孫洋馨 許洋 王彥麗 公為亮 袁從芳 倫志彩 張曉云

【摘 要】 目的：研究三七總皂苷和復(fù)方苦參注射液聯(lián)合化療對(duì)急性髓系白血病（AML）的血清 VEGF和LDH 的影響及臨床療效觀察。方法：收集急性髓系白血病患者60例，隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組各30例。治療組給予常規(guī)化療方案聯(lián)合注射用血栓通（凍干）和復(fù)方苦參注射液治療，對(duì)照組給予常規(guī)化療方案，觀察治療前后兩組的臨床療效及血清 VEGF和LDH水平變化。結(jié)果：治療14d后，治療組有效率為83.3%，對(duì)照組有效率為60.0%，兩組比較有顯著性差異（P<0.05）。兩組患者治療后血清LDH和VEGF較治療前顯著降低，與治療前比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），治療組較對(duì)照組降低更為明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：三七總皂苷和復(fù)方苦參注射液聯(lián)合化療治療AML可提高化療有效率，可明顯降低患者血清VEGF和LDH水平。

【關(guān)鍵詞】

三七總皂苷;復(fù)方苦參注射液;AML;VEGF;LDH

【中圖分類(lèi)號(hào)】R285.6?? 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A??? 【文章編號(hào)】1007-8517（2022）17-0097-03

Clinical Observation and Influence on VEGF and LDH of AML Patients Cured with Panax Notoginseng

Saponins and Compound Kushen Injection Combined with Chemotherapy

SUN Yangxin1 XU Yang2 WANG Yanli2 GONG Weiliang2* YUAN Congfang3 LUN Zhicai3 ZHANG Xiaoyun3

1.Affiliated Hospital of Shandong Academy of Traditional Chinese Medicine，Jinan 250014，China;

2.Linyi Central Hospital，Linyi 276400，China;3.Juxian Hospital of Traditional Chinese Medicine，Juxian 276500，China

Abstract：

Objective To observe the clinical observation and influence on VEGF and LDH of AML patients cured with PNS and Compound Kushen Injection combined with chemotherapy.Methods Collected 60 cases diagnosed with AML， randomly divided into treatment group and control group， each group of 30 cases， The treatment group was given PNS and Compound Kushen Injection combined withchemotherapy， and the control group was given conventional chemotherapy， observed efficacy and the levels of VEGF and LDH before and after treatment.Results After 14 days of treatment，the effective rate of treatment group was 83.3%，and that ofthe control group was 60.0%， two groups had obvious difference （P<0.05）.After the treatment，the levels of VEGF and LDH in both groups were significantly decreased compared with before treatment， and the difference was statistically significant（P<0.05）.The level of VEGF and LDH of treatment group were lower than control group， there was significant difference between two groups（P<0.05）.Conclusions The combination of PNS and Compound Kushen Injection in the treatment of AML improved the effective rate of chemotherapy， and significantly reduced the levels of VEGF and LDH in serum.

Key words：

PNS;Compound Kushen Injection;AML;VEGF;LDH

急性髓系白血?。╝cute myelogenous leukemia，AML）包括所有非淋巴細(xì)胞來(lái)源的急性白血病，是造血系統(tǒng)的髓系原始細(xì)胞克隆性惡性增值性疾病，診斷標(biāo)準(zhǔn)參照WHO 2016造血和淋巴組織腫瘤分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)，外周血或骨髓原始細(xì)胞≥20%是診斷AML的必要條件，但當(dāng)患者被證實(shí)有克隆性重現(xiàn)性細(xì)胞遺傳學(xué)異常時(shí)，即使原始細(xì)胞<20%，也應(yīng)診斷為AML[1]。規(guī)范的誘導(dǎo)化療是治療AML的首選方案，筆者在臨床實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)化療配合抗腫瘤中成藥針劑輔助可提高療效，旨在從中西醫(yī)結(jié)合治療AML提供新的聯(lián)合方案。注射用血栓通主要成分為三七總皂苷，包括多種皂苷單體 Rb1、Rg1、Re、Rd 及三七皂苷R1等[2-3]，具有多靶點(diǎn)抗腫瘤作用。復(fù)方苦參注射液是從苦參、白土苓提取制成的中藥制劑，是惡性腫瘤臨床常用的輔助藥物?？鄥⒌闹饕钚猿煞挚鄥A具有消炎、抗菌、調(diào)節(jié)免疫功能的作用，可有效抑制白血病腫瘤細(xì)胞的增殖，并促進(jìn)其凋亡[4]。

