陸 梅 ,李 宏

(1.陜西省農(nóng)業(yè)檢驗(yàn)檢測(cè)中心，西安 710003；2.陜西省畜牧技術(shù)推廣總站，西安 710016)

鉻是中國(guó)飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)重點(diǎn)控制的指標(biāo)之一。Cr6+還能擾亂機(jī)體免疫機(jī)能，可引起肺癌，具有致突變作用和細(xì)胞遺傳毒性。Cr6+的毒性最強(qiáng)，是Cr3+的100倍，具有強(qiáng)烈的致癌性和皮膚損傷性。根據(jù)其毒害部位，可分為免疫毒性、神經(jīng)毒性、生殖毒性、腎毒性、遺傳毒性、致癌毒性[5]。對(duì)于膨潤(rùn)土中鉻的檢測(cè)，目前大多檢測(cè)機(jī)構(gòu)都采用《飼料中鉻的測(cè)定》[6]中的原子吸收光譜法測(cè)定。但是膨潤(rùn)土中的無(wú)機(jī)鉻含量較高，使用酸溶解法無(wú)法使其中的鉻溶出，使用干灰化法會(huì)導(dǎo)致有機(jī)鉻和無(wú)機(jī)鉻在高溫環(huán)境中發(fā)生氧化反應(yīng)生成難溶性鉻鹽，降低鉻的提取效率，導(dǎo)致測(cè)定值比實(shí)際含量偏低。飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB13078-2017規(guī)定：飼料原料中鉻≤5mg/kg、豬用添加劑預(yù)混合飼料中鉻≤20mg/kg、豬用濃縮飼料中鉻≤5mg/kg、其他濃縮飼料中鉻≤5mg/kg、配合飼料中鉻≤5mg/kg[7]。膨潤(rùn)土作為飼料添加劑在飼料中應(yīng)用極為普遍，鉻含量測(cè)定不準(zhǔn)確，產(chǎn)品質(zhì)量安全控制不好，就會(huì)引起飼料產(chǎn)品中鉻超標(biāo)?！讹暳现秀t的測(cè)定》標(biāo)準(zhǔn)[6]，制定時(shí)間較早，有許多不完善的地方，已經(jīng)不能適應(yīng)檢測(cè)工作的需要。近年來(lái)有不少文獻(xiàn)報(bào)道：以干灰化法處理測(cè)定蛋氨酸中鉻含量時(shí)會(huì)導(dǎo)致鉻揮發(fā)，測(cè)定值降低[8-9]；使用干灰化法和硝酸常溫溶解體系提取率低，會(huì)使鉻的測(cè)定值偏低，干灰化法和50%的鹽酸-硝酸熱溶解體系處理，鉻的回收率達(dá)到95%以上[10]；采用干灰化法和硝酸常溫溶解體系處理會(huì)引起飼料中鉻測(cè)定值比實(shí)際含量偏低的結(jié)果，干灰化法和50%的鹽酸熱溶解體系處理，鉻的回收率達(dá)到90%以上[11]；諸如此類(lèi)的文獻(xiàn)很多，都對(duì)《飼料中鉻的測(cè)定》[6 ]標(biāo)準(zhǔn)中的技術(shù)缺陷提出各自觀點(diǎn)。為了進(jìn)一步研究飼料用膨潤(rùn)土中鉻的檢測(cè)方法，本試驗(yàn)選取飼料膨潤(rùn)土試樣，利用火焰原子吸收分光光度計(jì)，研究比較硝酸常溫溶解體系、鹽酸熱溶解體系、鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系對(duì)飼料用膨潤(rùn)土中鉻含量測(cè)定結(jié)果的影響，對(duì)鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系進(jìn)行優(yōu)化，旨在建立飼料用膨潤(rùn)土中鉻含量的最佳測(cè)定方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)樣品為飼料用膨潤(rùn)土。配合飼料質(zhì)控樣(中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院測(cè)試評(píng)價(jià)中心)。

硝酸(優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)，鹽酸(優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)，溴酸鉀(分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)，鉻元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心)。

