冉陽(yáng)露，藍(lán)艷茹，王 莉，段廷玉

（1. 蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 / 蘭州大學(xué)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部草牧業(yè)創(chuàng)新重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 / 蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院,甘肅 蘭州 730020；2. 新疆阿勒泰戈寶茶股份有限公司, 新疆 阿勒泰 836500）

羅布麻(Apocynum venetum)又稱野麻、野茶、紅麻、紅花草、茶葉棵子等[1]，主要分白麻和紅麻兩種，為夾竹桃科(Apocynaceae)直立半灌木或多年生宿根草本植物[2]。中國(guó)是世界上羅布麻分布面積最大的國(guó)家[3]，3 個(gè)主要分布區(qū)為西北內(nèi)陸的白麻和紅麻干旱分布區(qū)、北部的紅麻半干旱分布區(qū)、沿海及內(nèi)地的紅麻半濕潤(rùn)及濕潤(rùn)分布區(qū)[4]，在新疆、吉林、青海、河南、山西等十幾個(gè)省(市、自治區(qū))廣泛分布，其中數(shù)新疆維吾爾自治區(qū)羅布麻的分布面積最廣[5-6]。羅布麻具有特殊的組織和器官，如，薄葉片下表皮分布的氣孔器形成孔下室，根、莖的皮層內(nèi)含有深色貯藏物質(zhì)，莖環(huán)繞內(nèi)生韌皮部，根系粗壯，木質(zhì)部發(fā)達(dá)等，使得羅布麻的生存能力極強(qiáng)，多生長(zhǎng)于寒冷、干旱、鹽堿的荒漠地區(qū)，具有耐鹽堿、耐干旱、耐高溫、耐霜凍、耐風(fēng)沙侵蝕等特點(diǎn)，成為保持水土、涵養(yǎng)水源、改良土壤、調(diào)節(jié)氣候、防風(fēng)固沙的荒漠植物之一，同時(shí)在制藥、制茶和紡織等方面也充當(dāng)著重要角色，具有一定的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和生態(tài)效益[7-11]。

羅布麻殼針孢(Septoria apocyni)引致的斑枯病是阿勒泰地區(qū)羅布麻的主要真菌病害之一，蘭州大學(xué)團(tuán)隊(duì)研究發(fā)現(xiàn)該病在新疆阿勒泰栽培和野生羅布麻上發(fā)生普遍，引起葉片病斑，枯黃萎蔫，寄主早衰，病葉率、病株率最高可在50%以上，嚴(yán)重影響羅布麻的產(chǎn)量與品質(zhì)[12]。

近年來(lái)，隨著中醫(yī)藥、保健行業(yè)的發(fā)展，我國(guó)栽培羅布麻面積不斷擴(kuò)大，加之環(huán)境因素的影響以及國(guó)內(nèi)外防控技術(shù)的缺乏，導(dǎo)致該病害發(fā)病嚴(yán)重，蔓延加快，成為限制羅布麻產(chǎn)業(yè)的重要因素。國(guó)內(nèi)外關(guān)于該病害的研究?jī)H限于病原鑒定和寄主范圍測(cè)定，缺乏對(duì)病原生物學(xué)特性的研究。生物學(xué)特性是病原真菌特性的重要內(nèi)容，通過研究羅布麻殼針孢菌的生物學(xué)特性有利于深入了解該病原真菌侵染條件和侵染機(jī)制，在病害防控過程中制定出合理的防控策略。因此，本研究目的在于明確不同培養(yǎng)基、酸堿度、溫度、光照對(duì)菌落生長(zhǎng)的影響，篩選羅布麻殼針孢菌的最佳培養(yǎng)條件，為深入研究該病原菌及病害提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1供試植物

