于艷華，謝文瑞

延安大學咸陽醫(yī)院檢驗科，陜西咸陽 712000

冠心病是一類由于冠狀動脈出現(xiàn)粥樣硬化而導致血管狹窄、閉塞的心臟疾病，最終可由于心肌細胞缺血而發(fā)生缺氧、壞死導致心血管不良事件[1-2]，威脅人類健康。世界衛(wèi)生組織發(fā)布數(shù)據(jù)表明，冠心病已成為全球范圍內(nèi)病死率最高的疾病。因此，如何早期診斷、早期治療及實施有效的預防措施對于降低冠心病病死率具有重要意義。近年來，臨床研究者們致力于尋找與冠心病發(fā)病相關(guān)的標志物，以期通過檢測標志物在機體內(nèi)的表達水平預測冠心病，并提出有效的防治措施。然而，目前常用的血清標志物C反應蛋白(CRP)、白細胞介素等雖在冠心病發(fā)病時表達水平升高，但對于冠心病的預測不具有特異性，故尋找特異性較強的血清標志物對提高冠心病診療效果具有重要意義。本研究探討了中性粒細胞與淋巴細胞比值(NLR)、血清骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(BMP4)和血管生成素樣蛋白8(ANGPLT8)水平與冠心病的相關(guān)性，旨在為冠心病的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、病情預測等提供一定的參考，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2019年1月至2021年6月73例因胸痛于本院心血管內(nèi)科就診的冠心病患者納入冠心病組，其中男33例，女40例；平均年齡(52.26±7.45)歲。選擇同期主訴為胸痛于本院就診的116例疑似冠心病患者為對照組，其中男65例，女51例；平均年齡(51.59±6.78)歲。兩組患者性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。納入標準：(1)冠心病組患者有冠心病臨床癥狀和體征，且符合原衛(wèi)生部發(fā)布的《冠狀動脈粥樣硬化性心臟病診斷標準》[3]；(2)年齡35～75歲；(3)入院后行冠狀動脈造影檢查；(4)臨床病歷資料記錄完整。排除標準：(1)有先天性心臟病、高血壓心臟病、陳舊性心肌梗死、心力衰竭、心臟瓣膜病等心臟病史；(2)既往有支架介入手術(shù)史或冠狀動脈搭橋手術(shù)史；(3)既往有腦卒中病史；(4)合并肝腎功能障礙、血液系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌疾??；(5)近期內(nèi)有急性感染史；(6)近期內(nèi)有抗血小板聚集類藥物、抗凝藥物、非甾體類抗炎藥物或他汀類、貝特類血脂調(diào)節(jié)藥物用藥史。

1.2方法 收集并記錄所有患者的一般資料，包括性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、吸煙史、飲酒史、糖尿病病史、高血壓病史及心血管疾病家族病史等，其中吸煙史標準為每日吸煙≥1支且連續(xù)吸煙超過1年，戒煙者戒煙時間不超過6個月仍記為有吸煙史；飲酒史標準為男性每周飲酒折合乙醇>140 g，女性每周>70 g；糖尿病診斷標準為伴有糖尿病典型癥狀，包含多飲、多食、多尿和不明原因的體質(zhì)量下降，且隨機血糖水平≥11.1 mmol/L，或空腹血糖水平≥7.0 mmol/L，或餐后2 h血糖水平≥11.1 mmol/L，無糖尿病4項典型癥狀的患者需隔日復查血糖以確診；高血壓診斷標準為體循環(huán)動脈血壓升高，未應用任何降壓藥物時收縮壓≥140 mm Hg和(或)舒張壓≥90 mm Hg；心血管疾病家族病史以一級親屬患有心血管疾病為標準。

1.2.1常規(guī)生化指標檢測 檢測所有患者NLR、血脂四項[總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)]水平。

1.2.2BMP4和ANGPLT8檢測 取患者空腹肘靜脈血4 mL，以3 000 r/min離心10 min，取上清液低溫冷凍保存。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測BMP4和ANGPLT8水平，其中BMP4試劑盒購自英國Abcam公司(批號ab231930)，ANGPLT8試劑盒購自上海一研生物科技有限公司(批號EY4123)，嚴格按照試劑盒說明書進行檢測。

