史喜兵 焦雪輝 申瀟瀟

摘要：為研究青岡屬（Cyclobalanopsis）植物種子休眠特性，縮短播種育苗周期，以7種青岡屬植物種子為材料，通過超微結(jié)構(gòu)觀察、吸水性測定、白菜種子萌發(fā)受內(nèi)源抑制物影響試驗，對休眠類型進(jìn)行鑒定，并利用機械處理、激素處理等方法進(jìn)行休眠打破。結(jié)果表明，7種青岡屬植物種子的種殼呈現(xiàn)非常明顯的3層結(jié)構(gòu)，由外而內(nèi)依次為角質(zhì)層、外表皮細(xì)胞和內(nèi)表皮細(xì)胞。角質(zhì)層細(xì)胞石質(zhì)化，形成蠟質(zhì)層，非常堅硬;外表皮細(xì)胞呈柵欄狀排列，增加了種皮的厚度和硬度。去殼種子和劃口種子，其吸水率均高于種殼完整種子，說明種殼對種子的吸水性有一定的阻礙作用。經(jīng)種殼和子葉浸提液培養(yǎng)的白菜種子萌發(fā)率降低，對其根和葉的生長有明顯的抑制作用，說明種殼和子葉中含有阻礙種子萌發(fā)的物質(zhì)。去種殼及種殼劃口處理可以打破種子休眠，使萌發(fā)時間明顯提前，萌發(fā)率和發(fā)芽勢顯著提高。GA3處理對種子休眠打破影響不大，對部分樹種種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢有顯著提高作用。表明7種青岡屬植物種子的種殼影響胚的生長發(fā)育和種子的吸水性，種殼的物理阻礙作用是青岡種子休眠的主要因素。去種殼和種殼劃口處理是打破種子休眠的有效方法。

關(guān)鍵詞：青岡屬;休眠類型;休眠打破;機械處理;激素處理;種殼;子葉

中圖分類號： S722.1+4? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1002-1302（2022）10-0151-08

種子休眠的現(xiàn)象普遍存在于高等植物中，是植物本身適應(yīng)環(huán)境和延續(xù)生存的一種特性。胚未分化或發(fā)育未成熟、代謝抑制物等是導(dǎo)致種子休眠的內(nèi)源性原因，胚外周組織的物理、機械或化學(xué)性抑制等是外源性原因[1]。Nikolaeva按照影響種子萌發(fā)的因素形成了一套種子休眠分類系統(tǒng)[2]。Baskin 等對這一分類系統(tǒng)進(jìn)行了改進(jìn)并提議作為國際通用的種子休眠分類系統(tǒng)，該系統(tǒng)主要包括物理休眠（physical dormancy，簡稱PY）、形態(tài)休眠（morphological dormancy，簡稱MD）、生理休眠（physiological dormancy，簡稱PD）、復(fù)合休眠（PY+PD）和形態(tài)生理休眠（morphophysiology dormancy，簡稱MPD）5種[3]。無論是農(nóng)作物，還是林木、果樹、花卉，均存在種子休眠現(xiàn)象。

眾多學(xué)者對種子休眠因素和種子萌發(fā)特性進(jìn)行了大量研究。相關(guān)研究表明，硬度較高、密度較大的種皮（包括果皮），可能由于上披油脂或蠟質(zhì)，導(dǎo)致種子休眠[4]。郭聰聰?shù)日J(rèn)為，白皮松種子成熟時，種胚已發(fā)育完整，胚外部覆蓋組織、內(nèi)外種皮含有的抑制物是影響種子萌發(fā)的主要原因，胚乳對萌發(fā)無抑制作用[1]。耿文娟等發(fā)現(xiàn)，野生歐洲李種子各個部分的浸提液不影響白菜種子萌發(fā)，但對胚根生長有明顯的抑制作用，其各個部分的浸提液抑制白菜種子萌發(fā)的強弱表現(xiàn)為種胚>種皮>種殼[5]。有些植物種子還存在上胚軸休眠現(xiàn)象。仇云云等認(rèn)為，紫斑牡丹種皮致密、種皮和胚乳含有阻礙萌發(fā)物質(zhì)是胚軸休眠的原因，胚內(nèi)部原因造成了上胚軸休眠，需要低溫解除休眠[6]。也通過機械處理、低溫層積、熱水浸種、化學(xué)藥劑浸種等方法，對打破種子休眠進(jìn)行了研究。

