黃富鵬　閆浩

摘要：本文提出了一種實(shí)現(xiàn)人工DNA分子通信接收器中關(guān)鍵部件——信息轉(zhuǎn)換接口的方法。該信息轉(zhuǎn)換接口利用DNA堿基互補(bǔ)配對(duì)原理和電化學(xué)檢測(cè)技術(shù)，將微觀DNA分子信號(hào)轉(zhuǎn)換為宏觀電信號(hào)。我們開展了實(shí)驗(yàn)研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，本文提出的信號(hào)轉(zhuǎn)換接口能夠準(zhǔn)確地將微觀DNA分子信號(hào)實(shí)時(shí)轉(zhuǎn)換為宏觀電信號(hào)。這項(xiàng)工作對(duì)于微觀人工分子通信實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的系統(tǒng)構(gòu)建具有重要意義。

關(guān)鍵詞：分子通信;人工分子通信;人工DNA分子通信

一、引言

近年來(lái)，生物科學(xué)、納米技術(shù)和信息技術(shù)的進(jìn)步增強(qiáng)了人們探索納米世界的能力，為納米機(jī)器的實(shí)現(xiàn)提供了技術(shù)支持。納米機(jī)器在藥物靶向運(yùn)輸、納米物聯(lián)網(wǎng)等領(lǐng)域具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。然而，單個(gè)納米機(jī)器由于尺寸（1～100nm）小，只能在有限空間內(nèi)執(zhí)行非常簡(jiǎn)單的任務(wù)[1]。為了克服這種限制，實(shí)現(xiàn)在更大范圍內(nèi)完成更復(fù)雜、更精確的任務(wù)，學(xué)者們提出了將納米機(jī)器互聯(lián)，組建納米網(wǎng)絡(luò)。納米網(wǎng)絡(luò)通過納米機(jī)器之間的信息共享，擴(kuò)展了納米機(jī)器的功能。

納米網(wǎng)絡(luò)的應(yīng)用場(chǎng)景通常是微觀且富含水的生物環(huán)境，傳統(tǒng)的基于電磁波的通信技術(shù)受限于收發(fā)器體積和能耗等因素[2]，無(wú)法直接用于納米機(jī)器間的通信。自然界中存在大量天然納米機(jī)器，如細(xì)胞等，它們通過分子通信在微觀和富水生物環(huán)境中交換信息，形成穩(wěn)定高效的天然生物納米網(wǎng)絡(luò)。受到自然界啟發(fā)，學(xué)者們提出了利用生物化學(xué)分子作為信息載體的人工分子通信。由于具有能耗低和生物相容性等優(yōu)勢(shì)，人工分子通信被認(rèn)為是實(shí)現(xiàn)納米網(wǎng)絡(luò)最可靠的通信方式之一[3]。

目前，人工分子通信的研究主要集中在理論方面，在實(shí)驗(yàn)方面的研究極其有限，尤其缺乏能夠執(zhí)行穩(wěn)定而連續(xù)信息傳遞的微觀人工分子通信實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，這是當(dāng)前納米網(wǎng)絡(luò)研究中最主要的瓶頸問題。為了解決這個(gè)問題，學(xué)者們已經(jīng)開展了探索性研究，實(shí)現(xiàn)了微觀人工分子通信實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的部分模塊，但尚未實(shí)現(xiàn)完整的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。文獻(xiàn)[4]通過實(shí)驗(yàn)證明了工程大腸桿菌群可以作為微觀人工分子通信的信號(hào)接收器，能在接收到特定信息分子后發(fā)出熒光信號(hào)作為響應(yīng)，但響應(yīng)速度緩慢，1比特信息需要435分鐘才能完成接收。文獻(xiàn)[5]也對(duì)工程大腸桿菌群作為微觀信號(hào)接收器進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。接收器大腸桿菌群在接收到信息分子后會(huì)發(fā)出綠色熒光蛋白信號(hào)作為響應(yīng)。文獻(xiàn)[6]利用工程大腸桿菌和氧化還原反應(yīng)機(jī)制，設(shè)計(jì)并實(shí)現(xiàn)了從微觀分子信號(hào)到宏觀電信號(hào)的轉(zhuǎn)換接口，然而轉(zhuǎn)換速度同樣較慢，需要若干小時(shí)才能完成1比特信息的轉(zhuǎn)換。如上的研究，推動(dòng)了微觀人工分子通信實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的研究進(jìn)展，但也存在局限。首先，這些研究都是限定于工程化大腸桿菌這一種人工納米機(jī)器。其次，工作速度緩慢，若干小時(shí)才能完成1比特信號(hào)傳遞。

