農(nóng)　敏　譚婷心

潔凈室VHP傳遞窗性能測(cè)試技術(shù)的應(yīng)用

農(nóng)敏譚婷心

（廣西梧州制藥（集團(tuán)）股份有限公司，廣西 梧州 543000）

在無(wú)菌藥品的生產(chǎn)過(guò)程中，VHP（氣化過(guò)氧化氫）傳遞窗可用于由低級(jí)別向高級(jí)別潔凈區(qū)傳遞物料，并對(duì)窗體及所要傳遞的物料進(jìn)行表面滅菌。為了考察VHP傳遞窗的性能是否能達(dá)到GMP的要求，文章采用不同的技術(shù)手段對(duì)VHP傳遞窗性能進(jìn)行測(cè)試，可以證明該VHP傳遞窗能達(dá)到使用要求，把物料對(duì)潔凈室的污染降低到最低程度，減少因物料污染給藥品帶來(lái)污染的風(fēng)險(xiǎn)。

VHP傳遞窗；性能測(cè)試技術(shù)；潔凈區(qū)

引言

新版GMP顯著提高了無(wú)菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量的相關(guān)法規(guī)要求，與歐盟GMP接軌，提出了A、B、C、D分級(jí)以及更為嚴(yán)格的環(huán)境懸浮粒子和微生物方面的控制要求。新版GMP無(wú)菌附錄1第四十五條要求，必要時(shí)，可采用熏蒸的方法降低潔凈區(qū)內(nèi)衛(wèi)生死角的微生物污染，應(yīng)當(dāng)驗(yàn)證熏蒸的殘留水平。針對(duì)這種情況，VHP傳遞窗則提供了可以驗(yàn)證的滅菌技術(shù)。

在藥品生產(chǎn)過(guò)程中，必須保證向無(wú)菌區(qū)域傳遞物料的安全，向關(guān)鍵生產(chǎn)區(qū)域傳遞的物料、器具等，均需要經(jīng)過(guò)滅菌方式方可傳入高級(jí)別潔凈區(qū)，而對(duì)于不能承受高溫滅菌的物品，則可以選用VHP滅菌傳遞窗。

本次研究的研究對(duì)象是凈化型VHP傳遞窗，其采用VHP熏蒸的方式，對(duì)窗體及所需要傳遞的物料進(jìn)行表面滅菌，滅菌效果徹底，能殺死絕大多數(shù)病原菌及病毒，滅菌后無(wú)殘留，所耗費(fèi)的時(shí)間也相對(duì)較短。對(duì)VHP傳遞窗的性能進(jìn)行測(cè)試，考察其滅菌過(guò)程參數(shù)符合情況、過(guò)濾器完整性、腔體自凈效果、腔體潔凈度、VHP氣體濃度和分布以及VHP滅菌效果，證明此測(cè)試方法的有效性，減少由于VHP傳遞窗滅菌不完全等因素導(dǎo)致污染的情況發(fā)生，保證藥品生產(chǎn)的質(zhì)量。

1　VHP傳遞窗構(gòu)造

VHP傳遞窗為具備各種功能控制組件的獨(dú)立制動(dòng)的系統(tǒng)，其各個(gè)部件如下。

（1）傳遞窗腔體：腔體材料為304不銹鋼板，VHP往高效過(guò)濾器進(jìn)入通往腔體內(nèi)，配備有回風(fēng)口用于循環(huán)排風(fēng)，傳遞窗的前后配制有玻璃視鏡，可用于觀察墻內(nèi)滅菌過(guò)程。

（2）進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)和排風(fēng)系統(tǒng)：該系統(tǒng)主要由進(jìn)風(fēng)風(fēng)機(jī)和排風(fēng)風(fēng)機(jī)組成，分別位于VHP傳遞窗的進(jìn)口和出口處，風(fēng)機(jī)的葉輪和電機(jī)部分完全隔離，高濃度的VHP不能腐蝕風(fēng)機(jī)的任何元器件。

（3）VHP蒸汽發(fā)生系統(tǒng)：主要由儲(chǔ)液罐、蠕動(dòng)泵、蒸發(fā)室和預(yù)熱器四個(gè)部分組成，此系統(tǒng)能夠在高溫的狀態(tài)下，短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生大量的過(guò)氧化氫氣體，用于腔體內(nèi)的滅菌。