1.2.3冠狀動脈狹窄程度評估 對所有患者行冠狀動脈造影檢查，由兩位具有高級職稱的心血管主治醫(yī)師進行共同閱片，并采用Gensini積分法評估冠狀動脈病變程度，病變血管評分為所在病變部位的狹窄程度及所對應的分數(shù)與該段血管的權(quán)重系數(shù)之積，將各段血管評分相加即為該支血管評分，將各支血管評分相加即為該患者Gensini積分。其中病變血管狹窄程度評分中，無狹窄記為0分，狹窄程度≤25%記為1分，狹窄程度26%～50%記為2分，狹窄程度51%～75%記為4分，狹窄程度76%～90%記為8分，狹窄程度91%～99%記為16分，狹窄程度100%記為32分；病變血管部分權(quán)重系數(shù)中，左主干系數(shù)為5.0，左前降支近段系數(shù)為2.5，左前降支中段系數(shù)為1.5，左前降支遠段系數(shù)為1.0，第一對角支系數(shù)為1.0，第二對角支系數(shù)為0.5，左回旋支近段系數(shù)為2.5，左回旋支中段系數(shù)為1.5，左回旋支遠段系數(shù)為1.0，左回旋支后降支系數(shù)為1.0，左回旋支后側(cè)支系數(shù)為0.5，右冠狀動脈近段、中段、遠段、后降支系數(shù)均為1.0。根據(jù)Gensini積分對冠心病患者冠狀動脈病變嚴重程度進行分級，其中Gensini積分<30分為輕度冠狀動脈病變組，Gensini積分≥30分為重度冠狀動脈病變組。根據(jù)不同血管病變支數(shù)將冠心病患者分為單支病變組、雙支病變組、三支病變組。

2 結(jié) 果

2.1冠心病組與對照組基線資料比較 冠心病組與對照組心血管疾病家族病史、TC、LDL-C比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；冠心病組BMI、NLR、TG、BMP4、ANGPLT8水平，有吸煙史、飲酒史、高血壓病史、糖尿病病史的患者人數(shù)比例均明顯高于對照組，冠心病組HDL-C水平明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 冠心病與對照組基線資料比較

組別nTC(x±s,mmol/L)HDL-C(x±s,mmol/L)LDL-C(x±s,mmol/L)TG(x±s,mmol/L)BMP4(x±s,mg/L)ANGPLT8(x±s,pg/mL)Gensini積分(x±s,分)對照組1164.25±1.061.04±0.232.62±0.511.46±0.353.86±0.91566.49±97.58—冠心病組734.52±1.130.96±0.212.78±0.581.69±0.416.88±1.34818.05±136.2726.63±4.94χ2/t1.6622.4071.9914.11418.44914.765—P0.0980.0170.058<0.001<0.001<0.001—

2.2不同血管病變支數(shù)的冠心病患者實驗室指標比較 單支病變組、雙支病變組、三支病變組NLR、BMP4、ANGPLT8及Gensini積分比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。三支病變組NLR、BMP4、ANGPLT8和Gensini積分均明顯高于單支病變組和雙支病變組，雙支病變組NLR、BMP4、ANGPLT8和Gensini積分均明顯高于單支病變組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同血管病變支數(shù)的冠心病患者實驗室指標比較

2.3不同冠狀動脈病變程度的冠心病患者實驗室指標比較 重度冠狀動脈病變組NLR、BMP4、ANGPLT8水平均明顯高于輕度冠狀動脈病變組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 不同冠狀動脈病變程度的冠心病患者實驗室指標比較

2.4Logistic回歸分析冠心病發(fā)病的影響因素 以冠心病發(fā)病為因變量，將冠心病組和對照組比較中差異有統(tǒng)計學意義的指標作為自變量進行Logistic回歸分析，結(jié)果顯示HDL-C降低，TG、NLR、BMP4、ANGPLT8升高是影響冠心病發(fā)病的獨立危險因素(P<0.05)。見表4。

表4 Logistic回歸分析冠心病發(fā)病的影響因素

2.5Logistic回歸分析冠心病嚴重程度的影響因素 以是否為重度冠狀動脈病變?yōu)橐蜃兞?，將NLR、BMP4、ANGPLT8 作為自變量進行Logistic回歸分析，結(jié)果顯示NLR、BMP4、ANGPLT8升高是影響冠心病嚴重程度的獨立危險因素(P<0.05)。見表5。

