李 暢，范 榮，李東波，周 威，黃玉娥

（三亞市中醫(yī)院急診骨外科，海南 三亞 572000）

骨質(zhì)疏松性骨折是目前臨床中常見(jiàn)的疾病，主要與年齡、性別、營(yíng)養(yǎng)攝入及基礎(chǔ)疾病有關(guān)[1]?；颊哂捎趦?nèi)分泌疾病、腎功能疾病及長(zhǎng)期使用激素類(lèi)藥物等多種原因?qū)е鹿琴|(zhì)疏松，隨著病情進(jìn)展，患者由于非外傷或外傷發(fā)生骨折的風(fēng)險(xiǎn)顯著增加，且預(yù)后較差，導(dǎo)致患者長(zhǎng)期活動(dòng)受限，進(jìn)而引發(fā)全身感染性疾病[2]。研究[3]表明，Wnt/β-catenin 通路及相關(guān)蛋白水平的降低與骨質(zhì)疏松性骨折的發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)，曹燕明等[4]研究證實(shí)，β-catenin 蛋白水平的降低與骨質(zhì)疏松性骨折的發(fā)生密切相關(guān)；王斌等[5]研究表明，Wnt 及β-catenin 蛋白水平的降低誘導(dǎo)并加重骨質(zhì)疏松性骨折的發(fā)生及進(jìn)展。當(dāng)歸補(bǔ)血湯是以中醫(yī)理論為基礎(chǔ)，由當(dāng)歸、黃芪等中藥材組成的中藥制劑，具有補(bǔ)血功效，常用于治療血虛陽(yáng)浮等病癥。近年來(lái)，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)于骨質(zhì)疏松及骨折的愈合均有顯著的改善作用，謝青等[6]研究表明，當(dāng)歸補(bǔ)血湯能夠顯著改善骨折患者的隱形失血，減少并發(fā)癥，加速骨關(guān)節(jié)功能的恢復(fù)；陳煥杰[7]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)歸補(bǔ)血湯能夠顯著改善骨折患者踝關(guān)節(jié)及膝關(guān)節(jié)功能狀態(tài)，緩解患者疼痛狀態(tài)，促進(jìn)骨折愈合，由此可見(jiàn)當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)于骨折愈合有較好的促進(jìn)作用，然而，當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)于骨質(zhì)疏松性骨折愈合的促進(jìn)作用及對(duì)Wnt 及β-catenin 通路的調(diào)節(jié)作用目前尚未見(jiàn)明確報(bào)道。本研究通過(guò)探討當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)大鼠骨質(zhì)疏松性骨折的修復(fù)作用及其作用機(jī)制，為當(dāng)歸補(bǔ)血湯的藥理作用研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 72 只雌性SD 大鼠，6～8 周齡，體質(zhì)量180～200 g，購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（京）2019-0011，飼養(yǎng)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房，溫度22～25 ℃，相對(duì)濕度40%～70%，自然光照，自由飲食，適應(yīng)性飼養(yǎng)1 周。

1.2 藥品及試劑 當(dāng)歸補(bǔ)血湯由黃芪30 g（貨號(hào)：191017），當(dāng)歸6 g（貨號(hào)：190911）組成，藥材飲品購(gòu)自北京同仁堂藥業(yè)有限公司，將藥材飲品置于1 500 mL 蒸餾水中浸泡2 h，煎煮45 min，過(guò)濾后將藥材殘?jiān)糜? 000 mL 水中，再次煎煮45 min 后，過(guò)濾，合并2 次濾液，蒸發(fā)濃縮，制成生藥含量為1 g/mL 的制劑；骨組織蛋白提取試劑盒（北京百奧萊博科技有限公司，貨號(hào)：HR0117）；阿侖膦酸鈉（石藥集團(tuán)歐意藥業(yè)有限公司，規(guī)格：10 mg，批號(hào)：20190809）；Wnt3a、DKK1、Runx2 及β-catenin、GAPDH 單克隆抗體（艾博抗貿(mào)易有限公司，貨號(hào)：ab219412、ab109416、ab236639、ab32572、ab181602）；二喹啉甲酸（BCA）蛋白定量試劑盒、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記山羊抗兔IgG（碧云天生物科技有限公司，貨號(hào)：P0012、A0208）；RNA 提取試劑盒、cDNA 逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、HE 染色試劑盒（北京索萊寶科技有限公司，貨號(hào)：R1200、K1672、G1120）；PCR 引物設(shè)計(jì)及合成（賽默飛世爾科技有限公司）。

