劉巧敏，何麗

(1.舞鋼市人民醫(yī)院 檢驗科，河南 舞鋼 462500；2.平頂山市第一人民醫(yī)院 檢驗科，河南 平頂山 467000)

復發(fā)性流產(chǎn)(recurrent spontaneous abortion，RSA)指自然流產(chǎn)連續(xù)發(fā)生≥2次，其病因復雜，約50%～60%為免疫性RSA，主要由抗磷脂抗體綜合征(antiphospholipid syndrome，APS)所致[1-3]。抗β2-糖蛋白 Ⅰ 抗體(anti-β2glycoprotein Ⅰ antibody，A-β2-GPⅠ)是APS主要抗體，與RSA有關(guān)[4]?？购丝贵w(antinuclear antibody，ANA)陽性提示自身免疫系統(tǒng)激活[5]，但其與RSA的關(guān)系尚存爭議?；诖?，本研究旨在分析ANA、A-β2-GPⅠ、D-二聚體(D-dimer，D-D)與RSA疾病轉(zhuǎn)歸的關(guān)系及預測價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取舞鋼市人民醫(yī)院2019年3月至2021年3月收治的224例RSA患者作為觀察組，另選取于產(chǎn)科門診就診的60例正常經(jīng)產(chǎn)婦作為對照組。觀察組年齡24～39(31.33±3.48)歲，流產(chǎn)3～6(3.91±0.42)次，體質(zhì)量指數(shù)(body mass index，BMI)18～28(22.36±2.25)kg·m-2。對照組年齡22～40(30.91±3.62)歲，流產(chǎn)3～6(3.80±0.32)次，BMI 18～29(22.65±2.41)kg·m-2。兩組年齡、BMI均衡可比(P>0.05)。納入標準：符合《婦產(chǎn)科學》[6]中RSA診斷標準；1個性伴侶；男方精液正常；對照組為無任何不良孕產(chǎn)史的健康經(jīng)產(chǎn)婦。排除標準：感染、遺傳、生殖器官解剖異常、內(nèi)分泌等因素所致的RSA；合并糖尿病、腎病、甲狀腺疾病等內(nèi)科疾?。?個月內(nèi)使用過抗凝或促纖溶藥物?；颊邔Ρ狙芯績?nèi)容知情，自愿簽署知情同意書。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核通過。

1.2 檢測方法入組24 h內(nèi)取空腹靜脈血6 mL，其中3 mL使用枸櫞酸鈉抗凝，離心(半徑8 cm，轉(zhuǎn)速3 500 r·min-1，時間9 min)，取上清液，采用免疫比濁法，使用日本Sysmex CA-1500型全自動血細胞凝集分析儀檢測D-D水平。另3 mL不抗凝，離心(半徑8 cm，轉(zhuǎn)速3 500 r·min-1，時間9 min)，取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法，使用德國歐蒙公司試劑盒檢測A-β2-GPⅠ水平，≥cut off(20 IU·L-1)值為陽性，

1.3 觀察指標及分析內(nèi)容(1)ANA陽性率、A-β2-GPⅠ陽性率、D-D水平。(2)不同流產(chǎn)次數(shù)患者ANA陽性率、A-β2-GPⅠ陽性率、D-D水平，并分析其與流產(chǎn)次數(shù)相關(guān)性。(3)不同轉(zhuǎn)歸患者一般資料、ANA、A-β2-GPⅠ、D-D水平。(4)采用logistic回歸分析影響轉(zhuǎn)歸的因素。(5)將活產(chǎn)納入陰性組，將流產(chǎn)納入陽性組，分析ANA、A-β2-GPⅠ、D-D 受試者工作特征(receiver operating characteristic curve，ROC)水平及其對轉(zhuǎn)歸的預測價值，通過logistic二元回歸擬合，返回預測概率logit(p)，將其作為獨立檢驗變量，做ROC曲線，分析聯(lián)合檢測預測價值。

2 結(jié)果

2.1 ANA、A-β2-GPⅠ陽性率和D-D水平觀察組ANA、A-β2-GPⅠ陽性率及D-D水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組ANA、A-β2-GPⅠ陽性率和D-D水平比較

2.2 ANA、A-β2-GPⅠ、D-D與流產(chǎn)次數(shù)的關(guān)系流產(chǎn)≤3次的患者ANA、A-β2-GPⅠ陽性率與≥3次的患者比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；流產(chǎn)≤3次患者的D-D水平低于>3次的患者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，RSA患者ANA、A-β2-GPⅠ表達與流產(chǎn)次數(shù)無關(guān)，D-D水平與流產(chǎn)次數(shù)呈正相關(guān)(P<0.05)。見表3。

表2 不同流產(chǎn)次數(shù)ANA、A-β2-GPⅠ、D-D比較

表3 ANA、A-β2-GPⅠ、D-D與流產(chǎn)次數(shù)的關(guān)系

2.3 不同轉(zhuǎn)歸患者一般資料、ANA、A-β2-GPⅠ、D-DRSA不同轉(zhuǎn)歸患者既往流產(chǎn)次數(shù)、吸煙、飲酒、受教育程度、生殖道感染、D-D水平及ANA、A-β2-GPⅠ陽性率相比，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。RSA不同轉(zhuǎn)歸患者年齡、BMI比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表4。