（4）控制系統(tǒng)：控制系統(tǒng)由PLC進(jìn)行控制，其依照控制界面?zhèn)鲗?dǎo)的指令，可以處理所有與傳遞窗操作相關(guān)的操作，可以通過(guò)手動(dòng)或者自動(dòng)控制該滅菌過(guò)程，對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行相應(yīng)的管理和監(jiān)控，并且可以進(jìn)行系統(tǒng)安全和數(shù)據(jù)方面的提取，系統(tǒng)還可以對(duì)用戶登錄/登出系統(tǒng)的時(shí)間、參數(shù)設(shè)置和修改和操作人員簽名進(jìn)行控制。

2　VHP傳遞窗構(gòu)造及滅菌過(guò)程概述

VHP傳遞窗整個(gè)滅菌過(guò)程包括六個(gè)階段。

（1）腔體自凈：此狀態(tài)時(shí)，無(wú)菌空氣由低噪聲離心風(fēng)機(jī)壓入，再經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾器均壓以后，通過(guò)排風(fēng)管對(duì)腔體進(jìn)行自靜；

（2）腔體干燥：此狀態(tài)時(shí)，腔體內(nèi)部進(jìn)行預(yù)熱干燥，當(dāng)干燥時(shí)間達(dá)到設(shè)定值后，進(jìn)入下一階段；

（3）滅菌提升：待預(yù)熱器、蒸發(fā)室達(dá)到預(yù)設(shè)溫度至滅菌溫度后，開(kāi)始腔體滅菌；

（4）滅菌維持：當(dāng)腔體內(nèi)過(guò)氧化氫氣體濃度上升至設(shè)定值時(shí)，開(kāi)始滅菌計(jì)時(shí)，使腔體內(nèi)的過(guò)氧化氫氣體濃度和相對(duì)濕度保持穩(wěn)定狀態(tài)，達(dá)到設(shè)定的滅菌溫度后，進(jìn)入下一階段；

（5）腔體置換：待傳遞窗腔體內(nèi)殘余過(guò)氧化氫濃度≤1 ppm時(shí)，通風(fēng)階段結(jié)束；

（6）結(jié)束運(yùn)行。

3 性能測(cè)試部分

3.1 材料與試劑

PAO氣溶膠、VHP蒸汽化學(xué)試紙條、食品級(jí)35%過(guò)氧化氫溶液、嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌片、TSB培養(yǎng)基、試管。

3.2 儀器與設(shè)備

生化培養(yǎng)箱、ATI-2H光度計(jì)、TDA-6C氣溶膠發(fā)生器、MET ONE 3445懸浮粒子計(jì)數(shù)器（采樣量100 L）。

3.3 測(cè)試方法

3.3.1 高效過(guò)濾器完整性測(cè)試

對(duì)高效過(guò)濾器進(jìn)行完整性測(cè)試，可考察其過(guò)濾器是否存在泄漏，確保腔體內(nèi)的自凈效果達(dá)到要求。

（1）測(cè)試步驟：①在高效過(guò)濾器的上游發(fā)氣溶膠作為塵源，待氣溶膠在腔體內(nèi)混合均勻后，把該濃度設(shè)定為100%基準(zhǔn)值；②在上游的氣溶膠濃度達(dá)到20 ug/L～80 ug/L的時(shí)候，手持采樣頭在高效過(guò)濾器下方進(jìn)行掃描，檢測(cè)時(shí)采樣頭距離高效過(guò)濾器2 cm～3 cm，掃描速度在3 cm/s～5 cm/s；③檢測(cè)氣溶膠的濃度，此時(shí)光度計(jì)上顯示的濃度和上游的濃度比值，為泄漏率。

（2）判定標(biāo)準(zhǔn)。過(guò)濾器和框架泄露限度應(yīng)≤0.01%。

（3）試驗(yàn)結(jié)果。高效過(guò)濾器完整性測(cè)試的光度計(jì)掃描結(jié)果顯示，透過(guò)率均小于0.1%，結(jié)果符合要求，說(shuō)明該VHP傳遞窗高效過(guò)濾器完整無(wú)泄漏，可提供潔凈氣流。

