薛 站， 霍曉敏， 張雅昆， 王亭亭， 曾艷榮， 譚承建

(貴州民族大學(xué)，貴州貴陽 550025)

黃花棘豆(a Bunge)是豆科棘豆屬多年生草本植物，俗稱馬絆腸、團(tuán)巴草，是我國新疆、西藏、青海、甘肅等西部地區(qū)草場的一種毒草。馬、牛、綿羊、山羊等牲畜連續(xù)采食30～40 d即出現(xiàn)以運(yùn)動機(jī)能障礙如搖頭、眼睛呆滯、反應(yīng)遲鈍、步態(tài)蹣跚、四肢無力、后肢麻痹等為特征的中毒癥狀。出現(xiàn)中毒癥狀的牲畜最終將死亡，給當(dāng)?shù)匦竽翗I(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

黃花棘豆根系發(fā)達(dá)，抗旱、抗寒、耐鹽堿能力及繁殖能力強(qiáng)，分布面積廣，是優(yōu)良的固沙、防風(fēng)植被。近年來，由于亂砍濫伐、土地荒漠化，該植物迅速蔓延，成為草原優(yōu)勢種群，給草原生態(tài)和畜牧業(yè)帶來較大壓力。前期從該植物中發(fā)現(xiàn)了結(jié)構(gòu)新穎的喹諾里西啶類生物堿，并合成槐定堿衍生物，相關(guān)化合物表現(xiàn)出抗乙型肝炎病毒(HBV)、抗腫瘤和對斜紋夜蛾幼蟲的殺蟲活性。為進(jìn)一步豐富黃花棘豆生物堿成分的基礎(chǔ)研究，為其資源化利用提供依據(jù)，本研究繼續(xù)對該植物的化學(xué)成分進(jìn)行研究，并評價相關(guān)化合物對斜紋夜蛾的殺蟲活性。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)備及材料

Ultimate3000高效液相色譜儀(HPLC)，購自中國賽默飛世爾科技有限公司；XBbridge BEH C色譜柱(10 mm×250 mm)，購自美國Waters公司；ODS柱色譜材料，購自德國Merck公司；三用紫外分析儀ZF-6，購自上海嘉鵬科技有限公司；數(shù)顯旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀BUCHI Rotavapor R-3，購自瑞士步琦有限公司；柱層析用硅膠、薄層層析硅膠板GF254，購自青島海洋化工廠；Sephadex LH-20型羥丙基葡聚糖凝膠，購自瑞典Pharmacia公司；Bruker AV Neo-400 MHz 核磁共振儀、Bruker AV Neo-600 MHz 核磁共振儀，購自德國Bruker公司；Waters Xevo G2-S QTOF質(zhì)譜儀，購自美國Waters公司。試驗所用色譜級試劑均購自上海星可高純?nèi)軇┯邢薰?，其他提取分離試劑均為國產(chǎn)分析純。

黃花棘豆植物樣品于2016年8月采自青海省湟中縣，由青海大學(xué)莫重輝教授定為黃花棘豆，憑證標(biāo)本(Zhao-BY-201603)保存于西北農(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院有毒植物研究室。供試斜紋夜蛾()蟲卵購自濟(jì)源科云生物有限公司，在實(shí)驗室常溫[(27±2) ℃]下用白菜飼養(yǎng)，相對濕度為40%～60%，其間不接觸任何藥劑，卵孵化后挑選大小一致且健康的3齡幼蟲供試。

1.2 提取與分離

干燥黃花棘豆全草50 kg經(jīng)粉碎后用95%乙醇熱回流浸提3次，每次2 h，合并后通過減壓濃縮得到浸膏5 kg，將浸膏用等體積沸水捻溶，用2 mol/L HCl調(diào)節(jié)pH值至1～3，用等量二氯甲烷萃取3次，酸水液再經(jīng)2 mol/L NaOH水溶液調(diào)節(jié)pH值至 10～11，再用等量二氯甲烷萃取3次。回收濃縮二氯甲烷層得到總生物堿310 g。將其中210 g總堿采用硅膠柱層析，用二氯甲烷-甲醇(體積比為 100 ∶1～1 ∶1，下同為體積比)進(jìn)行梯度洗脫，得到8個部分(A-G)。

