王丹 江芊 祁立新 趙海鵬 陳曉鷺 于福來

?？诋a(chǎn)諾麗青果、白果和鮮葉揮發(fā)性成分分析

王丹1江芊1祁立新2趙海鵬2陳曉鷺1于福來1

（1. 中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部中藥材生物學(xué)與栽培重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/海南省熱帶藥用植物工程研究中心 海南?？?571101；2. 濰坊市檢驗(yàn)檢測中心 山東濰坊 261200）

采用固相微萃取技術(shù)結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測方法測定?？诋a(chǎn)諾麗青果、白果和鮮葉中揮發(fā)性成分。從諾麗青果、白果和鮮葉中分別鑒定出30、31和27個(gè)化合物，主要涉及醇類、酯類、酸類、醛類、萘類、烷類、含氮化合物、烯烴類和酮類共9類化合物。其中，鑒定出來的醇類成分?jǐn)?shù)量和含量較高，青果、白果和鮮葉中分別為12、9和12個(gè)，分別占總相對(duì)含量的28.594%、31.335%和44.664%。?？谥Z麗青果、白果和鮮葉中共有化合物為14個(gè)，主要為正辛酸、水楊酸甲酯、反-3-己烯-1醇、芳樟醇、正己酸、壬醛、癸醛等化合物，不同的來源導(dǎo)致其相對(duì)含量差異較大，其中正辛酸含量分別為20.817%、10.939%和4.853%，水楊酸甲酯為22.651%、0.759%和6.603%，反-3-己烯-1醇為2.347%、0.568%和21.875%，芳樟醇為1.873%、11.78%和2.965%。由此可見，不同成熟度諾麗鮮果以及鮮葉中揮發(fā)性成分的種類和相對(duì)含量差異明顯。

諾麗；青果；白果；鮮葉；揮發(fā)性成分；GC-MS；海口產(chǎn)

諾麗（Noni）為茜草科巴戟天屬植物海濱木巴戟L.，又名海巴戟，也叫蘿梨、印度桑葚，原產(chǎn)于南太平洋熱帶島嶼[1-2]，是一種生長在熱帶、亞熱帶地區(qū)的多年生常綠闊葉灌木或小喬木，在我國海南、臺(tái)灣以及西沙群島有野生資源分布，目前在海南、云南西雙版納等地已有較大面積的栽培引種[3]。諾麗果富含多種必需氨基酸、維生素、微量元素、多糖等營養(yǎng)成分以及豐富的活性物質(zhì)，如生物堿、蒽醌類、多酚類、脂肪酸類、木脂素類、多糖類、甾醇類、黃酮類和萜類等化合物，具有抑菌、抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、消炎、鎮(zhèn)痛、降血壓、保護(hù)血管、保肝護(hù)肝、預(yù)防酒精性肝損傷和增強(qiáng)免疫等功效，早在2 000多年前諾麗就被波利尼西亞人用于治療多種疾病，被人們譽(yù)為“千年圣果”[4-10]。諾麗作為一種新興保健食材，在西方社會(huì)的普及程度日益提高。2010年5月，《中華人民共和國食品安全法》和《新資源食品管理辦法》的規(guī)定，批準(zhǔn)諾麗果漿為新資源食品。

諾麗果實(shí)有一種特殊的、濃烈的氣味，諾麗果營養(yǎng)成分豐富，具有較好的醫(yī)療保健功能和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，因此，對(duì)其化學(xué)成分的研究有利用諾麗的開發(fā)和利用。目前，有關(guān)諾麗果實(shí)營養(yǎng)成分、質(zhì)量分析、化學(xué)成分分析等相關(guān)研究已有報(bào)導(dǎo)[11-13]，黃夢(mèng)利等[14]對(duì)海南產(chǎn)諾麗藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了研究，包括浸出物、總灰分、多糖等，但未對(duì)其揮發(fā)性成分進(jìn)行分析。龔敏等[15]對(duì)諾麗鮮果的揮發(fā)性成分進(jìn)行了分析，但其諾麗鮮果產(chǎn)地不明。羊青等[16]采用GC-MS方法對(duì)海南儋州、澄邁、萬寧產(chǎn)諾麗果實(shí)中揮發(fā)油進(jìn)行了化學(xué)成分分析。此外，果實(shí)為諾麗常見的食用或藥用部分，一般用其鮮果進(jìn)行發(fā)酵以制備諾麗酵素。諾麗果實(shí)成熟過程顏色從青色變成黃色直到接近白色，成熟時(shí)果肉較軟，易出汁，且具有獨(dú)特的強(qiáng)烈腐臭味道，有“臭乳酪味”[17-18]。趙文珂等[19]研究發(fā)現(xiàn)，成熟度對(duì)諾麗果酵素超氧化物歧化酶活力、酪氨酸酶抑制率、總糖和總多酚含量影響不同。這可能主要與不同成熟度果實(shí)中的化學(xué)成分有關(guān)。因此，本研究對(duì)?？诋a(chǎn)諾麗不同成熟度的青果、白果和鮮葉揮發(fā)性成分進(jìn)行分析鑒定，為諾麗果實(shí)和葉片質(zhì)量評(píng)價(jià)提供參考依據(jù)，并且為諾麗種植地選擇提供了數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試材 2022年3月12日，諾麗青果、白果和鮮葉采自海南省?？谑兄袊鵁釒мr(nóng)業(yè)科學(xué)院。

