劉崗生,蔡佳佳

(1.信陽學院 公共體育教學部，河南 信陽 464000；2.福建師范大學 傳媒學院，福建 福州 350100)

0 前言

酒精相關性肝病(alcoholic liver diseases，ALD)是由于長期酗酒或者是短時間內(nèi)大量飲酒導致包括酒精相關性脂肪肝(alcoholic fatty liver disease，AFLD)、酒精相關性肝炎、酒精相關性肝纖維化、酒精相關性肝硬化以及肝癌在內(nèi)的一種全球性的慢性肝臟疾病的統(tǒng)稱[1]。其中，AFLD是ALD形成的早期階段，經(jīng)臨床研究發(fā)現(xiàn)，患者已經(jīng)形成AFLD時，若停止飲酒可以逐漸恢復，如果繼續(xù)飲酒可能會導致AFLD加重進而導致酒精相關性肝炎、肝纖維化、肝硬化甚至肝癌。因此，在AFLD階段及時進行干預與治療，減輕肝臟超微結構的損傷，調(diào)節(jié)肝臟脂質(zhì)代謝，逆轉(zhuǎn)AFLD發(fā)展，除了停止飲酒還應該以更加積極的干預方式阻止AFLD的惡化，加快AFLD的恢復，是重要的治療思路。

SIRT1在嚙齒動物和人類肝臟脂質(zhì)代謝、炎癥反應和AFLD的發(fā)展中起著重要的調(diào)控作用[2]。乙醇暴露導致的SIRT1抑制或刺激腺苷酸活化激酶(AMP-activated kinase，AMPK)、脂聯(lián)素-1(Lipin-1)、甾醇調(diào)節(jié)元件蛋白-1(Sterol調(diào)節(jié)元件結合蛋白-1，SREBP-1)、過氧化物酶體增殖物激活受體β(PPARα)輔激活物-1α(PGC-1α)和核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)等轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子和協(xié)同調(diào)節(jié)因子的活性，從而使多種脂質(zhì)代謝和炎癥反應途徑的調(diào)控失控，包括脂生成、脂肪酸β氧化、脂蛋白攝取和分泌以及肝內(nèi)促炎細胞因子的表達異常等[3]。本綜述旨在通過論述SIRT1的調(diào)控機制及乙醇對其誘導毒性反應，以及SIRT1與運動的關系，探討運動改善AFLD可能的分子機制。

1 乙醇的體內(nèi)代謝及AFLD的形成

我國飲酒人數(shù)眾多，成年居民中過量飲酒比例達到4.7%，酒精消費者人群中過量飲酒比例49. 1%[4]。作為人體中央代謝器官之一的肝臟。在乙醇攝入體內(nèi)后，只有2%～10%的乙醇通過排汗、呼吸以及排尿等方式排出體外，90%的乙醇經(jīng)腸胃吸收進入通過血液循環(huán)進入肝臟代謝，很少在肝臟外代謝[5]。乙醇在肝臟中的氧化代謝過程主要由乙醇脫氫酶(Alcohol Dehydrogenase，ADH)、微粒體乙醇氧化(Microsomal ethanol oxidizing system，MEOS)和過氧化氫酶(Cat-lase，CAT)等三種酶參與。

進入肝臟中的乙醇濃度較低時，主要是以ADH為主要代謝途徑。乙醇在ADH的作用下與氧化型輔酶Ⅰ(NAD+)反應，生成還原型輔酶Ⅰ(NADH)和乙醛，然后以乙醛作為代謝底物被乙醛脫氫酶氧化生成乙酸，最后生成CO2和H2O，并釋放能量。在此途徑中肝內(nèi)耗氧增加，NAD+作為輔酶，胞漿質(zhì)內(nèi)氧化型輔酶Ⅰ(NAD+)轉(zhuǎn)變?yōu)檫€原型輔酶Ⅰ(NADH)，而氧化型輔酶Ⅰ與還原型輔酶Ⅰ的比值降低，進而改變了細胞內(nèi)氧化還原狀態(tài)，干擾細胞新陳代謝，抑制三羧酸循環(huán)，導致脂質(zhì)代謝紊亂，產(chǎn)生堆積。