A段(70.32 g)經(jīng)硅膠柱層析、Sephadex LH-20(甲醇)和半制備HPLC分離得到化合物7(19.4 mg)。

B段(28.44 g)經(jīng)硅膠柱層析(石油醚-二乙胺50 ∶1～5 ∶1)梯度洗脫得到B～B。B(506.6 mg)經(jīng)Sephadex LH-20(二氯甲烷-甲醇 1 ∶1)及硅膠柱層析分離純化得到化合物21(7.0 mg)；B(660.0 mg)經(jīng)Sephadex LH-20(甲醇)分離得到化合物1(621.3 mg)；B經(jīng)Sephadex LH-20(甲醇)和半制備HPLC分離得到化合物2(94.1 mg)、化合物16 (7.8 mg)；B(160.6 mg)經(jīng)硅膠柱層析，先用乙酸乙酯-甲醇(10 ∶1)洗脫，再經(jīng)半制備HPLC分離得到化合物14(7.1 mg)、化合物15(6.7 mg)、化合物18(16.9 mg)；B(3.017 8 g)多次經(jīng)硅膠柱層析并結(jié)合半制備HPLC，得到化合物10(1.088 5 g)、化合物11(227.6 mg)、化合物12(76.0 mg)。

C段(10.04 g)經(jīng)硅膠柱層析，用石油醚-二乙胺(50 ∶1～2 ∶1)梯度洗脫得到C～C。C(220.9 mg)多次經(jīng)半制備HPLC分離得到化合物6(49.6 mg)、化合物19(8.6 mg)、化合物20(3.7 mg)；C(492.0 mg)經(jīng)硅膠柱層析和半制備HPLC分離得到化合物8(80.2 mg)；C經(jīng)Sephadex LH-20(甲醇)和反復(fù)硅膠柱層析，得到化合物3(101.8 mg)、化合物4(735.5 mg)、化合物9 (11.7 mg)；C(1.039 0 g)先用ODS柱色譜進(jìn)行粗分，再經(jīng)硅膠柱層析和凝膠柱層析純化得到化合物17(101.3 mg)。

D段(30.80 g)經(jīng)ODS、Sephadex LH-20(甲醇)及硅膠柱層析得到化合物13(4.0 mg)、化合物5(31.2 mg)。

1.3 單體化合物對斜紋夜蛾的殺蟲活性

將供試生物堿分別用5%吐溫-80溶解后稀釋成10.0 mg/mL，采用浸蟲浸葉法對斜紋夜蛾幼蟲進(jìn)行毒力測定。將新鮮無藥白菜()葉片用打孔器打成直徑為1.5 cm的葉碟，置于不同濃度藥液中浸漬20 s，取出瀝去多余藥液后水平攤放在置有保濕濾紙的培養(yǎng)皿(直徑為9 cm)中，自然晾至表面無水。選取大小一致的3齡試蟲，浸漬藥液中5 s取出，除去幼蟲體表多余藥液后將其放在上述培養(yǎng)皿中，以5%吐溫-80處理為陰性對照，以苦參堿處理為陽性對照。每個處理重復(fù)3次，每次重復(fù)30頭幼蟲，最后用保鮮膜封口并扎孔透氣。輕輕觸動蟲體，若幼蟲干癟或不能正常爬行則視為死亡。分別于24、48、72 h后檢查并記錄死亡蟲數(shù)，按以下公式計算死亡率。若空白死亡率<5%，無需校正；空白死亡率在5%～20%之間，需進(jìn)行校正；對照死亡率>20%，試驗需重做。

2 結(jié)果與分析

2.1 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：CHNO，白色晶體，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；電噴霧質(zhì)譜(ESI-MS)：249[M+H]。H NMR (600 MHz，CDOD)：4.25 (1H，dd，=12.8，4.3 Hz，H-17a)，3.81 (1H，m，H-11)，3.01 (1H，t，=12.8 Hz，H-17b)，2.82 (2H，m，H-2a，H-10a)，2.30-1.97 (7H，m)，1.85-1.42 (12H，m)；C NMR (150 MHz，CDOD)：172.0 (C-15)，65.1 (C-6)，58.3(C-2)，58.2 (C-10)，54.7 (C-11)，44.6 (C-17)，42.8 (C-7)，36.9 (C-5)，33.4 (C-14)，28.8 (C-12)，28.0 (C-4)，27.2 (C-8)，22.1 (C-3)，21.6 (C-9)，19.6 (C-13)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]中的報道基本一致，故化合物1鑒定為苦參堿。

