李建中

(海鹽縣西塘橋街道農(nóng)業(yè)農(nóng)村辦公室，浙江 海鹽 314305)

豬瘟(Classical swine fever, CSF)，是由豬瘟病毒(Classical swine fever virus, CSFV)引起豬的一種以高熱稽留、出血、梗死、壞死和高死亡率為主要特征的高度接觸性傳染病[1]，是國家現(xiàn)有強制免疫病種。因地制宜，制定生豬免疫程序，并定期進行免疫抗體監(jiān)測，及時了解本地的CSF免疫情況，提高豬瘟抗體免疫合格率，是職責所在，為此，開展了豬瘟免疫效果試驗。

1 試驗儀器與材料

1.1試驗動物 海鹽縣飼養(yǎng)管理水平較好的10個規(guī)?；B(yǎng)殖場(戶)，存欄數(shù)均大于500頭，每個場點選擇30日齡左右斷奶仔豬30頭，共計300頭。

1.2試驗疫苗 豬瘟疫苗均為政府采購組織苗，分別由齊魯動保、中牧實業(yè)、杭州薦量三家公司生產(chǎn)。疫苗生產(chǎn)批號依次為： 11090116-1、 1202007和1110107。

1.3試驗試劑 豬瘟正向間接血凝試驗抗原、豬瘟陰性對照血清、豬瘟陽性對照血清及豬瘟正向間接血凝試驗稀釋液均為中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，抗原兩個批次批號為：20120516和20120728。

2 試驗方法及過程

2.1實驗動物分組 將10個場點的300頭豬按照場點分為10個小組，每個場點隨機選取一頭生豬血樣送檢，豬瘟抗原均呈陰性。10個場點分別編號為A、B、C、D、E、F、G、H、I和J共10個小組。每個小組又分為Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組試驗組和對照組，試驗組每組8頭豬，對照組每組6頭豬。

2.2實驗過程

2.2.1首免接種 試驗組在30日齡左右(28日齡至35日齡)分別頸部肌肉接種齊魯動保、中牧實業(yè)、杭州薦量三個不同廠家生產(chǎn)的豬瘟組織苗1頭份/頭，對照組均接種滅菌注射用水1 mL/頭。接種過程由助手保定，盡量減少仔豬因追趕和固定產(chǎn)生應激。接種后1～2 d觀察試驗組和對照組仔豬精神狀況，注射部位有無腫脹，采食量和飲水量有無增減，是否有體溫變化，有無肌肉震顫、可視黏膜充血、嘔吐、鼻孔出血等不良反應。

2.2.2血清抗體檢測 首免28 d后前腔靜脈采集所有試驗組和對照組豬血樣，分離血清，根據(jù)農(nóng)業(yè)部《豬瘟診斷技術(shù)規(guī)程》(NY/SY156-2000)進行豬瘟抗體檢測，結(jié)果判定參考農(nóng)業(yè)部《2012年國家動物疫病監(jiān)測計劃》(農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2012〕2號)。

根據(jù)農(nóng)業(yè)部相關(guān)文件要求，接種豬瘟疫苗的豬群免疫抗體效價達到1∶32(25)凝集判為合格。

2.2.3二免接種 首免28 d后，在采集血樣的同時進行二次免疫接種，接種方法同首免，試驗組豬瘟疫苗接種劑量為2頭份/頭，對照組滅菌生理鹽水接種劑量仍然為1 mL/頭，接種后1～2 d觀察精神狀況、體溫變化等。