MEOS的生理特征是在ADH和CAT缺失時，也可將乙醇代謝為乙醛。細胞色素 P450(CYPs)家族主要分布于肝臟中，細胞色素P450 2E1(CYP2E1)作為MEOS的關鍵酶，主要分布在肝細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體中，極易被乙醇誘導[6]。當大量乙醇進入肝臟代謝時，MEOS和CYP2E1被激活，乙醇在氧化為乙醛的過程中，ROS也大量生成。當細胞內(nèi)有大量ROS生成時，會造成細胞線粒體功能紊亂，降低自由脂肪酸β的氧化能力，而自由脂肪酸β是肝臟脂質(zhì)從頭合成(DNL)的重要原料。

除以上兩種途徑之外，乙醇也可在肝過氧化物酶體中被CAT氧化為乙醛和水。

另外，乙醇會造成琥珀酸脫氫酶(SDH)等線粒體酶活性的減弱，使線粒體氧化磷酸化能力降低，影響細胞呼吸功能，更加重了肝細胞的損傷。

2 乙醇與肝臟中SITR1表達

急性或慢性乙醇暴露都會降低肝臟中SIRT1基因和蛋白的表達水平。

2.1 乙醇代謝產(chǎn)物與SIRT1

低劑量乙醇通過ADH途徑在肝臟中代謝時，NAD+/NADH比值降低，以及乳酸/丙酮酸比值升高，抑制了肝臟內(nèi)SIRT1的表達[7]。同時，乙醇的兩種代謝產(chǎn)物乙醛和乙酸對SIRT1的表達和活性也有明顯的抑制作用[8]。煙酰胺磷酸活化轉(zhuǎn)移酶(NAMPT)是細胞合成NAD+的關鍵酶，NAMPT活性可以直接降低細胞NAM水平。所以，NAMPT對SIRT1活性的改變起到重要作用。乙醇暴露也可以損害NAMPT介導的NAD+的生成，從而抑制SIRT1表達。

2.2 活性氧自由基(ROS)與SIRT1

ROS可以抑制SIRT1活性并干擾其信號傳導[9]。大量證據(jù)表明，肝臟在乙醇代謝過程中會產(chǎn)生氧化應激，氧化應激是導致酒精相關性脂肪肝的重要因素。ROS是通過乙醇代謝的多種途徑產(chǎn)生的，尤其是CYP2E1介導的乙醇代謝過程。

肝臟SIRT1活性降低可以加重氧化應激，乙醇暴露下小鼠肝臟中丙二醛生成量會增加。乙醇暴露下，肝臟特異性SIRT1敲除(SIRT1 LK0)小鼠的氧化應激會加劇，這表明乙醇介導的SIRT1下調(diào)可能是減量調(diào)節(jié)，通過ROS的產(chǎn)生進一步抑制SIRT1，并降低肝臟對氧化應激的保護能力[3]。實驗證明，乙醛或乙酸具有可以誘導肝細胞生成ROS的能力。

2.3 microRNA與SIRT1

microRNA的異常與酒精相關性肝損傷形成有著密切關系[10]。在AML-12系列肝細胞及小鼠肝臟中發(fā)現(xiàn)，作為內(nèi)源性SIRT1抑制劑的microRNA-217可以在乙醇介導下大量產(chǎn)生。mR-217的過表達造成了SIRT1活性的下降，還會抑制SIRT1相關調(diào)控基因的表達，加重酒精相關性肝臟脂肪變性。另一種內(nèi)源性SIRT1抑制劑-mR-34a也有類似的效果：乙醇喂養(yǎng)的小鼠，其肝細胞中mR-34a顯著升高。

2.4 乙醇誘導SIRT1核質(zhì)穿梭

SIRT1主要存在于細胞核中，SIRT1活性受核質(zhì)穿梭調(diào)節(jié)，在外界刺激下，如ROS等會導致SIRT1從細胞核移位，并干擾SIRT1的活性[11]。乙醇暴露也會影響SIRT1從細胞質(zhì)到細胞核的轉(zhuǎn)運[12]。