1.3 設(shè)備與儀器 EXA -3000 雙能X 線骨密度檢測(cè)儀（澳思托醫(yī)療器械有限公司）；HY -0350 萬(wàn)能生物力學(xué)試驗(yàn)機(jī)（上海衡翼精密儀器有限公司）；5427 R 臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（艾本德中國(guó)有限公司）；SpectraMax iD5 酶標(biāo)儀（美谷分子儀器有限公司）；MyGo Pro PCR 儀（英國(guó)IT-IS 公司）；IX83 熒光倒置顯微鏡（奧林巴斯有限公司）；E-Gel Imager 凝膠成像儀（賽默飛世爾科技有限公司）。

1.4 分組、造模及給藥 72 只大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（12 只）及造模組（60 只），參照文獻(xiàn)[8]方法，將造模組大鼠麻醉后從背部作切口，去除雙側(cè)卵巢，正常對(duì)照組大鼠只做切口但不摘除卵巢，消毒并逐層縫合后，給予70 mg/kg 的頭孢呋辛預(yù)防感染，12 周后，測(cè)定大鼠骨密度，以造模組大鼠骨密度顯著低于正常對(duì)照組視為造模成功。在造模組大鼠右后肢外側(cè)作一切口，將股骨中段橫行鋸斷，使用直徑為1 mm 的克氏針固定后縫合。將造模組大鼠隨機(jī)分為骨質(zhì)疏松性骨折組、當(dāng)歸補(bǔ)血湯低、中、高劑量組及阿侖膦酸鈉組，12 只/組。當(dāng)歸補(bǔ)血湯低、中、高劑量組分別按照2.5、5、10 g/kg[9]（以生藥含量計(jì)）的劑量灌胃給予大鼠當(dāng)歸補(bǔ)血湯，阿侖膦酸鈉組按照0.5 mg/kg[10]灌胃給予大鼠阿侖膦酸鈉，正常對(duì)照組及骨質(zhì)疏松性骨折組大鼠灌胃給予生理鹽水，每日1 次，連續(xù)給藥8周[11]。

1.5 大鼠骨密度的測(cè)定 大鼠使用10%水合氯醛麻醉后置于雙能X 線骨密度檢測(cè)儀，檢測(cè)各組大鼠右后肢股骨密度。

1.6 大鼠血清TNF-α、IL-1β 水平測(cè)定 每組取6 只大鼠，麻醉后取仰臥位，腹主動(dòng)脈取血至干凈離心管中，4℃靜置1 h 后，置于4℃離心機(jī)中，8 000 r/min，離心10 min，取上清，使用TNF-α、IL-1β ELISA 試劑盒測(cè)定大鼠血清TNF-α、IL-1β 水平。

1.7 大鼠血清ALP、OC 水平測(cè)定 每組取6 只大鼠，眼眶靜脈叢取血至干凈離心管中，4℃靜置1 h 后，置于4 ℃離心機(jī)，6 000 r/min，離心10 min，取上清液，使用大鼠ALP 及OC 檢測(cè)試劑盒測(cè)定大鼠血清ALP、OC 水平。

1.8 大鼠股骨彈性模量、最大應(yīng)力、最大承受力測(cè)定 每組取6 只大鼠，頸椎脫臼法處死后分離右后肢股骨，使用萬(wàn)能生物力學(xué)試驗(yàn)機(jī)檢測(cè)大鼠股骨彈性模量、最大應(yīng)力、最大承受力等生物力學(xué)指標(biāo)。