青岡屬植物種子大多屬于頑拗性種子，不經(jīng)歷成熟脫水，脫落時含水量相對較高，不耐干燥，一般情況下干燥至15%～20%含水量時大多數(shù)或者全部死亡。種皮和種殼堅硬致密是導(dǎo)致頑拗性種子休眠的重要原因。李金華研究過赤皮青岡（Cyclobalanopsis gilva）種子萌發(fā)特性，采用不同激素、不同果皮和種皮處理方式對種子進(jìn)行處理，發(fā)現(xiàn)果皮和內(nèi)種皮對種子萌發(fā)存在物理性抑制，去除種殼后種子可打破休眠，提高萌發(fā)率，激素處理也可以提高萌發(fā)率[7]。彭穎姝等研究過不同沙藏處理對青岡櫟種子萌發(fā)的影響，發(fā)現(xiàn)去種皮后種子發(fā)芽率明顯高于完整種子。種皮透氣性很差、透水性不受影響;低溫貯藏發(fā)芽率高于常溫貯藏[8]。李慶梅等研究了櫟屬7種植物種子的發(fā)芽抑制物，認(rèn)為不僅種皮影響萌發(fā)，其種子內(nèi)源抑制物也可能是種子休眠的原因[9]。目前對青岡屬種子休眠的研究多集中在休眠打破方法上，少有從形態(tài)結(jié)構(gòu)及內(nèi)源物質(zhì)等方面對休眠因素進(jìn)行系統(tǒng)研究。因此，本研究通過對7 種青岡屬植物種子超微結(jié)構(gòu)、種殼吸水性及內(nèi)源抑制物的研究，希望尋找到阻礙種子萌發(fā)的原因，并在此基礎(chǔ)上探索休眠打破的方法，為生產(chǎn)中提供種子萌發(fā)率、降低繁育成本提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

2020年秋季采集青岡屬植物種子，包括青岡（Cyclobalanopsis glauca）、小葉青岡（C. myrsinaefolia）、細(xì)葉青岡（C. gracilis）、赤皮青岡（C. gilva）、曼青岡（C. oxyodon）、多脈青岡（C. multinervis）、云山青岡（C. sessilifolia），其中青岡櫟、小葉青岡種子采集地點為中國林業(yè)科學(xué)研究院亞熱帶林業(yè)實驗中心年珠林場，赤皮青岡采集地點為浙江省慶元縣實驗林場，曼青岡和多脈青岡采集地點為湖北神農(nóng)架，云山青岡采集地點為浙江省九龍山自然保護(hù)區(qū)。7個樹種分別標(biāo)記為FC1、FC2、FC3、FC4、FC5、FC6、FC7，從中挑選大小均勻、飽滿、無病蟲害的種子，放置于鄭州市農(nóng)林科學(xué)研究所實驗室，洗凈晾干備用。

1.2 休眠類型鑒定方法

1.2.1 超微結(jié)構(gòu)觀察

取7個樹種新鮮種子的種殼，組織塊面積不超過3 mm2，用磷酸鹽緩沖鹽溶液（PBS）輕輕漂洗干凈，標(biāo)記好掃描面，放入電鏡固定液中2 h，最后保存于4°冰箱;固定好的樣品經(jīng) 0.1 mol/L PBS（pH值7.4）漂洗3次，每次15 min;0.1 mol/L PBS（pH值7.4）配制1%鋨酸室溫避光固定1～2 h。0.1 mol/L PBS（pH值7.4）漂洗3次，每次 15 min;用梯度濃度為30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%、100%乙醇逐級處理，每次 15 min，然后用醋酸異戊酯處理15 min，再使用臨界干燥儀干燥后進(jìn)行離子濺射儀噴鍍，置于Hitachi SU8100掃描電子顯微鏡下觀察。

1.2.2 種殼吸水性

分別取完整種子、劃口種子（從種子胚端開始，使用解剖刀向下對稱劃開種殼，至種子1/2～2/3處，露出種胚但不損傷種胚）及去殼種子各5粒，稱量后放入燒杯，加入40 mL蒸餾水，置于25 ℃恒溫環(huán)境，每隔一定時間取出種子，先用吸水紙吸掉表面水分，再用電子天平稱質(zhì)量，重復(fù)3次，種子質(zhì)量不再增加為止。前8 h，每浸泡2 h取1次，每次取5粒，之后每隔12～48 h可取1次，每次取5粒。使用如下公式計算種子吸水速率：

