楊葉華，黃興成*，朱華清，李 渝，張 松，張雅蓉，劉彥伶，蔣太明

（1 貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所，貴州貴陽(yáng) 550006；2 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部貴州耕地保育與農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站，貴州貴陽(yáng) 550006；3 貴定縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州貴定 551300；4 貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，貴州貴陽(yáng) 550006）

微生物在土壤生態(tài)系統(tǒng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化和能量傳遞等過(guò)程中具有至關(guān)重要的作用，其群落結(jié)構(gòu)能直接或間接地反映土壤肥力和生產(chǎn)力[1–3]。施肥是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中最常見(jiàn)的管理措施，通過(guò)改變農(nóng)田土壤理化性狀、作物生長(zhǎng)等來(lái)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖，是影響土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的重要因素[4–6]。了解不同施肥下土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的演變特征，對(duì)農(nóng)田土壤培肥及肥料高效利用具有重要意義。

受農(nóng)民施肥習(xí)慣影響，在農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)中常見(jiàn)的施肥模式有施用化肥、有機(jī)肥和有機(jī)無(wú)機(jī)肥配施，不同施肥模式對(duì)土壤微生物的影響結(jié)果不一[7]?；试谔嵘r(nóng)作物產(chǎn)量方面具有重要作用，且因其施用方便、見(jiàn)效快等特點(diǎn)而備受農(nóng)民青睞，單施化肥現(xiàn)象較為普遍。研究表明，長(zhǎng)期氮磷鉀平衡施用有利于改善土壤微生物特性，增加土壤微生物群落豐富度和優(yōu)勢(shì)度，還能促進(jìn)微生物功能多樣性[8]?；势┗蜻^(guò)量施用則不利于微生物生長(zhǎng)，長(zhǎng)期施用降低土壤微生物活性和多樣性[9]。有機(jī)肥作為優(yōu)質(zhì)的肥料，施用后能夠增加土壤有效養(yǎng)分和改善土壤理化性質(zhì)，為微生物創(chuàng)造良好的生態(tài)環(huán)境，有利于提高微生物總量、各類菌群的生物量、微生物活性和優(yōu)化微生物群落結(jié)構(gòu)[10–11]。針對(duì)中國(guó)農(nóng)田區(qū)域尺度施肥對(duì)微生物的影響研究表明，施用有機(jī)物料處理的土壤微生物磷脂脂肪酸含量、碳和氮含量是施用化肥的2倍以上[12]。更多的研究表明，有機(jī)無(wú)機(jī)肥配施更有利于土壤微生物生長(zhǎng)。王偉華等[13]研究發(fā)現(xiàn)，有機(jī)無(wú)機(jī)肥配施能夠提高細(xì)菌、真菌、革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌磷脂脂肪酸含量和碳利用率，且有機(jī)肥的效果比秸稈效果更佳。唐海明等[14]研究表明，有機(jī)無(wú)機(jī)配施有利于維持稻田根際微生物群落多樣性，且高量有機(jī)肥效果更顯著。但有機(jī)無(wú)機(jī)肥配施對(duì)微生物的影響機(jī)理復(fù)雜，目前其影響機(jī)制還不明確，可能與土壤生物學(xué)性狀改善有關(guān)。此外，在有機(jī)無(wú)機(jī)肥配施的施肥模式下，土壤的生物學(xué)性狀還受土壤類型[15]、氣候條件等[16]因素影響。任鳳玲等[17]研究表明，亞熱帶季風(fēng)區(qū)施用有機(jī)肥比溫帶大陸氣候區(qū)和溫帶季風(fēng)氣候區(qū)施用更有利于提高農(nóng)田土壤微生物量；且中性土壤施用比酸性和石灰性土壤施用提高效果更好。因此，因地制宜研究有機(jī)無(wú)機(jī)肥配施對(duì)土壤微生物的影響，對(duì)區(qū)域農(nóng)田土壤施肥具有現(xiàn)實(shí)意義。黃壤是我國(guó)西南濕潤(rùn)地區(qū)的主要耕作土壤，其中，貴州黃壤面積占全國(guó)25.3%，占貴州土壤面積46.4%，在貴州農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有至關(guān)重要地位[18]，但尚不明確有機(jī)無(wú)機(jī)肥配施下黃壤微生物群落組成特征?；诖?，本研究依托農(nóng)業(yè)農(nóng)村部貴州耕地保育與農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)觀測(cè)試驗(yàn)站的長(zhǎng)期定位試驗(yàn)，采用Illumina Miseq高通量測(cè)序技術(shù)，探討長(zhǎng)期不同有機(jī)無(wú)機(jī)肥配施模式對(duì)黃壤性水稻土細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響，并了解其主要影響因子，為黃壤區(qū)耕地健康管理提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)點(diǎn)概況及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)點(diǎn)位于貴州省貴陽(yáng)市花溪區(qū)貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院內(nèi)“農(nóng)業(yè)農(nóng)村部貴州耕地保育與農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)觀測(cè)試驗(yàn)站”的長(zhǎng)期肥料定位試驗(yàn)田(106°39′52″E，26°29′49″N)，地處黔中黃壤丘陵區(qū)，平均海拔 1071 m，年平均氣溫15.3℃，年降雨量1100～1200 mm，無(wú)霜期270天左右，屬于亞熱帶季風(fēng)氣候。土壤類型為黃壤母質(zhì)上形成的水耕人為土(Anthrosols)，成土母質(zhì)為三疊系灰?guī)r與砂頁(yè)巖殘積物。試驗(yàn)于1994年開(kāi)始建設(shè)和勻地，1995年正式開(kāi)展，各小區(qū)面積為201 m2。試驗(yàn)前土壤化學(xué)性質(zhì)為：pH 6.75、有機(jī)質(zhì) 44.50 g/kg、全氮 1.96 g/kg、全磷 2.30 g/kg、全鉀13.8 g/kg、堿解氮 134 mg/kg、有效磷 13.4 mg/kg、速效鉀 294 mg/kg。

