秦玉華
摘要:近年集約化規(guī)?;u養(yǎng)殖業(yè)得到長(zhǎng)足的發(fā)展,但在長(zhǎng)時(shí)間養(yǎng)殖管理中,由于受到飼養(yǎng)環(huán)境和衛(wèi)生環(huán)境等諸多因素的影響,雞腺病毒的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年升高趨勢(shì),已嚴(yán)重影響雞健康生長(zhǎng)和生產(chǎn)效益提升??偣舱{(diào)查了391例雞腺病毒(FAdV)感染的臨床病例。雞腺病毒類型4、8b和11分別包含181、88和122個(gè)臨床病例。所有雞腺病毒4型病例均顯示臨床心包積水(HPS)病變以及包涵體肝炎(IBH),而所有雞腺病毒8b和11型病例均顯示無HPS的IBH病變。在肉雞(9~30日齡)和蛋雞(23~112日齡)中檢測(cè)到所有這三種類型,而大多數(shù)本地雞(14~65日齡)僅受雞腺病毒4型影響。傳染性法氏囊病病毒和雞傳染性貧血病毒是51.3%的雞腺病毒病例的并發(fā)癥,死亡率有較大差異, 0.1%~55%不等。在所有本地雞病例中均檢測(cè)到雞傳染性貧血病毒。
關(guān)鍵詞:禽腺病毒;包涵體肝炎;水心皮;流行病學(xué)
禽腺病毒是腺病毒科的腺病毒屬中的I類腺病毒。根據(jù)完整雞腺病毒基因組的限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性,將禽腺病毒分為5種(從A到E),并通過交叉中和試驗(yàn)將其進(jìn)一步分為12種血清型。
禽腺病毒在廣闊范圍內(nèi)分布[1],據(jù)報(bào)道經(jīng)常從健康的雞以及患禽中分離出來。他們有廣泛的臨床表現(xiàn),包括心包積水綜合征,包涵體肝炎,呼吸道疾病和胃糜爛。由于幼雞的突然死亡和高死亡率,雞腺病毒感染,尤其是心包積水和包涵體肝炎,給許多養(yǎng)殖戶造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。包涵體肝炎病例與某些雞腺病毒類型相關(guān),而大多數(shù)心包積水病例與雞腺病毒類型4相關(guān)[2]。
近年來,家禽業(yè)尤其是在肉雞和本地雞中,包涵體肝炎和心包積水病例的數(shù)量有所增加。特別是存在有關(guān)免疫抑制劑參與雞腺病毒感染暴發(fā)的問題。本文收集了雞中雞腺病毒感染的臨床病例,對(duì)分離出的雞腺病毒進(jìn)行了分型,并調(diào)查了與其他傳染因子的共感染,以了解雞腺病毒感染的流行病學(xué)。
1樣品
研究共采集了6個(gè)規(guī)?;B(yǎng)殖場(chǎng)和8個(gè)散養(yǎng)養(yǎng)殖場(chǎng),總共使用了391例病例,這些病例已在檢疫局禽病實(shí)驗(yàn)室診斷為雞腺病毒感染。它們包括肉雞、蛋雞和本土雞。樣品包括肝臟、脾臟、小腸和盲腸。將組織樣品在含有抗生素、抗真菌溶液的0.01M磷酸鹽緩沖鹽水(pH7.4)中均質(zhì)化至10%(wt/vol),并通過低速離心進(jìn)行澄清。上清液用0.45μm濾膜過濾待用。而勻漿用于檢測(cè)雞腺病毒和其他病毒病原體。
2樣品中病毒病原體的篩選
通過PCR篩選了雞腺病毒,雞傳染性貧血病毒(CIAV),傳染性法氏囊病病毒(IBDV),新城疫病毒(NDV),禽流感病毒(AIV)和傳染性支氣管炎病毒(IBV)等病毒病原體;根據(jù)之前描述的方法,將雞腺病毒和CIAV逆轉(zhuǎn)錄(RT)PCR用于NDV,AIV和IBDV。在9~11日齡的無特定病原體雞蛋胚胎中傳代2次后,通過PCR或RT-PCR直接在組織中檢測(cè)雞腺病毒,IBDV和CIAV,而通過RT-PCR分析檢測(cè)NDV,AIV和IBV。通過對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序并與參考序列進(jìn)行比較來確認(rèn)陽性樣品[3]。
3結(jié)果
使用PCR或RT-PCR分析法檢查了總共391例懷疑與雞腺病毒感染有關(guān)的臨床病例。不出所料,在所有情況下都成功檢測(cè)到雞腺病毒。通過測(cè)序和系統(tǒng)發(fā)育分析進(jìn)行分類時(shí),有176例臨床病例被分類為雞腺病毒4型(與KR5菌株的同源性為98.2%~98.5%)。所有雞腺病毒4型病例均顯示臨床包涵體肝炎和心包積水病變。在215例無心包水的包涵體肝炎病例中檢測(cè)到的雞腺病毒中,有96個(gè)被歸類為雞腺病毒8b型(與764菌株有99.2%~100%的同源性),其余119個(gè)屬于雞腺病毒11型(與380菌株有94.0%~99.1%的同源性))??偟膩碚f,筆者的發(fā)現(xiàn)表明,雞腺病毒4型與雞的心包積水病例最相關(guān),而8b和11型與包涵體肝炎雞相關(guān)。