化合物2：CHNO，白色晶體，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：249 [M+H]。H NMR (400 MHz，CDCl)：3.64 (1H，t，=13.0 Hz，H-11)，3.52 (1H，dd，=12.7，4.5 Hz，H-17a)，2.74 (1H，dd，=9.4，2.6 Hz，H-17b)；C NMR (100 MHz，CDCl)：170.4 (C-15)，61.0 (C-6)，55.7 (C-2)，52.5 (C-11)，51.9 (C-10)，43.0 (C-17)，39.0 (C-7)，32.5 (C-14)，30.5 (C-5)，27.1 (C-12)，26.6 (C-4)，21.2 (C-3)，21.1 (C-8)，20.0 (C-9)，18.1 (C-13)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]中的報道基本一致，故化合物2鑒定為異苦參堿。

化合物3：CHNO，白色晶體，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：249 [M+H]。H NMR (400 MHz，CDOD)：4.58 (1H，dd，=13.0，4.1 Hz，H-17a)，3.15 (1H，m，H-11)，2.90-2.80 (2H，m，H-2，H-10)；C NMR (100 MHz，CDOD)：171.7 (C-15)，71.5 (C-6)，61.4 (C-11)，57.3 (C-10)，56.7 (C-2)，47.4 (C-17)，47.1 (C-7)，40.1 (C-5)，33.4 (C-14)，29.1 (C-12)，28.1 (C-4)，27.5 (C-8)，25.4 (C-3)，25.3 (C-9)，19.9 (C-13)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]中的報道基本一致，故化合物3鑒定為別苦參堿。

化合物4：CHNO，白色晶體，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：249 [M+H]。H NMR (400 MHz，CDOD)：3.38-3.15 (3H，m，H-11，H2-17)，2.79 (2H，m，H-2a，10a)，2.25 (3H，m，H2-14，H-6)，2.11 (2H，m，H-2b，H-10b)，1.94 (2H，m，H-3a，H-5)，1.86-0.99 (12H，m)；C NMR (100 MHz，CDOD)：172.5 (C-15)，63.6 (C-6)，57.4 (C-2)，56.7 (C-11)，50.7 (C-10)，48.4 (C-17)，41.7 (C-7)，33.0 (C-14)，31.4 (C-5)，30.7 (C-12)，28.6 (C-4)，23.6 (C-3)，22.9 (C-8)，22.8 (C-9)，19.5 (C-13)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]中的報道基本一致，故化合物4鑒定為槐定堿。

化合物5：CHNO，淡黃色油狀物，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：265 [M+H]。HNMR (400 MHz，CDOD)：3.95 (1H，dd，=13.4，7.8 Hz，H-17a)，3.18 (1H，dd，=13.5，8.6 Hz，H-17b)；C NMR (100 MHz，CDOD)：172.4 (C-15)，73.8 (C-6)，72.0 (C-2)，60.4 (C-11)，59.4 (C-10)，48.1 (C-17)，36.7 (C-7)，32.9 (C-14)，30.8 (C-5)，29.4 (C-12)，28.2 (C-4)，24.6 (C-3)，23.0 (C-8)，20.0 (C-9)，18.8 (C-13)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]中的報道基本一致，故化合物5鑒定為氧化槐定堿。

化合物6：CHNO，白色固體，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：247 [M+H]。HNMR (400 MHz，CDCl)：4.24 (1H，d，=11.8 Hz，H-17a)，3.14 (1H，t，=12.6 Hz，H-17b)；C NMR (100 MHz，CDCl)：168.4(C-15)，128.0 (C-11)，115.2 (C-7)，61.6(C-6)，57.1 (C-10)，55.4 (C-2)，40.6 (C-17)，32.6 (C-14)，31.8 (C-5)，29.0 (C-12)，27.0 (C-4)，26.8 (C-8)，24.4 (C-4)，21.5(C-3)，19.5 (C-13)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]中的報道基本一致，故化合物6鑒定為(—)-7，11-去氫苦參堿。