3 Sirtuin1(SIRT1)在酒精相關性脂肪肝(AFLD)中的作用

沉默信息調(diào)節(jié)因子Sirtuin1(SIRT1)是一種依賴于煙酰胺腺苷二酸(NAD+)的去乙酰化酶，與酵母細胞質(zhì)中的物質(zhì)代謝和長壽有關的沉默信息調(diào)節(jié)因子AIR2同源，具有對底物去乙?；δ艿幕騕2]，在酵母、線蟲、嚙齒動物和人類中廣泛存在，具有高度保守性，在生命過程中扮演重要角色。肝臟是SIRT1調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝和炎癥的重要器官之一，通過改變包括組蛋白、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子及其輔助調(diào)節(jié)因子的去乙酰化狀態(tài)，在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝和炎癥過程中起關鍵作用。

人類的慢性或急性酒精中毒通常與多種形式的肝損傷有關[13]。通過對嚙齒動物以及人類的大量研究表明，乙醇對肝臟SIRT1信號通路的破壞在AFLD的發(fā)展中有重要作用。雖然目前乙醇對肝臟SIRT1信號通路的破壞和肝脂肪變性、炎癥和輕度纖維化的分子機制尚不完全清楚，但越來越多的證據(jù)表明，乙醇對肝臟SIRT1信號通路的抑制主要是通過破壞由腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、甾醇調(diào)節(jié)元件結合蛋白1(SREBP-1)、過氧化物酶體增殖物激活受體 (PPARα)、PPARγcoactivator-1α(PGC-1α)、lipin-1、Forkhead轉(zhuǎn)錄因子O1(FOXO-1)、β-catenin和核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κb)等多種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子和輔助調(diào)節(jié)因子組成的信號網(wǎng)絡來實現(xiàn)的[3, 9, 14-15](見圖1)。

圖1 SRIT1在AFLD中的作用Fig. 1 The role of SRIT1 in AFLD

在乙醇的影響下，肝細胞中SIRT1的表達量會顯著下降，直接破壞肝臟中脂質(zhì)代謝穩(wěn)態(tài)，造成脂質(zhì)過度積累和炎癥反應。使用SIRT1激動劑白藜蘆醇喂養(yǎng)慢性乙醇中毒的小鼠，可以減輕肝臟脂肪變性，使血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)趨于正常，而ALT是檢測肝損傷的經(jīng)典指標之一。肝細胞SIRT1通過表達可以提升SIRT1活性防止酒精相關性脂肪變性細胞模型中脂肪堆積[16]。將乙醇注射給 SIRT1 LK0后，部分酒精相關性脂肪肝小鼠進一步進展為輕度酒精相關性肝纖維化。這些發(fā)現(xiàn)提示SIRT1信號在AFLD中的重要作用。

4 運動激活SIRT1改善AFLD的可能分子機制

4.1 運動激活SIRT1/AMPK信號通路與AFLD

乙醇導致AMPK磷酸化活性降低是AFLD的主要原因之一[17]。乙醇會抑制AMPK活性，促進糖原分解，導致糖代謝異常，肝臟糖代謝異常的最直接后果就是形成脂肪肝。AMPK還可以抑制引起乙?；o酶(ACC)的活性，誘導脂肪酸氧化，從而降低脂質(zhì)積累[18]。ACC是肝臟及其他組織中脂肪合成的限速酶，可以催化乙酰輔酶A(CoA)合成脂肪酸生物合成前體丙二酰輔酶A(malonyl-CoA)，并抑制卡尼丁棕櫚酸轉(zhuǎn)移酶-1 (cpt-1)的活性，該酶控制長鏈脂肪?；?CoA向線粒體的轉(zhuǎn)運。乙醇導致AMPK信號傳導障礙，從而促進肝臟脂質(zhì)積累，降低脂質(zhì)分解代謝，最終導致AFLD的發(fā)生。實驗證據(jù)表明，SIRT1和AMPK之間存在相互調(diào)節(jié)關系[19]，AMPK可以增強煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶的表達，使得NAD+濃度升高，激活SIRI1；SIRT1可以通過脫乙酰作用激活肝激酶B1(LKB 1)來激活AMPK，原因在于LKB 1是AMPK重要的上游激酶。這種獨特的SIRT1/AMPK信號通路參與調(diào)節(jié)了各種脂質(zhì)代謝和炎癥途徑[20-21]。作為SIRT1和AMPK激動劑的白藜蘆醇，可以激活小鼠肝臟中AIRT 1/AMPK信號通路，最終發(fā)揮其對AFLD的抑制保護作用。因此，乙醇對SIRT1/AMPK信號通路的抑制，是中樞上游信號系統(tǒng)受損導致AFLD的一個很重要的因素。