電子分析天平，德國(guó)耶拿公司的Vaio6型原子吸收分光光度計(jì)，電加熱爐，SX2-4-10箱式電阻爐(天津市中環(huán)實(shí)驗(yàn)電爐有限公司，溫度誤差±20 ℃)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)1：3種溶解體系鉻測(cè)定的結(jié)果比較。稱(chēng)取飼料用膨潤(rùn)土試樣18份，每份3 g(精確至0.000 1 g)于瓷坩堝中，隨機(jī)抽取6個(gè)為1組，分為對(duì)照組、處理一組和處理二組，每組加入平行質(zhì)控樣，小心炭化至無(wú)煙后，然后移至550 ℃高溫爐中灰化5 h，取出，放冷。對(duì)照組使用國(guó)標(biāo)法[6]硝酸常溫溶解體系進(jìn)行溶解，處理一組使用鹽酸熱溶解體系溶解，處理二組使用鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系溶解，3組溶解好的樣品，全部用水轉(zhuǎn)移定容到50 mL容量瓶中，過(guò)濾，利用火焰原子吸收(扣背景)測(cè)定鉻含量并進(jìn)行結(jié)果比較，選出最佳溶解體系。

試驗(yàn)2：最佳溶解體系的條件優(yōu)化試驗(yàn)。分別稱(chēng)取膨潤(rùn)土試樣、質(zhì)控樣品各18份，每份3 g(精確至0.000 1 g)于瓷坩堝中，任取2份試樣和2份質(zhì)控樣做平行試驗(yàn)，小心炭化至無(wú)煙后，移至550 ℃高溫爐中灰化5 h，取出，放冷，使用鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系溶解，在溶解過(guò)程中逐步增加溴酸鉀溶液的使用量，最后用5 mL 50%鹽酸溶液加熱復(fù)溶，用水轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，定容、過(guò)濾，利用火焰原子吸收(扣背景)測(cè)定鉻含量并進(jìn)行結(jié)果比較，選擇鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系的最佳條件。

鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系的方法學(xué)考察：稱(chēng)取膨潤(rùn)土試樣20份，每份3 g(精確至 0.000 1 g)于瓷坩堝中，分為對(duì)照組平行樣和添加試驗(yàn)組平行樣，添加試驗(yàn)組的添加濃度分別為5 mg/kg、10 mg/kg、15 mg/kg，小心炭化至無(wú)煙后，移至550 ℃高溫爐中灰化5 h，取出，放冷，使用試驗(yàn)2優(yōu)化后的鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系溶解，用水轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，定容、過(guò)濾，利用火焰原子吸收(扣背景)測(cè)定鉻的回收率及精密度。

1.2.2 試驗(yàn)方法 硝酸常溫溶解體系處理方法：稱(chēng)取飼料用膨潤(rùn)土試樣，小心炭化至無(wú)煙后，然后移至550 ℃高溫爐中灰化5 h，取出，放冷，加入10 mL 50%的硝酸溶液溶解，用水轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，定容、過(guò)濾，利用火焰原子吸收(扣背景)光譜儀，在波長(zhǎng)選擇359.4 nm，測(cè)定吸光度并計(jì)算含量。

鹽酸熱溶解體系處理方法：稱(chēng)取飼料用膨潤(rùn)土試樣，小心炭化至無(wú)煙后，然后移至550 ℃高溫爐中灰化5 h，取出，放冷，加入10 mL 50%的鹽酸溶液，加熱溶解后，用水轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，定容、過(guò)濾，利用火焰原子吸收(扣背景)光譜儀，在波長(zhǎng)選擇359.4 nm，測(cè)定吸光度并計(jì)算 含量。

鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系處理方法：稱(chēng)取飼料用膨潤(rùn)土試樣，小心炭化至無(wú)煙后，然后移至550 ℃高溫爐中灰化5 h，取出，放冷，加入5 mL 50%鹽酸溶液加熱溶解，再加入5 mL 10%的溴酸鉀溶液加熱氧化，至溶液成亮黃色，5 mL 50%用鹽酸復(fù)溶后，用水轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，定容、過(guò)濾，利用火焰原子吸收(扣背景)光譜儀，在波長(zhǎng)選擇359.4 nm，測(cè)定吸光度并計(jì)算 含量。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)組的空白試樣設(shè)計(jì)2次重復(fù)，試驗(yàn)樣品為6個(gè)重復(fù)。鉻含量測(cè)定結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,采用SPSS進(jìn)行單因素方差分析及差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 3種溶解體系對(duì)膨潤(rùn)土中鉻測(cè)定的結(jié)果 比較

