熊 穎，禹 霖，柏文富，聶東伶，李建揮，嚴(yán)佳文，吳思政

（1.湖南省植物園 經(jīng)濟(jì)植物研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410116；2.湖南省藍(lán)莓研究發(fā)展中心，湖南 長(zhǎng)沙 410116）

花青素為黃酮類(lèi)化合物，廣泛存在于植物體內(nèi)[1]，具有抗氧化[2]、抗衰老[3]、保護(hù)視力[4-5]、抗癌[6-7]、抑菌[8]、調(diào)節(jié)腸道菌群[9]等功效。因此，花青素在食品、化妝品、藥品等工業(yè)領(lǐng)域應(yīng)用范圍較廣。藍(lán)莓因花青素含量高、食用價(jià)值高而受到廣泛關(guān)注。藍(lán)莓不僅是一種理想的鮮食水果，還可被加工成各種休閑食品，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和廣闊的發(fā)展前景。

目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)藍(lán)莓果實(shí)的研究主要集中在不同品種的加工特性、采后保鮮、抗氧化的對(duì)比以及相關(guān)產(chǎn)品研發(fā)等方面[10-13]。我國(guó)藍(lán)莓種植面積廣，藍(lán)莓深加工發(fā)展迅速，但加工過(guò)程中產(chǎn)生的下腳料利用程度有限，有研究結(jié)果表明藍(lán)莓果酒或果汁生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的酒渣或果渣中仍殘留大量花青素[14-15]。目前，關(guān)于藍(lán)莓果渣高效利用的研究報(bào)道較多，但關(guān)于藍(lán)莓酒渣高效利用的研究報(bào)道較為鮮見(jiàn)[16-18]。藍(lán)莓酒渣若不能得到充分利用會(huì)造成極大的資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。為充分利用藍(lán)莓資源，提高藍(lán)莓花青素的利用效率，對(duì)藍(lán)莓酒渣中花青素進(jìn)行高效提取和利用勢(shì)在必行。

本研究中以藍(lán)莓酒渣為原料，使用乙醇-檸檬酸提取花青素，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面法對(duì)藍(lán)莓酒渣花青素的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，并使用高效液相色譜儀對(duì)藍(lán)莓酒渣中的花青素組成進(jìn)行分析，旨在完善藍(lán)莓酒渣花青素高效提取工藝，為藍(lán)莓酒渣的高效利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 原料與試劑

藍(lán)莓鮮果為采自湖南省植物園藍(lán)莓園的‘燦爛’藍(lán)莓，藍(lán)莓酒渣為‘燦爛’藍(lán)莓鮮果經(jīng)純釀后的下腳料。無(wú)水乙醇、KCl、醋酸鈉、HCl、檸檬酸等均為分析純，產(chǎn)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；甲酸、乙腈均為色譜純，產(chǎn)自美國(guó)Sigma公司。

1.2 儀器與設(shè)備

DHG-9070A 恒溫鼓風(fēng)干燥箱購(gòu)于中國(guó)上海一恒公司，HJ-4A 恒溫磁力攪拌器購(gòu)于江蘇金壇市金城國(guó)勝實(shí)驗(yàn)儀器廠，WF-04B 粉碎機(jī)購(gòu)于永康市偉峰電器廠，UV1200 紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)購(gòu)于上海美譜達(dá)儀器公司，Centrifuge 5418 離心機(jī)購(gòu)于德國(guó)Eppendorf 公司，1260 型高效液相色譜儀（配有紫外檢測(cè)器）購(gòu)于美國(guó)Agilent 公司，Agile ZORBAX SB-C18 分析型色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）購(gòu)于美國(guó)Agilent 公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 花青素提取

藍(lán)莓酒渣經(jīng)自然干燥后，用粉碎機(jī)粉碎，過(guò)80 目篩，用石油醚脫脂后，于45 ℃條件下烘至恒質(zhì)量，將烘干后的藍(lán)莓酒渣粉密封保存于4 ℃冰箱內(nèi)。配制體積分?jǐn)?shù)分別為40%、50%、60%、70%和80%的酒精水溶液，并用檸檬酸調(diào)節(jié)溶液pH 至2、3、4、5、6，密封備用。

