黃永堂，姚桂林 ，孫延林，鄭鴻燾，顧彩紅，樊亮

（1.高臺縣動物疫病預(yù)防控制中心 甘肅張掖 734300；2.高臺縣宣化鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站 甘肅張掖 734300）

動物斷奶腹瀉是養(yǎng)殖業(yè)頑癥痼疾，肉羊養(yǎng)殖補欄階段也是如此，特別是2014 年小反芻獸疫進入內(nèi)地以后，二者互相作用，對肉羊養(yǎng)殖影響較為深切。2020 年以來，高臺縣肉羊養(yǎng)殖持續(xù)向好，羔羊價格持續(xù)走高，出現(xiàn)羔羊搶購潮，羔羊斷奶日齡越發(fā)提前，養(yǎng)殖戶補欄育肥肉羊月齡最小的只有20 日齡，加之?dāng)嗄?、運輸、混群及寒冷應(yīng)激等因素影響，導(dǎo)致育肥肉羊養(yǎng)殖戶補欄后，腹瀉發(fā)生情況較為普遍，發(fā)病率、死亡率較往年都有較大幅度增加。在此階段如果混合感染小反芻獸疫，會進一步加劇病癥，造成巨大的經(jīng)濟損失。為探索和創(chuàng)新新補欄肉羊補欄至15d 內(nèi)的疾病防控措施，筆者根據(jù)高臺縣部分養(yǎng)殖戶實踐經(jīng)驗、個人臨床實踐及筆者所在單位開展的小劑量動物疫苗不同免疫劑量對免疫效果影響試驗，進行了育肥肉羊補欄時緊急免疫注射小反芻獸疫疫苗與三聯(lián)四防滅活疫苗對補欄應(yīng)激階段疾病防控效果驗證與研究。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

在高臺縣轄區(qū)隨機選擇1 個存欄量700 只左右，年周轉(zhuǎn)達到3,000 只的養(yǎng)羊場，在2021 年1 月、4 月分別選取1.5～2 月齡從市場收購準(zhǔn)備入欄的疫苗免疫情況不明的健康羔羊40 只作為試驗羊，免疫前對試驗羊進行小反芻獸疫基礎(chǔ)抗體滴度測定，所選試驗羊布魯氏菌病抗體陰性的選擇為試驗對象。

1.2 試驗疫苗

1 月份試驗疫苗為羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、腸毒血癥三聯(lián)四防滅活疫苗，山東綠都生物科技有限公司生產(chǎn)，批號2 002005；小反芻獸疫活疫苗，新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)，批號2020004-2。4 月份試驗疫苗為羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、腸毒血癥三聯(lián)四防滅活疫苗，山東綠都生物科技有限公司生產(chǎn)，批號2 101002；小反芻獸疫活疫苗，新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)，批號2020032。

1.3 檢測試劑

小反芻獸疫病毒阻斷ELISA 抗體檢測試劑盒，購自青島立見生物科技有限公司，生產(chǎn)批號020 172003；暫無羊三聯(lián)四防抗體檢測試劑盒。

1.4 試驗分組

1 月、4 月分別隨機選取從市場收購準(zhǔn)備入欄的1.5～2 月齡羔羊40 只，隨機分成2 組，每組20 只，依次為實驗組1～20 號、對照組20～40 號。

1.5 試驗及免疫方法

1 月組：試驗組在補欄卸車過程中進行疫苗免疫，注射部位為左右頸部各注射一針。注射時嚴(yán)格消毒，規(guī)范操作。免疫劑量：羊三聯(lián)四防滅活疫苗5.0mL/只，小反芻獸疫活疫苗2 頭份/只。對照組不進行任何免疫。

4 月組：試驗組在補欄卸車過程中進行疫苗免疫，注射部位為左右頸部各注射一針。注射時嚴(yán)格消毒，規(guī)范操作。免疫劑量：羊三聯(lián)四防滅活疫苗5.0mL/只，小反芻獸疫活疫苗3 頭份/只。對照組不進行任何免疫。

1.6 飼養(yǎng)管理

按照露天正常飼養(yǎng)管理，與其他群體同等水平飼養(yǎng)管理即可。

1.7 臨床不良反應(yīng)觀察

試驗組主要觀察補欄、低溫應(yīng)激與小反芻獸疫活疫苗，羊快疫、猝狙、羔羊痢疾、腸毒血癥三聯(lián)四防滅活疫苗聯(lián)合免疫注射疊加階段，羊只的精神狀況、采食、飲水是否正常和是否有其他嚴(yán)重不良反應(yīng)等，同時分1～3d、4～7d、8～15d 兩個階段分別觀察腹瀉及其它疾病發(fā)生情況；對照組主要觀察補欄、低溫應(yīng)激階段羊只的精神狀況、采食、飲水是否正常和是否有其他嚴(yán)重不良反應(yīng)等，同時分1～3d、4～7d、8～15d 兩個階段分別觀察腹瀉及其它疾病發(fā)生情況。

1.8 免疫抗體檢測

分別于免疫后7d、10d 和15d 經(jīng)頸靜脈采血，分離血清，用于小反芻獸疫免疫抗體檢測。小反芻獸疫免疫抗體檢測：采用阻斷ELISA 方法，具體操作參照試劑盒說明書進行。判定標(biāo)準(zhǔn)：PB＞50%，抗體陽性，PB≤50%，抗體陰性。