表4 不同轉(zhuǎn)歸患者一般資料、ANA、A-β2-GPⅠ、D-D

2.4 RSA患者疾病轉(zhuǎn)歸影響因素分析以RSA患者疾病轉(zhuǎn)歸為因變量(活產(chǎn)=0，流產(chǎn)=1)，將表3中差異有統(tǒng)計學意義的因素(既往流產(chǎn)次數(shù)、吸煙、飲酒、受教育程度、生殖道感染、D-D水平及ANA、A-β2-GPⅠ陽性率)賦值，納入logistic回歸分析，可知上述因素均為RSA患者疾病轉(zhuǎn)歸影響因素(P<0.05)。見表5。

表5 RSA患者疾病轉(zhuǎn)歸影響因素logistic回歸分析

2.5 ANA、A-β2-GPⅠ、D-D表達對RSA患者疾病轉(zhuǎn)歸的預測價值以活產(chǎn)為陰性組，以流產(chǎn)為陽性組，建立ROC曲線，結(jié)果顯示，ANA預測RSA患者疾病轉(zhuǎn)歸的AUC為0.865，A-β2-GPⅠ預測疾病轉(zhuǎn)歸的AUC為0.789，D-D預測疾病轉(zhuǎn)歸的AUC為0.795，ANA、A-β2-GPⅠ、D-D聯(lián)合預測RSA患者疾病轉(zhuǎn)歸的AUC最大，且>0.9，預測效能較高。見表6。

表6 ANA、A-β2-GPⅠ、D-D表達對RSA患者疾病轉(zhuǎn)歸的預測價值

3 討論

RSA是育齡期女性常見疾病，發(fā)生率為1%～5%，復發(fā)風險隨流產(chǎn)次數(shù)增加而上升，再次妊娠自然流產(chǎn)率可達70%～80%[7-8]。隨著生殖免疫學研究的不斷深入，免疫因素被認為是RSA重要原因[9]。免疫性RSA指母體自身產(chǎn)生免疫抗體，干擾排卵、受精、胚泡著床等過程，導致反復自然流產(chǎn)，其中抗磷脂抗體為主要抗體[10]?？沽字贵w主要包括A-β2-GPⅠ、抗心磷脂抗體、狼瘡抗凝物，其中A-β2-GPⅠ較抗心磷脂抗體和狼瘡抗凝物對APS診斷更具特異度[11]。ANA是抗細胞核抗原自身抗體總稱，幾乎所有自身免疫性疾病均存在ANA陽性。有文獻報道，正常人也可出現(xiàn)ANA陽性，陽性率為1.82 %～6.00%[12]。目前，ANA檢測對RSA診斷的意義仍存在爭議。周燕等[13]研究顯示，RSA患者ANA陽性率(20.71%)高于已生育健康女性(4.61%)。Li等[14]報道，接受體外受精術(shù)后早期流產(chǎn)的患者ANA陽性率(39.45%)明顯高于正常對照組(16.13%)。也有研究認為，RSA患者ANA陽性率無明顯變化[15]。本研究結(jié)果顯示，RSA患者ANA、A-β2-GPⅠ陽性率均高于正常經(jīng)產(chǎn)婦，且ANA、A-β2-GPⅠ陽性均為RSA患者疾病轉(zhuǎn)歸影響因素，提示ANA、A-β2-GPⅠ均與RSA有關(guān)。本研究還發(fā)現(xiàn)，RSA患者D-D水平與流產(chǎn)次數(shù)呈正相關(guān)?？紤]與RSA患者流產(chǎn)次數(shù)增加，體內(nèi)存在更多被破壞的血管內(nèi)皮細胞有關(guān)。本研究結(jié)合既往文獻認為，RSA患者機體內(nèi)存在復雜自身免疫反應，ANA可能通過促進免疫復合物在蛻膜血管表面沉積，損傷蛻膜血管組織，胎盤血灌注量下降，誘導血栓形成，缺血、低氧必然影響胚胎組織，導致流產(chǎn)[16-21]；同時，ANA可能通過阻礙內(nèi)膜發(fā)育，對胚胎著床和發(fā)育產(chǎn)生影響，最終造成流產(chǎn)[22-24]，但確切機制有待進一步研究。本研究采用ANA、A-β2-GP Ⅰ、D-D聯(lián)合預測RSA患者疾病轉(zhuǎn)歸，ANA陽性、A-β2-GPⅠ陽性、D-D>210.2 μg·L-1時，均高度懷疑流產(chǎn)發(fā)生，聯(lián)合預測AUC達0.937，預測價值最高。提示臨床可同時檢測ANA、A-β2-GPⅠ、D-D，為RSA患者疾病轉(zhuǎn)歸的預測提供更全面、可靠的參考信息。

綜上可知，ANA、A-β2-GPⅠ、D-D與RSA血栓前狀態(tài)有關(guān)，該3項指標檢測可為RSA患者流產(chǎn)原因研判提供參考，并可有效預測疾病轉(zhuǎn)歸，對指導治療有重要意義。