正常的肝臟脂質(zhì)合成是通過脂肪酸(FA)與甘油骨架縮合產(chǎn)生甘油三酯(TG)，肝臟中FA主要由來自于食物及脂肪組織中的游離脂肪酸和脂質(zhì)從頭合成(DNL)提供。DNL是糖類轉(zhuǎn)化為脂肪酸的主要途徑，糖類經(jīng)糖酵解生成乙酰輔酶A，在ACC的催化下生成MCoA，再經(jīng)一系列酶促反應，最終生成脂肪酸，與甘油縮合成為TG。在乙醇介導下，正常的脂質(zhì)合成與代謝遭到破壞，DNL途徑合成FA增加。因此，降低ACC活性，抑制DNL，可以緩解肝脂肪的變性。運動可以通過激活AMPK抑制肝臟脂肪的生成，加強脂肪酸氧化，減輕脂肪肝變性，使肝臟脂質(zhì)代謝趨向正常。

運動可以激活被乙醇抑制的AMPK，從而抑制肝臟脂肪生成與積累?；罨腁MPK可以磷酸化SREBP-1c，抑制SREBP-1c的活性，降低ACC和FAS表達水平，進而減少TG合成與堆積。AMPK也可以直接磷酸化ACC，降低ACC活性，減少MCoA合成，增加MCoA分解，從而抑制TG合成。運動激活SIRT1，降低SREBP-1c乙?；剑种聘闻K脂肪合成。AMPK與SIRT1兩者相互促進，協(xié)調(diào)調(diào)控細胞糖脂代謝過程。

4.2 SIRT1-PGC-1α/PPARα信號通路與AFLD

過氧化物增殖物活化受體α(peroxisome proliferator activated receptor α ,PPARα)是核激素受體家族中的一種，在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、脂肪生成、炎性反應方面有重要作用的轉(zhuǎn)錄因子[22]。過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1α,PGC-1α)是一種輔激活因子，可以協(xié)調(diào)作用于多種轉(zhuǎn)錄因子，包括PPARγ和PPARα等，參與調(diào)控脂肪酸β氧化和肝臟糖異生等過程。

SIRT1是PGC-1的功能調(diào)節(jié)因子。SIRT1可以直接作用于PGC-1α使其脫乙?；せ頟GC-1α活性，進而激活線粒體脂肪酸氧化代謝基因轉(zhuǎn)錄程序[23]。同時，PGC-1α的乙?；癄顟B(tài)也是通常用來檢測體內(nèi)SIRT1活性的指標之一。經(jīng)乙醇喂養(yǎng)的小鼠，肝臟中PGC-1基因和蛋白表達量顯著下降。乙醇注射后的小鼠其肝臟中PGC-1乙?；斤@著升高，總PGC-1蛋白也顯著升高[15]。PGC-1α與PPARα共同激活線粒體脂肪酸氧化酶表達，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝穩(wěn)態(tài)。 SIRT1 LK0小鼠會影響PPARα信號通路，造成肝臟脂肪酸氧化水平降低，加重肝臟脂肪變性和炎癥等結果。PGC-1α和PPARα的損傷與動物的AFLD的發(fā)展有關[15, 24]。因此，乙醇對SIRT1-PGC-1α/PPARα信號通路的破壞可能是AFLD的主要觸發(fā)因素之一。

運動可以提高SIRT1/AMPK信號通路表達與活化水平升高，促進脂肪酸氧化[18]。激活的SIRT1可以降低肝臟PGC-1α乙?；?，使脂肪酸氧化水平加強；隨著SIRT1被運動激活，進而激活AMPK上游激酶LBK1，激活AMPK ,也可以增加PGC-1α和肉 毒 堿 棕 櫚 酰 基 轉(zhuǎn) 移 酶 1(Carnitine palmitoyl transferase 1，CPT1)的表達水平，加速脂肪氧化。

