曹秀榮 董照鋒 任崗 熊瀟垚 鵬 徐艷

摘 ? 要 ? 哈茨木霉極易侵染香菇、平菇、雙孢菇、杏鮑菇、茶樹菇、毛木耳、靈芝等多種食用菌的培養(yǎng)基質(zhì)、菌種、菌絲和子實(shí)體，造成減產(chǎn)甚至絕收。采用菌絲生長速率法分別測(cè)定戊唑醇、枯草芽孢桿菌、四霉素、春雷霉素、多抗霉素、多菌靈對(duì)哈茨木霉菌絲的抑制作用。結(jié)果表明，戊唑醇抑制作用最強(qiáng)，其次是枯草芽孢桿菌、多菌靈和四霉素，春雷霉素和多抗霉素抑制作用相對(duì)較弱。故而戊唑醇和枯草芽孢桿菌不能與哈茨木霉混合使用，多菌靈和四霉素不建議與哈茨木霉混合使用，春雷霉素和多抗霉素可與哈茨木霉聯(lián)合使用以增強(qiáng)防效。戊唑醇、枯草芽孢桿菌、多菌靈和四霉素對(duì)哈茨木霉抑制作用明顯，可就其對(duì)木霉病害防治展開進(jìn)一步研究。

關(guān)鍵詞 ? 殺菌劑;哈茨木霉;抑菌率

木霉（Trichoderma spp.） 是廣泛分布于土壤、植物殘?bào)w、植物根圍和葉圍、海洋以及空氣等環(huán)境中的一類真菌，對(duì)多種細(xì)菌和病原真菌有拮抗作用，已被作為生防制劑廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。但木霉也因具有適應(yīng)性強(qiáng)、繁殖速度快、為害期長等特性，極易侵染香菇、平菇、雙孢菇、杏鮑菇、茶樹菇、毛木耳和靈芝等多種食用菌的培養(yǎng)基質(zhì)、菌種、菌絲和子實(shí)體，造成減產(chǎn)甚至絕收，為食用菌生產(chǎn)中的第一大競(jìng)爭性雜菌。其中，綠色木霉（Trichoderma viride）與哈茨木霉（Trichoderma harzianum）是相對(duì)優(yōu)勢(shì)菌種。

我們研究了戊唑醇、枯草芽孢桿菌、四霉素、春雷霉素、多抗霉素、多菌靈6種殺菌劑對(duì)哈茨木霉菌絲生長的影響，以期為哈茨木霉作為生防菌應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)時(shí)如何協(xié)調(diào)與生物防治、化學(xué)防治的矛盾，以及其作為食用菌生產(chǎn)中的競(jìng)爭性雜菌時(shí)如何選擇防治藥劑提供 參考。

1 ? 材料與方法

1.1 ? 試驗(yàn)材料

1）供試藥劑。430 g/L戊唑醇懸浮劑，鹽城利民農(nóng)化有限公司生產(chǎn);100億芽孢/g枯草芽孢桿菌粉劑，陜西綠頓作物科技有限公司生產(chǎn);0.15%四霉素水劑，遼寧微科生物工程股份有限公司生產(chǎn);2%春雷霉素水劑，績溪農(nóng)華生物科技有限公司生產(chǎn);3%多抗霉素水劑，績溪農(nóng)華生物科技有限公司生產(chǎn);40%多菌靈懸浮劑，江蘇劍牌農(nóng)化股份有限公司。以上材料均為市售。

2）供試培養(yǎng)基。馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）：無菌水1 000 mL，馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂15 g。

3）供試菌種。供試的哈茨木霉菌株（Trichoderma harzianum），來源于2021年3月3日從商洛盛澤農(nóng)林科技發(fā)展有限公司香菇基地采回的染病香菇菌棒，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室分離鑒定后，接種到PDA試管斜面培養(yǎng)基，于4 ℃條件下保存。