試驗(yàn)共設(shè)14個(gè)處理，本研究選取其中5個(gè)處理：1)不施肥(CK)；2)全量化肥(NPK)；3)1/4牛廄肥+3/4化肥(1/4M+3/4NP)；4)1/2牛廄肥+1/2化肥(1/2M+1/2NP)；5)全量牛廄肥(M)。具體施肥量見(jiàn)表1?；蔬x用尿素(N 46%)、普鈣(P2O516%)和氯化鉀(K2O 60%)；有機(jī)肥用牛廄肥，其平均含碳(C)10.4%、氮 (N) 2.7 g/kg、磷 (P2O5) 1.3 g/kg、鉀 (K2O)6 g/kg。種植制度為一季中稻，水稻移栽前按處理分別施用磷鉀肥或配施有機(jī)肥作基肥，施化肥處理在水稻生長(zhǎng)期內(nèi)追施2次尿素。

表1 試驗(yàn)處理與年施肥量Table 1 Test treatment and annual fertilization amount

1.2 樣品采集與測(cè)定方法

1.2.1 取樣方法 于2019年11月水稻收獲后，采集耕層(0—20 cm)土壤樣品并測(cè)定土壤容重。采用“S”形五點(diǎn)取樣法，隨機(jī)取5個(gè)位點(diǎn)土壤樣混合，每個(gè)處理3次重復(fù)。土樣混合均勻后過(guò)2 mm篩除去雜質(zhì)，一部分存在–80℃冰箱用于提取土壤DNA，剩余部分風(fēng)干后測(cè)定土壤養(yǎng)分含量。

1.2.2 土壤細(xì)菌測(cè)定 土壤樣品DNA提取根據(jù)FastDNA 試劑盒 (MP Biomedicals，Cleveland，USA)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，完成基因組DNA提取后，用ND 2000 分光光度計(jì) (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham,MA, USA)進(jìn)行檢測(cè)。細(xì)菌 16S rRNA 的 V3～V4 區(qū)采用 338F (5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3′)和806R (5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′)進(jìn)行擴(kuò)增，通過(guò)2%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)其PCR產(chǎn)物進(jìn)行切膠回收。高通量測(cè)序委托上海派森諾生物科技有限公司采用Illumina Miseq高通量測(cè)序平臺(tái)完成，同時(shí)完成文庫(kù)構(gòu)建。