稱(chēng)取(1.00±0.01)g 藍(lán)莓酒渣粉，分別與10、15、20、25、30 mL 不同體積分?jǐn)?shù)的酒精水溶液混合均勻，然后在30、40、50、60、70 ℃條件下攪拌提取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 h，將混合物于4 000 r/min 條件下離心5 min，取上清液，并用對(duì)應(yīng)溶劑定容至溶劑的初始體積得提取液。分析乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溫度、料液比、提取時(shí)長(zhǎng)和溶劑pH 對(duì)藍(lán)莓酒渣花青素提取的影響。

1.3.2 總花青素含量測(cè)定

參照文獻(xiàn)[19]采用pH 示差法并稍加調(diào)整，測(cè)定提取液總花青素含量。分別取0.1 mL 提取液于2個(gè)試管中。向其中1 支試管中加入4.9 mL的KCl-HCl 緩沖液（pH=1），搖勻后避光靜置50 min，分別測(cè)定待測(cè)液在510 nm 波長(zhǎng)處的吸光度（A510），在700 nm 波長(zhǎng)處的吸光度（A700）。向另1 支試管中加入4.9 mL 的NaAc-HCl 緩沖液（pH=4.5），搖勻后避光靜置50 min，分別測(cè)定待測(cè)液在510 nm 波長(zhǎng)處的吸光度（A510′），在700 nm 波長(zhǎng)處的吸光度（A700′）。

花青素質(zhì)量分?jǐn)?shù)（ω）以藍(lán)莓酒渣中矢車(chē)菊-3-O-葡萄糖苷當(dāng)量表示，計(jì)算公式為

式中：M為矢車(chē)菊-3-O-葡萄糖苷的相對(duì)分子質(zhì)量449.2 g/mol；D為稀釋倍數(shù)50；V為提取液體積；ε為矢車(chē)菊-3-O-葡萄糖苷的消光系數(shù)26 900；L為光程1 cm；m為藍(lán)莓酒渣質(zhì)量1 g。

1.3.3 花青素組成分析

參照文獻(xiàn)[14]中所述方法分析花青素組成。

1.4 數(shù)據(jù)分析和處理

所有數(shù)據(jù)均使用Excel 2019 和SPSS 22 軟件進(jìn)行計(jì)算和分析，單因素結(jié)果均使用Origin 2018軟件繪圖，使用Design-Expert 8.0.5 軟件進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 藍(lán)莓酒渣花青素提取單因素試驗(yàn)

2.1.1 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)提取效率的影響

乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)藍(lán)莓酒渣花青素提取效率的影響如圖1所示。從圖1 可以看出，乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)藍(lán)莓酒渣花青素的提取效率有較大影響，體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇溶液對(duì)藍(lán)莓酒渣花青素有較好的提取效果，乙醇體積分?jǐn)?shù)增加或降低時(shí)花青素提取效率均出現(xiàn)了不同程度降低。這是因?yàn)榛ㄇ嗨貙儆邳S酮類(lèi)化合物，分子極性較強(qiáng)，易溶于極性與之類(lèi)似的溶劑，不同體積分?jǐn)?shù)乙醇的極性不同，當(dāng)乙醇溶液極性與花青素極性相近時(shí)，花青素提取效率較高。

圖1 不同乙醇體積分?jǐn)?shù)條件下藍(lán)莓酒渣花青素的提取效率Fig.1 Extraction efficiency of anthocyanins from blueberry lees with different ethanol volume fractions

2.1.2 提取溫度對(duì)提取效率的影響

提取溫度對(duì)藍(lán)莓酒渣花青素提取效率的影響如圖2所示。從圖2 可以看出，藍(lán)莓酒渣花青素提取效率隨溫度升高呈現(xiàn)先升高、后降低的趨勢(shì)，當(dāng)提取溫度由30 ℃升至50 ℃時(shí)，由于分子運(yùn)動(dòng)加快，花青素向溶劑擴(kuò)散的速度加快，因此提取效率有所提高，但當(dāng)溫度繼續(xù)升高時(shí)花青素發(fā)生熱分解而導(dǎo)致提取效率下降，尤其是當(dāng)溫度超過(guò)70 ℃時(shí)提取效率下降明顯，因此藍(lán)莓酒渣花青素提取的最佳溫度為50 ℃。