3.3.2 VHP系統(tǒng)自凈時(shí)間測(cè)試

通過(guò)在VHP傳遞柜內(nèi)部制造一定濃度粒子下的污染環(huán)境，然后進(jìn)行粒子采樣，計(jì)算粒子到達(dá)相應(yīng)級(jí)別靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)的時(shí)間，該時(shí)間即為自凈時(shí)間。通過(guò)考察自凈時(shí)間是否能達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求，可證明該系統(tǒng)的送風(fēng)系統(tǒng)所送出的潔凈氣流能夠及時(shí)把污染氣體清除，達(dá)到自凈的效果。

（1）測(cè)試步驟：①在VHP傳遞窗內(nèi)放置粒子計(jì)數(shù)器，利用氣溶膠發(fā)生器持續(xù)發(fā)煙至粒子超出B級(jí)潔凈區(qū)潔凈級(jí)別（0.5 μm粒子）100倍（即352000粒/ m3以上）以上后停止發(fā)煙；②打開(kāi)懸浮粒子計(jì)數(shù)器連續(xù)采樣，設(shè)置每一分鐘記錄一次粒子數(shù)據(jù)，直至達(dá)到潔凈室B級(jí)級(jí)別的靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)要求；③統(tǒng)計(jì)粒子達(dá)到B級(jí)級(jí)別的自凈時(shí)間，測(cè)試共進(jìn)行三次。

（2）判定標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)過(guò)自凈后，VHP傳遞窗內(nèi)空氣潔凈度應(yīng)能達(dá)到B級(jí)潔凈室靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)要求（B級(jí)區(qū)：≥0.5 μm粒子不得過(guò)3520粒/ m3），且自凈時(shí)間T≤15 min。

（3）測(cè)試結(jié)果。自凈時(shí)間測(cè)試結(jié)果如表1所示。

表1 自凈時(shí)間檢測(cè)結(jié)果

通過(guò)三次測(cè)試數(shù)據(jù)表明，三次自凈時(shí)間分別為9 min、10 min和10 min，測(cè)試結(jié)果均符合要求，說(shuō)明該VHP傳遞窗自凈效果良好，可快速凈化由粒子帶來(lái)的污染，也符合相應(yīng)潔凈區(qū)域潔凈度要求，該測(cè)試方法有效。

3.3.3 滅菌過(guò)程參數(shù)符合情況測(cè)試

通過(guò)考察滅菌過(guò)程各相關(guān)運(yùn)行參數(shù)是否符合要求，來(lái)確保此過(guò)程是符合既定的規(guī)程來(lái)進(jìn)行滅菌的，從而證明滅菌過(guò)程無(wú)任何偏差，減少物料污染的風(fēng)險(xiǎn)。

（1）測(cè)試步驟。進(jìn)行VHP滅菌程序，觀察并記錄滅菌過(guò)程中相關(guān)參數(shù)。

（2）判定標(biāo)準(zhǔn)。滅菌過(guò)程參數(shù)應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

（3）測(cè)試結(jié)果。滅菌過(guò)程參數(shù)測(cè)試結(jié)果如表2所示。

通過(guò)三次滅菌參數(shù)測(cè)試數(shù)據(jù)表明，各滅菌步驟測(cè)試結(jié)果均符合要求，說(shuō)明該VHP傳遞窗滅菌過(guò)程是完全符合既定設(shè)定程序要求的，該滅菌過(guò)程有效。

表2 滅菌過(guò)程參數(shù)檢測(cè)結(jié)果

3.3.4 VHP氣體分布測(cè)試

VHP氣體分布測(cè)試，是為了確認(rèn)待滅菌物品以最大裝載量，并按照與生產(chǎn)操作相同條件下放置的情況下，VHP氣體仍然能夠均勻分布于傳遞窗內(nèi)各個(gè)測(cè)試點(diǎn)。