4.3 SIRT1/SREBP-1信號通路與AFLD

甾醇調(diào)節(jié)元件蛋白(SREBP)是一種位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的膜連接蛋白，在膽固醇、脂肪酸、甘油三酯以及脂質(zhì)細胞分化過程中起關鍵作用，又稱為固醇調(diào)節(jié)配件蛋白。SREBP蛋白質(zhì)分為SREBP-1a、SREBP-1c 和 SREBP-2 三種亞型，分別由 SREBP-1和SREBP-2基因編碼[17]。SREBP-1a是調(diào)控脂肪酸合酶、甘油三酯和膽固醇等低密度脂蛋白的轉(zhuǎn)錄因子，SREBP-1c可以激活與脂肪酸和甘油三酯代謝相關的基因和蛋白的表達水平；SREBP-2是特異性的膽固醇代謝基因。SREBP-1主要參與肝臟脂質(zhì)的合成。

乙醇激活SREBP-1在AFLD發(fā)病機制中起重要作用。急性或慢性乙醇攝入會使乙酰輔酶A(CoA)、硬脂酰輔酶A去飽和酶(SCD)、脂肪酸合酶(FAS)、線粒體甘油-3-磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶1(GPAT 1)、蘋果酸酶(ME)以及ACC等SREBP-1調(diào)節(jié)酶的基因和蛋白表達量增加，進而激活SREBP-1蛋白活性，導致脂肪酸氧化受到抑制，肝臟脂質(zhì)異常堆積。在肝細胞、小鼠、豬等酒精相關性脂肪變性模型中，也證實肝臟SREBP-1活性增加[25-26]。肝臟特異性敲出SREBP-1基因的小鼠，沒有表現(xiàn)出發(fā)生AFLD的傾向，這說明在AFLD中，SREBP-1發(fā)揮著重要作用。但是，抑制SREBP-1c信號的大鼠模型也可觀察到AFLD的發(fā)展，說明乙醇對SREBP-1的影響可能因模型品種的不同而異。

SIRT1和SREBP-1存在相互調(diào)節(jié)作用[27]。通過組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)、CBP/p300和SIRT1的去乙?；饔茫{(diào)節(jié)SREBP-1c蛋白的穩(wěn)定性和活性。SIRT1通過去乙?；疭REBP-1c調(diào)節(jié)SREBP-1c活性，抑制SREBP-1c的轉(zhuǎn)錄活性，從而抑制肝細胞和肝組織中的SREBP-1c下游蛋白酶，如FAS、SCD、GPAT1、ME、ACL和ACC。乙醇暴露下小鼠肝細胞SREBP-1的乙酰化水平明顯升高。乙醇暴露導致的SIRT1活性下降與SREBP-1c的乙?；钚栽黾佑嘘P，從而導致脂肪變性的發(fā)生。用白藜蘆醇喂養(yǎng)小鼠可通過提升SIRT1，降低乙醇誘導的SREBP-1c乙?；胶蚐REBP-1活性的增加來減輕AFLD。因此，乙醇調(diào)節(jié)SIRT1-SREBP-1c信號通路的能力被認為是乙醇暴露與肝脂肪基因表達和AFLD發(fā)育的潛在機制之一。乙醇介導的SREBP-1激活部分是通過AMPK抑制介導的，表明SIRT1通過AMPK依賴的或獨立的機制調(diào)節(jié)SREBP-1的活性。

運動可以抑制大鼠SREBP-1c的表達，可能機制在于SIRT l負性調(diào)控SREBPs以及ACC等脂質(zhì)合成酶的靶基因[28]。運動可以提升SIRT1/AMPK信號通路活性，從而抑制SREBP-1c和ACC下游調(diào)脂性靶基因的活性。P-AMPK可以直接磷酸化ACC的79位絲氨酸或者通過磷酸化SREBP-1c降低ACC活性，從而減少丙二?；o酶A(MCA)的生成。MCA作為肉堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶I(CPTl) 變構抑制劑，MCA的合成減少使得CPTl的活性增強促進了脂肪酸向線粒體內(nèi)的轉(zhuǎn)移間接增強脂肪酸氧化。