圖2 不同提取溫度條件下藍(lán)莓酒渣花青素的提取效率Fig.2 Extraction efficiency of anthocyanins from blueberry lees with different extraction temperature

2.1.3 料液比對(duì)提取效率的影響

料液比對(duì)藍(lán)莓酒渣花青素提取效率的影響如圖3所示。從圖3 可以看出，在一定范圍內(nèi)，藍(lán)莓酒渣花青素提取效率隨著溶劑比例的增多而升高，當(dāng)料液比為1∶20 時(shí)提取效率達(dá)到最高，隨溶劑比例繼續(xù)增加，提取效率出現(xiàn)了顯著下降，因此藍(lán)莓酒渣花青素提取的最佳料液比為1∶20。

圖3 不同料液比條件下藍(lán)莓酒渣花青素的提取效率Fig.3 Extraction efficiency of anthocyanins from blueberry lees with different solid-liquid ratios

2.1.4 溶劑pH 對(duì)提取效率的影響

溶劑pH 對(duì)藍(lán)莓酒渣花青素提取效率的影響如圖4所示。從圖4 可以看出，溶劑pH 較低時(shí)更有利于藍(lán)莓酒渣花青素的提取，當(dāng)溶劑pH 為2 或3 時(shí)，藍(lán)莓酒渣花青素提取效率無(wú)顯著差異，但當(dāng)pH 為4時(shí)，藍(lán)莓酒渣花青素提取效率出現(xiàn)顯著降低，因此藍(lán)莓酒渣花青素提取的最佳溶劑pH 為2 或3。

圖4 不同溶劑pH 條件下藍(lán)莓酒渣花青素的提取效率Fig.4 Extraction efficiency of anthocyanins from blueberry lees with different solvent pH

2.1.5 提取時(shí)長(zhǎng)對(duì)提取效率的影響

提取時(shí)長(zhǎng)對(duì)藍(lán)莓酒渣花青素提取效率的影響如圖5所示。從圖5 可以看出，藍(lán)莓酒渣花青素提取效率隨提取時(shí)長(zhǎng)的延長(zhǎng)出現(xiàn)先增后降的趨勢(shì)，當(dāng)提取時(shí)長(zhǎng)為1.5 h 時(shí)花青素提取效率出現(xiàn)最高點(diǎn)。這是因?yàn)榛ㄇ嗨靥崛〉膭?dòng)力主要來(lái)源于物料與溶劑中花青素的濃度差，提取時(shí)長(zhǎng)較長(zhǎng)時(shí)花青素的溶解更充分，花青素提取效率更高，但隨著提取時(shí)長(zhǎng)繼續(xù)延長(zhǎng)花青素發(fā)生降解，從而導(dǎo)致提取效率有所降低。

圖5 不同提取時(shí)長(zhǎng)條件下藍(lán)莓酒渣花青素的提取效率Fig.5 Extraction efficiency of anthocyanins from blueberry lees with different extraction duration

2.2 藍(lán)莓酒渣花青素提取響應(yīng)面試驗(yàn)

2.2.1 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)

以單因素試驗(yàn)為基礎(chǔ)，選擇乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溫度、料液比、提取時(shí)長(zhǎng)和溶劑pH 共5個(gè)因素，進(jìn)行5 因素3 水平Box-Behnken 響應(yīng)面中心組合設(shè)計(jì)試驗(yàn)，因素和水平編碼見(jiàn)表1。

在該“囚徒困境”式的博弈[12]中，港口城市可采取的最優(yōu)投資策略是：不會(huì)考慮競(jìng)爭(zhēng)者的投資，認(rèn)為投資越多越好，直到投資到自身投資的上限。另外一種做法是，在沒(méi)有滿(mǎn)足自身投資準(zhǔn)則時(shí)不投資。此時(shí)，港口城市可選擇的戰(zhàn)略不投資港口、以最大能力投資港口、在口投資回報(bào)率等于城市平均投資回報(bào)率之前投資港口等3種。