人體內(nèi)血清乳酸脫氫酶（LDH）活性水平可充分反映富含LDH細(xì)胞的增殖、代謝等生物學(xué)特征[5]。白血病患者中LDH水平的升高是由正常組織的惡性轉(zhuǎn)化引起，且腫瘤細(xì)胞中基因的調(diào)節(jié)失衡，導(dǎo)致LDH合成量增加。此外，腫瘤細(xì)胞中的LDH水平會(huì)在細(xì)胞損傷和能量代謝異常條件下會(huì)升高。研究[6]顯示，化療前白血病組患者LDH水平較對(duì)照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。有研究[7]對(duì)急性髓系白血病患者血漿以及細(xì)胞中VEGF水平進(jìn)行分析，初始發(fā)病與復(fù)發(fā)患者血清以及細(xì)胞中VEGF水平均高于健康對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。基于以上理論，筆者認(rèn)為血清VEGF和LDH水平是反映AML腫瘤負(fù)荷的一項(xiàng)指標(biāo)，可作為判斷AML療效及預(yù)后的可靠參考指標(biāo)。

通過(guò)對(duì)我院AML患者（包括初診和緩解期的患者）與正常血清LDH和VEGF水平進(jìn)行檢測(cè)，觀察三七總皂苷和復(fù)方苦參注射液聯(lián)合化療治療AML的臨床療效，分析其治療對(duì)血清LDH和VEGF的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料及方法

1.1 一般資料 選取2013年7月至2020年6月我院血液科收治的AML患者（M3型患者除外）60例，所有患者均需經(jīng)血常規(guī)、血生化、出凝血檢查、骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查、免疫分型、染色體核型和分子學(xué)檢測(cè)等明確診斷。其中，男性35例，女性25例，最小11歲，最大68歲。將所有患者隨機(jī)分為對(duì)照組和治療組。對(duì)照組30例，男性17例，女性13例，年齡14～66歲，平均年齡（52.9±2.8）歲;治療組30例，其中男性18例，女性12例，年齡15～68歲，平均年齡（55.4±3.5）歲。對(duì)照組和治療組病程、年齡、性別和實(shí)驗(yàn)室檢查值等均無(wú)顯著性差異（P>0.05），且所有病例均完成治療。本研究通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：均確診為AML;患者知情同意，依從性良好。排除標(biāo)準(zhǔn)：骨髓增生異常綜合征轉(zhuǎn)化 AML;急性早幼粒細(xì)胞白血病;合并心肝腎等重要臟器功能?chē)?yán)重異常;既往有精神類(lèi)疾病史。

1.2 治療方法 根據(jù)AML患者情況，選用適合的誘導(dǎo)緩解方案，方案如下。

DA方案：DNR45 mg·m-2·d-1×d1-3+Ara-C100 mg·m-2·d-1×d1-7;

HA方案：HHT2 mg·m-2·d-1×d1-5+Ara-C150 mg·m-2·d-1×7d1-7;

IA方案：IDA12 mg·m-2d-1 ×d1-3+Ara-C120 mg·m-2·d-1×d4-10;

MA方案：MITmg·m-2d-1 × d1-3+Ara-C100 mg·m-2·d-1×d1-7。

對(duì)照組和治療組化療基礎(chǔ)方案一致，治療組自治療之日起在對(duì)照組治療的基礎(chǔ)上聯(lián)合靜脈滴注：注射用血栓通（凍干）300 mg配入5%葡萄糖注射液250 mL聯(lián)合復(fù)方苦參注射液20 mL配入5%葡萄糖注射液250 mL，1日1次，共用14d。

1.3 并發(fā)癥和對(duì)癥支持治療 治療兩組按指南要求常規(guī)應(yīng)用碳酸氫鈉等漱口液?；熎陂g患者均加強(qiáng)對(duì)癥支持治療，注意心臟功能的檢測(cè)，并給予止吐、保肝、護(hù)胃和保心等藥物，同時(shí)給予水化、堿化和利尿治療。骨髓抑制時(shí)，根據(jù)患者血常規(guī)檢查指標(biāo)給予對(duì)癥處理，重視血小板輸注，預(yù)防重要臟器尤其是腦出血發(fā)生，給予粒細(xì)胞集落刺激因子注射液升高粒細(xì)胞。體溫超過(guò)38℃時(shí)，對(duì)留取標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌和真菌等微生物培養(yǎng)，注意查找感染源，必要時(shí)行胸部CT等影像學(xué)檢查，及時(shí)給予抗菌藥物和抗真菌藥物[8]。