4.4 SIRT1/lipin-1信號通路與AFLD

Lipin-1是調(diào)節(jié)機體脂代謝的一類蛋白，在促進脂肪氧化和抑制脂肪從頭合成中起重要作用的輔助轉(zhuǎn)錄因子，在脂肪組織、骨骼肌、肝臟和其他組織中對糖脂代謝中調(diào)節(jié)起著重要的作用。Lipin-1共有Lipin-1α、 Lipin-1β和 Lipin-1γ三種亞型，其中Lipin-1α是一種核質(zhì)連體穿梭蛋白，主要位于肝細胞的細胞核內(nèi)，lipin-1β則多集中在肝細胞胞質(zhì)中，Lipin-1γ主要負責腦組織的脂代謝。Lipin-1α直接與PGC-1α、PPARα和SREBP-1等核受體相互作用，作為轉(zhuǎn)錄協(xié)同刺激因子，調(diào)節(jié)脂肪酸氧化和脂質(zhì)合成酶的活性。Lipin-1β在細胞質(zhì)中，介導磷脂酸磷酸(phosphatidic acid phosphatase)將磷酸(PA)轉(zhuǎn)化為二酰甘油(DAG)，DAG可以作為甘油三酯(TG)、磷脂酰膽堿(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)的底物。Lipin-1β還與脂肪基因表達增加和肝臟脂肪的過度積累有關。

乙醇會干擾lipin-1信號通路功能紊亂，造成肝臟脂代謝異常。在嚙齒動物和人AFLD的形成和發(fā)展中，肝臟中l(wèi)ipin-1基因和蛋白以及其介導的PAP活性均顯著升高。更重要的是，乙醇會激活細胞質(zhì)中l(wèi)ipin-1的促脂活性，乙醇暴露下的小鼠肝細胞中l(wèi)ipin-1躍遷細胞核總量減少?？偟膩碚f，乙醇對lipin-1作用的凈結果是可以增強脂肪從頭合成，并抑制脂肪酸氧化，使得肝臟脂質(zhì)過量堆積，AFLD形成和發(fā)展。

研究發(fā)現(xiàn)，lipin-1信號通路的活性被SIRT1/SFRS10信號通路調(diào)節(jié)[29]。絲氨酸精氨酸二肽富含性剪切因子10(serine/arginine-rich splicing factor,SFRS10)是類RS蛋白家族中的一員。特異性SFRS10敲除后發(fā)現(xiàn)，基因敲除組小鼠肝細胞內(nèi)LPIN1mRNA的總量與對照組相比無明顯變化，但lipin-1α/β的總量是對照組的近兩倍[16]。這意味著，SFRS10表達量降低會使lipin-1表達升高，進而增強肝臟脂質(zhì)的合成與沉積。乙醇可以抑制SFRS10使肝細胞和小鼠肝lipin-lβ/α比值顯著升高培養(yǎng)肝細胞和小鼠肝臟中LPIN1基因以及SFRS10mRNA的表達，顯著增加肝組織LPIN1。研究發(fā)現(xiàn)，肝臟SIRT1通過抑制Suv39h1賴氨酸87的泛素化增加Suv39h1的半衰期，進而使乙?；疭FRS10去乙酰化，避免蛋白酶體對SFRS10降解，加強其穩(wěn)定性并提高其蛋白水平，意味著SIRT1活性與SFRS10的活性呈正相關。在將SRITl LK0小鼠與野生型(WT)小鼠進行制備酒精性肝損傷模型時發(fā)現(xiàn)SIRTl LK0小鼠lipin-lβ和lipin-l的總mRNA水平比WT小鼠均升高2.5倍，lipin-lα/β比值約升高2倍。WT小鼠SFRSl0 mRNA及其總蛋白量明顯下降，這種情況在SIRTl LK0組Z中更加顯著，分析可能是由于SIRT l的缺失導致SFRSl0的乙?；缴?，使SFRSl0穩(wěn)定性降低，被蛋白酶體降解?？梢哉J為，乙醇暴露會抑制SIRT l的表達，使SFRSl0蛋白表達水平降低，從而促進lipin-lβ的表達以及l(fā)ipin-lβ/α比值的增加，最終導致AFLD的發(fā)生與進展。

運動使機體SIRT1活性升高，使乙?；疭FRS10去乙?；?，提升SFRS10穩(wěn)定性，避免降解。同時，研究發(fā)現(xiàn)PGC-1α與lipin-1存在顯著性負相關，中等強度耐力運動可有效上調(diào)大鼠PGC-1α蛋白表達，并下調(diào)lipin-1蛋白的表達[30-31]。