針對(duì)上述瓶頸問題，本文提出了一個(gè)基于DNA分子的微觀分子信號(hào)到宏觀電信號(hào)的轉(zhuǎn)換接口，簡(jiǎn)稱信號(hào)轉(zhuǎn)換接口。該信號(hào)轉(zhuǎn)換接口利用DNA堿基互補(bǔ)配對(duì)原理和電化學(xué)檢測(cè)技術(shù)，可以將微觀DNA分子信號(hào)轉(zhuǎn)換為宏觀電信號(hào)。信號(hào)轉(zhuǎn)換接口是一個(gè)表面修飾了與DNA信息分子序列互補(bǔ)的DNA探針的金薄膜電極，當(dāng)電極表面的DNA探針檢測(cè)接收到微觀DNA分子信號(hào)后，電極表面的雙電層電化學(xué)性質(zhì)發(fā)生改變，通過電化學(xué)阻抗譜檢測(cè)技術(shù)可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)電極阻抗變化，進(jìn)而獲取信號(hào)變化。實(shí)驗(yàn)證明，本文提出的信號(hào)轉(zhuǎn)換接口能夠?qū)⑽⒂^DNA分子信號(hào)實(shí)時(shí)轉(zhuǎn)換為宏觀電信號(hào)，1比特信息的轉(zhuǎn)換只需要300秒。這項(xiàng)工作對(duì)于微觀人工分子通信實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的系統(tǒng)構(gòu)建具有重要意義。本工作的意義在于：拓展了實(shí)現(xiàn)微觀人工分子通信的機(jī)制，除了文獻(xiàn)中已經(jīng)提出的大腸桿菌機(jī)制外，本工作證明了DNA技術(shù)也有望用于實(shí)現(xiàn)微觀人工分子通信平臺(tái)。此外，提高了接收器信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的信息轉(zhuǎn)換速度。

二、基于DNA分子的人工分子通信接收器信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的基本原理

基于DNA分子的人工分子通信接收器信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的微觀DNA分子信號(hào)轉(zhuǎn)換宏觀電信號(hào)過程如圖1所示，信號(hào)轉(zhuǎn)換接口靜置在液體環(huán)境中，通過電化學(xué)工作站采用阻抗-時(shí)間測(cè)量法（IMPT，Impedance-Time），實(shí)時(shí)監(jiān)控信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的阻抗大小。實(shí)驗(yàn)過程中采用了開關(guān)鍵控（OOK，On-Off Keying）的調(diào)制方式，將向裝置中加入單鏈DNA溶液代表“1”，向裝置中加入不含單鏈DNA的溶液代表“0”。單鏈DNA進(jìn)入液體環(huán)境后，通過自由擴(kuò)散和電場(chǎng)作用進(jìn)行傳播。

當(dāng)信號(hào)轉(zhuǎn)換接口上的DNA探針檢測(cè)接收到單鏈DNA時(shí)，互補(bǔ)配對(duì)形成雙鏈DNA結(jié)構(gòu)，改變信號(hào)轉(zhuǎn)換接口表面的雙電層結(jié)構(gòu)，使得信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的阻抗發(fā)生變化，進(jìn)而被電化學(xué)工作站上檢測(cè)到，實(shí)現(xiàn)微觀DNA信號(hào)到宏觀電信號(hào)的轉(zhuǎn)換。