化合物7：CHNO，白色晶體，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：247 [M+H]。HNMR (600 MHz，CDOD)：5.87 (1H，dm，=10.2 Hz，H-12)，5.72 (1H，dm，=10.4 Hz，H-13)，4.38 (1H，m，H-11)，4.25 (1H，dd，=12.7，4.5 Hz，H-17a)，3.05 (1H，t，=12.2 Hz，H-17b)，2.81 (2H，m，H2-12)，2.81 (2H，m，H2-12)；C NMR (150 MHz，CDOD)：168.7(C-15)，125.5(C-13)，123.2(C-12)，65.2(C-6)，58.4 (C-2)，58.2 (C-10)，56.3 (C-11)，45.7 (C-7)，43.0 (C-17)，37.3 (C-5)，32.3 (C-14)，28.7 (C-4)，27.5 (C-8)，22.1 (C-3)，21.9 (C-9)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]中的報道基本一致，故化合物7鑒定為12，13-去氫苦參堿。

化合物8：CHNO，白色晶體，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：247 [M+H]。HNMR (400 MHz，CDOD)：5.90 (1H，dm，=9.4 Hz，H-12a)，5.77 (1H，dm，=9.8 Hz，H-13)，3.96 (1H，m，H-11)，3.46 (1H，dd，=13.4，10.8 Hz，H-17a)，3.36 (1H，dd，=13.7，6.2 Hz，H-17b)，2.95-2.76 (4H，m)；C NMR (100 MHz，CDOD)：169.4 (C-15)，125.2 (C-12)，122.4 (C-13)，63.4 (C-6)，58.5 (C-11)，56.5 (C-2)，50.4 (C-10)，48.7 (C-17)，43.2 (C-7)，32.4 (C-14)，31.6 (C-4)，30.2 (C-5)，23.6 (C-3)，22.8 (C-8)，22.3 (C-9)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]中的報道基本一致，故化合物8鑒定為12，13-去氫槐定堿。

化合物9：CHNO，白色晶體，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：247 [M+H]。H NMR (400 MHz，CDOD)：6.59 (1H，m，H-13)，5.77 (1H，dt，=9.8，2.0 Hz，H-14)，3.62 (1H，dd，=13.1，5.4 Hz，H-17b)，3.57 (1H，dd，=3.3，1.2 Hz，H-11)，3.24 (1H，dd，=11.0，10.8 Hz，H-17a)，2.90 (1H，dm，=12.5 Hz，H-2b)，2.83 (1H，dd，=11.3，5.3 Hz，H-10b)，2.63 (1H，m，H-6)，2.36-1.09 (14H，m)；C NMR (100 MHz，CDOD)：166.4 (C-15)，140.5 (C-13)，124.6 (C-14)，63.6 (C-6)，56.9 (C-2)，55.4 (C-11)，51.0 (C-10)，46.7 (C-17)，40.2 (C-7)，32.0 (C-5)，31.3 (C-12)，29.3 (C-4)，23.8 (C-3)，23.2 (C-8)，22.8 (C-9)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]中的報道基本一致，故化合物9鑒定為(—)-13，14-去氫槐定堿。

化合物10：CHNO，白色晶體，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：245 [M+H]。H NMR (400 MHz，CDOD)：7.50 (1H，dd，=8.8，7.8 Hz，H-13)，6.55 (1H，d，=7.5 Hz，H-14)，6.44 (1H，d，=8.9 Hz，H-12)，4.10 (1H，dd，=15.1，7.1 Hz，H-17a)，3.80 (1H，dd，=15.2，12.4 Hz，H-176)；C NMR (100 MHz，CDOD)：166.1 (C-15)，150.1 (C-11)，141.2 (C-13)，116.4 (C-14)，106.6 (C-12)，61.5 (C-6)，57.7 (C-2)，57.5 (C-10)，45.3 (C-17)，39.5 (C-7)，32.8 (C-5)，28.7 (C-4)，27.7 (C-8)，22.2 (C-3)，21.3 (C-9)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]中的報道基本一致，故化合物10鑒定為槐胺堿。