1.9 大鼠股骨病理學(xué)檢查 每組取6 只大鼠，頸椎脫臼法處死大鼠后，分離右側(cè)股骨，在4%中性甲醛中固定48 h，然后在10%乙二胺四乙酸中脫鈣2 周，使用石蠟包埋機(jī)包埋后，進(jìn)行5 μm 切片，常規(guī)蘇木精-伊紅（HE）染色后，在顯微鏡下進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。

1.10 大鼠股骨Wnt3a、DKK1、Runx2 及β-catenin mRNA 水平測(cè)定 每組取6 只大鼠，頸椎脫臼法處死大鼠后，分離右側(cè)股骨，在液氮中研磨，使用RNA 提取試劑盒提取總RNA，并使用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒將RNA逆轉(zhuǎn)為cDNA，根據(jù)引物序列，使用PCR 試劑盒，測(cè) 定Wnt3a、DKK1、Runx2、β-catenin 及GAPDH mRNA 水平，結(jié)果以GAPDH 為內(nèi)參，采用2-ΔΔCt法計(jì)算各基因表達(dá)水平。PCR 引物序列：Wnt3a，正向引物5’-GCAGCTGTGAAGTGAAGAC-3’，反向引物5’-GGTGTTTCTCTACCACCATCTC-3’；DKK1，正向引物5’-AGTGGGAACCGAAGAAGAAG-3’，反向引物5’-GACGGGAACTGACTGGATGAAC-3’；Runx2，正向引物5’-GTGTGTGAAAAGCCCGTGTC-3’，反向引物5’-GCACAAGGTTCTGGCAGTTG-3’；β-catenin，正向引物5’-GCAACTGTTCCTGAACTCAACT-3’，反向引物5’-ATCTTTTGGGGTCCGTCAACT-3’；GAPDH，正向引物5’-CCCATCTATGAGGGTTACGC-3’，反向引物5’-TTTAATGTCACGCACGATTTC-3’。

1.11 大鼠股骨Wnt3a、DKK1、Runx2 及β-catenin 蛋白水平測(cè)定 每組取6 只大鼠，頸椎脫臼法處死大鼠后，分離右側(cè)股骨，在液氮中研磨，使用骨組織蛋白提取試劑盒提取總蛋白，使用BCA 蛋白測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白含量后，取相當(dāng)于50 μg 蛋白的股骨組織樣品，使用聚丙烯酰胺凝膠電泳分離后，電轉(zhuǎn)移至聚偏氟乙烯膜上，使用封閉液室溫封閉1 h，分別用Wnt3a、DKK1、Runx2、β-catenin 及GAPDH 兔單克隆抗體（1: 1 000 稀釋）在4℃條件下孵育過(guò)夜，使用含吐溫的磷酸鹽緩沖液清洗3 次，每次5 min，使用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔IgG（1: 2 000 稀釋）室溫孵育2 h，再次用含吐溫的磷酸鹽緩沖液清洗3 次，滴加超敏化學(xué)發(fā)光液，置于凝膠成像儀中拍照，并使用ImageJ 1.8.0 進(jìn)行灰度值分析，計(jì)算各蛋白相對(duì)表達(dá)量。

1.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)采用SPSS 26.0 進(jìn)行處理和分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，符合正態(tài)分布且方差齊，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)骨質(zhì)疏松性骨折大鼠骨密度的影響 與正常對(duì)照組比較，骨質(zhì)疏松性骨折組大鼠骨密度顯著降低（P＜0.05）；與骨質(zhì)疏松性骨折組比較，當(dāng)歸補(bǔ)血湯低、中、高劑量組及阿侖膦酸鈉組大鼠骨密度顯著升高（P＜0.05），且隨著當(dāng)歸補(bǔ)血湯劑量的增加，大鼠骨密度逐漸升高。見(jiàn)表1。

2.2 當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)骨質(zhì)疏松性骨折大鼠血清TNF-α、IL-1β 的影響 與正常對(duì)照組比較，骨質(zhì)疏松性骨折組大鼠血清TNF-α、IL-1β 水平顯著升高（P＜0.05），與骨質(zhì)疏松性骨折組比較，當(dāng)歸補(bǔ)血湯低、中、高劑量組及阿侖膦酸鈉組大鼠血清TNF-α、IL-1β 水平顯著降低（P＜0.05），且隨著當(dāng)歸補(bǔ)血湯劑量的增加，大鼠血清TNF-α、IL-1β 水平逐漸降低。見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠血清TNF-α、IL-1β 水平比較 pg/mL