1.2.3 土壤理化性質(zhì)測(cè)定 土壤容重采用環(huán)刀法，pH采用用電位法(水土比2.5∶1)，土壤總有機(jī)碳采用重鉻酸鉀法，全氮采用半微量凱氏定氮法，堿解氮采用堿解擴(kuò)散法，全磷、有效磷采用紫外可見(jiàn)分光光度法，全鉀、速效鉀采用火焰光度法[19]測(cè)定。

1.3 數(shù)據(jù)分析

根據(jù)序列碼將雙端序列分配給各個(gè)樣本，并使用 QIIME (v1.8.0, http://qimei.org/)過(guò)濾低質(zhì)量序列。雙端序列使用 FLASH (v1.2.7，http://ccb.jhu.edu/s oftware/FLASH/)組裝。USEARCH用于檢查和消除嵌合序列(Edgar，2010)。檢查后，應(yīng)用QIIME中的序列比對(duì)工具UCLUST以97%的序列相似度構(gòu)建操作分類單元(OTUs)豐度矩陣?；诰仃?，使用QIIME獲得每個(gè)樣本在門(mén)、綱、目、科和屬5個(gè)分類級(jí)別的分類組成和豐度。

采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，使用單因素ANOVA方差分析計(jì)算檢驗(yàn)差異顯著性(Duncan檢驗(yàn)，P<0.05為差異顯著)。運(yùn)用Canoco5.0軟件做主成分分析(PCA)和冗余分析(RDA)，采用Origin 2018 和 Excel 2010 繪制圖表。

2 結(jié)果與分析

2.1 長(zhǎng)期不同施肥處理對(duì)土壤養(yǎng)分的影響

長(zhǎng)期施肥改變了土壤的物理化學(xué)性質(zhì)(表2)。與不施肥(CK)比較，施肥提高了土壤有機(jī)質(zhì)、全磷和有效磷含量，分別提高了21.22%～44.05%、22.43%～48.19和85.23%～146.94%。施肥導(dǎo)致土壤pH不同程度地降低，與CK相比降低了0.27～0.60個(gè)單位，其中單施有機(jī)肥(M)和有機(jī)無(wú)機(jī)肥配施(1/2M+1/2NP)處理降低幅度較大。結(jié)果還顯示，施用有機(jī)肥處理(1/4M+3/4NP、1/2M+1/2NP和M)顯著提高了土壤全氮、堿解氮和速效鉀含量，與CK相比，分別增加了26.32%～45.79%、31.42%～61.71%和18.67%～42.93%，但與對(duì)照相比全量化肥施用(NPK)對(duì)土壤全氮、堿解氮和速效鉀含量影響均不顯著。

表2 各處理土壤理化性質(zhì)Table 2 Soil physical and chemical properties in each treatment

2.2 長(zhǎng)期不同施肥處理對(duì)土壤細(xì)菌α多樣性的影響

施肥顯著影響土壤細(xì)菌多樣性指數(shù)(Shannon)、優(yōu)勢(shì)度指數(shù)(Simpson)和均勻度指數(shù)(Pielou)，對(duì)豐富度指數(shù)(Chao1)影響較小(表3)。與CK比較，氮磷鉀(NPK)施用降低了土壤細(xì)菌Simpson指數(shù)，但Shannon和Pielou指數(shù)與CK處理間差異不顯著。與CK比較，施用有機(jī)肥1/4M+3/4NP、1/2M+1/2NP和M處理的Shannon指數(shù)、Simpson指數(shù)和Pielou指數(shù)均有提高，分別提高1.67%～1.86%、0.020%和0.73%～0.95%，不同有機(jī)肥處理間差異多不顯著。

表3 不同施肥處理細(xì)菌α多樣性指數(shù)Table 3 Soil bacterial α diversity index as affected by different fertilization treatments

2.3 細(xì)菌群落組成對(duì)長(zhǎng)期不同施肥的響應(yīng)

