林忠寧 李兆龍 陸 烝 楊有泉 肖學(xué)奎

（1.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所 福州 350013；2.福建省山地草業(yè)工程技術(shù)研究中心福州 350013；3.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 福州 350013）

仔豬早期斷乳是當(dāng)前集約化養(yǎng)豬生產(chǎn)的關(guān)鍵技術(shù)，由于生理、心理、營養(yǎng)及環(huán)境的改變，給斷乳后仔豬造成巨大的應(yīng)激，引起腹瀉、采食量下降、生長阻滯和免疫功能降低等生理病癥，即仔豬斷乳綜合征，嚴(yán)重影響仔豬的生長性能，甚至死亡[1]?？股厥菍?duì)仔豬斷乳綜合征有效預(yù)防和治療措施之一，但隨著抗生素在畜牧生產(chǎn)的廣泛和高劑量使用，在促進(jìn)仔豬生長、提高養(yǎng)殖效益的同時(shí)，給動(dòng)物健康、食品安全及生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生嚴(yán)重的負(fù)面影響，目前歐盟和美國已全面禁止抗生素在畜牧上應(yīng)用，我國也已在2020年全面禁止抗生素飼料添加劑，因此，尋找能有效替代抗生素的綠色安全的飼料添加劑已成為畜牧產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的必然趨勢(shì)。中草藥是天然的綠色植物，兼有營養(yǎng)和藥用的兩種屬性，具有促進(jìn)動(dòng)物生長發(fā)育、提高飼料利用率等功能，已經(jīng)在仔豬的飼養(yǎng)中得以應(yīng)用[2-4]。

鐵莧菜（Acalypha australis L.）為大戟科鐵莧菜屬一年生草本植物，營養(yǎng)豐富，富含蛋白質(zhì)、脂肪、胡蘿卜素和鈣，民間常作為野生蔬菜食用，同時(shí)也是傳統(tǒng)草藥品種之一，以全草或地上部分入藥，含有總黃酮、生物堿、鐵莧菜素、沒食子酸、胡蘿卜苷、谷甾醇等活性成分，具有清熱解毒、利濕消積、收斂止血的功效，民間常用于腸炎、細(xì)菌性痢疾、阿米巴痢疾、疳積等小兒消化道疾病的治療[5]。但鐵莧菜在動(dòng)物生產(chǎn)上的應(yīng)用鮮有報(bào)道，對(duì)仔豬腹瀉防治及仔豬促生長的效果尚不清楚，為了尋找代替抗生素的天然植物提取物，本研究擬開展鐵莧菜提取物對(duì)仔豬的添加喂飼試驗(yàn)，分析其對(duì)仔豬生長性能、血液生化指標(biāo)及糞樣菌群的的影響，以期為鐵莧菜開發(fā)成替代抗生素的天然植物飼料添加劑奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 鐵莧菜提取物：鐵莧菜藥材由福建東嵐醫(yī)藥有限公司提供，福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所功能性草產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)室提取，采用水浸提、真空濃縮、噴霧干燥等制備工藝，劑型為粉劑，主要成分為沒食子酸(含量≥2.5%)、總黃酮(含量≥5.0%)。抗生素：飼用金霉素，由福建浦城正大生化有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)在福建省長汀縣李學(xué)星生豬養(yǎng)殖有限公司開展，正式試驗(yàn)喂養(yǎng)28 d，預(yù)試驗(yàn)5 d。試驗(yàn)選取同一批次25日齡、健康的外三元斷乳仔豬120頭，頭均重9.60±0.65 kg，按體重相近、公母各半的原則隨機(jī)分成4組，每組分3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6頭，統(tǒng)一打上耳標(biāo)，采用分欄養(yǎng)殖，每欄控制每頭仔豬活動(dòng)面積約0.5 m2。

試驗(yàn)組分別為鐵莧菜提取物組Ⅰ和組Ⅱ、抗生素組及對(duì)照組，鐵莧菜提取物組Ⅰ和組Ⅱ在基礎(chǔ)日糧中分別加入50 mg/kg、100 mg/kg鐵莧菜提取物，抗生素組在基礎(chǔ)日糧中加入75 mg/kg飼用金霉素，對(duì)照組則在基礎(chǔ)日糧中不添加鐵莧菜提取物或飼用金霉素。

1.3 試驗(yàn)日糧與飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)日糧參照NRC（2012）仔豬營養(yǎng)需要推薦量配制，試驗(yàn)豬場(chǎng)的日糧組成及營養(yǎng)水平見表1，仔豬預(yù)混料由福建聚力生物科技有限公司提供。本試驗(yàn)飼料、鐵莧菜提取物和飼用金霉素均為粉料，鐵莧菜提取物和飼用金霉素按比例預(yù)先混合到飼料中，再按日常投喂量喂飼斷乳仔豬。試驗(yàn)期間，每天分2次進(jìn)行投喂，投喂量應(yīng)每日進(jìn)行調(diào)整，盡量做到不多喂、不少喂。仔豬自由采食和飲水，其它飼養(yǎng)管理及免疫程序與豬場(chǎng)日常一致。