2.3 當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)骨質(zhì)疏松性骨折大鼠血清ALP、OC的影響 與正常對(duì)照組比較，骨質(zhì)疏松性骨折組大鼠血清ALP、OC 水平顯著升高（P＜0.05），與骨質(zhì)疏松性骨折組比較，當(dāng)歸補(bǔ)血湯低、中、高劑量組及阿侖膦酸鈉組大鼠血清ALP、OC 水平顯著降低（P＜0.05），且隨著當(dāng)歸補(bǔ)血湯劑量的增加，大鼠血清ALP、OC 水平逐漸降低。見(jiàn)表3。

表3 各組大鼠血清ALP、OC 水平比較

2.4 當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)骨質(zhì)疏松性骨折大鼠骨生物力學(xué)的影響 與正常對(duì)照組比較，骨質(zhì)疏松性骨折組大鼠彈性模量、最大應(yīng)力及最大承受力顯著降低（P＜0.05），與骨質(zhì)疏松性骨折組比較，當(dāng)歸補(bǔ)血湯低、中、高劑量組及阿侖膦酸鈉組大鼠彈性模量、最大應(yīng)力及最大承受力顯著升高（P＜0.05），且隨著當(dāng)歸補(bǔ)血湯劑量的增加，大鼠彈性模量、最大應(yīng)力及最大承受力逐漸升高。見(jiàn)表4。

表4 各組大鼠彈性模量、最大應(yīng)力及最大承受力比較

2.5 當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)骨質(zhì)疏松性骨折大鼠股骨病理學(xué)的影響 正常對(duì)照組大鼠股骨組織結(jié)構(gòu)正常，未見(jiàn)明顯病理學(xué)變化，與正常對(duì)照組比較，骨質(zhì)疏松性骨折組大鼠股骨組織骨小梁減少；與骨質(zhì)疏松性骨折組比較，當(dāng)歸補(bǔ)血湯各劑量組阿侖膦酸鈉組大鼠骨小梁逐漸增多，空骨陷窩明顯減少，股骨組織骨質(zhì)疏松性病理組織變化明顯改善。見(jiàn)圖1。

圖1 大鼠股骨病理學(xué)檢查（HE，×200）

2.6 當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)骨質(zhì)疏松性骨折大鼠Wnt3a、DKK1、Runx2 及β-catenin mRNA 水平的影響 與正常對(duì)照組比較，骨質(zhì)疏松性骨折組大鼠Wnt3a、DKK1、Runx2 及β-catenin mRNA 水平顯著降低（P＜0.05），與骨質(zhì)疏松性骨折組比較，當(dāng)歸補(bǔ)血湯低、中、高劑量組及阿侖膦酸鈉組大鼠Wnt3a、DKK1、Runx2 及β-catenin mRNA 水平顯著升高（P＜0.05），且隨著當(dāng)歸補(bǔ)血湯劑量的增加，大鼠Wnt3a、DKK1、Runx2 及β-catenin mRNA 水平逐漸升高。見(jiàn)表5。

表5 各組大鼠Wnt3a、DKK1、Runx2 及β-catenin mRNA 水平比較

2.7 當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)骨質(zhì)疏松性骨折大鼠Wnt3a、DKK1、Runx2 及β-catenin 蛋白水平的影響 當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)骨質(zhì)疏松性骨折大鼠Wnt3a、DKK1、Runx2及β-catenin 蛋白水平的影響顯著降低（P＜0.05），與骨質(zhì)疏松性骨折組比較，當(dāng)歸補(bǔ)血湯低、中、高劑量組及阿侖膦酸鈉組大鼠Wnt3a、DKK1、Runx2及β-catenin 蛋白水平顯著升高（P＜0.05），且隨著當(dāng)歸補(bǔ)血湯劑量的增加，大鼠Wnt3a、DKK1、Runx2 及β-catenin 蛋白水平逐漸升高。見(jiàn)表6，圖2。