表1 藍(lán)莓酒渣花青素提取Box-Behnken 響應(yīng)面試驗(yàn)因素及其水平Table 1 Factors and levels of Box-Behnken response surface test for anthocyanin extraction from blueberry lees

2.2.2 建模及方差分析

響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。對(duì)表2 中藍(lán)莓酒渣花青素質(zhì)量分?jǐn)?shù)（ω）和5個(gè)因素進(jìn)行分析，得到花青素質(zhì)量分?jǐn)?shù)和各因素的多元回歸方程：

表2 藍(lán)莓酒渣花青素提取Box-behnken 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果Table 2 Box-behnken response surface experiment results of anthocyanin extraction from blueberry lees

ω=5.72+0.12A-0.15B+0.27C-0.087D-0.18E-0.040AB+0.14AC+0.012AD-0.12AE+0.062BC+0.060BD-0.15BE+0.17CD-0.058CE+0.28DE-0.16A2-0.50B2-1.98C2+0.051D2-0.018 7E2。

式中：A為溶劑體積分?jǐn)?shù)；B為提取溫度；C為料液比；D為溶劑pH；E為提取時(shí)長(zhǎng)。

Box-behnken 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果的方差分析結(jié)果見(jiàn)表3。由表3 可知，B、C、E、DE（溶劑pH 與提取時(shí)長(zhǎng)的交互作用）、B2和C2對(duì)藍(lán)莓酒渣花青素的提取效率有顯著影響。從F值來(lái)看，各提取參數(shù)對(duì)藍(lán)莓酒渣花青素提取效率的影響程度由強(qiáng)到弱依次為料液比、提取時(shí)長(zhǎng)、提取溫度、溶劑體積分?jǐn)?shù)、溶劑pH。模型F值為33.53，且P值小于0.05，說(shuō)明用該模型模擬各參數(shù)對(duì)藍(lán)莓酒渣花青素提取效率的影響是可靠的。除此之外，該模型失擬項(xiàng)F值為3.18（＞0.05），說(shuō)明失擬項(xiàng)相對(duì)于純誤差不顯著，該多元回歸方程對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的擬合效果較好。

表3 藍(lán)莓酒渣花青素提取Box-behnken 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果的方差分析結(jié)果?Table 3 Variance analysis of Box-behnken response surface test results for anthocyanin extraction from blueberry lees

2.2.3 交互作用分析與工藝優(yōu)化

對(duì)5個(gè)因素之間的交互作用進(jìn)行分析，得出以提取液中花青素質(zhì)量分?jǐn)?shù)為響應(yīng)值的響應(yīng)面，如圖6所示。從圖6 可以看出，其他因素不變時(shí)乙醇體積分?jǐn)?shù)升高會(huì)在一定程度上提高花青素的提取效率，提取液中花青素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)會(huì)隨提取溫度升高出現(xiàn)先升、后降的趨勢(shì)，料液比對(duì)提取液中花青素的含量有較大影響，其他因素不變時(shí)溶劑pH 對(duì)提取液中花青素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響不大，其他因素不變時(shí)提取時(shí)長(zhǎng)對(duì)提取液中花青素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響較小。在各因素的交互作用下均存在最大響應(yīng)值，說(shuō)明各因素均存在最適值，以試驗(yàn)值最低點(diǎn)為出發(fā)點(diǎn)，以響應(yīng)值為最大值進(jìn)行優(yōu)化，最終得到藍(lán)莓酒渣花青素提取的最佳工藝條件：乙醇體積分?jǐn)?shù)70%、提取溫度50 ℃、料液比1∶20、溶劑pH=2、提取時(shí)長(zhǎng)1 h，該條件下提取液中花青素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)可達(dá)6.38 mg/g。

圖6 藍(lán)莓酒渣花青素提取效率對(duì)因素交互作用的響應(yīng)面Fig.6 Response diagram of the interaction of factors on the extraction efficiency of anthocyanins from blueberry lees