1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

臨床反應(yīng)及小反芻獸疫疫苗免疫抗體檢測按實際觀察和實驗室檢測數(shù)據(jù)進行分類統(tǒng)計，小反芻獸疫免疫抗體以抗體陽性率表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 臨床觀察

1 月組：外界氣溫-11～-24℃，試驗組疫苗注射后，試驗組與對照組在3d 內(nèi)精神、體溫、采食、飲水等方面均未見明顯臨床癥狀。4～7d 內(nèi)腹瀉發(fā)生率具有明顯差異。8～15d 腹瀉發(fā)生率具有明顯差異（見表1）。

表1 臨床癥狀統(tǒng)計情況（1月組）

4 月組：外界氣溫3～16℃，試驗組疫苗注射后，試驗組與對照組在3d 內(nèi)精神、體溫、采食、飲水等方面均未見明顯臨床癥狀。4～7d 內(nèi)腹瀉發(fā)生率具有明顯差異。8～15d 腹瀉發(fā)生率具有明顯差異（見表2）。

表2 臨床癥狀統(tǒng)計情況（4月組）

2.2 小反芻獸疫免疫抗體產(chǎn)生情況

從表3 可以看出，每組試驗在7d 時抗體水平都能達到最低群體保護率，2 頭份組，抗體陽性率在70%以上。3 頭份組，抗體陽性率可以達到80%以上。

表3 小反芻獸疫抗體檢測統(tǒng)計情況

3 結(jié)論

育肥肉羊補欄時緊急免疫注射小反芻獸疫活疫苗與三聯(lián)四防滅活疫苗，通過1 月氣溫極低與4 月氣溫正常情況下兩次臨床對比試驗，對低溫與正常氣溫補欄應(yīng)激階段羊只影響，臨床癥狀差異不顯著，未見不良反應(yīng)加重現(xiàn)象。但對育肥肉羊補欄期間斷奶及應(yīng)激腹瀉有較好的預(yù)防作用，腹瀉發(fā)生率明顯下降，發(fā)生后治愈率也得到明顯提升。同時因提前進行2～3 倍小反芻獸疫疫苗免疫，70%～80%以上補欄育肥肉羊7d 內(nèi)即可產(chǎn)生小反芻獸疫疫苗免疫抗體，可以在最短時間內(nèi)有效阻斷小反芻獸疫病毒的侵襲。同時加量免疫：①可以大幅度提升首次免疫抗體水平；②對不能做到全進全出的育肥肉羊養(yǎng)殖場起到了緊急免疫的作用，可以有效阻斷因羊只來源復(fù)雜而造成疫情蔓延的幾率，大大降低了補欄應(yīng)激階段疫病發(fā)生的幾率；③提前免疫，可以充分利用斷奶腹瀉發(fā)生的窗口期，使補欄羊只及時產(chǎn)生免疫抗體，降低腹瀉發(fā)生的幾率。

2020—2021 年，通過對高臺縣轄區(qū)內(nèi)新補欄育肥肉羊?qū)嵤坝嗜庋蜓a欄時緊急免疫注射小反芻獸疫活疫苗與三聯(lián)四防滅活疫苗效果研究”試驗及推廣，疫苗注射應(yīng)激反應(yīng)率基本可以忽略不計，但對腹瀉發(fā)生率有明顯的防控效果，小反芻獸疫免疫抗體血清抽樣檢測抗體合格率達90%以上。

育肥肉羊補欄時緊急免疫注射小反芻獸疫活疫苗與三聯(lián)四防滅活疫苗對羊只的精神狀況、采食、飲水等沒有顯著影響，也沒有增加斷奶、運輸、混群及寒冷應(yīng)激副反應(yīng)，通過綜合分析，可在實際工作中大規(guī)模推廣“育肥肉羊補欄時緊急免疫注射小反芻獸疫活疫苗與三聯(lián)四防滅活疫苗”免疫操作程序，減少育肥肉羊補欄階段疾病發(fā)生，最大限度提升育肥肉羊養(yǎng)殖效益。

本次試驗不足之處在于缺少羊三聯(lián)四防滅活疫苗免疫檢測試劑，項目實施中對羊三聯(lián)四防滅活疫苗的免疫效果未進行評價，影響試驗的完整性，建議我國科研工作者，能夠盡快開發(fā)相關(guān)檢測產(chǎn)品，為基層工作人員檢測提供產(chǎn)品保障。但根據(jù)筆者臨床實踐，在三聯(lián)四防滅活疫苗免疫后12d即可產(chǎn)生抗體，阻斷相關(guān)疾病傳播。

育肥肉羊補欄時緊急免疫注射疫苗種類，各地也可以根據(jù)本地疫病流行或威脅程度，把小反芻獸疫、羊痘、三聯(lián)四防、口蹄疫隨機聯(lián)合，統(tǒng)籌考慮，都可以取得較好的防控效果。但各地實際情況不一，在實際應(yīng)用時，一定要先做好小群實驗，取得本地數(shù)據(jù)，確保安全應(yīng)用。