1.4 標(biāo)本采集與測(cè)定 對(duì)照組和治療組，分別于治療前及治療后第14天清晨采集空腹靜脈血5 mL，肝素抗凝處理后，以2000 r/min離心10 min，分離得到上層血清，保存至-70 ℃冰箱備用，用于VEGF水平檢測(cè)。同時(shí)空腹抽取外周靜脈血2 mL，用于LDH水平檢測(cè)。VEGF測(cè)定采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)，LDH檢測(cè)應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀。

1.5 療效指標(biāo) 療效指標(biāo)主要有臨床癥狀、外周血紅細(xì)胞分類(lèi)、血常規(guī)、骨髓象、血清VEGF 和LDH，分別于化療前及化療后第14天檢查并詳細(xì)記錄。

1.6 療效判定 按張之南和沈悌主編的《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》[8]對(duì)患者的血常規(guī)、外周血紅細(xì)胞分類(lèi)和骨髓象等結(jié)果以及療效評(píng)價(jià)進(jìn)行判定，分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、未緩解或進(jìn)展，CR及PR為有效，按WHO制定的標(biāo)準(zhǔn)確定。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS 22.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料應(yīng)用χ2 檢驗(yàn)，計(jì)量資料應(yīng)用t檢驗(yàn)，t檢驗(yàn)采用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差的方式表示。P<0.05表示兩組有顯著性差異，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床療效比較 治療組有效率為83.3%，對(duì)照組有效率為60.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2 =4.02，P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 兩組治療前后LDH和VEGF變化水平比較 兩組患者治療前血清LDH和VEGF水平無(wú)顯著性差異，治療后血清LDH和VEGF均低于對(duì)照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。

2.3 兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較 兩組不良反應(yīng)有骨髓抑制、惡心、嘔吐、發(fā)熱（>38 ℃）等，不良反應(yīng)發(fā)生率分別為83%和80%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3 討論

急性髓系白血病患者血清LDH水平的升高，反映了組織受損和快速細(xì)胞更新的情況，其與白血病腫瘤細(xì)胞的數(shù)量有關(guān)，能夠反映體內(nèi)腫瘤負(fù)荷情況。VEGF作為特異性血管通透性誘導(dǎo)因子和內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂原在血管形成中發(fā)揮著重要作用。它已被證明在急性白血病細(xì)胞中的高表達(dá)會(huì)促進(jìn)疾病的發(fā)生和發(fā)展，其含量水平可作為診斷及預(yù)后判斷的重要因素[9-10]。因此，通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)急性髓系白血病患者血清LDH和VEGF能夠反映體內(nèi)腫瘤負(fù)荷情況。三七總皂苷具有多靶點(diǎn)、高效、低毒的抗腫瘤特點(diǎn)，馮磊等[11]研究通過(guò)AML小鼠模型證實(shí)三七皂苷SR1可以抑制AML細(xì)胞VEGF表達(dá)水平，從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移。李響等[12]證實(shí)三七總皂甙能顯著抑制人急性髓系白血病細(xì)胞模型增殖并能有效促進(jìn)其凋亡。鄭文球和朱敏[13]證實(shí)三七皂苷R1除可抑制人白血病細(xì)胞株HL-60細(xì)胞生長(zhǎng)外，還誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抗腫瘤作用機(jī)制很可能與凋亡調(diào)節(jié)基因p53的上調(diào)和Bcl-2的下調(diào)有關(guān)[14]。研究[15]顯示苦參堿注射液與抑制miR-125b的表達(dá)有關(guān)，其輔助化療可有效提升AML的治療效果，并能減輕毒副反應(yīng)。復(fù)方苦參注射液[16]與化療藥物聯(lián)用安全有效，81.8%的AML患者得到臨床緩解并減輕了化療藥物不良反應(yīng)，其作用機(jī)制與復(fù)方苦參注射液可以促進(jìn)線粒體中Prdx3和細(xì)胞質(zhì)中Prdx2的表達(dá)，降低AML細(xì)胞內(nèi)ROS水平，抑制AML細(xì)胞增殖，促進(jìn)AML細(xì)胞凋亡有關(guān)。