表1 基礎(chǔ)日糧及營養(yǎng)成分

1.4 仔豬生長性能及腹瀉情況 分別于試驗(yàn)第1 d、15 d和29 d早上8:00對(duì)試驗(yàn)豬（逐頭）進(jìn)行空腹稱重，同時(shí)全程（每天）記錄試驗(yàn)豬的采食情況。試驗(yàn)期間每日清晨或定時(shí)觀察豬糞便情況來判斷豬是否腹瀉，按0、1、2、3逐頭記錄腹瀉程度。平均日增重（ADG）＝（末期組總重﹣初期組總重）/(試驗(yàn)天數(shù)×組頭數(shù))；平均日采食量（ADFI）＝每組總采食量/（試驗(yàn)天數(shù)×組頭數(shù)）；料重比（F/G）＝平均日采食量（ADFI）/平均日增重（ADG）；腹瀉發(fā)生率（%）＝（每組腹瀉頭數(shù)×腹瀉天數(shù)）/（每組頭數(shù)×試驗(yàn)天數(shù)）×100。

1.5 血液生化和免疫指標(biāo)檢測(cè) 于試驗(yàn)第29 d對(duì)試驗(yàn)豬逐頭進(jìn)行空腹頸靜脈采血，室溫下2 000 r/min離心20 min，收集血清和血漿，用全自動(dòng)血液生化分析儀及試劑盒分別檢測(cè)仔豬血液生化指標(biāo)及免疫指標(biāo)。

1.6 腸道菌群檢測(cè) 試驗(yàn)第29 d清晨，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選2頭健康仔豬，采集其新鮮無污染微生物糞便，放冰箱-20℃待測(cè)。在無菌條件下，稱取1 g糞樣放入加有9 mL磷酸鹽緩沖液的試管內(nèi)，振蕩器中均質(zhì)振蕩5 min后制成10-1稀釋液，然后依次稀釋制成至10-6稀釋液，分別在EMB、SS和MRS固體培養(yǎng)基上接入10μL糞樣稀釋液，37℃、48 h培養(yǎng)后分別進(jìn)行大腸桿菌、沙門氏菌和乳酸桿菌鑒定和平板計(jì)數(shù)，計(jì)算出每克糞樣所含的菌數(shù)。

1.7 數(shù)據(jù)處理 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS15.0系統(tǒng)進(jìn)行整理和統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 鐵莧菜提取物對(duì)仔豬生長性能的影響 從表2中看出，鐵莧菜提取物組和抗生素組的平均日增重（ADG）均顯著高于對(duì)照組（P<0.05），鐵莧菜提取物組與抗生素組的ADG差異不顯著（P>0.05）；鐵莧菜提取物組和抗生素組的料肉比（F/G）與對(duì)照組相比均有不同程度降低，其中抗生素組的F/G最低，為1.581，比對(duì)照組降低了17.91%，差異顯著（P<0.05），鐵莧菜提取物組的F/G分別為1.651和1.585，比對(duì)照組分別降低了14.28%和17.70%，差異顯著（P<0.05）；鐵莧菜提取物組與抗生素組的F/G差異均不顯著（P>0.05）。從仔豬生長性能影響結(jié)果看，鐵莧菜提取物對(duì)仔豬有顯著的促生長作用，促生長效果與飼用金霉素相近。

表2 鐵莧菜提取物對(duì)仔豬生長性能的影響

2.2 鐵莧菜提取物對(duì)仔豬腹瀉的影響情況 從表3中看出，鐵莧菜提取物組和抗生素組的仔豬腹瀉發(fā)生率分別為4.34%、3.42%和3.50%，均顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。從控制仔豬腹瀉的初步效果看，鐵莧菜提取物對(duì)仔豬腹瀉有明顯的防治效果。

表3 鐵莧菜提取物對(duì)仔豬腹瀉發(fā)病情況的影響

2.3 鐵莧菜提取物對(duì)仔豬血液生化和免疫指標(biāo)的影響 從表4中看出，鐵莧菜提取物組和抗生素組仔豬血液中總蛋白、白蛋白和球蛋白指標(biāo)均高于對(duì)照組，但差異不顯著（P>0.05）；鐵莧菜提取物組和抗生素組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶指標(biāo)均低于對(duì)照組，其中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶指標(biāo)差異顯著（P<0.05），而谷丙轉(zhuǎn)氨酶指標(biāo)差異不顯著（P>0.05）；鐵莧菜提取物組和抗生素組的堿性磷酸酶指標(biāo)均高于對(duì)照組，但差異不顯著（P>0.05）；鐵莧菜提取物組和抗生素組的免疫球蛋白G、A和M指標(biāo)均顯著高對(duì)照組（P<0.05）。從仔豬血液生化指標(biāo)和免疫指標(biāo)的影響結(jié)果看，鐵莧菜提取物對(duì)仔豬有增強(qiáng)免疫的功效。