在門(mén)水平上，共獲得48個(gè)細(xì)菌類群，其中相對(duì)豐度>1%的類群10個(gè)，共占菌群比重95.77%～96.68% (圖1a)。其中優(yōu)勢(shì)細(xì)菌門(mén)(相對(duì)豐度>10%)主要由酸桿菌門(mén)(Acidobacteria) 30.76%～36.44%、變形菌門(mén)(Proteobacteria) 22.81%～27.16%、綠彎菌門(mén)(Chloroflexi) 20.30%～24.30%組成，共占菌群比重79.08%～81.26%。放線菌門(mén)(Actinobacteria) 3.59%～4.73%、棒狀桿菌門(mén)(Rokubacteria) 3.12%～4.20%、芽單胞菌門(mén)(Gemmatimonadetes) 2.31%～2.98%、擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes) 1.41%～2.19%、亞硝酸鹽氧化菌門(mén) (Nitrospinae) 0.68%～2.13%、Latescibacteria 1.01%～1.40%和硝化螺旋菌門(mén)(Nitrospirae) 0.89%～1.24%，共占菌群比重14.97%～16.68%。相比CK，1/4M+3/4NP增加了Proteobacteria、Bacteroidetes和Nitrospirae的相對(duì)豐度；1/2M+1/2NP降低了Gemmatimonadetes相對(duì)豐度；M和1/2M+1/2NP增加了Acidobacteria相對(duì)豐度；1/4M+3/4NP、1/2M+1/2NP和M降低了Rokubacteria和Nitrospinae的相對(duì)豐度，而NPK增加了Proteobacteria相對(duì)豐度，其他菌門(mén)差異不顯著。

圖1 不同處理細(xì)菌群落基于門(mén)(a)和綱(b)分類水平的柱狀堆疊圖Fig.1 Bacterial relative abundance of bacterial communities at the phylum (a) and class (b) classification levels under different treatments

在綱水平上，共獲得114個(gè)類群，平均相對(duì)豐度>1%的類群有16個(gè)(圖1b)。其中，Subgroup 6、厭氧繩菌綱(Anaerolineae)、變形菌綱(Deltaproteobacteria)、γ-變形菌綱 (Gammaproteobacteria)、α-變形菌綱(Alphaproteobacteria)、母鏈菌綱[Blastocatellia(Subgroup 4)]、KD4-96和 NC10相對(duì)豐度分別為16.79%～20.97%、12.31%～14.75%、9.77%～11.23%、8.70%～11.66%、4.20%～5.82%、3.31%～4.78%、3.67%～4.46%和3.12%～4.46%，其他類群相對(duì)豐度則在0.68%～3.37%。與CK相比，NPK增加了Gammaproteobacteria相對(duì)豐度，其他菌綱差異不顯著；施用有機(jī)肥1/4M+3/4NP、1/2M+1/2NP和M增加了Alphaproteobacteria的相對(duì)豐度，降低了NC10和P9X2b3D02的相對(duì)豐度。

采用主成分分析對(duì)不同處理的群落組成進(jìn)行差異分析(圖2)。結(jié)果顯示，在門(mén)和綱水平上，不施肥(CK)和單施化肥(NPK)處理的細(xì)菌群落組成較為相似，有機(jī)無(wú)機(jī)肥配施(1/4M+3/4NP、1/2M+1/2NP)處理的細(xì)菌群落組成較為相似。在門(mén)水平上，第1、2主成分軸對(duì)細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)組成變異的解釋量分別為57.3%和15.8%，合計(jì)73.1% (圖2a)，綱水平解釋量為66.9% (圖2 b)。在屬水平上，第1、2主成分軸對(duì)細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)組成變異的解釋量分別為84.1%和8.2%，合計(jì)92.3% (圖2c)。施用有機(jī)肥(1/4M+3/4NP、1/2M+1/2NP和M)處理的細(xì)菌群落組成相似，CK和NPK處理的細(xì)菌群落組成均與施用有機(jī)肥處理有差異。

圖2 不同處理基于細(xì)菌群落門(mén)(a)、綱(b)和屬(c)水平的主成分分析Fig.2 Principal component analysis of bacterial communities at the phylum (a), class (b) and genus(c) levels under different treatments