種子吸水速率=（吸水后種子質(zhì)量-吸水前種子質(zhì)量）/吸水前種子質(zhì)量×100%。

1.2.3 內(nèi)源抑制物對白菜種子萌發(fā)影響

1.2.3.1 甲醇浸提液的提取

取7個樹種新鮮的種子，剝開并分離種殼和子葉，分別稱取 4 g，放入預(yù)冷的研缽內(nèi)研碎，加入20 mL 80%甲醇溶液，搖晃均勻，置于4 ℃恒溫冰箱浸提24 h，為充分浸提，每4 h晃動1次，24 h后過濾，按此方法連續(xù)浸提3次，將3次濾液倒入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，減壓蒸干后蒸餾水沖洗，最后定容到100 mL作為培養(yǎng)液。

1.2.3.2 白菜種子萌發(fā)測定

挑選出部分飽滿的白菜種子，先用0.5%高錳酸鉀溶液消毒，蒸餾水沖洗干凈后自然風(fēng)干備用。培養(yǎng)皿中放入濕潤的脫脂棉，脫脂棉上蓋1層濕潤的濾紙，加入25 mL培養(yǎng)液，對白菜種子進(jìn)行萌發(fā)試驗，以蒸餾水為對照。每個培養(yǎng)皿中放入白菜種子30粒，每個處理3個重復(fù)，25 ℃恒溫光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)。24 h后統(tǒng)計每個培養(yǎng)皿中發(fā)芽的白菜種子數(shù)量，以發(fā)芽長度超過種子直徑為標(biāo)準(zhǔn)，計算平均發(fā)芽率，48、72 h后測量根長，記錄生長情況。

1.3 休眠解除

挑選健康飽滿的青岡種子，去除雜質(zhì)和有蟲種子，清洗干凈晾干，過種子篩進(jìn)行分級。用3%高錳酸鉀溶液處理20 min，清水沖洗3次，將部分種子進(jìn)行劃口和去殼處理。按照不同方法處理后，自種子發(fā)芽開始，每天記錄發(fā)芽數(shù)，種子連續(xù)15 d不再發(fā)芽時結(jié)束試驗（對照種子培養(yǎng)3個月）。計算發(fā)芽率和發(fā)芽勢。

1.3.1 種殼處理方式的影響

取FC1～FC7完整種子（T0）、劃口種子（T2）、去殼種子（T6）各15粒（表1），每組重復(fù)3次，常溫水浸泡48 h，放入光照培養(yǎng)箱，設(shè)置溫度25 ℃、8 h黑暗、16 h光照。

1.3.2 激素的影響

取FC1～FC7劃口種子各15粒，分別放入常溫水浸泡48 h（T2）及GA3 400 mg/L浸泡48 h（T5）（表1）。每組重復(fù)3次，置于25 ℃光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，光照16 h、黑暗8 h。

1.3.3 光照時間的影響

取FC5、FC6劃口種子15粒，常溫水浸泡48 h，置于25 ℃光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)。光照時間設(shè)2個梯度：光照16 h、黑暗8 h（T1），全黑暗（T4）（表1），重復(fù)3次。

1.3.4 培養(yǎng)溫度的影響

取FC5、FC6劃口種子15粒，常溫水浸泡48 h，置于光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，光照 16 h、黑暗8 h。光照培養(yǎng)箱設(shè)置2個溫度梯度：25 ℃（T2），20 ℃（T3）（表1）。重復(fù)3次。