化合物11：CHNO，無色針狀結(jié)晶，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：245 [M+H]。H NMR (400 MHz，CDOD)：7.43 (1H，dd，=9.2，7.1 Hz，H-13)，6.40 (1H，d，=9.3 Hz，H-14)，6.23 (1H，d，=7.3 Hz，H-12)，4.87 (1H，dd，=13.4，5.7 Hz，H-17a)，3.18 (1H，dd，=14.2，10.4 Hz，H-17b)，2.83 (2H，m，H-2a，H-10b)，2.63 (1H，td，=11.2，3.0 Hz，H-7)，2.17-1.43 (12H，m)；C NMR (100 MHz，CDOD)：164.4 (C-15)，152.1 (C-11)，141.3 (C-13)，117.3 (C-14)，104.8 (C-12)，64.1 (C-6)，56.5 (C-10)，51.7 (C-2)，44.6 (C-17)，38.8 (C-7)，34.3 (C-5)，28.0 (C-4)，24.9 (C-8)，22.5 (C-3)，21.8 (C-9)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]中的報道基本一致，故化合物11鑒定為7-槐胺堿。

化合物12：CHNO，白色晶體，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：245 [M+H]。H NMR (400 MHz，CDOD)：7.30 (1H，dd，=9.0，7.2 Hz，H-13)，6.46 (1H，d，=8.9 Hz，H-14)，6.17 (1H，d，=7.2 Hz，H-12)，4.43 (1H，dd，=15.3，5.9 Hz，H-17a)，3.16 (1H，dd，=14.7，12.4 Hz，H-17b)，2.90 (2H，m，H-2a，H-10b)，2.62 (1H，td，=11.7，3.2 Hz，H-7)，2.34 (1H，m)，2.20-1.13 (12H，m)；C NMR (100 MHz，CDOD)：163.4 (C-15)，149.1 (C-11)，138.8 (C-13)，116.9 (C-14)，103.3 (C-12)，64.1 (C-6)，55.4 (C-2)，55.1 (C-10)，48.9 (C-17)，41.6 (C-7)，34.6 (C-5)，28.9 (C-4)，28.6 (C-8)，24.8 (C-3)，24.2 (C-9)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]中的報道基本一致，故化合物12鑒定為5，7-槐胺堿。

化合物13：CHNO，淡黃色油狀物，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：261 [M+H]。H NMR (400 MHz，CDOD)：7.43 (1H，dd，=8.9，7.4 Hz，H-13)，6.42 (1H，d，=7.2 Hz，H-14)，6.37 (1H，d，=9.1 Hz，H-12)，4.29 (1H，dd，=15.4，H-17a)；C NMR (100 MHz，CDOD)：165.7 (C-15)，148.0 (C-11)，141.4 (C-13)，117.5 (C-14)，106.6 (C-12)，72.4 (C-6)，70.8 (C-2)，57.6 (C-10)，49.8 (C-17)，34.5 (C-7)，28.7 (C-5)，28.2 (C-8)，23.1 (C-4)，22.7 (C-3)，21.0 (C-9)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]中的報道基本一致，故化合物13鑒定為5-氧化槐胺堿。

化合物14：CHNO，白色晶體，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：265 [M+H]。H NMR (600 MHz，CDOD)：4.22 (1H，d，=13.7 Hz，H-17a)，3.73 (1H，m，H-11)，3.09 (1H，d，=13.5 Hz，H-17b)，2.87 (1H，dt，=11.3，2.0 Hz，H-2a)，2.76 (1H，dt，=11.4，1.7 Hz，H-10a)；C NMR (150 MHz，CDOD)：173.1 (C-15)，70.0 (C-6)，68.6 (C-5)，58.0 (C-10)，57.6 (C-2)，54.5 (C-11)，47.2 (C-17)，38.1 (C-7)，37.8 (C-4)，33.5 (C-14)，27.9 (C-8)，26.9 (C-12)，23.3 (C-3)，21.3 (C-9)，19.7 (C-13)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]中的報道基本一致，故化合物14鑒定為槐醇。

化合物15：CHNO，無色油狀物，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：265 [M+H]。H NMR (600 MHz，CDCl)：3.98 (1H，m，H-11)，3.89 (1H，m，H-8a)，3.49 (1H，d，=13.4 Hz，H-17a)，3.15 (1H，m，H-17b)，2.90 (1H，d，=9.8 Hz，H-2b，10b)，2.41 (1H，dt，=17.5，4.8 Hz，H-14b)，2.31 (2H，m，H-10a，14a)，2.18 (2H，m，H-9b，12b)，1.99 (3H，m，H-2a，5a，6a)；C NMR (150 MHz，CDCl)：170.6 (C-15)，65.8 (C-8)，64.0 (C-6)，55.4 (C-2)，50.9 (C-11)，50.0 (C-10)，47.8 (C-17)，45.7 (C-7)，34.1 (C-5)，32.5 (C-14)，30.9 (C-9)，30.3 (C-4)，27.8 (C-12)，25.0 (C-3)，18.8 (C-13)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]中的報道基本一致，故化合物15鑒定為8-羥基槐定堿。