圖2 大鼠Wnt3a、DKK1、Runx2 及β-catenin 蛋白水平比較

表6 各組大鼠Wnt3a、DKK1、Runx2 及β-catenin 蛋白水平比較

3 討論

骨質(zhì)疏松主要發(fā)生在中老年人群中，由內(nèi)分泌疾病、慢性腎臟病及血液系統(tǒng)疾病等多種病因引起的骨密度及骨質(zhì)量下降，臨床中以骨微結(jié)構(gòu)破壞及骨脆性增加為主要病理特征。骨質(zhì)疏松患者骨脆性增加，骨折是骨質(zhì)疏松患者常見(jiàn)的并發(fā)癥，且骨質(zhì)疏松性骨折的發(fā)生率高，預(yù)后差，進(jìn)而導(dǎo)致患者活動(dòng)受限，生活不能自理，增加患者肺部感染及褥瘡的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[12]。

當(dāng)歸補(bǔ)血湯載于中醫(yī)學(xué)著作《內(nèi)外傷辨惑論》，具有補(bǔ)氣生血的功效。方中黃芪具有滋陰補(bǔ)血、補(bǔ)脾益氣的功效，當(dāng)歸則具有養(yǎng)血和營(yíng)、浮陽(yáng)秘?cái)康墓πА＝陙?lái)，研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)于骨折愈合具有顯著的促進(jìn)作用。焦明海[13]研究表明，當(dāng)歸補(bǔ)血湯能夠顯著緩解骨折患者疼痛、腫脹等癥狀，減少患者疼痛的發(fā)生；吳興輝等[14]研究表明，當(dāng)歸補(bǔ)血湯能夠顯著提高骨折術(shù)后患者的血紅蛋白及紅細(xì)胞比容，減輕患者貧血表現(xiàn)，促進(jìn)骨折愈合；鄧海峰等[15]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)歸補(bǔ)血湯能夠顯著升高股骨粗隆間骨折術(shù)后患者血紅蛋白水平，并促進(jìn)骨折術(shù)后的愈合；郭華洋等[16]研究表明，當(dāng)歸補(bǔ)血湯能夠顯著提高骨折患者術(shù)后髖關(guān)節(jié)功能，降低患者隱性失血的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。由此可見(jiàn)，當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)于骨折的愈合具有顯著的促進(jìn)作用。

骨密度是評(píng)價(jià)骨質(zhì)疏松的重要指標(biāo)，骨密度降低提示骨質(zhì)疏松發(fā)生或其發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增加[17]。本研究結(jié)果表明，與正常對(duì)照組比較，骨質(zhì)疏松性骨折大鼠骨密度顯著降低，提示造模成功，與骨質(zhì)疏松性骨折大鼠比較，當(dāng)歸補(bǔ)血湯各劑量組大鼠骨密度呈劑量依賴性顯著升高，促進(jìn)骨質(zhì)疏松的恢復(fù)。彈性模量、最大應(yīng)力及最大承受力是評(píng)價(jià)骨生物力學(xué)的重要指標(biāo)，彈性模量、最大應(yīng)力及最大承受力降低表明骨組織生物力學(xué)顯著降低及骨組織功能減退[18]。本研究結(jié)果表明，與正常對(duì)照組比較，骨質(zhì)疏松性骨折大鼠彈性模量、最大應(yīng)力及最大承受力均顯著降低，給予大鼠不同劑量的當(dāng)歸補(bǔ)血湯后，大鼠彈性模量、最大應(yīng)力及最大承受力隨當(dāng)歸補(bǔ)血湯劑量的增加而逐漸升高，提示當(dāng)歸補(bǔ)血湯能夠呈劑量依賴性的顯著修復(fù)骨質(zhì)疏松性骨折大鼠的骨組織功能，恢復(fù)大鼠骨生物力學(xué)指標(biāo)，促進(jìn)骨折大鼠的修復(fù)。