供試宿主植物為甘肅榆中縣和新疆阿勒泰種植的羅布麻，種子均由新疆阿勒泰戈寶麻公司提供。

1.1.2供試菌株

供試菌株羅布麻殼針孢(Septoria apocyni)為新疆阿勒泰地區(qū)和甘肅榆中縣種植羅布麻田病樣分離純化所得。病樣采集自甘肅榆中縣和新疆阿勒泰羅布麻田，用實(shí)驗(yàn)室常規(guī)的病害病原分離方法，將典型有害狀的樣葉用無(wú)菌水沖洗干凈，75%酒精浸泡40 s，5% 次氯酸鈉浸泡1 min，無(wú)菌水清洗3 次，然后用滅菌濾紙進(jìn)行干燥，干燥完成后，用鑷子將其置于新的滅菌濾紙上，滅菌鑷子固定，用切刀切取樣葉病健交界處約2 mm × 2 mm 大小的組織，接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基上，每個(gè)PDA培養(yǎng)基中放5 個(gè)大小約2 mm × 2 mm 的組織，于黑暗條件下25 ℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，每葉片3 個(gè)重復(fù)，選擇僅有羅布麻殼針孢菌落生長(zhǎng)的平板，在菌絲體形成后，用接種針挑取菌絲置于新的PDA 培養(yǎng)基平板上進(jìn)行分離純化，隨后于25 ℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行黑暗培養(yǎng)[13-14]。

1.1.3供試培養(yǎng)基

通過研究白術(shù)(Atractylodes macrocephala)、白芷(Angelica dahurica)、大黃(Rheum palmatum)、黨參(Codonopsis pilosula)等分離出的殼針孢屬真菌在不同培養(yǎng)基平板上的生長(zhǎng)情況和試驗(yàn)結(jié)果[15-25]，本研究最終選定7 種培養(yǎng)基平板進(jìn)行試驗(yàn)，分別為PDA培養(yǎng)基[26]、馬鈴薯蔗糖瓊脂(potato sucrose agar, PSA)培養(yǎng)基[27]、10%羅布麻汁液 + PDA 培養(yǎng)基[28]、20%羅布麻汁液 + 瓊脂培養(yǎng)基[28]、理查德(Richard)培養(yǎng)基[29]、脅本哲氏培養(yǎng)基[15]、V-8 培養(yǎng)基[30]。

1.2 試驗(yàn)方法

將甘肅榆中縣和新疆阿勒泰分離純化的兩個(gè)羅布麻殼針孢菌株(分別簡(jiǎn)寫為GS 和XJ) 在PDA 培養(yǎng)基上25 ℃黑暗條件下培養(yǎng)2 月，在生長(zhǎng)2 月的菌落邊緣用直徑5 mm 的打孔器打出菌餅，接種至直徑9 cm 的培養(yǎng)皿中，每皿1 個(gè)菌餅[31]。

d(菌落凈生長(zhǎng)直徑) =d1(菌落總直徑) -d2(菌餅直徑)，比較各種處理間菌落凈增長(zhǎng)直徑。

v(菌落生長(zhǎng)速率) =d(20 d 時(shí)的菌落凈生長(zhǎng)直徑) /t(培養(yǎng)時(shí)間)，比較各處理間菌落生長(zhǎng)速率與生長(zhǎng)特征。

1.2.1 不同培養(yǎng)基對(duì)菌落生長(zhǎng)的影響

將GS、XJ 兩個(gè)菌株的菌餅分別接種于供試培養(yǎng)基平板上，共7 個(gè)處理，每處理4 個(gè)重復(fù)，25 ℃條件下黑暗培養(yǎng)20 d，每隔4 d 用十字交叉法測(cè)定一次菌落直徑，記錄菌落特征。

1.2.2 黑暗條件下溫度對(duì)菌落生長(zhǎng)的影響

將GS、XJ 菌餅接種于PDA 和10%羅布麻汁液 +PDA 培養(yǎng)基平板上，分別置于5、10、15、20、25、30和35 ℃條件下黑暗培養(yǎng)20 d，共7 個(gè)溫度梯度，每處理4 個(gè)重復(fù)，其他操作同1.2.1。

1.2.3 光照條件對(duì)菌落生長(zhǎng)的影響

將GS、XJ 菌餅接種于PDA 和10%羅布麻汁液 +PDA 培養(yǎng)基平板上，分別置于24 h 連續(xù)光照、24 h 連續(xù)黑暗、12 h 光照12 h 黑暗，共3 個(gè)處理，每處理4 個(gè)重復(fù)，25 ℃條件下連續(xù)培養(yǎng)20 d，其他操作同1.2.1。

1.2.4 pH 對(duì)菌落生長(zhǎng)的影響

用1 mol·L-1NaOH和1 mol·L-1HCl將PDA和10%羅布麻汁液 + PDA 培養(yǎng)基pH 調(diào)成4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10.0，共13 個(gè)處理，將GS、XJ 菌餅接種于不同pH 的PDA 和10%羅布麻汁液 + PDA 培養(yǎng)基平板上，每處理4 個(gè)重復(fù)，25 ℃條件下黑暗培養(yǎng)20 d，其他操作同1.2.1。