化合物16：CHNO，無色針狀結(jié)晶，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：265 [M+H]。H NMR (400 MHz，CDCl)：4.25 (1H，dd，=12.7，4.4 Hz，H-17a)，3.93 (2H，dd，=12.1，5.2 Hz，H-11b，14a)，3.15 (1H，t，=13.0 Hz，H-17b)，2.81 (2H，m，H-2b，10b)；C NMR (100 MHz，CDCl)：171.7 (C-15)，67.9 (C-14)，63.2 (C-6)，57.2 (C-2)，57.1 (C-10)，53.9 (C-11)，43.8(C-7)，41.9(C-17)，35.1(C-5)，27.6(C-4)，27.2(C-13)，25.9(C-8)，25.0(C-12)，21.1(C-3)，20.6(C-9)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]中的報道基本一致，故化合物16鑒定為(—)-14-羥基苦參堿。

化合物17：CHNO，淡黃色晶體，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：491 [M+H]。H NMR (400 MHz，CDCl)：7.06 (1H，d，=8.0 Hz，H-13)，6.20 (1H，d，=7.1 Hz，H-12)，4.36 (1H，dd，=12.5，4.3 Hz，H-17′a)，4.15 (1H，dd，=15.1，6.7 Hz，H-17a)，3.94 (1H，m，H-11′)，3.79 (1H，dd，=14.8，12.3Hz，H-17b)，3.36 (1H，m，H-13′)，3.07 (1H，t，=12.5Hz，H-17′b)；C NMR (100 MHz，CDCl)：168.4 (C-15′)，163.0 (C-15)，145.6 (C-11)，133.0 (C-13)，129.3 (C-14)，102.9 (C-12)，64.3 (C-6′)，60.3 (C-6)，57.3 (C-2′)，57.3 (C-10′)，56.7 (C-2)，56.5 (C-10)，52.5 (C-11′)，43.8 (C-17)，42.4 (C-17′)，41.2 (C-7′)，38.2 (C-7)，36.6 (C-5′)，36.0 (C-14′)，32.1 (C-5)，29.3 (C-13′)，28.6 (C-12′)，27.8 (C-4′)，27.6 (C-8′)，26.9 (C-4)，26.6 (C-8)，21.2 (C-3)，21.1 (C-9)，20.6 (C-3′)，20.3 (C-9′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]中的報道基本一致，故化合物17鑒定為Ochrocephalamine A。

化合物18：CHNO，白色針狀結(jié)晶，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：205 [M+H]。H NMR (600 MHz，CDCl)：7.27 (1H，dd，=6.8，5.4 Hz，H-4)，6.43 (1H，d，=9.0 Hz，H-3)，5.98 (1H，d，=6.8 Hz，H-5)，4.03 (1H，d，=15.1 Hz，H-10b)，3.90 (1H，dd，=15.4，6.9 Hz，H-10a)，2.93 (1H，m，H-7)，2.88 (1H，d，H-11a)，2.82 (1H，dt，=10.7，1.5 Hz，H-13a)，2.42 (1H，m)，2.24 (1H，dd，=10.7，2.2 Hz，H-13b)，2.21 (1H，d，=11.0 Hz，H-11b)，2.11 (3H，s，N-CH3)，1.85 (1H，d，=12.7 Hz，H-8a)，1.73 (1H，d，=12.4 Hz，H-8b)；C NMR (150 MHz，CDCl)：163.7 (C-2)，151.5 (C-6)，138.6 (C-4)，116.7 (C-3)，104.6 (C-5)，62.5 (C-13)，62.2 (C-11)，50.0 (C-10)，46.2 (N-CH)，35.4 (C-7)，27.9 (C-9)，25.4 (C-8)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[18]中的報道基本一致，故化合物18鑒定為-甲基金雀花堿。