（1）檢測(cè)方法：①于VHP傳遞窗內(nèi)放置與生產(chǎn)操作相同最大裝載量物品；②分別將VHP蒸汽化學(xué)試紙條均勻分布于傳遞窗內(nèi)15個(gè)測(cè)試點(diǎn)（共分三層分布，每層分布5個(gè)測(cè)試點(diǎn)，分布如圖1所示）；③啟動(dòng)VHP傳遞窗自動(dòng)滅菌運(yùn)行程序，記錄滅菌時(shí)VHP濃度值，滅菌結(jié)束后，觀察化學(xué)試紙條變色情況，測(cè)試共進(jìn)行三次。

（2）判定標(biāo)準(zhǔn)。滅菌時(shí)過(guò)氧化氫濃度峰值應(yīng)＞300 ppm，化學(xué)試紙條均能顯著變色，各指示條變色后顏色基本一致，無(wú)顯著性差異。

（3）試驗(yàn)結(jié)果。VHP氣體分布測(cè)試結(jié)果如表3所示。

通過(guò)三次測(cè)試數(shù)據(jù)表明，滅菌時(shí)傳遞窗內(nèi)VHP濃度均能超過(guò)300 ppm，經(jīng)過(guò)滅菌后，化學(xué)試劑條的顏色均能顯著變色，且無(wú)顯著差異，說(shuō)明在該滿載情況下，VHP氣體均能均勻分布于腔體內(nèi)，并能達(dá)到要求的濃度，測(cè)試符合要求，該測(cè)試方法有效。

表3 VHP氣體分布測(cè)試結(jié)果

3.3.5 VHP滅菌效果測(cè)試

通過(guò)檢測(cè)滅菌過(guò)程VHP的滅菌效力進(jìn)行確認(rèn)，確保其通過(guò)VHP滅菌后，能夠殺死腔體內(nèi)中所有微生物，達(dá)到預(yù)期的滅菌效果。

（1）檢測(cè)方法：①VHP傳遞窗滿載情況下，按VHP氣體分布測(cè)試點(diǎn)布置嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌片（孢子量106）；②運(yùn)行VHP傳遞窗自動(dòng)滅菌程序，并記錄運(yùn)行參數(shù)；③待滅菌程序完成并通風(fēng)結(jié)束后，迅速將嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌片取下，并在無(wú)菌條件下接種至TSB培養(yǎng)基中；④在無(wú)菌條件下，將一片未經(jīng)過(guò)接觸VHP的嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌片接種至TSB培養(yǎng)基中，作為陽(yáng)性對(duì)照管，另一支只含TSB培養(yǎng)基的試管作為陰性對(duì)照管；⑤將所有試驗(yàn)培養(yǎng)基試管至于生化培養(yǎng)箱中（55℃～60℃）培養(yǎng)7天，觀察培養(yǎng)基是否渾濁，測(cè)試共進(jìn)行三次。

（2）判定標(biāo)準(zhǔn)：①試驗(yàn)結(jié)束后，觀察接種有試驗(yàn)樣品菌片的TSB培養(yǎng)基，應(yīng)不渾濁，陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)有菌生長(zhǎng)（渾濁），陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)，則此次滅菌效果判定合格；②若有試驗(yàn)樣品菌片的TSB培養(yǎng)基有菌生長(zhǎng)，陽(yáng)性對(duì)照有菌生長(zhǎng)，陰性對(duì)照無(wú)菌生長(zhǎng)，則判定此次滅菌效果不合格；③若陽(yáng)性對(duì)照無(wú)菌生長(zhǎng)或陰性對(duì)照有菌生長(zhǎng)，則試驗(yàn)樣品結(jié)果無(wú)論如何，均判定此次試驗(yàn)無(wú)效。

（3）試驗(yàn)結(jié)果。VHP滅菌效果測(cè)試結(jié)果如表4所示。

通過(guò)三次檢測(cè)數(shù)據(jù)表明，經(jīng)過(guò)VHP傳遞窗在線滅菌后，各測(cè)試點(diǎn)的TSB培養(yǎng)結(jié)果均無(wú)菌生長(zhǎng)，陽(yáng)性對(duì)照均有菌生長(zhǎng)，陰性對(duì)照均無(wú)菌生長(zhǎng)，說(shuō)明在滿載物料的情況下，經(jīng)過(guò)VHP滅菌程序后，均能有效殺滅傳遞窗空間內(nèi)微生物，可使芽孢數(shù)量下降6個(gè)對(duì)數(shù)單位，滿足了滅菌的要求，減少了因由低級(jí)別潔凈區(qū)向高級(jí)別潔凈區(qū)傳遞物料而產(chǎn)生的風(fēng)險(xiǎn)，且滅菌結(jié)束后VHP的殘留均小于1 ppm，符合殘留量要求。