本文使用到的實(shí)驗(yàn)裝置由測(cè)試儀器和電極測(cè)量體系組成，其中測(cè)試儀器是上海辰華儀器公司生產(chǎn)的電化學(xué)工作站CHI660E，實(shí)驗(yàn)裝置使用的電極測(cè)量體系為三電極測(cè)量體系，三電極測(cè)量體系由工作電極、對(duì)電極和參比電極組成，相對(duì)于兩電極測(cè)量體系，三電極體系測(cè)量更便捷，測(cè)量結(jié)果更穩(wěn)定，常用于固相與液相界面間的電化學(xué)過程測(cè)量。實(shí)驗(yàn)裝置中的對(duì)電極為鉑絲（Pt）、參比電極為飽和氯化鉀/氯化銀電極（KCl/AgCl）、工作電極為電極夾和信號(hào)轉(zhuǎn)換接口組成，如圖2所示。

三、信號(hào)轉(zhuǎn)換接口使用的材料及制備過程

（一）使用的材料和試劑

本文中使用到的金薄膜電極是利用濺射技術(shù)在BK7玻璃上修飾了一層薄膜，其中，薄膜由3nm的鉻和47nm的金組成。本文中使用到的單鏈DNA材料均是從生工生物有限公司定制，其中，DNA探針是設(shè)計(jì)的長(zhǎng)度為20個(gè)堿基的單鏈DNA，一端末尾修飾了巰基（-SH），DNA信息分子是與DNA探針序列互補(bǔ)的單鏈DNA。

（二） 制備過程

信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的制備過程分為以下兩個(gè)步驟：清洗和修飾DNA探針，如圖3所示。首先將金薄膜電極加入無(wú)水乙醇中加熱煮沸10分鐘，取出用超純水清洗，再將金薄膜電極完全浸沒于濃度為30%的過氧化氫中，靜置10分鐘，取出用超純水清洗。通過清洗步驟去除金薄膜電極表面可能存在的雜質(zhì)。最后將清洗后的金薄膜電極浸沒在DNA探針溶液中，置于4℃的環(huán)境中過夜，再取出用超純水清洗即可制備得到信號(hào)轉(zhuǎn)換接口。

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果和分析

為了驗(yàn)證提出的信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的可行性，本文做了如下三個(gè)實(shí)驗(yàn)。

第一個(gè)實(shí)驗(yàn)是往實(shí)驗(yàn)裝置中加入不含DNA信息分子的溶液，第二個(gè)實(shí)驗(yàn)是往實(shí)驗(yàn)裝置中加入濃度為20uM的DNA信息分子的溶液，第三個(gè)實(shí)驗(yàn)采用開關(guān)鍵控的調(diào)制方式，將加入濃度為20uM的DNA信息分子的溶液代表“1”，加入不含DNA信息分子的溶液代表“0”，模擬輸入二進(jìn)制信號(hào)，驗(yàn)證信號(hào)轉(zhuǎn)換接口可行性。其中，三個(gè)實(shí)驗(yàn)每次往實(shí)驗(yàn)裝置中加入溶液的時(shí)間間隔為300秒，每次加入的溶液體積均遠(yuǎn)小于實(shí)驗(yàn)裝置內(nèi)電解質(zhì)溶液的體積。定義阻抗比值為信號(hào)轉(zhuǎn)換接口通過電化學(xué)工作站實(shí)時(shí)測(cè)量阻抗與最初測(cè)量阻抗的比值。