2.4 細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)與土壤理化性質(zhì)的關(guān)系

采用冗余分析解析土壤理化性質(zhì)對(duì)門(mén)水平細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響，結(jié)果表明不同施肥處理細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)明顯不同，CK和NPK處理相似，1/4M+3/4NP、1/2M+1/2NP、M處理相似(圖3)。結(jié)果還顯示，RDA分析的第一軸、第二軸解釋度分別為50.0%和10.0%，解釋度60.0%。在單因素影響中，土壤全氮(TN)、堿解氮(AN)、速效鉀(AK)、pH、有效磷(AP)和全磷(TP)是影響土壤細(xì)菌群落組成的重要因子，其中全氮(TN，47.6%，F(xiàn)=11.8，P=0.002)、堿解氮(AN，46.5%，F(xiàn)=11.3，P=0.002)和速效鉀(AK，35.6%，F(xiàn)=7.2，P=0.004)是關(guān)鍵因子。CK和NPK處理群落結(jié)構(gòu)在pH上的投影在正方向，而1/4M+3/4NP、1/2M+1/2NP和M處理在負(fù)方向上，說(shuō)明有機(jī)肥處理通過(guò)降低pH與CK、NPK處理形成差異，而在TN、AN、AK上的投影上相反。TN、AN、AK、AP和TP與酸桿菌門(mén)(Acidobacteria)、放線菌門(mén)(Actinobacteria)和擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes)呈明顯銳角，為正相關(guān)關(guān)系，與其他菌門(mén)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，pH則相反。

圖3 不同處理基于土壤理化性質(zhì)和細(xì)菌群落門(mén)水平的冗余分析Fig.3 Redundancy analysis of based on soil chemical properties and dominant bacterial phyla

3 討論

土壤細(xì)菌α多樣性指數(shù)是表征土壤細(xì)菌群落多樣性和生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定的重要指標(biāo)。本研究結(jié)果表明，與不施肥(CK)和長(zhǎng)期單施化肥(NPK)比較，單施有機(jī)肥(M)和有機(jī)無(wú)機(jī)肥配施(1/4M+3/4NP、1/2M+1/2NP)均促進(jìn)了土壤細(xì)菌的生長(zhǎng)和繁殖，土壤細(xì)菌的Shannon指數(shù)、Simpson指數(shù)和Pielou指數(shù)的提高與此一致(表3)。Liu 等[20]在華北地區(qū)的研究結(jié)果也與本研究一致。原因可能是施用有機(jī)肥改善了土壤理化性質(zhì)，能夠提高土壤肥力，為土壤細(xì)菌提供了一個(gè)良好的生長(zhǎng)環(huán)境，而長(zhǎng)期施用化肥和不施肥下土壤退化嚴(yán)重，土壤環(huán)境營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏，限制了細(xì)菌生長(zhǎng)[21–23]。