表4 VHP滅菌測(cè)試結(jié)果

4 討論

本文主要闡述了VHP傳遞窗性能測(cè)試技術(shù)的應(yīng)用，通過(guò)對(duì)VHP傳遞窗進(jìn)行性能測(cè)試，其測(cè)試結(jié)果完全符合要求，證明了該測(cè)試技術(shù)的可靠性和有效性，該傳遞窗能用于藥品無(wú)菌制劑生產(chǎn)線上物料的傳遞，能充分說(shuō)明該性能測(cè)試方法是合乎日常生產(chǎn)實(shí)際的。

然而，該VHP傳遞窗的性能測(cè)試方法往往通常不止上述這幾項(xiàng)測(cè)試方法，對(duì)滅菌效果有效性影響的因素還有很多，比如傳遞窗的密封性是否會(huì)直接影響腔體內(nèi)VHP的濃度，從而對(duì)滅菌效果造成影響；系統(tǒng)的蠕動(dòng)泵充氣速率也有較大影響，充氣速率的快和慢，往往會(huì)影響過(guò)氧化氫氣體的濃度變化，從而影響滅菌效果，同時(shí)還應(yīng)當(dāng)注意檢查蠕動(dòng)泵系統(tǒng)的完整性，看是否存在泄漏的風(fēng)險(xiǎn)；還有就是在充氣和保壓階段，充氣時(shí)間的長(zhǎng)短，還有過(guò)氧化氫的注射流量也對(duì)滅菌效果有較大影響，一般延長(zhǎng)充氣時(shí)間，加大過(guò)氧化氫的用量，都會(huì)識(shí)得滅菌效果更佳；另外裝載模式也會(huì)對(duì)滅菌效果有較大影響，因?yàn)楸粶缇奈锪媳砻姹仨毰cVHP充分的進(jìn)行接觸，若裝載量過(guò)大，容易存在部分死角而達(dá)不到充分的滅菌效果，增加物料傳遞的污染風(fēng)險(xiǎn)，所以裝載物應(yīng)留有部分間隙以防滅菌不完整。

5 結(jié)束語(yǔ)

VHP傳遞窗的性能測(cè)試技術(shù)還有待于專業(yè)技術(shù)人員更深入的研究與探討，設(shè)計(jì)出更多符合測(cè)試設(shè)備性能的技術(shù)項(xiàng)目，減少由低風(fēng)險(xiǎn)潔凈區(qū)向高風(fēng)險(xiǎn)潔凈區(qū)傳遞物料的風(fēng)險(xiǎn)，從而更充分保障藥品生產(chǎn)的質(zhì)量控制過(guò)程，生產(chǎn)出質(zhì)量合格的產(chǎn)品。

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Application of VHP Transfer Window Performance Test Technology in Clean Room

In the production process of sterile drugs, VHP (vaporized hydrogen peroxide) transfer window can be used to transfer materials from low-level to high-level clean areas, and sterilize the window and the materials to be transferred. In order to investigate whether the performance of VHP transfer window can meet the requirements of GMP, this paper uses different technical means to test the performance of VHP transfer window, which can prove that the VHP transfer window can meet the use requirements, reduce the pollution of materials to the clean room to a minimum, and reduce the risk of drug pollution caused by material pollution.

VHP transfer window; performance testing technology; clean area

TQ46

A

1008-1151(2022)06-0056-04

2022-03-26

農(nóng)敏（1984－），女，廣西橫州人，廣西梧州制藥（集團(tuán)）股份有限公司工程師，從事藥品設(shè)備、藥品設(shè)備技術(shù)研究工作。

譚婷心（1985－），女，廣西博白人，廣西梧州制藥（集團(tuán)）股份有限公司工程師，從事藥品技術(shù)、藥物警戒研究工作。