2.2.4 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證

經(jīng)響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化后，藍(lán)莓酒渣花青素提取的最佳工藝條件確定為乙醇體積分?jǐn)?shù)70%、料液比1∶20、乙醇溶液pH=2、提取溫度50 ℃、提取時(shí)長(zhǎng)1 h，在此條件下藍(lán)莓酒渣花青素提取液中花青素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6.38 mg/g。為了驗(yàn)證經(jīng)優(yōu)化后藍(lán)莓酒渣花青素提取工藝的可靠性，在此工藝條件下進(jìn)行3 次提取試驗(yàn)，藍(lán)莓酒渣花青素提取液中花青素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為(6.17±0.02)mg/g，與理論值6.38 mg/g 基本吻合，說(shuō)明響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

2.3 藍(lán)莓酒渣花青素組成分析

藍(lán)莓酒渣、鮮果和3 種花青素標(biāo)準(zhǔn)品的高效液相色譜分析結(jié)果如圖7所示。從圖7 可以看出，3 種標(biāo)準(zhǔn)品的出峰順序依次為飛燕草色素（10.396 min）、矢車(chē)菊色素（13.091 min）、錦葵色素（17.333 min），對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品可知藍(lán)莓酒渣提取液中共有2 種花青素，分別為飛燕草色素和錦葵色素，藍(lán)莓鮮果中除了含有3 種有標(biāo)樣的花青素之外還含有1 種無(wú)標(biāo)樣的花青素，根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道推測(cè)該花青素可能為矮牽牛色素[14]。

圖7 藍(lán)莓酒渣和鮮果花青素提取液及花青素標(biāo)準(zhǔn)品的高效液相色譜分析結(jié)果Fig.7 HPLC analysis of extracts from blueberry lees and fresh fruits and standard anthocyanins

藍(lán)莓發(fā)酵前后花青素組成和含量變化較明顯。其中，藍(lán)莓酒渣中所含2 種花青素燕草色素和錦葵色素的相對(duì)含量分別為70.48%和29.52%，藍(lán)莓鮮果中飛燕草色素、矢車(chē)菊色素、無(wú)標(biāo)樣物質(zhì)和錦葵色素的相對(duì)含量分別為16.92%、11.08%、16.83%和55.17%。發(fā)酵后，藍(lán)莓中飛燕草色素的峰面積由82.3 變?yōu)?8.3，變化較??；矢車(chē)菊色素和無(wú)標(biāo)樣物質(zhì)峰面積分別由53.9 和81.9 變?yōu)?，變化明顯；錦葵色素峰面積由268.4 變?yōu)?2.8，變化較大。由此可見(jiàn)，藍(lán)莓經(jīng)過(guò)發(fā)酵后4 種花青素的含量均有不同程度減少，其中矢車(chē)菊色素、無(wú)標(biāo)樣物質(zhì)和錦葵色素減少程度最大，飛燕草色素減少程度最低。

3 結(jié)論與討論

本研究中使用檸檬酸酸化的乙醇溶液提取藍(lán)莓酒渣中的花青素，經(jīng)采用響應(yīng)面法優(yōu)化后確定了最佳工藝條件：乙醇體積分?jǐn)?shù)70%、提取溫度50℃、料液比1∶20、溶劑pH 為2、提取時(shí)長(zhǎng)1 h。驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果顯示，在該提取條件下，提取液中花青素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)可達(dá)(6.17±0.02)mg/g，與預(yù)測(cè)值6.38 mg/g 僅相差3.29%，表明響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果準(zhǔn)確可靠。藍(lán)莓發(fā)酵后，所含花青素種類(lèi)和含量均有較大的變化，‘燦爛’藍(lán)莓鮮果中主要含有飛燕草色素、矢車(chē)菊色素、錦葵色素和一種未知色素，4 種色素的相對(duì)含量分別為16.92%、11.08%、55.17%和16.83%，藍(lán)莓酒渣中僅含有飛燕草色素（70.47%）和錦葵色素（29.53%）。