2 結(jié)果與分析

2.1 休眠類型鑒定

2.1.1 種殼掃描電鏡觀察

從圖1可以看出，不同樹種種殼厚度及結(jié)構(gòu)不同，其中FC4種殼最厚，其次為FC6、FC7。從橫斷面圖來看，種殼結(jié)構(gòu)分為3層，最外面為角質(zhì)層，然后是外表皮細(xì)胞和內(nèi)表皮細(xì)胞。角質(zhì)層細(xì)胞石質(zhì)化，形成蠟質(zhì)層，非常致密，對吸水有嚴(yán)重阻礙作用。外表皮細(xì)胞呈柵欄狀排列，主要由單層長柱狀的大石細(xì)胞組成，其細(xì)胞壁厚度增加，呈木質(zhì)化。外表皮細(xì)胞增加了種皮的厚度和硬度，對水分進(jìn)入種子有很大的阻礙作用。內(nèi)表皮細(xì)胞厚度因樹種而異，其中FC4的內(nèi)表皮細(xì)胞層很厚，占據(jù)了整個種殼的大部分厚度，但排列較為疏松，其他樹種內(nèi)表皮細(xì)胞相對較薄。內(nèi)外表層細(xì)胞之間有1層被擠壓的薄壁組織，較薄。內(nèi)表面圖顯示有很多細(xì)長管狀或帶狀的表皮毛，內(nèi)表皮細(xì)胞排列不規(guī)則，內(nèi)表面凹凸不平，外表面圖顯示大部分樹種種殼外表面比較規(guī)則、平整，其中FC5、FC7表面非常光滑，其他樹種表面有空隙，這對種子的吸水性也有一定影響。

2.1.2 種殼吸水性

青岡屬種子本身屬于含水量較高的種子。從圖2可以看出，對于所有樹種，去殼種子和劃口種子的最終吸水率均明顯高于完整種子。完整種子吸水率最終達(dá)到5%左右，而去殼種子和劃口種子大部分在10%左右，有的甚至超過20%。前8 h為快速吸水期，吸水率迅速上升，8 h后吸水率逐漸下降，最后趨于平緩。去殼種子可吸水時間最長，吸水率達(dá)到穩(wěn)定的時間最晚。FC1、FC3、FC5、FC7的去殼種子和劃口種子最終吸水率差異不明顯，但均明顯高于完整種子。FC2、FC4、FC6的去殼種子、劃口種子和完整種子之間均差異明顯，且去殼種子最終吸水率明顯高于其他2個處理?？梢姺N殼對種子吸水存在一定的阻礙作用。

2.1.3 內(nèi)源抑制物對白菜種子萌發(fā)影響 從表2可以看出，蒸餾水培養(yǎng)24 h后，白菜種子萌發(fā)率可達(dá)到100%，48 h后根長為20～25 mm，并長出葉片。經(jīng)7個樹種的種殼和子葉浸提液培養(yǎng)的白菜種子，除FC2、FC3、FC4種殼以及FC4、FC5子葉處理后的萌發(fā)率較高外，其他24 h萌發(fā)率均在80%及以下。其中FC6的種殼和子葉、FC7的種殼浸提液培養(yǎng)24 h后，萌發(fā)率為0，48 h后萌發(fā)率仍低于80%。培養(yǎng)72 h后，對照根長增加至40～50 mm，葉片明顯增大，其他處理根長均無顯著增加，且有幾組處理出現(xiàn)根尖發(fā)黑、干枯的現(xiàn)象。經(jīng)種殼和子葉浸提液培養(yǎng)后的白菜籽，僅有部分萌發(fā)出葉片，即使有葉片萌發(fā)，大部分根的長度也明顯短于對照，根的生長狀態(tài)也明顯比對照差。由此可見，浸提液對白菜種子根的伸長有抑制作用，7個樹種種殼及子葉內(nèi)可能含有抑制種子萌發(fā)物質(zhì)。不同樹種種殼和子葉的抑制作用程度不同。FC1種殼和子葉浸提液培養(yǎng)的白菜種子萌發(fā)率一致，F(xiàn)C2和FC3子葉浸提液培養(yǎng)的白菜種子萌發(fā)率小于種殼，F(xiàn)C4、FC5、FC6和FC7種殼浸提液培養(yǎng)的白菜種子萌發(fā)率小于子葉。除FC2和FC6外，其他樹種子葉浸提液培養(yǎng)的白菜種子72 h后根長均小于種殼，葉片生長情況也比種殼浸提液培養(yǎng)的白菜種子差。