表4 鐵莧菜提取物對(duì)仔豬血液生化指標(biāo)的影響

2.4 鐵莧菜提取物對(duì)仔豬腸道菌群的影響 從表5中看出，鐵莧菜提取物組和抗生素組仔豬糞樣中大腸桿菌數(shù)和沙門氏菌數(shù)均顯著低于對(duì)照組（P<0.05），其中鐵莧菜提取物組的大腸桿菌數(shù)和沙門氏菌數(shù)略高于抗生素組，但差異不顯著（P>0.05）；鐵莧菜提取物組的乳酸桿菌數(shù)均顯著高于抗生素組和對(duì)照組（P<0.05），同時(shí)抗生素組的乳酸桿菌數(shù)也顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。從仔豬糞樣菌群的影響結(jié)果看，鐵莧菜提取物不僅顯著提高乳酸桿菌的數(shù)量，而且顯著抑制大腸桿菌和沙門氏菌等有害菌的數(shù)量。

表5 鐵莧菜提取物對(duì)仔豬腸道菌群的影響

3 討論與結(jié)論

鐵莧菜在民間常作為野生蔬菜食用，營養(yǎng)豐富，富含蛋白質(zhì)、脂肪、胡蘿卜素和鈣，在動(dòng)物生產(chǎn)中添加喂飼是完全可行的。同時(shí)，它也是傳統(tǒng)民間草藥品種，具有清熱解毒、利濕消積、收斂止血的功效，民間常用于腸炎、細(xì)菌性痢疾、阿米巴痢疾、疳積等小兒消化道疾病的治療。現(xiàn)有研究表明，鐵莧菜富含總黃酮、沒食子酸等活性成分，總黃酮有抗炎、抑菌、增強(qiáng)免疫、抗過敏、防治心與腦血管疾病等廣泛作用[6-8]，沒食子酸也有抗菌、抗炎、抗氧化和抗病毒等作用[9]，因此，鐵莧菜具有對(duì)包括腸炎、菌痢、消化不良、胃痛、胃炎等消化系統(tǒng)疾病有很好的療效，對(duì)番瀉葉引起的腹瀉具有拮抗作用，同時(shí)對(duì)金黃色葡萄球菌、革蘭氏陽性桿菌、枯草桿菌和多種革蘭氏陰性腸道致病菌都具有不同程度的抑制和殺滅作用[10]。本試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)，鐵莧菜提取物對(duì)仔豬糞樣中的大腸桿菌和沙門氏菌等有害菌有明顯的抑制作用，有效改善仔豬腸道菌群結(jié)構(gòu)，促進(jìn)飼料的消化吸收。

鐵莧菜提取物組與對(duì)照組相比，仔豬血液的免疫球蛋白G、A和M指標(biāo)均顯著升高，同時(shí)總蛋白、白蛋白和球蛋白指標(biāo)也有所增加，這些免疫指標(biāo)的增強(qiáng)，表明鐵莧菜提取物具有增強(qiáng)仔豬免疫的作用；堿性磷酸酶是蛋白質(zhì)合成與代謝的重要酶，鐵莧菜提取物組的堿性磷酸酶均高于對(duì)照組，表明鐵莧菜提取物能促進(jìn)仔豬體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成與代謝；谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是與肝功能有關(guān)的酶，這些酶的活性增加提示肝臟疾病、感染、寄生或創(chuàng)傷，試驗(yàn)中鐵莧菜提取物組的谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶均低于對(duì)照組，表明鐵莧菜提取物對(duì)仔豬肝臟具有保護(hù)作用。試驗(yàn)結(jié)果表明，鐵莧菜提取物具有增強(qiáng)免疫、保護(hù)肝臟、促進(jìn)蛋白質(zhì)合成與代謝的作用，從而提高仔豬免疫力，促進(jìn)生長發(fā)育，可能與鐵莧菜富含總黃酮、生物堿、鐵莧菜素、沒食子酸、胡蘿卜苷、谷甾醇等活性成分有關(guān)，但具體是哪些活性成分及其作用機(jī)理還需進(jìn)一步研究。研究結(jié)果表明，鐵莧菜提取物對(duì)仔豬有明顯的促生長和增強(qiáng)免疫的作用，對(duì)仔豬腹瀉有明顯的防治效果，促生長和防治腹瀉的效果與飼用金霉素相近。同時(shí)鐵莧菜提取物還能有效提高乳酸桿菌的數(shù)量，并抑制大腸桿菌和沙門氏菌等有害菌的數(shù)量，可以達(dá)到仔豬飼料中添加抗生素所起到的效果，又能避免使用抗生素所帶來的危害。因此，鐵莧菜提取物可以作為抗生素添加劑很好的替代品，是一個(gè)天然綠色安全的飼料添加劑。