2.2.4二免血清抗體檢測 待二免結(jié)束后28 d開始采集血樣，分離血清，并進行血清抗體檢測，方法及判定依據(jù)等同2.2.2。

3 試驗結(jié)果

3.1首免應激 首次免疫后1～2天試驗組和對照組大多數(shù)整體精神狀況良好，無拉稀癥狀，采食量和飲水量無明顯變化，呼吸正常，無可視粘膜充血、嘔吐等現(xiàn)象，體重變化不明顯，沒有應激死亡現(xiàn)象。試驗組兩個試驗場點的6頭出現(xiàn)注射部位腫脹，約占試驗組總數(shù)的2.50%，且為不同廠家的疫苗；出現(xiàn)體溫一過性升高的約占體溫測量統(tǒng)計數(shù)量20頭的10%；試驗組和對照組均有兩個場點出現(xiàn)扎堆現(xiàn)象；對照組有2頭注射部位有輕微腫脹，約占對照組3.33%。

3.2首免抗體檢測結(jié)果 詳見表1和圖1。由表1可見，首次免疫后試驗組10個場點的240份三個廠家疫苗的抗體整體合格率分別為41.25%、38.75%和40.00%，僅有1個場點的1個廠家的疫苗抗體合格率達到了70%(國家規(guī)定標準為70%以上為合格)以上，其余均低于70%，試驗組10個場點抗體總合格率為40%。據(jù)圖1可見，抗體效價大多分布于1∶8～1∶128之間，占試驗組總數(shù)73%以上。三個廠家均有抗體效價達到1∶512的血清樣品，抗體效價均無達到1∶1024及以上樣品。對照組沒有1份血樣抗體合格，其中抗體效價最高的為1∶16且只有6份，約占對照組的10%。

表1 首次免疫后試驗組和對照組豬瘟抗體檢測合格率

3.3二免應激 二免后1～2 d試驗組和對照組均無明顯變化，但是70日齡后試驗組和對照組均出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，其中試驗組1頭，對照組2頭(為1個場點)。死亡多以拉稀和呼吸道疾病為主，剖檢發(fā)現(xiàn)，試驗組死亡豬呈現(xiàn)肺臟病變，肺臟出血腫大，且伴有肺間質(zhì)增寬，一側(cè)肺間質(zhì)充滿膠凍樣物質(zhì)，可以排除豬瘟感染；對照組2頭均為拉稀導致脫水而死亡，經(jīng)檢測PEDV和TGEV均呈現(xiàn)陰性，具體原因不祥。其余均無異?，F(xiàn)象。

3.4二免抗體檢測結(jié)果 詳見表2和圖2。由表2可見，二次免疫后豬瘟抗體整體合格率得到了極大的提升，由40%提高到96.23%，增加了56個百分點以上，且三個廠家的豬瘟疫苗抗體整體合格率均達到95%以上(遠高于國家要求的70%標準)。由圖2可以看出，通過二次免疫后豬瘟抗體效價明顯升高，效價介于1∶32至1∶256的占試驗組總數(shù)(239頭)的近90%，更有甚者抗體效價達到1∶1024及以上。其中效價低于1∶16的共計9份，占試驗各組總數(shù)的3.77%。對照組58份樣品抗體合格率為零，且效價均小于1∶8。

表2 二免后試驗組和對照組豬瘟抗體檢測合格率

4 結(jié)果分析

根據(jù)上述試驗結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)豬只首免后只有極少數(shù)抗體合格，絕大多數(shù)抗體效價偏低，很難有保護力，存在發(fā)生豬瘟疫病的風險，不利于豬瘟疫病防控。而經(jīng)過二次免疫后抗體整體保護力得到極大的提升，達到有效防控豬瘟的目的。對照組抗體在60日齡時抗體效價均低于1∶32，說明此時豬只完全處于免疫空白期，需要盡快免疫消除潛在隱患。因此，為有效防控豬瘟疫病的發(fā)生，商品育肥豬必須通過至少兩次豬瘟疫苗免疫接種方能達到有效保護水平。此試驗結(jié)果與國家動物疫病預防控制中心、疫苗生產(chǎn)廠家等有關(guān)機構(gòu)(單位)數(shù)據(jù)基本相似，為海鹽縣豬瘟疫病防控提供了參考。