2.2 休眠打破

從圖3、表3可以看出，大部分樹種在T5、T6處理條件下萌發(fā)最早，一般比對照早15～20 d。除FC7外，其他樹種在T6處理下最終發(fā)芽率均達(dá)80%以上，且FC1、FC2和FC4最終發(fā)芽率均為100%。FC1～FC5在T6處理下，發(fā)芽勢均在30%以上，其中 FC2～FC4發(fā)芽勢均高達(dá)53.33%。FC2、FC3、FC7等3個樹種在T6處理下發(fā)芽最早，培養(yǎng)4 d后即開始發(fā)芽，其中FC3在T5處理下，僅8 d即全部萌發(fā)。FC5、FC6在大部分處理條件下種子萌發(fā)持續(xù)時間較長。

2.2.1 光照對解除青岡種子休眠的影響

從FC5的T2、T3處理試驗結(jié)果可以看出，二者發(fā)芽勢一致，均為20%。全黑暗條件下發(fā)芽較晚，但持續(xù)時間短，最終發(fā)芽率較低;而光照16 h條件下發(fā)芽較早，但持續(xù)時間長，最終發(fā)芽率較高。從FC6的T2、T3處理試驗結(jié)果可以看出，二者發(fā)芽勢都比較低，但T3處理下發(fā)芽時間明顯早于T2處理，但最終發(fā)芽率明顯低于T2處理。從這2個樹種來看，光照時間16 h相較于全黑暗條件可以促進(jìn)種子萌發(fā)。

2.2.2 培養(yǎng)溫度對解除青岡種子休眠的影響

從FC5的T1、T2處理試驗結(jié)果可以看出，二者最終發(fā)芽率一致，但與20 ℃相比，25 ℃條件下種子萌發(fā)更早，發(fā)芽勢略低。從FC6的T1、T2處理試驗結(jié)果可以看出，25 ℃條件下種子發(fā)芽明顯早于20 ℃，二者的發(fā)芽勢一致，但發(fā)芽率差異明顯。從這2個樹種來看，25 ℃ 相較于20 ℃，種子發(fā)芽更早，發(fā)芽率更高。因此25 ℃條件下更有利于休眠解除。

2.2.3 種子處理方式對解除青岡種子休眠的影響

對比T0、T1和T5處理可以發(fā)現(xiàn)，在7個樹種中有5個樹種在T5處理下最終發(fā)芽率均最高，有6個樹種在T5處理下發(fā)芽均最早。而且FC2在T5處理下，種子在發(fā)芽后5 d時間內(nèi)發(fā)芽率達(dá)到100%，F(xiàn)C3在T5處理下，種子在開始發(fā)芽后7 d時間內(nèi)發(fā)芽率達(dá)到100%，發(fā)芽速度快。T0處理下發(fā)芽最晚，發(fā)芽周期一般也最長，發(fā)芽率除FC4外均是最低的。因此，相較于劃口種子和完整種子，去種殼處理對休眠打破、提高發(fā)芽勢和發(fā)芽率有極大的促進(jìn)作用。

2.2.4 激素對解除青岡種子休眠的影響

2.2.4.1 劃口種子 對于劃口種子，對比所有樹種T1和T4處理，除FC7外，使用400 mg/L GA3浸泡與使用常溫水浸泡2種處理條件下種子開始萌發(fā)時間差異不大。除FC7外，其他樹種在2種處理下的發(fā)芽勢差異也不顯著 ，但除了FC2和FC3外，其他樹種在2種處理下的最終發(fā)芽率差異顯著。因此對于劃口種子，400 mg/L GA3對最終發(fā)芽率影響較大，但對種子開始萌發(fā)時間和種子發(fā)芽勢影響不明顯。

2.2.4.2 去殼種子 對比所有樹種T5和T6處理可知，使用400 mg/L GA3浸泡與使用常溫水浸泡對種子休眠解除和發(fā)芽率差異不明顯，2種條件下種子開始萌發(fā)時間除了FC6外，其他樹種差異均不大，發(fā)芽率除了FC5外，其他樹種差異均不大。FC1、FC4、FC5等3個樹種在T6處理下的發(fā)芽勢均明顯高于T5處理，且發(fā)芽周期也明顯短于T5處理。

