劉 婷， 張玉玲， 白 雪， 王吉利， 宋和威， 丁 楊

(吉林大學(xué) 新能源與環(huán)境學(xué)院， 長(zhǎng)春 130021)

1 實(shí) 驗(yàn)

1.1 主要儀器

紫外-可見光分光光度計(jì)(722型， 上海洪紀(jì)儀器設(shè)備有限公司); 掃描電子顯微鏡(SEM, JSM-6700F型， 日本電子株式會(huì)社).

1.2 主要材料及試劑

1.2.1 土著氮細(xì)菌與負(fù)載材料來源

氮細(xì)菌為前期從吉林省某農(nóng)業(yè)作業(yè)區(qū)污染地下水篩選得到[19]， 經(jīng)鑒定為Pseudomonas(假單胞菌屬)， 菌體呈桿狀， 其SEM照片如圖1所示. 火山巖從吉林省某火山巖礦區(qū)采集得到， 將礦物粉碎、 洗凈、 風(fēng)干后， 過0.5～2 mm篩即得實(shí)驗(yàn)所需火山渣， 如圖2所示. 主要礦物成分為22%(質(zhì)量分?jǐn)?shù)， 下同)石英， 31%堿性長(zhǎng)石和47%斜長(zhǎng)石， 主要元素是O，Si，Al等， 孔隙率74%～78%， 最大孔徑0.60 nm， 是以微孔和介孔為主的硅酸鹽礦物材料， 比表面積為0.52～0.95 m2/g.

圖1 氮細(xì)菌的SEM照片F(xiàn)ig.1 SEM image of nitrogen bacteria

圖2 火山渣的宏觀形態(tài)Fig.2 Macroscopic morphology of scoria

1.2.2 主要試劑

FeCl24H2O，Na2SO4，CaCl2，MgCl26H2O，Na2CO3，NaHCO3，Na2S，NH4Cl，K2HPO43H2O，NaCl,MgSO47H2O，F(xiàn)eSO4，CON2H4和葡萄糖等均為分析純?cè)噭?購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司.

1.3 方 法

1.3.1 負(fù)載材料制備

1) 氮細(xì)菌負(fù)載材料的制備和生長(zhǎng)規(guī)律.

將培養(yǎng)基[19]和火山渣于121 ℃滅菌20 min， 冷卻后按m(固)∶V(液)=1∶15混合， 按質(zhì)量分?jǐn)?shù)3%接種生長(zhǎng)穩(wěn)定期降解菌， 在10 ℃， 100 r/min振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2 d， 過濾并用生理鹽水洗凈， 即得到負(fù)載材料. 期間定時(shí)監(jiān)測(cè)OD600值， 對(duì)比微生物生長(zhǎng)隨時(shí)間變化情況.

2) 負(fù)載材料固定效果.

取1 g負(fù)載材料于離心管中， 加入50 mL生理鹽水， 超聲振蕩20 min. 取1滴上清液到血球計(jì)數(shù)板上， 采用直接計(jì)數(shù)法， 考察微生物固定情況.

表1 水化學(xué)因子質(zhì)量濃度設(shè)置 Table 1 Hydrochemical factors mass concentration setting table mg/L

1.3.3 檢測(cè)方法

2 結(jié)果與討論

2.1 氮細(xì)菌負(fù)載材料性能分析

1) 氮細(xì)菌負(fù)載材料生長(zhǎng)規(guī)律.

氮細(xì)菌負(fù)載材料的生長(zhǎng)規(guī)律如圖3所示. 由圖3可見， 氮細(xì)菌負(fù)載材料OD600值在2 d內(nèi)逐漸上升， 第2天達(dá)到峰值1.046， 此后OD600值變化較小. 表明前期培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)充足， 為氮細(xì)菌提供了良好生存條件， 細(xì)菌生長(zhǎng)狀況良好； 隨著時(shí)間的延長(zhǎng)， 培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)逐漸消耗， 也可能在細(xì)菌繁殖過程產(chǎn)生了有害物質(zhì)， 不利于降解菌生存， 因此細(xì)菌生長(zhǎng)變緩.

2) 負(fù)載材料固定效果.

在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)， 根據(jù)

菌株數(shù)量(個(gè)/g)=顯微鏡計(jì)數(shù)×5×104×稀釋倍數(shù)/火山渣質(zhì)量

計(jì)算氮細(xì)菌數(shù)目. 固定后火山渣上負(fù)載的氮細(xì)菌生物量約為2.12×107個(gè)/g.

2.2 氮細(xì)菌負(fù)載材料凈化污染地下水規(guī)律分析

圖3 氮細(xì)菌負(fù)載材料的生長(zhǎng)規(guī)律Fig.3 Growth law of nitrogen bacteria loading materials

圖水化學(xué)因子條件下的去除規(guī)律Fig.4 Removal law under condition of

圖水化學(xué)因子條件下的去除規(guī)律Fig.5 Removal law under condition of

圖6 Ca2+,Mg2+水化學(xué)因子條件下的去除規(guī)律Fig.6 Removal law under condition of Ca2+,Mg2+ hydrochemical factors

圖7 Fe2+,Mn2+水化學(xué)因子條件下的去除規(guī)律Fig.7 Removal law under condition of Fe2+,Mn2+ hydrochemical factors

圖8 S2-水化學(xué)因子條件下的去除規(guī)律Fig.8 Removal law under condition of S2- hydrochemical factor

圖9 S2-,SO2- 4水化學(xué)因子條件下的去除規(guī)律Fig.9 Removal law under condition of S2-,SO2- 4hydrochemical factors

2.3 氮細(xì)菌負(fù)載材料微觀結(jié)構(gòu)分析

圖10 火山渣及其反應(yīng)前后負(fù)載材料的SEM照片F(xiàn)ig.10 SEM images of scoria and loading materials before and after reaction

火山渣及其反應(yīng)前后負(fù)載材料的SEM照片如圖10所示. 由圖10可見: 火山渣表面凹凸不平， 表面粗糙， 有較多孔隙； 負(fù)載材料反應(yīng)前微觀形態(tài)上表面較光滑， 有較多細(xì)小突起， 有較清晰的棱角， 負(fù)載大量氮細(xì)菌； 負(fù)載材料反應(yīng)后表面更平滑， 吸附了大量離子， 細(xì)小突起被覆蓋.

3 結(jié) 論

1) 固定后火山渣上負(fù)載的氮細(xì)菌生物量約為2.12×107個(gè)/g;

4) 負(fù)載材料反應(yīng)后吸附了大量離子， 表面變平滑， 細(xì)小突起被覆蓋.