化合物19：CHNO，白色結(jié)晶，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：249 [M+H]。H NMR (400 MHz，CDCl)：4.48 (1H，dt，=13.2，2.3 Hz，H-10b)，3.27 (1H，dd，=10.6，6.2 Hz，H-6b)，2.87 (1H，t，=10.9 Hz，H-17b)，2.79 (1H，d，=11.3 Hz，H-15b)，2.49 (2H，dd，=13.8，3.0 Hz，H-3b，10b)，2.31 (1H，td，=12.4，6.0 Hz，H-3a)，2.18 (1H，m，H-8a)，2.07 (1H，m，H-7b)，1.93 (2H，dd，=12.0，3.5 Hz，H-15a，17a)，1.78 (2H，m，H-4a，5b)，1.71-1.51 (8H，m)，1.39 (1H，m，H-12b)，1.29 (1H，t，=2.5 Hz，H-8b)，1.23 (1H，t，=2.4 Hz，H-13a)；C NMR (100 MHz，CDCl)：171.5 (C-2)，64.1 (C-11)，60.9 (C-6)，55.4 (C-15)，52.7 (C-17)，46.7 (C-10)，34.7 (C-9)，33.4 (C-12)，33.0 (C-3)，32.2 (C-7)，27.3 (C-8)，26.6 (C-5)，25.1 (C-14)，24.3 (C-13)，19.5 (C-4)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19]中的報道基本一致，故化合物19鑒定為白羽扇豆堿。

化合物20：CHNO，白色結(jié)晶，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：263 [M+H]。H NMR (400 MHz，CDCl)：4.84 (1H，dt，=13.6，2.5 Hz，H-10a)，4.71 (1H，m，H-15a)，3.45 (1H，m，H-6)，3.28 (1H，dd，=11.3，2.3 Hz，H-11)，2.71 (1H，dd，=13.2，3.0 Hz，H-10b)，2.51 (1H，m，H-7)，2.40 (2H，m，H-15b，5b)，2.22 (2H，m，H-8)；C NMR (100 MHz，CDCl)：170.9 (C-2)，167.3 (C-17)，61.1 (C-11)，58.8 (C-6)，47.9 (C-10)，43.5 (C-7)，42.9 (C-15)，33.8 (C-9)，33.4 (C-3)，33.4 (C-12)，32.7 (C-5)，26.9 (C-8)，25.2 (C-14)，25.0 (C-13)，19.4 (C-4)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20]中的報道基本一致，故化合物20鑒定為(+)-17-氧代白羽扇豆堿。

化合物21：CHNO，白色結(jié)晶，改良碘化鉍鉀顯色呈橘紅色；ESI-MS：265 [M+H]。H NMR (400 MHz，CDCl)：4.50 (1H，d，=13.4 Hz，H-10a)，3.79 (1H，m，H-6b)，3.65 (1H，t，=10.9 Hz，H-17b)，3.37 (1H，m，H-15b)，2.95 (1H，t，=11.2 Hz，H-15a)，2.89 (1H，dd，=12.9，2.9 Hz，H-17a)，2.53 (3H，m)；C NMR (100 MHz，CDCl)：172.1 (C-2)，71.4 (C-11)，69.5 (C-15)，65.0 (C-17)，61.8 (C-6)，47.1 (C-10)，33.6 (C-7)，33.0 (C-3)，31.7 (C-9)，29.7 (C-12)，27.8 (C-5)，25.6 (C-13)，22.7 (C-8)，20.3 (C-14)，19.3 (C-4)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[21]中的報道基本一致，故化合物21鑒定為氧化白羽扇豆堿。

2.2 單體化合物對斜紋夜蛾的殺蟲活性

表1 部分化合物對斜紋夜蛾幼蟲的殺蟲活性

3 討論

本研究從黃花棘豆中分離得到21個喹諾里西啶類生物堿，包括17個苦參堿型生物堿(化合物 1～化合物17)、1個金雀花堿型生物堿(化合物18)和3個鷹爪豆堿型生物堿(化合物19～化合物21)，其中化合物2、化合物3、化合物5、化合物8、化合物9、化合物11～化合物16、化合物18、化合物20、化合物21為首次從黃花棘豆中分離得到。采用浸蟲浸葉法對所分離得到含量較大的12個化合物進(jìn)行了抗斜紋夜蛾幼蟲活性研究，發(fā)現(xiàn)化合物12表現(xiàn)出較強(qiáng)的殺蟲活性，該化合物能否作為先導(dǎo)化合物進(jìn)一步進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和優(yōu)化，需要進(jìn)一步的試驗研究。