1.3 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)按照不同培養(yǎng)條件處理，用Excel 2021 進(jìn)行數(shù)據(jù)匯總整理及表格制作，用JMP IN 4 軟件進(jìn)行培養(yǎng)基和真菌種類間交互效應(yīng)分析，用SPASS 20.0進(jìn)行單因素方差分析，應(yīng)用最小顯著差異法(LSD)對(duì)平均數(shù)進(jìn)行比較(P＜ 0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)基對(duì)菌落生長(zhǎng)的影響

GS 和XJ 兩個(gè)羅布麻殼針孢菌株在供試的7 種培養(yǎng)基上均可以生長(zhǎng)(表1、圖1)，但未產(chǎn)孢。GS 的生長(zhǎng)速率為0.76～1.57 mm·d-1，在PDA、20% 羅布麻汁液 + 瓊脂培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速率顯著高于除V-8外的其余培養(yǎng)基 (P＜ 0.05)，在Richard 培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速率最低(表1)。XJ 的生長(zhǎng)速率為0.52～1.40 mm·d-1，在10%羅布麻汁液 + PDA 培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速率顯著高于脅本哲氏和Richard 培養(yǎng)基，在Richard培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速率依舊最低?？傮w上，GS 和XJ在供試的7 種培養(yǎng)基平板上菌落直徑均存在顯著差異(P＜ 0.000 1) (表2)。GS 在PDA 培養(yǎng)基平板上生長(zhǎng)的最好，XJ 的最適培養(yǎng)基為10% 羅布麻汁液 +PDA，且GS 的生長(zhǎng)速率高于新疆阿勒泰地區(qū)(表1)。同種培養(yǎng)基平板上兩個(gè)菌株菌落直徑也存在顯著差異(P= 0.000 2) (表2)。其中，Richard培養(yǎng)基上兩個(gè)菌株均生長(zhǎng)最慢，但在此培養(yǎng)基上GS 菌株的生長(zhǎng)速率較新疆阿勒泰地區(qū)快46.15% (表1)。另外，培養(yǎng)基種類和兩個(gè)菌株之間存在顯著的交互效應(yīng)(P= 0.001 6) (表2)，且不同培養(yǎng)基平板上GS 和XJ殼針孢菌落大小、顏色和形狀、氣生菌絲和內(nèi)生菌絲的生長(zhǎng)均有所差異(表1、圖1)。

圖1 20 d 時(shí)不同培養(yǎng)基處理下菌落特征Figure 1 Morphological characteristics of colonies under different medium treatments at 20 days

表1 羅布麻殼針孢在7 種培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況Table 1 Growth of Septoria apocyni on Apocynum venetum on seven types of culture media in Xinjiang Altay and Gansu Yuzhong

表2 培養(yǎng)基類型和不同地點(diǎn)菌株之間的交互效應(yīng)Table 2 Interaction effects between medium types and strains at different sites

在PDA 和PSA 培養(yǎng)基上XJ 和GS 的菌落特征相似，氣生菌絲較多，白色絨毛狀、絮狀，圓形凸起，基生菌絲呈黑色或青綠色，氈狀，可生長(zhǎng)至培養(yǎng)基中，一段時(shí)間后培養(yǎng)基底部凹陷，裂開(圖1 A)，不同的是PSA 培養(yǎng)基上的氣生菌絲較PDA 上的少(圖1 B)；在10%羅布麻汁液 + PDA 培養(yǎng)基上XJ 和GS 的氣生菌絲為白色絨毛狀凸起，邊緣不規(guī)則隆起，堅(jiān)硬，基生菌絲呈黑色或紅褐色，氈狀，一段時(shí)間后培養(yǎng)基底部凹陷，裂開，不同的是XJ 的氣生菌絲較GS 多(圖1 C)；在20% 羅布麻汁液 + 瓊脂培養(yǎng)基上XJ 的氣生菌絲白色絨毛狀、絮狀，圓形隆起，基生菌絲白色或淺褐色，少量黑色，可生長(zhǎng)至培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基底部無(wú)凹陷和裂痕(圖1 D)，GS 的氣生菌絲生長(zhǎng)稀疏分散，邊緣不齊，基生菌絲黑色或褐色，可生長(zhǎng)至培養(yǎng)基中，其他同10%羅布麻汁液 + PDA 培養(yǎng)基(圖1 D)；在Richard培養(yǎng)基上XJ 和GS 菌落生長(zhǎng)極其緩慢，黑色，隆起，堅(jiān)硬，氣生菌絲極少；基生菌絲黑色，中心少量紅褐色，培養(yǎng)基底部凹陷，裂開(圖1 E)；在脅本哲氏培養(yǎng)基上XJ 的氣生菌絲呈白色絨毛狀，極規(guī)則圓形凸起，邊緣極規(guī)則圓形；基生菌絲白色、青綠色，培養(yǎng)基底部無(wú)裂痕(圖1 F)，GS 菌落生長(zhǎng)較Richard 平板快，底部裂痕小，其他同Richard(圖1 F)；在V-8 培養(yǎng)基上XJ 的氣生菌絲較多，白色絨毛狀，圓形凸起；基生菌絲白色、青綠色、少量黑色，放射狀，培養(yǎng)基底部無(wú)裂痕(圖1 G)，GS 的氣生菌絲較少，白色絨毛狀，圓形凸起，基生菌絲青綠色、黑色，放射狀(圖1 G)。