不同施肥均會(huì)影響土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)，總體上，處理間的細(xì)菌優(yōu)勢(shì)門(mén)和綱類群相似，但相對(duì)豐度存在一定差異(圖1)。不同施肥處理優(yōu)勢(shì)菌門(mén)(相對(duì)豐度>10%)為酸桿菌門(mén)(Acidobacteria)、變形菌門(mén)(Proteobacteria)和綠彎菌門(mén)(Chloroflexi)，這與王娟娟等[24]研究得到的水稻土細(xì)菌群落優(yōu)勢(shì)類群相似?？赡苁且?yàn)樵囼?yàn)土壤均為稻田中性土壤，且同處中緯度亞熱帶季風(fēng)氣候，水熱條件類似，因此土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)和優(yōu)勢(shì)菌群相似度較高。與CK比較，長(zhǎng)期施肥不同程度地提高了變形菌門(mén)(Proteobacteria)的相對(duì)豐度，試驗(yàn)處理的相對(duì)豐度從高到底依次為NPK>1/4M+3/4NP>1/2M+1/2NP>M>CK。原因可能是長(zhǎng)期施肥提高了土壤肥力，促進(jìn)作物根系生長(zhǎng)，進(jìn)而影響了與根系生長(zhǎng)關(guān)系密切的變形菌門(mén)[25]。Proteobacteria的相對(duì)豐度隨著有機(jī)肥替代量的增加而降低，且1/4M+3/4NP和NPK的Proteobacteria相對(duì)豐度顯著高于CK，說(shuō)明在本研究中，Proteobacteria受化肥的影響更加顯著。與CK和NPK處理相比，施用有機(jī)肥處理均降低了棒狀桿菌門(mén)(Rokubacteria)和亞硝酸鹽氧化菌門(mén)(Nitrospinae)相對(duì)豐度，提高了擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes)相對(duì)豐度。Rokubacteria為近年被識(shí)別的土壤細(xì)菌門(mén)類，尚未明確施肥對(duì)其豐度和功能性的影響機(jī)理，但肯定了Rokubacteria合成抗生素的潛力[26]，從側(cè)面反映出長(zhǎng)期施用有機(jī)肥可降低致病性細(xì)菌數(shù)量，對(duì)土壤健康有重要意義。亞硝酸鹽氧化菌門(mén)(Nitrospinae)是參與有機(jī)碳固定過(guò)程的重要細(xì)菌種類[27]，長(zhǎng)期施用有機(jī)肥降低土壤Nitrospinae豐度的原因可能是施用有機(jī)肥處理增加了外源碳源，微生物的固碳作用減弱。而施用有機(jī)肥提高擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes)相對(duì)豐度的原因可能是有機(jī)肥為牛廄肥，動(dòng)物的腸道中有較多的Bacteroidetes，牛糞發(fā)酵成的有機(jī)肥含有Bacteroidetes細(xì)菌[28]。近年來(lái)，隨著研究者對(duì)土壤微生物的深入研究，一些土壤碳循環(huán)[29]、氮循環(huán)[30]相關(guān)功能性細(xì)菌逐漸被認(rèn)識(shí)，但整體來(lái)看，功能性微生物仍處于探究階段，因此，在后續(xù)的研究中，應(yīng)系統(tǒng)對(duì)其進(jìn)行研究。本研究通過(guò)主成分分析發(fā)現(xiàn)，無(wú)論在細(xì)菌門(mén)水平還是綱水平上，1/4M+3/4NP、1/2M+1/2NP和M處理的土壤細(xì)菌群落組成相似度較高，CK和NPK聚類在一起，相似度高(圖2)，說(shuō)明不同處理間土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)差異是施用有機(jī)肥造成的，劉平靜等[31]在土上的相關(guān)研究結(jié)果與本研究結(jié)果一致。

另外，本研究結(jié)果還表明，長(zhǎng)期不同施肥改變了土壤理化性質(zhì)，其中土壤全氮、堿解氮、速效鉀、pH、有效磷和全磷養(yǎng)分的差異是導(dǎo)致土壤細(xì)菌群落組成差異的重要因子(圖3)。一些研究者的相關(guān)研究結(jié)果與本研究有所差異。如邢亞薇等[32]研究表明，土壤pH、全氮和有機(jī)碳含量是影響黃土旱塬農(nóng)田土壤微生物群落豐度的重要因子；李春越等[33]研究發(fā)現(xiàn)，黃土旱塬農(nóng)田土壤理化性質(zhì)對(duì)土壤微生物群落結(jié)構(gòu)差異影響大小表現(xiàn)為為：全氮>全磷>pH>有機(jī)質(zhì)。產(chǎn)生差異的原因可能是不同試驗(yàn)點(diǎn)的施肥量、施肥模式等存在差異，土壤的理化性質(zhì)對(duì)施肥的響應(yīng)不同導(dǎo)致。

4 結(jié)論

在貴州黃壤區(qū)，長(zhǎng)期單施有機(jī)肥和有機(jī)無(wú)機(jī)肥配施能夠提高土壤肥力，改善土壤細(xì)菌的生長(zhǎng)環(huán)境，顯著提高土壤細(xì)菌的多樣性、優(yōu)勢(shì)度和均勻度，并改變了土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)。施用有機(jī)肥對(duì)提升貴州黃壤區(qū)土壤肥力，促進(jìn)農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定和健康發(fā)展具有重要意義，是值得推薦的施肥模式。