1.2 ? 試驗(yàn)方法

1）試驗(yàn)設(shè)計(jì)。采用菌絲生長速率法，測(cè)定6種供試藥劑對(duì)哈茨木霉菌絲的抑制作用。試驗(yàn)設(shè)7個(gè)處理，每個(gè)處理4次重復(fù)，各處理濃度依據(jù)使用說明推薦用量確定，無菌水作對(duì)照。如表1所示。

2）含藥PDA平板制備。將供試藥劑用滅菌水稀釋至設(shè)計(jì)濃度的10倍，編號(hào)后備用。取6 mL稀釋好的藥液注入100 mL經(jīng)過滅菌處理的燒杯中，再加入經(jīng)高壓蒸汽滅菌并冷卻至50 ℃左右的PDA培養(yǎng)基54 mL，充分混勻，制成60 mL設(shè)計(jì)濃度的含藥培養(yǎng)基（為防止培養(yǎng)基過快冷凝而影響試驗(yàn)進(jìn)程，每個(gè)處理多配制20 mL），然后取10 mL注入經(jīng)過滅菌處理的9 cm培養(yǎng)皿中，制成試驗(yàn)設(shè)計(jì)濃度的PDA平板。以無菌水替代藥液，同上述方法制作空白對(duì)照。

3）菌絲接種。將哈茨木霉菌接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，在溫度28 ℃、濕度90%條件下培養(yǎng)4天，活化菌種。在一培養(yǎng)皿內(nèi)菌落生長均勻、旺盛的同一半徑處用打孔器制作直徑6 mm的菌餅，用接種針挑取菌餅正面向下轉(zhuǎn)接種到各處理PDA平板培養(yǎng)基中心位置，置于溫度28 ℃、濕度90%條件下培養(yǎng)，分別于48小時(shí)、72小時(shí)、96小時(shí)用十字交叉法測(cè)量各皿菌落直徑，并按下試計(jì)算菌絲生長抑制率：

2 ? 結(jié)果與分析

從表2、圖1可知：依據(jù)使用說明推薦的田間劑量濃度下，6種殺菌劑對(duì)哈茨木霉菌絲96小時(shí)抑制率由大到小排序?yàn)椋何爝虼?枯草芽孢桿菌>四霉素>多菌靈>春雷霉素>多抗霉素。戊唑醇抑制效果最好，48小時(shí)、72小時(shí)、96小時(shí)抑制率均達(dá)到98%以上，呈逐漸增大趨勢(shì);枯草芽孢桿菌抑制率略低于戊唑醇，48小時(shí)、72小時(shí)、96小時(shí)抑制率均達(dá)到92%以上，72小時(shí)達(dá)到最高，72～96小時(shí)基本穩(wěn)定;春雷霉素和多抗霉素48小時(shí)、72小時(shí)、96小時(shí)抑制率均低于20%，96小時(shí)抑制率分別為6.3%和4.4%;多菌靈和四霉素抑制率處于中等水平，96小時(shí)抑制率分別為58.4%和50.1%。

3 ? 小結(jié)與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，在推薦的田間劑量下，春雷霉素和多抗霉素對(duì)哈茨木霉菌菌絲生長抑制作用較小，96小時(shí)抑制率分別為6.3%、4.4%;四霉素和多菌靈對(duì)哈茨木霉菌絲96小時(shí)抑制率分別為58.4%、50.1%，抑制作用明顯;戊唑醇和枯草芽孢桿菌對(duì)哈茨木霉菌絲有顯著的抑制作用，96小時(shí)抑制率分別達(dá)到99.4%、94.6%。

由以上結(jié)果得出，6種殺菌劑中，能與哈茨木霉配伍，增強(qiáng)防治效果的藥劑為春雷霉素和多抗霉素，不建議與哈茨木霉配伍的藥劑為四霉素和多菌靈，堅(jiān)決禁止與哈茨木霉配伍的藥劑為戊唑醇和枯草芽孢桿菌。由于戊唑醇和枯草芽孢桿菌對(duì)哈茨木霉抑制作用顯著，可在進(jìn)一步研究其對(duì)食用菌菌絲生長影響的基礎(chǔ)上，確定其可否適用于食用菌木霉病害防治。

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