2.2 黑暗條件下溫度對(duì)菌落生長(zhǎng)的影響

在供試的兩種培養(yǎng)基上，XJ 與GS 適宜生長(zhǎng)的溫度范圍較廣，于10～30 ℃范圍內(nèi)均能生長(zhǎng)，最適溫度為25 ℃ (表3)。5～25 ℃時(shí)，該病原菌的生長(zhǎng)量隨溫度的升高而升高，25～35 ℃時(shí)隨溫度的升高呈下降趨勢(shì)，25 ℃生長(zhǎng)的最好，高于30 ℃時(shí)，不生長(zhǎng)。25 ℃黑暗條件下，在PDA 培養(yǎng)基上，GS 的生長(zhǎng)量總體上較XJ 的好，4 d 生長(zhǎng)約3.45 mm，8 d 時(shí)菌落直徑增加約9.58 mm，20 d 后菌落凈增長(zhǎng)直徑達(dá)31.43 mm，較XJ 增加1.25 mm；在10%羅布麻汁液 + PDA 培養(yǎng)基上，XJ 的生長(zhǎng)量則較GS 更好，4 d 生長(zhǎng)約0.70 mm，8 d 時(shí)菌落直徑增加約7.30 mm，20 d 后菌落凈增長(zhǎng)直徑達(dá)29.54 mm，較GS 增加3.44 mm。上述結(jié)果表明，5 和35 ℃均能抑制該菌的正常生長(zhǎng)發(fā)育；15、20、25 和30 ℃溫度處理下，XJ 與GS 于不同培養(yǎng)基上黑暗培養(yǎng)20 d 時(shí)菌落生長(zhǎng)存在差異 。

表3 溫度對(duì)羅布麻殼針孢菌落凈增長(zhǎng)直徑的影響Table 3 Effect of temperature on net growth diameter of colony of Septoria apocyni mm·d-1

2.3 光照條件對(duì)菌落生長(zhǎng)的影響

在供試的兩種培養(yǎng)基上，XJ 和GS 均在光暗交替條件下菌絲生長(zhǎng)較好。于PDA 培養(yǎng)基上，20 d 時(shí)菌落凈增長(zhǎng)直徑分別可以達(dá)到30.56 和26.28 mm；于10%羅布麻汁液 + PDA 培養(yǎng)基上，分別可達(dá)28.90和27.90 mm。PDA 培養(yǎng)基上，XJ 于連續(xù)黑暗和光暗交替條件下，20 d 時(shí)菌落凈增長(zhǎng)直徑均顯著大于持續(xù)光照(P＜ 0.05)，其他未表現(xiàn)出明顯差異；光暗交替條件下，PDA 培養(yǎng)20 d 后XJ 菌落凈增長(zhǎng)直徑均顯著高于GS (P＜ 0.05)，與10%羅布麻汁液 + PDA培養(yǎng)基平板上的則無(wú)明顯差異(P＞ 0.05)。由此可見，XJ 與GS 于3 類光照處理下，適宜生長(zhǎng)的光照條件相同；總體上，20 d 時(shí)不同菌于不同培養(yǎng)基上菌落凈增長(zhǎng)無(wú)明顯差異(P＞ 0.05) (表4)。

表4 光照對(duì)羅布麻殼針孢菌落凈增長(zhǎng)直徑的影響Table 4 Effect of light on net growth diameter of colony of Septoria apocyni mm·d-1