從表1中可以看出，稱(chēng)取相同質(zhì)量的膨潤(rùn)試樣分別使用硝酸常溫溶解體系、鹽酸熱溶解體系和鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系處理，鉻的測(cè)定平均值分別為18.56 mg/kg、27.32 mg/kg和36.01 mg/kg，鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系的平均提取率比硝酸常溫溶解體系和鹽酸加熱溶解體系分別提高94.02%和31.81%(P<0.05)；質(zhì)控樣品的平均提取率分別提高38.34%和 19.73%(P<0.05)。這說(shuō)明鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系能明顯提高試樣中鉻的提取率，為最佳樣品前處理方法。究其原因是膨潤(rùn)土試樣中鉻化合物種類(lèi)較多，相比質(zhì)控樣品的成分要復(fù)雜得多，其中存在類(lèi)似三氧化二鉻等難溶性物質(zhì)[12-17]，使用硝酸或鹽酸不能完全將膨潤(rùn)土中鉻溶出，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏低；對(duì)于礦石中的鉻的溶解，大部分使用熔融法[18-20]和氧化法[21-24]解決這一問(wèn)題；本研究利用溴酸鉀氧化法能使試樣中類(lèi)似三氧化二鉻的難溶解物質(zhì)化學(xué)形態(tài)發(fā)生改變，使鉻溶出，同樣達(dá)到這一效果，不但提取率提高，而且穩(wěn)定性好，操作方便。

表1 不同溶解體系下鉻測(cè)定結(jié)果

2.2 鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系優(yōu)化

稱(chēng)取膨潤(rùn)土試樣若干，選擇鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系，在保持溴酸鉀溶液濃度不變的情況下，逐步增加溴酸鉀溶液的使用量，觀察試樣中鉻的測(cè)定變化情況。結(jié)果表明(表2)：溴酸鉀溶液由2.50 mL增加至10 mL時(shí)，膨潤(rùn)土試樣中鉻的測(cè)定值逐漸增加，到達(dá)10 mL時(shí)測(cè)定值達(dá)到最大38.21 mg/kg，比對(duì)照組提高42.6%(P< 0.05)，以后隨著溴酸鉀溶液由10 mL增加至20 mL時(shí)，試樣溶液變得渾濁，黏度增大，鉻的測(cè)定值逐漸降至12.97 mg/kg，比對(duì)照組降低51.5%(P<0.05)。質(zhì)控樣的檢測(cè)結(jié)果也開(kāi)始增加，到達(dá)10 mL時(shí)，測(cè)定值達(dá)到最大8.07 mg/kg，回收率為100.9%，以后隨著溴酸鉀溶液由10 mL增加至20 mL時(shí)，鉻的回收率下降到4.98 mg/kg，這說(shuō)明在稱(chēng)樣質(zhì)量為3 g左右時(shí)，選擇鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系，保持其他不變，使用10 mL溴酸鉀溶液是最佳條件。

表2 鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系的條件優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果(n=2)

2.3 鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系方法學(xué)考察

在鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系的最佳優(yōu)化條件下，對(duì)添加濃度分別為5 mg/kg、10 mg/kg、15 mg/kg的3組膨潤(rùn)土試樣的回收率和重復(fù)性進(jìn)行考察。結(jié)果顯示，3個(gè)濃度梯度的鉻添加水平，平均回收率分別為98.07%、99.3%、99.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為4%、2.03%、1.22%，方法準(zhǔn)確度高，精密度好(表3)。

表3 鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系的回收率及精密度

3 結(jié) 論

試驗(yàn)結(jié)果表明：在3種溶解體系處理中，鹽酸-溴酸鉀溶液熱溶解體系是膨潤(rùn)土試樣的最佳處理方法，該方法提取率比硝酸冷溶解體系和鹽酸熱溶解體系分別提高94.02%和31.81%(P< 0.05)。在試驗(yàn)最佳優(yōu)化條件下，3個(gè)梯度鉻的添加試驗(yàn)，回收率均大于98%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于4%，方法準(zhǔn)確度高，精密度好。本方法適用于含有三氧化二鉻、硫酸鉻、碳化鉻和氮化鉻等混合飼料樣品中鉻的測(cè)定，可克服現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)方法[6 ]測(cè)量值比實(shí)際偏低的缺陷；本試驗(yàn)研究結(jié)論可為飼料用膨潤(rùn)土中鉻的檢測(cè)提供借鑒和參考，同時(shí)可以延展到飼料其他產(chǎn)品中鉻的檢測(cè)，為《飼料中鉻的測(cè)定》[6 ]標(biāo)準(zhǔn)修訂提供技術(shù)支持。