乙醇體積分?jǐn)?shù)、溶劑pH、提取溫度、料液比和提取時(shí)長(zhǎng)均對(duì)藍(lán)莓酒渣花青素的提取效率有較大的影響。單因素試驗(yàn)結(jié)果顯示，乙醇體積分?jǐn)?shù)為60%時(shí)藍(lán)莓酒渣花青素提取效果較好。前人的研究結(jié)果也表明：乙醇濃度對(duì)花青素的提取效率有較大影響，藍(lán)莓花青素提取較理想的乙醇體積分?jǐn)?shù)為50%～70%[15,20]；在花青素提取過(guò)程中溶劑pH 越低，花青素提取效果越好，這可能與花青素在酸性條件下更穩(wěn)定有關(guān)[21-22]。李亮等[23]和張盼盼等[24]的研究結(jié)果表明，溶劑pH 為2 或3 時(shí)有更高的花青素提取效率，胡敏等[25]的研究結(jié)果也表明當(dāng)溶劑pH 為2 時(shí)更有利于花青素的提取和保存。提取時(shí)長(zhǎng)對(duì)花青素提取效率有顯著影響，提取時(shí)長(zhǎng)過(guò)短則花青素溶出不充分，提取時(shí)長(zhǎng)過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致花青素嚴(yán)重分解，前人的研究結(jié)果也說(shuō)明了這一現(xiàn)象[26-27]。在本研究中提取時(shí)長(zhǎng)為1.5 h 時(shí)，既能保證花青素充分溶出，又能保證花青素分解程度較低，因此1.5 h 是較理想的提取時(shí)長(zhǎng)?；ㄇ嗨鼐哂袩岱纸獾奶攸c(diǎn)，且其分解過(guò)程為一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)過(guò)程[28-29]，因此提取溫度不宜過(guò)高，但是在實(shí)際操作中往往會(huì)根據(jù)試驗(yàn)材料中花青素溶出的難易程度調(diào)整提取溫度[30]。藍(lán)莓酒渣花青素溶出速度較快，本研究中得出的最佳提取溫度與楊玉等[31]的研究結(jié)果較接近。在提取過(guò)程中，料液比是決定提取效率的重要因素之一，料液比過(guò)低導(dǎo)致提取達(dá)到平衡的時(shí)長(zhǎng)過(guò)短，目標(biāo)成分溶解不充分，料液比過(guò)高則會(huì)導(dǎo)致溶劑的浪費(fèi)，因此在提取過(guò)程中選擇合適的料液比是至關(guān)重要的。料液比對(duì)藍(lán)莓加工殘?jiān)谢ㄇ嗨氐奶崛∮休^大的影響，在本研究中得出的藍(lán)莓酒渣花青素提取的最佳料液比為1∶20，與田建華等[32]的研究結(jié)果類(lèi)似。響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果表明，藍(lán)莓酒渣花青素的提取效率不僅取決于各因素，還在一定程度上取決于各因素之間的交互作用，其中溶劑pH 與提取時(shí)長(zhǎng)的交互作用對(duì)花青素提取效率的影響最顯著，與張盼盼等[24]的研究結(jié)果存在一定差異，這可能是原材料、提取方式等不同導(dǎo)致的。

藍(lán)莓在發(fā)酵后4 種花青素的含量均有不同程度減少，其中錦葵色素含量變化較大，矢車(chē)菊色素和未知色素含量變化明顯，飛燕草色素含量變化較微弱，藍(lán)莓酒渣中僅檢測(cè)出2 種花青素，其中飛燕草色素相對(duì)含量為70.48%，錦葵色素相對(duì)含量為29.52%。宋頎等[33]和Wu 等[34]的研究結(jié)果表明，藍(lán)莓酒渣中錦葵色素是含量最高的花青素，與本研究結(jié)果有一定差異，這可能是因?yàn)樗{(lán)莓品種和發(fā)酵條件存在差別，丁原春等[35]的研究結(jié)果表明藍(lán)莓在發(fā)酵過(guò)程中花青素含量的變化受發(fā)酵工藝的影響較大。

由于受發(fā)酵條件影響，藍(lán)莓酒渣中殘留的花青素種類(lèi)和含量有較大差異，而本研究中僅考慮了在實(shí)驗(yàn)室條件下藍(lán)莓酒渣中花青素的組成，應(yīng)進(jìn)一步探索工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的藍(lán)莓酒渣中花青素的高值化利用，因此下階段將圍繞花青素的精制、各種花青素的分離提純、各種花青素之間的協(xié)同規(guī)律以及花青素在功能性食品加工過(guò)程中的應(yīng)用等方面開(kāi)展研究。