4.5 SIRT1/FOXO1信號通路與AFLD

研究證實FOXO1在機體的脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)和氧化應激反應的眾多途徑中起關鍵作用[32]。FOXO1的活性主要受其蛋白翻譯后修飾相關的亞細胞定位變化的調(diào)節(jié)，包括乙?；?去乙?；?。SIRT1可以將FOXO1DNA結合域中的賴氨酸殘基去乙?；瑫r通過增加或降低其轉(zhuǎn)錄活性來促進FOXO1的核保留。硫辛酸(ALA)是SIRT1的化學激動劑，用ALA處理人肝癌細胞(HepG2)激活SIRT1，證實激活的SIRT1減弱了胞漿內(nèi)P-FOXO1表達，增強了甘油三酯脂肪酶的表達，同時胞漿內(nèi)P-SREBP-1的表達顯著增強，進而抑制了肝臟FAS的表達。乙醇暴露會增加FOXO1的乙酰化水平，導致小鼠肝臟細胞核內(nèi)FOXO1蛋白量下降[12]。

FOXO3a是FOXO叉頭轉(zhuǎn)錄因子家族的另一個成員，是調(diào)節(jié)乙醇誘導的自噬和細胞存活的重要分子。急性乙醇誘導自噬并部分減輕乙醇誘導的肝損傷，白藜蘆醇激活SIRT1進一步增強了乙醇誘導的自噬相關基因的表達，很可能是通過增加FOXO3a的脫乙?；瑥亩砻鱏IRT1-FOXO3a信號通路參與了乙醇的作用。

4.6 SIRT1/Adiponectin信號通路與AFLD

脂聯(lián)素是一種脂肪衍生素，具有多種有益的生物學功能，如增強胰島素敏感性等。最近研究發(fā)現(xiàn)，在諸多AFLD動物模型中，均出現(xiàn)低脂聯(lián)素血癥以及肝脂聯(lián)素信號異常。脂聯(lián)素在AFLD的發(fā)病機制中有著重要作用，通過食物或者藥物刺激脂肪組織和肝脂聯(lián)素受體(Adipo R) ，可以在很大程度上減輕動物AFLD的發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn)，SIRT1可以顯著提高FOXO1-Δ256和C/EBPα共轉(zhuǎn)染細胞的熒光素酶活性，雖然FOXO1-Δ256不具有易活化性，但可以C/EBPα結合，進而提高FOXO1的轉(zhuǎn)錄活性和FOXO1-C/EBPα復合物的形成來上調(diào)脂聯(lián)素基因的轉(zhuǎn)錄。

目前對于乙醇對脂聯(lián)素的表達、產(chǎn)生、分泌的機制尚未完全闡明，但是白藜蘆醇介導的循環(huán)脂聯(lián)素水平的升高與慢性乙醇喂養(yǎng)小鼠肝臟SIRT1蛋白表達的增強和肝臟脂質(zhì)積累的減少有關[33]。這些結果表明，受SIRT1激動劑刺激的肝脂聯(lián)素-SIRT1信號通路在一定程度上對AFLD有保護作用。必須指出的是，乙醇對SIRT1的影響不太可能完全通過破壞脂聯(lián)素信號來介導，因為乙醇對SIRT1的抑制作用在體外培養(yǎng)的肝細胞中也能觀察到，而不受脂聯(lián)素的影響。

4.7 SIRT1-Wnt/β-catenin信號通路與AFLD

Wnt/β-catenin異常導致包括肝硬化、肝癌和酒精性肝病等肝臟疾病的關鍵因素。乙醇注射肝臟β-catenin表達異常(β-catenin KO) 小鼠，小鼠肝臟表現(xiàn)為氧化還原失衡、PPARα介導的線粒體脂肪酸氧化受損和肝臟脂肪變性。進一步的研究發(fā)現(xiàn)，乙醇注射后，β-catenin KO小鼠肝臟中的SIRT1mRNA和蛋白水平會顯著降低，而SIRT1是PPARα功能和線粒體脂肪酸氧化的既定調(diào)節(jié)因子。因此，肝臟Wnt/β-catenin信號可能通過改變SIRT1-PPARα信號通路與AFLD相關。