本研究證實(shí)，治療組VEGF和LDH下降幅度較對(duì)照組更大，可能與注射用血栓通和復(fù)方苦參注射液的抗腫瘤、提高免疫力作用有關(guān)。但中成藥針劑成分復(fù)雜，對(duì)其中藥活性成分還需進(jìn)一步研究。因此，還需根據(jù)自身藥理作用的特點(diǎn)，進(jìn)行更加深入的臨床藥理學(xué)研究。

三七總皂苷和復(fù)方苦參注射液聯(lián)合化療治療AML可顯著降低機(jī)體腫瘤負(fù)荷，降低血清VEGF和LDH水平，減輕臨床癥狀，提高患者生活質(zhì)量。因此，三七總皂苷和復(fù)方苦參注射液聯(lián)合化療治療AML值得在臨床進(jìn)一步推廣應(yīng)用。本研究還證實(shí)血清 VEGF和LDH水平可作為判斷AML療效及預(yù)后的可靠參考指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)

[1]王建祥.中國(guó)成人急性髓系白血病診療指南（2021年版）[J].中華血液學(xué)雜志，2021，42（8）：617-618.

[2]蔣賽.彭曉珊.黃志華，等.黃芪多糖和三七總皂苷配伍對(duì)糖尿病大鼠腎組織Ⅳ型膠原及層黏連蛋白表達(dá)的影響[J]. 湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，35（ 12）：18-22.

[3]HAN S Y.LI H X，MA X.et al. Evaluation of the antimyocardial ischemia effect of individual and combined extracts of Panax notoginseng and Carthamus tinctorius in rats[J].J Ethnopharmacol，2013，145（3）：722-725.

[4]邵明坤，范青.苦參堿抗腫瘤作用研究的新進(jìn)展[J]實(shí)用藥物與臨床，2014，17（6）：756-759.

[5]鞏國(guó)亭.管洪在.郭小芳，等.急性淋巴細(xì)胞性白血病患者血清IL-12、IFN-7及 LDH測(cè)定的臨床意義[J].東醫(yī)藥，2007，47（4）：5-6.

[6]胡忠利.楊艷麗.潘少君.急性白血病中超敏C反應(yīng)蛋白及乳酸脫氫酶的表達(dá)特點(diǎn)及臨床意義[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2021，37（14）：2337-2338.

[7]林小棠，陸文英.急性髓系白血病細(xì)胞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)[J].深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志，2021，31（6）：44-45.

[8]張之南，沈悌.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M].4版.北京：科學(xué)出版社，2007：92-95.

[9]李云.段相會(huì).朱映霞，等.血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、乳酸脫氫酶和β2-微球蛋白在急性白血病診斷及預(yù)后中的價(jià)值[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2021，16（31）：26-27.

[10]SHIBUYA M. VEGF-VEGFR signals in health and disease [J]. Biomol Ther（Seoul）， 2014， 22（1）：1-9.

[11]馮磊.馬秋玲.石琳，等.三七皂甙R1抑制PI3K/AKT通路對(duì)AML小鼠存活和Caspase-3，VEGF表達(dá)水平的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志，2020，28（2）：394-399.

[12]李響.李鄭.程燚，等.三七總皂甙對(duì)人急性髓系白血病細(xì)胞株U937的抑制增殖及誘導(dǎo)凋亡作用[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2016，13（4）：657-660.

[13]鄭文球，朱敏. p53和Bcl-2 mRNA表達(dá)在三七皂苷R1誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡中的作用[J].腫瘤學(xué)雜志， 2007，13（3）：198-200.

[14]王國(guó)俊，周黎明，王莉，等. 三七皂甙R1 誘導(dǎo)HL-60 細(xì)胞凋亡的初步研究[J]. 四川生理科學(xué)雜志， 2004，26（1）：14-16.

[15]黃偉萍，王世俊.苦參堿注射液聯(lián)合化療對(duì)急性髓系白血病中 miR - 125 b 表達(dá)的影響[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志，2016，32（3）：221-223.

[16]王衛(wèi)東.治療急性髓系白血病的中藥活性成分研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2021，32（6）：1444-1449.

（收稿日期：2022-02-07 編輯：杜玲玉珊）