雞腺病毒感染的臨床病例發(fā)生在9至30日齡的肉雞(平均18.4日齡)中,與本地雞(平均42.0日齡)和蛋雞(平均56.5日齡)相比,年齡相對(duì)年輕。在某種程度上,這反映了肉雞的總壽命與其他禽類相比較短的事實(shí),這使肉雞的任何疾病的平均年齡下降。然而,在2周齡或更小的幼雞中,仍有35.7%的雞腺病毒感染發(fā)生,這表明肉雞中雞腺病毒感染的臨床病例可能是由水平和垂直傳播引起的,盡管沒有辦法了解每種情況下的傳播路徑是水平還是垂直。在本地雞(14~65日齡)和蛋雞(23~112日齡)中,雞腺病毒感染的所有病例均發(fā)生在2周或更大的年齡。和之前的研究結(jié)果一致,14只臨床雞中的1例發(fā)生在2周齡以內(nèi)的本地雞(n=5)和蛋雞(n=9)中,而肉雞在31周發(fā)生的11例出現(xiàn)在2周以內(nèi)。這些發(fā)現(xiàn)表明,與肉仔雞相比,垂直傳播在本地雞和蛋雞中相對(duì)較少。
8b型和11型雞腺病毒分別導(dǎo)致總共126、93和117個(gè)肉雞病例。這些結(jié)果表明,這些類型可能是肉雞中雞腺病毒感染的主要原因,例如包涵體肝炎和心包積水。在天然雞中,除K08-09(雞腺病毒11型)以外的所有病例都是由雞腺病毒4型引起的心包積水病例。這表明在本地雞中,雞腺病毒感染的主要臨床表現(xiàn)是心包積水而非包涵體肝炎。盡管研究中僅包括56個(gè)蛋雞病例,但在蛋雞中檢測(cè)到了所有3種主要類型。因此,雞腺病毒感染的年齡、病毒類型、傳播方式和臨床表現(xiàn)可能取決于禽類品種而有所不同。
在雞腺病毒感染之前或同時(shí)發(fā)生的免疫抑制,是產(chǎn)生包涵體肝炎和心包積水等臨床表現(xiàn)的重要因素。免疫抑制可由多種因素引起,包括病毒感染,球蟲病,霉菌毒素,壓力和代謝性疾病。其中,免疫抑制劑如IBDV、CIAV和霉菌毒素被認(rèn)為會(huì)加劇雞腺病毒的臨床表現(xiàn)。在研究中的各臨床病例中均未檢出球蟲病。不幸的是,在診斷前的采樣期間未檢查非感染性免疫抑制因子,例如霉菌毒素、應(yīng)激和代謝性疾病。因此調(diào)查了其他病毒病原體是否同時(shí)或隨后與雞腺病毒共感染。在61個(gè)肉雞病例(K08-04,K09-10,K09-17,K09-22,K09-23和K-09-24)中檢測(cè)到了IBDV(同源性>99%)。引起并發(fā)癥的原因是,活疫苗在肉雞中很常見。在檢查的391例病例中,有51.3%并發(fā)免疫抑制疾病,例如CIAV和IBDV。在雞腺病毒感染病例中有15.4%檢出了高毒性的IBDV。無論禽鳥類型如何,在41.0%的雞腺病毒感染病例中均檢測(cè)到CIAV。在21例病例中同時(shí)檢測(cè)到CIAV和IBDV(K09-08和K09-11)。有趣的是,在所有本地雞病例中均檢測(cè)到CIAV,這表明CIAV在本地雞中廣泛存在,并引起了雞腺病毒感染的臨床表現(xiàn)。但是,沒有其他病毒病原體被分離出來??傮w而言,這些發(fā)現(xiàn)表明,大多數(shù)雞腺病毒病例與CIAV相關(guān),而不是IBDV。
4結(jié)論
總之,至少有3種血清型(4、8b和11型血清型)與臨床雞腺病毒感染相關(guān),例如包涵體肝炎或心包積水。本研究中大多數(shù)雞腺病毒感染的臨床病例均被免疫抑制病毒劑(如CIAV和IBDV)共同感染。因此,應(yīng)采取針對(duì)雞腺病毒感染(如包涵體肝炎和心包積水)以及免疫抑制疾?。ㄈ鏑IA和IBD)的預(yù)防措施,以及對(duì)禽場(chǎng)的嚴(yán)格生物安全措施。目前,市面上也有很多關(guān)于禽腺病毒的疫苗,如油乳劑細(xì)胞滅活苗、全病毒滅活疫苗、弱毒滅活苗和亞單位疫苗。選擇與流行毒株基因型相匹配的油乳劑細(xì)胞滅活苗,對(duì)該病也能較好保護(hù),且這種保護(hù)作用能傳遞給免疫禽的子代,對(duì)免疫禽及其子代的保護(hù)率分別達(dá)到100%和90%。除此以外,還需要對(duì)原種場(chǎng)、祖代場(chǎng)等進(jìn)行禽腺病毒的凈化,才能有效地切斷傳播途徑,減少該病毒的感染。調(diào)查結(jié)果可以為今后禽腺病毒病的科學(xué)防控、精準(zhǔn)施策提供基礎(chǔ)依據(jù)。
參考文獻(xiàn):
[1]向文彬,陳俊宏,嚴(yán)紅亞,等.云南省禽腺病毒檢測(cè)與分子流行病學(xué)調(diào)查[J].云南畜牧獸醫(yī),2020(6):2-5.
[2]尹德晶,張?jiān)频?,岳筠,?禽腺病毒血清4型貴州株全基因序列分析[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī),2021,48(1):44-54.
[3]王恩麗,高亞東,李志中,等.一株Ⅰ群禽腺病毒血清8b型的分離與鑒定[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2020(21):109-112+176-177.