2.4 pH 對(duì)菌落生長(zhǎng)的影響

如 表5 所列，在供試的兩種培養(yǎng)基上，XJ 與GS 生長(zhǎng)的pH 范圍較寬，pH 于4～10 內(nèi)均能生長(zhǎng)?？傮w上，隨著pH 的增加，XJ 與GS 在兩種培養(yǎng)基上的凈增長(zhǎng)直徑總體上呈先上升后下降的趨勢(shì)。在PDA 和10% 羅 布 麻 汁 液 + PDA 培 養(yǎng) 基 上，XJ 在pH 為5.5 時(shí)菌落生長(zhǎng)的最好，GS 則在pH 為5 時(shí)生長(zhǎng)的最好。pH 為5.5，25 ℃黑暗培養(yǎng)20 d 時(shí)，XJ 菌落凈增長(zhǎng)直徑在兩種培養(yǎng)基上可達(dá)30.00 和29.07 mm；pH 為5，25 ℃黑暗培養(yǎng)20 d 時(shí)，GS 菌落凈增長(zhǎng)直徑可達(dá)33.60 和34.88 mm，同比16 d，分別增加6.82、9.62、10.73 和10.43 mm。結(jié)果表明，pH 過高過低均能限制該菌的正常生長(zhǎng)發(fā)育，黑暗培養(yǎng)20 d時(shí)，pH 分別為4、4.5、5、5.5、6、6.5、9、9.5、10 時(shí)，兩種菌于兩種培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)存在顯著差異(P＜0.05)，pH 分 別 為4 和9.5 時(shí)，PDA 上 培 養(yǎng)20 d 的XJ 菌落凈增長(zhǎng)直徑顯著低于PDA 上的GS 和10%羅布麻汁液 + PDA 上的XJ 與GS，pH 分別為4.5 和5 時(shí)，PDA 上的XJ 菌落凈增長(zhǎng)直徑顯著低于GS，且10%羅布麻汁液 + PDA 上的XJ 菌落凈增長(zhǎng)直徑也顯著低于GS，pH 分別為7、7.5、8、8.5 時(shí)，兩種菌于兩種培養(yǎng)基上菌落凈增長(zhǎng)直徑則無(wú)明顯差異(P＞ 0.05)。

表5 pH 對(duì)羅布麻殼針孢菌落凈增長(zhǎng)直徑的影響Table 5 Effect of pH on net growth diameter of colony of Septoria apocyni mm·d-1

續(xù)表5Table 5 (Continued)

3 討論與結(jié)論

殼針孢屬真菌可以侵染30 多種藥用植物，引起12 科24 種真菌病害[32]，此外，還侵染小麥(Triticum aestivum)[33]、大麥(Hordeum vulgare)[34]、大豆(Glycine max)[16]等多種糧食作物，對(duì)寄主產(chǎn)量和品質(zhì)造成嚴(yán)重影響。其引致羅布麻斑枯病的報(bào)道可追溯到1933 年，Lantzova 和Tcheenyak[35]在俄羅斯地區(qū)的大麻狀羅布麻(A. cannabinum)和伸展型羅布麻(A.androsaemifolium)上發(fā)現(xiàn)了殼針孢菌，同年，在中亞地區(qū)的西伯利亞羅布麻(A. sibiricum)上也進(jìn)行了報(bào)道，而后2014 年蘭州大學(xué)團(tuán)隊(duì)報(bào)道了羅布麻殼針孢葉斑病新病害，對(duì)其發(fā)病癥狀、病原種類、致病性及寄主范圍等進(jìn)行了相關(guān)調(diào)查、鑒定與報(bào)道[36]，但缺乏對(duì)病原生物學(xué)特性的研究。