第一個(gè)實(shí)驗(yàn)是空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)，信號(hào)轉(zhuǎn)換接口已經(jīng)準(zhǔn)備好接收微觀DNA分子信號(hào)，但在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中，加入實(shí)驗(yàn)裝置的溶液中不含有DNA信息分子，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖4所示。在溶液加入實(shí)驗(yàn)裝置的時(shí)候，信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的阻抗比值曲線出現(xiàn)了劇烈的波動(dòng)，然后迅速回到穩(wěn)定狀態(tài)，這是往實(shí)驗(yàn)裝置中加入溶液時(shí)造成裝置內(nèi)溶液震蕩導(dǎo)致的結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)過程中，多次加入不含DNA信息分子的溶液，信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的阻抗比值在1上下波動(dòng)，說明阻抗比值不受到加入外部溶液的影響。

第二個(gè)實(shí)驗(yàn)是輸入連續(xù)信號(hào)“1”的信號(hào)接收轉(zhuǎn)換實(shí)驗(yàn)。連續(xù)接收四個(gè)“1”信號(hào)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖5所示?？梢钥吹?，當(dāng)加入濃度為20uM的DNA信息分子的溶液時(shí)，信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的阻抗比值曲線同樣出現(xiàn)波動(dòng)，然后恢復(fù)平穩(wěn)，當(dāng)此時(shí)的阻抗比值相對(duì)于加入DNA信息分子的溶液前出現(xiàn)了下降。對(duì)于連續(xù)四次加入的含有DNA信息分子的溶液，信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的阻抗比值連續(xù)下降，曲線呈現(xiàn)出階梯狀，即四次微觀DNA分子信號(hào)均被信號(hào)轉(zhuǎn)換接口檢測(cè)接收，轉(zhuǎn)換為宏觀電信號(hào)變化。同時(shí)，注意到隨著檢測(cè)接收次數(shù)的增加，阻抗比值下降的幅度逐漸減小，這可能與信號(hào)轉(zhuǎn)換接口上的DNA探針結(jié)合DNA信息分子形成互補(bǔ)配對(duì)后，表面可探測(cè)的DNA探針數(shù)量減少有關(guān)系。

第三個(gè)實(shí)驗(yàn)為采用開關(guān)鍵控調(diào)制方式，模擬接收二進(jìn)制信號(hào)（1100），實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖6所示?？梢钥吹剑诮邮盏健?”信號(hào)時(shí)，信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的阻抗比值明顯下降，而在接收到“0”信號(hào)時(shí)，信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的阻抗比值相對(duì)穩(wěn)定，基本保持不變。四個(gè)比特信號(hào)均被信號(hào)轉(zhuǎn)換接口正確接收轉(zhuǎn)換，證明了信號(hào)轉(zhuǎn)換接口的成功。

五、結(jié)束語(yǔ)

本文提出了一個(gè)基于DNA納米機(jī)器的微觀分子信號(hào)到宏觀電信號(hào)的轉(zhuǎn)換接口，該轉(zhuǎn)換接口利用DNA堿基互補(bǔ)配對(duì)原理和電化學(xué)檢測(cè)方法，實(shí)現(xiàn)了微觀DNA分子信號(hào)到宏觀電信號(hào)的轉(zhuǎn)換。通過將微觀DNA分子信號(hào)的二進(jìn)制序列成功轉(zhuǎn)換為宏觀電信號(hào)變化，證明了該轉(zhuǎn)換的可行性。同時(shí)，該轉(zhuǎn)換接口的實(shí)驗(yàn)環(huán)境為封閉的實(shí)驗(yàn)裝置，如何在實(shí)際復(fù)雜環(huán)境中對(duì)信號(hào)進(jìn)行準(zhǔn)確檢測(cè)接收，排除其他噪聲因素干擾，是后續(xù)工作的重點(diǎn)。

作者單位：黃富鵬? ? 閆浩? ? 上海交通大學(xué) 電子信息與電氣工程學(xué)院 儀器科學(xué)與工程系

參? 考? 文? 獻(xiàn)

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上海智能診療儀器工程技術(shù)研究中心（15DZ2252000）。

黃富鵬（1996.10-），男，壯族，廣西，碩士生，研究方向：分子通信;

閆浩（1982.07-），女，漢族，上海，博士，副教授，研究方向：數(shù)字全息或分子通信。