血清ALP、OC在骨組織損傷恢復(fù)中發(fā)揮重要作用，李希寧等[19]研究表明ALP、OC 水平的升高是導(dǎo)致骨質(zhì)疏松及骨組織損傷的重要因素，并能夠抑制成骨細(xì)胞的組織分化，抑延緩骨組織的愈合速度；陳洪燕等[20]研究表明，降低大鼠ALP、OC 水平能夠促進(jìn)新骨的形成，升高骨密度水平。本研究結(jié)果表明，給予骨質(zhì)疏松性骨折大鼠不同劑量的當(dāng)歸補(bǔ)血湯后，大鼠血清ALP、OC 水平呈劑量依賴性顯著降低，提示當(dāng)歸補(bǔ)血湯能夠呈劑量依賴性顯著調(diào)節(jié)骨代謝，促進(jìn)大鼠骨組織結(jié)構(gòu)和功能的恢復(fù)。TNF-α、IL-1β 水平對(duì)于骨折的愈合有較大影響，劉明等[21]研究表明，TNF-α、IL-1β水平的升高會(huì)減緩大鼠骨折愈合速度。本研究結(jié)果表明，骨質(zhì)疏松性骨折大鼠血清TNF-α、IL-1β 水平顯著升高，給予大鼠當(dāng)歸補(bǔ)血湯后，骨質(zhì)疏松性骨折大鼠血清TNF-α、IL-1β 水平呈劑量依賴性顯著降低，提示當(dāng)歸補(bǔ)血湯能夠呈劑量依賴性顯著降低骨質(zhì)疏松性骨折大鼠的炎癥反應(yīng)，緩解大鼠體內(nèi)炎癥狀態(tài)，促進(jìn)骨折的愈合。

Wnt/β-catenin 通路與細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)及代謝有關(guān)，近年來(lái)，研究表明Wnt/β-catenin 通路及相關(guān)蛋白水平異常與骨折的發(fā)生及愈合有關(guān)，史巖等[22]研究發(fā)現(xiàn)，上調(diào)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞Wnt/β-catenin 通路相關(guān)蛋白水平，能夠顯著促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化，對(duì)骨折愈合有顯著的促進(jìn)作用；丁徐等[23]研究表明，雞血藤能夠通過(guò)提高骨質(zhì)疏松性骨折大鼠Wnt/β-catenin 通路蛋白水平，提高大鼠骨密度，促進(jìn)大鼠最大載荷及抗彎強(qiáng)度等骨生物力學(xué)的恢復(fù)；黃曉文等[24]研究表明，升高Wnt/β-catenin 通路相關(guān)蛋白水平能夠顯著促進(jìn)脛骨骨折大鼠骨組織愈合，提高大鼠骨組織愈合評(píng)分，并緩解大鼠體內(nèi)炎癥水平，促進(jìn)大鼠骨折的恢復(fù)，由此可見(jiàn)調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin 通路及相關(guān)蛋白水平可能是促進(jìn)骨折恢復(fù)及治療骨質(zhì)疏松性骨折的有效途徑和方法。本研究探討不同劑量當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)骨折大鼠的修復(fù)作用，發(fā)現(xiàn)與正常對(duì)照組比較，骨質(zhì)疏松性骨折組大鼠Wnt3a、DKK1、Runx2 及β-catenin mRNA 水平降低，與骨質(zhì)疏松性骨折組比較，當(dāng)歸補(bǔ)血湯低、中、高劑量組及阿侖膦酸鈉組大鼠Wnt3a、DKK1、Runx2及β-catenin mRNA 水平升高，提示當(dāng)歸補(bǔ)血湯能夠呈劑量依賴性的顯著提高骨質(zhì)疏松性骨折大鼠的Wnt/β-catenin 通路相關(guān)蛋白水平，激活骨組織Wnt/β-catenin通路，促進(jìn)骨質(zhì)疏松性骨折大鼠的恢復(fù)。

綜上所述，當(dāng)歸補(bǔ)血湯能夠顯著提高骨質(zhì)疏松性骨折大鼠的骨密度，改善大鼠骨生物力學(xué)指標(biāo)，調(diào)節(jié)骨代謝水平，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin 通路有關(guān)。