表5 Logistic回歸分析冠心病嚴重程度的影響因素

3 討 論

冠心病是一類與動脈粥樣硬化具有高度相關(guān)性的疾病，而動脈粥樣硬化是一類炎癥性疾病，動脈局部炎性反應活躍狀態(tài)是影響動脈粥樣硬化進程的重要標志[4]。因此推測，與炎性反應相關(guān)的細胞因子標志物表達水平可能與冠心病的發(fā)生具有一定的聯(lián)系。本研究通過對73例冠心病患者(冠心病組)和116例疑似冠心病患者(對照組)進行對比發(fā)現(xiàn)，冠心病組NLR水平明顯高于對照組(P<0.05)，而Logistic回歸分析顯示，NLR每增加1，患者冠心病發(fā)病率可增加至1.163倍，提示中性粒細胞和淋巴細胞參與冠心病的發(fā)病進程，也提示NLR對于冠心病發(fā)病的預測價值。本研究結(jié)果表明，NLR越高則冠心病發(fā)病率越高，其有可能的表現(xiàn)形式為中性粒細胞表達增加及淋巴細胞表達減少，其中中性粒細胞屬于吞噬細胞中的一種，對于抵御病原體入侵具有重要的作用[5-7]，同時現(xiàn)代醫(yī)學研究也證實其在炎癥誘導和免疫應答方面也具有重要作用[8]。中性粒細胞和淋巴細胞均參與機體的免疫反應，中性粒細胞以非特異性免疫反應為主，主要分泌氧自由基及彈性蛋白酶等炎性物質(zhì)，正常生理狀態(tài)下中性粒細胞壽命較短，但在炎性反應刺激下可促進中性粒細胞增殖分化，并導致動脈粥樣硬化斑塊破裂，進一步加重了炎性反應，故在冠心病患者機體內(nèi)表現(xiàn)為中性粒細胞數(shù)量增加；淋巴細胞代表了免疫系統(tǒng)的調(diào)控，動脈血管病變的發(fā)生對于機體是一類應激信號，人體的下丘腦-垂體-腎上腺軸在應激反應的調(diào)控下激活分泌皮質(zhì)醇，而內(nèi)源性皮質(zhì)醇水平的升高可導致淋巴細胞表達減少，相應的NLR在冠心病患者血清中水平升高。NLR最早用于評價機體的免疫炎癥狀態(tài)，近年來臨床研究發(fā)現(xiàn)NLR在預測冠心病和動脈病變程度中有較好的應用價值[9]。王媛等[10]研究報道，對247例冠心病患者行冠狀動脈造影檢查，并進行外周血血細胞計數(shù)，計算NLR并分析其診斷冠心病的受試者工作特征(ROC)曲線發(fā)現(xiàn)，NLR的ROC曲線下面積為0.761，當cut-off值取2.28時，其診斷冠心病的靈敏度和特異度分別達到74.1%和63.5%，是預測冠心病的良好指標。VERDOIA等[11]檢測了3 738例冠狀動脈疾病患者的NLR水平，發(fā)現(xiàn)NLR與冠狀動脈疾病發(fā)病率相關(guān)，且與多支血管病變和冠狀動脈鈣化程度獨立相關(guān)，本研究結(jié)果也顯示，單支病變組、雙支病變組、三支病變組NLR比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，其中三支病變組NLR明顯高于單支病變組和雙支病變組(P<0.05)，雙支病變組NLR明顯高于單支病變組(P<0.05)，均提示NLR是冠心病發(fā)病和嚴重程度的有效預測因子。

BMP4是骨形態(tài)發(fā)生蛋白家族成員，可與異二聚體復合物絲氨酸/蘇氨酸酶受體結(jié)合并控制信號的傳遞過程。魏曉等[12]研究表明，大鼠主動脈BMP4表達水平越高，經(jīng)茜素紅染色法顯示的動脈血管鈣化程度也越高，提示BMP4參與冠狀動脈疾病的發(fā)病過程?，F(xiàn)代醫(yī)學研究認為，BMP4可在冠狀動脈血管鈣化部位表達進而激活轉(zhuǎn)錄程序，促進成軟骨基因及成骨樣基因的表達，加重血管鈣化程度并加快心血管疾病進程[13]。

冠心病的發(fā)病與脂代謝紊亂有關(guān)，本研究結(jié)果顯示，TG升高，HDL-C降低均為影響冠心病發(fā)病的獨立危險因素。ANGPLT8是一類分泌蛋白，主要在肝臟和脂肪組織中表達，也可在血漿中檢測到，WANG等[14]的動物實驗報道，敲除ANGPLT8基因的小鼠體質(zhì)量增加速度相較于正常野生同窩小鼠慢，且血漿中TG水平與禁食動物接近，提示ANGPLT8基因與TG的代謝有關(guān)。MYSORE等[15]的研究表明，ANGPLT8參與抑制機體循環(huán)中的脂肪分解過程及餐后脂肪的儲存，提示ANGPLT8水平與血脂水平相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)冠心病組HDL-C水平明顯低于對照組，而TG水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。由于ANGPLT8作為ANGPLT家族的非典型成員，其缺少C端的纖維蛋白原結(jié)構(gòu)域，但與ANGPLT3和ANGPLT4基因結(jié)構(gòu)相似，可協(xié)同參與調(diào)節(jié)血脂代謝繼而影響動脈粥樣硬化進程。

綜上所述，NLR、BMP4、ANGPLT8升高是冠心病發(fā)病和嚴重程度的獨立危險因素，NLR、BMP4、ANGPLT8檢測可能有助于冠心病早期診斷及病情預測。