3 討論與結(jié)論

大多種子休眠都是由多種原因造成的[1]，可能是種皮結(jié)構(gòu)致密或柵欄組織發(fā)達(dá)，也可能是種子表面角質(zhì)層較厚或上覆蠟質(zhì)[10-12]。周健等通過對種皮、胚乳細(xì)胞結(jié)構(gòu)的觀察和分析，發(fā)現(xiàn)阻礙種子吸水的主要原因是發(fā)達(dá)的柵欄層，揭示了大花四照花種子的休眠解除機制[13]。本研究中7種青岡屬種子表面均有角質(zhì)層，角質(zhì)層細(xì)胞排列緊密，有保護(hù)種胚的作用[14]。然而表面蠟質(zhì)和致密的角質(zhì)層等種殼構(gòu)造導(dǎo)致青岡屬種子的吸水性很差，本研究也證明了去掉種殼后可以增加種子吸水速率，延長種子吸水飽和狀態(tài)的時間。角質(zhì)層里面是細(xì)胞緊密排列、細(xì)胞壁較厚的柵欄組織層，增加了種皮硬度。因此，角質(zhì)層和柵欄組織層極有可能對胚的萌發(fā)有機械阻礙作用，影響胚根的萌發(fā)和伸長，同時也影響吸水性 這是種胚無法突破種皮進(jìn)行正常萌發(fā)的原因之一。內(nèi)表皮細(xì)胞排列相對疏松，可使水分迅速穿過，但有的樹種內(nèi)表皮細(xì)胞厚度也很大，在一定程度上也會阻礙種子萌發(fā)。青岡屬種子結(jié)構(gòu)中，種臍位置種殼最薄，且沒有堅硬的角質(zhì)層，應(yīng)該是整個種子透水透氣性最好的位置。但由于此次研究的7種植物胚芽均在種臍端相反位置，因而并未專門對種臍的吸水性進(jìn)行研究。

植物體內(nèi)產(chǎn)生抑制發(fā)芽物質(zhì)或存在與抑制發(fā)芽相關(guān)的物質(zhì)，此類物質(zhì)對同種或異種種子萌發(fā)具有延遲或抑制作用[15]。朱銘瑋等認(rèn)為，酚類物質(zhì)是鳳丹種皮內(nèi)的主要抑制物成分，有機酸類物質(zhì)是鳳丹種胚內(nèi)的主要抑制物質(zhì)成分[16]。櫟類植物為防止昆蟲捕食種子，產(chǎn)生了多酚（polyphenols）[17] 和單寧酸[18]等抑制種子萌發(fā)的次生代謝物。也有研究稱櫟屬植物種子各部分甲醇浸提液都對白菜種子萌發(fā)、根長、苗高具有較強的抑制作用，其種皮、子葉、胚的浸提液對白菜種子的萌發(fā)抑制作用依次增強，而且對白菜種子萌發(fā)率的影響低于對根長、苗高的影響[19]。這與本研究的結(jié)果基本一致。本研究對子葉和種殼浸提液進(jìn)行了對比，大部分樹種子葉對白菜種子的抑制作用要比種殼強，且對根的伸長和葉片萌發(fā)的抑制作用要強于對發(fā)芽率的作用。說明青岡屬種子中確實含有抑制白菜種子萌發(fā)的物質(zhì)。但是試驗中浸提液濃度很高，若進(jìn)行稀釋，是否還對白菜種子萌發(fā)有抑制作用，這些并未進(jìn)行詳細(xì)研究。而且自然界中的種子各部分中抑制物質(zhì)的含量以及該含量是否可以抑制青岡種子萌發(fā)，也都需要進(jìn)一步試驗論證。

景美清等認(rèn)為，內(nèi)果皮、種皮的機械阻力和透氣性是影響赤皮青岡種子休眠的主要原因，去除了內(nèi)果皮、種皮后即可打破休眠。高濃度的GA3處理也有一定的作用[20]。本研究對比了光照時間、培養(yǎng)溫度、種殼處理方式及激素等因素對休眠打破的影響，發(fā)現(xiàn)種殼機械處理對種子萌發(fā)影響最大，其他因素也有一定影響。本試驗未對胚的形態(tài)進(jìn)行研究，不能從形態(tài)結(jié)構(gòu)上確定胚是否存在生理后熟。但種子在劃口和去殼后迅速萌發(fā)，去殼后效果尤為明顯，從側(cè)面驗證了胚不存在生理后熟，種殼對胚的機械阻礙是導(dǎo)致休眠的主要原因。

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