5 SIRT1與運動

SIRT1在體內(nèi)參與了氧化應激響應、能量控制和運動代謝適應等生理過程[34]。運動可以調(diào)節(jié)機體組織SIRT1的表達，且SIRT1與運動強度呈正相關，并表現(xiàn)出劑量依賴關系[35]。

國內(nèi)外關于SIRT1的研究多與慢性疾病，例如緩解糖尿病、心血管功能障礙、神經(jīng)退行性疾病、癌癥以及衰老的方面，關于SIRT1與運動關系的研究相對較少，且較集中于SIRT1與骨骼肌等運動系統(tǒng)方面。

在研究SIRT1在骨骼肌中的分布以及在急性運動和耐力訓練中對SIRT1在骨骼肌中的表達和代謝成分的影響中發(fā)現(xiàn)，在慢肌纖維中SIRT1優(yōu)勢表達，急性運動(跑臺運動，20 m/min，18.5%坡度，45 min)干預后2 h，比目魚肌中SIRT1表達量增加；在低強度耐力訓練(跑臺運動，20 m/min，18.5%坡度，90 min/d)和高強度耐力訓練(跑臺運動，30 m/min，18.5%坡度，60 m/d)中發(fā)現(xiàn)，兩組中比目魚肌SIRT1、己糖激酶、線粒體酶以及葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白(GLUT4)含量均增加[36]。該實驗驗證了骨骼肌運動會使SIRT1表達量增加，并且SIRT1的表達量提升可能在運動引起的骨骼肌代謝適應中有非常重要作用。在基于SIRT1信號通路探討有氧運動與白藜蘆醇對糖尿病大鼠的影響中發(fā)現(xiàn)，糖尿病運動組與白藜蘆醇干預組以及白藜蘆醇聯(lián)合運動干預組中，血管SIRT1表達量均高于糖尿病對照組[37]。白藜蘆醇作為SIRT1激動劑，可以直接提升SIRT1的表達量，有氧運動組中SIRT1表達量的升高提示有氧運動也可以作為激動SIRT1表達的重要方法與手段。在基于SIRT1軸探討有氧運動對大鼠脂肪性肝炎的影響中發(fā)現(xiàn)，對高脂喂養(yǎng)大鼠進行長期運動訓練(25 m/min，60 min/d，5 d/周，23周)，結果顯示長期運動訓練組大鼠肝細胞SIRT1較正常組有顯著提高[38-39]。

6 總結與展望

近年來，越來越多的證據(jù)證明SIRT1在AFLD(7-21)發(fā)病機制中的作用和影響。在人類和嚙齒動物AFLD的研究中，乙醇通過影響SIRT1功能，破壞由多種重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子和輔助調(diào)節(jié)因子參與的信號網(wǎng)絡，進而影響脂質(zhì)代謝和肝細胞炎癥過程的多個調(diào)節(jié)通路，最后導致脂肪變性和炎癥的發(fā)生。但是，目前還有很多問題尚未闡明：1)乙醇對SIRT1的表達及其介導的脫乙酰酶活性有抑制作用，但SIRT1活性被抑制與乙醇暴露的確切機制仍不明確；2)運動是如何在機體中廣泛激活SIRT1并發(fā)揮作用的； 3)SIRT1在體內(nèi)有多重調(diào)節(jié)機制，例如NAD+濃度以及翻譯后修飾等，那么乙醇對于SIRT1的乙?；⒘姿峄?、類泛素化是否有影響，怎么影響？4)運動激活SIRT1發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的時效性，停止運動后SIRT1的活性如何變化，以及停止運動后肝臟脂肪變性發(fā)展？5)哪種運動方式和運動強度對SIRT1的激活更顯著？運動訓練對機體的影響既系統(tǒng)又廣泛，其影響不止于SIRT1，探究運動改善AFLD的可能機制，筆者認為應以AFLD的發(fā)病機理入手，宏觀角度研究運動激活SIRT1對機體各個方面的影響，最終表現(xiàn)出減輕肝臟損傷、恢復肝臟功能、改善肝臟中脂類異常堆積、減輕炎癥反應、抗氧化應激等方面對AFLD的改善作用。