本研究首次較系統(tǒng)地研究了引致羅布麻斑枯病的病原真菌羅布麻殼針孢(Septoria apocyni)菌絲生長(zhǎng)所需的培養(yǎng)條件，明確了不同培養(yǎng)基、溫度、光照、pH 處理對(duì)該菌菌絲生長(zhǎng)的影響。與白術(shù)斑枯病菌(Septoria atractylodis)、白芷斑枯病菌(Septoria dearnessii)、大黃斑枯病菌(Septoria palmati)等球殼孢屬真菌相似[23-25]，羅布麻殼針孢菌生長(zhǎng)極其緩慢，培養(yǎng)基中加入寄主汁液能夠促進(jìn)菌落生長(zhǎng)。兩個(gè)羅布麻殼針孢菌株的最適生長(zhǎng)溫度均為25 ℃，說(shuō)明該菌為中溫真菌，低于5 ℃或高于30 ℃菌落均不生長(zhǎng)；最適生長(zhǎng)pH 為5～5.5，說(shuō)明該菌偏愛弱酸性環(huán)境，pH 過高過低也會(huì)抑制該菌的正常生長(zhǎng)發(fā)育。不同光照處理中，光暗交替最適宜該菌的生長(zhǎng)。在7 種培養(yǎng)基處理下，兩個(gè)羅布麻殼針孢菌株均未產(chǎn)孢，但兩個(gè)菌株于不同培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況存在差異，甘肅榆中縣羅布麻殼針孢菌在PDA 培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的較好，新疆阿勒泰羅布麻殼針孢菌則在10%羅布麻汁液 + PDA 培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的較好。培養(yǎng)20 d 時(shí)，PDA與PSA 兩種培養(yǎng)基上的殼針孢菌落特征相似，可能是由于蔗糖中一半為葡糖糖，葡糖糖提供的碳源與蔗糖提供的碳源相似，導(dǎo)致該菌對(duì)兩種碳源的利用率更接近，因而PDA 與PSA 的菌落特征相似，其他培養(yǎng)基平板上菌落大小、形態(tài)顏色卻存在差異[37]。

該菌適合在中溫環(huán)境中生長(zhǎng)，此結(jié)果與姚遠(yuǎn)等[22]報(bào)道的龍膽草斑枯病菌(Rough gentian)、鄭艷等[24]報(bào)道的白芷斑枯病菌生物學(xué)特性的研究結(jié)果一致。溫度過高過低均抑制生長(zhǎng)，源于高溫破壞了生物膜結(jié)構(gòu)和蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)，例如：氫鍵、離子鍵、疏水力和范德華力等非共價(jià)鍵會(huì)隨著溫度的升高被破壞，進(jìn)而使蛋白質(zhì)永久變性，酶失活，高溫對(duì)病原真菌的抑制性是致死的、不可逆的；而低溫僅是抑制了菌落生長(zhǎng)速度，降低了相關(guān)酶的代謝活性，是暫時(shí)的、可恢復(fù)的[38-39]。菌落適宜生長(zhǎng)的pH 范圍與靳學(xué)慧等[16]的大豆殼針孢菌(Septoria glycines)、王艷等[19]的大黃殼針孢菌研究結(jié)果一致，pH 過高過低也會(huì)抑制菌落的生長(zhǎng)，作用機(jī)理與溫度相似。

光是地球上所有生命必不可少的一種環(huán)境信號(hào)，調(diào)節(jié)著生物體的正常生長(zhǎng)發(fā)育，包括病原真菌的生存生長(zhǎng)、新陳代謝和繁殖傳播[40-42]。本研究表明，24 h 光照24 h 黑暗交替處理下，GS 與XJ 菌落生長(zhǎng)得最好，但各光照處理間無(wú)顯著差異(P＞ 0.05)，這與威靈仙(Septoria clematidis-flammulae)[15]、大黃[19]、龍膽草(Septoria gentianae)[22]、玄參(Septoria scrophulariae)[28]、落羽杉斑枯病病菌(Pestalotiopsis maculans)[43]的研究結(jié)果一致，也有報(bào)道表明蝴蝶花斑枯病病菌(Fusarium oxysporum)在連續(xù)黑暗條件下生長(zhǎng)得最好[17]，可能是不同寄主植物間存在差異。

羅布麻是一種稀有的野生植物，在制藥、制茶、紡織以及生態(tài)環(huán)境建設(shè)等方面發(fā)揮著重要作用，由羅布麻殼針孢(Septoria apocyni)引致的斑枯病嚴(yán)重?fù)p害了羅布麻產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。本文對(duì)該菌的生物學(xué)特性進(jìn)行了較為全面的研究，表明羅布麻殼針孢喜中溫、弱酸性和光暗交替的生長(zhǎng)環(huán)境，GS 和XJ 的最適生長(zhǎng)培養(yǎng)基分別為PDA 和10% 羅布麻汁液 +PDA。這為進(jìn)一步研究羅布麻斑枯病提供了基礎(chǔ)，但具體的提早預(yù)防與有效控制措施亟需進(jìn)一步開展試驗(yàn)進(jìn)行研究。