1.1.2 儀器設(shè)備

采用Agilent氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀7890B-5977A（美國安捷倫公司）；Collect AS39系列多功能自動(dòng)進(jìn)樣器（鄭州克萊克特科學(xué)儀器有限公司）和固相微萃取頭（PDMS/DVB/ CAR 50/30um PK3，美國Supelco公司）。

1.2 方法

分別將諾麗青果、白果和鮮葉切碎后，精確稱取樣品1.00 g裝入樣品瓶，萃取頭老化溫度為200℃，將60℃萃取頭插入采樣瓶中吸附40 min，解析5 min，然后進(jìn)行GC-MS檢測。色譜柱為VF-WAXms色譜柱（0.25 mm×30 m，0.25 μm），進(jìn)樣口溫度230℃，升溫程序：初始溫度60 ℃，以4℃/min升溫至150℃，保持3 min，繼續(xù)以6℃/min升溫至230℃，保持5 min。載氣為高純He（99.999%），流量為1.0 mL/min，壓力為17.729 psi，分流比8:1。離子源為EI源，離子源溫度為230℃，四極桿溫度為150℃，電子能量70 eV，倍增器電壓1043 V，接口溫度230℃，全波長掃描質(zhì)量范圍35～450 amu，速度1 562 u/s。通過增強(qiáng)型ChemStation（MSD ChemStation F.01.03.2357）化學(xué)工作站，結(jié)合NIST14質(zhì)譜圖庫進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 ?？谥Z麗青果、白果和鮮葉揮發(fā)性成分GC-MS總離子流色譜圖

海口產(chǎn)諾麗青果、白果和鮮葉揮發(fā)性成分的GC-MS總離子流圖見圖1。

2.2 ?？诋a(chǎn)諾麗青果、白果和鮮葉揮發(fā)性成分分析

由表1可見，?？诋a(chǎn)諾麗青果共鑒定出揮發(fā)性成分30個(gè)，白果有31個(gè)，鮮葉有27個(gè)，主要涉及醇類、酯類、酸類、醛類、萘類、烷類、含氮化合物、烯烴類和酮類共9類化合物。其中青果和白果共有21個(gè)相同化合物，青果和鮮葉共有16個(gè)化合物，白果和鮮葉共有14個(gè)化合物，三者共含有14個(gè)化合物。

結(jié)合圖2、3可見，與其他種類相比，醇類是三者所含化合物種類最多以及相對(duì)含量總量最高的化合物，青果、白果和鮮葉中所含醇類化合物分別為12、9和12個(gè)，分別占總相對(duì)含量的28.594%、31.335%和44.664%。由此結(jié)果可知，雖然青果中醇類化合物的數(shù)量最多，為12個(gè)，但其含量明顯低于白果和鮮葉，而鮮葉中醇類數(shù)量和相對(duì)含量始終高于果實(shí)。白果中酯類化合物的數(shù)量明顯多于青果和鮮葉，但是其相對(duì)含量低于二者。酸類成分的數(shù)量和相關(guān)含量結(jié)果較一致，均為青果>白果>鮮葉，分別為30.349%、16.544%和7.099%。而醛類結(jié)果與酯類化合物結(jié)果相反，白果的化合物數(shù)量最少，但是含量最高。以上結(jié)果說明，諾麗果實(shí)和鮮葉中揮發(fā)性成分類型和相對(duì)含量差異較大。

A.青果；B.白果；C.鮮葉。

表1 海口諾麗青果、白果和鮮葉揮發(fā)性成分及其相對(duì)含量

續(xù)表1 ?？谥Z麗青果、白果和鮮葉揮發(fā)性成分及其相對(duì)含量

續(xù)表1 ?？谥Z麗青果、白果和鮮葉揮發(fā)性成分及其相對(duì)含量

注：“–”表示未檢出。

圖2 ?？诋a(chǎn)諾麗青果、白果和鮮葉揮發(fā)性化合物種類及數(shù)量

圖3 諾麗產(chǎn)青果、白果和鮮葉各類揮發(fā)性成分及其相對(duì)含量

由表1可見，海口諾麗青果、白果和鮮葉中共有化合物為14個(gè)，主要為正辛酸、水楊酸甲酯、反-3-己烯-1醇、芳樟醇、正己酸、壬醛、癸醛等化合物，不同的來源導(dǎo)致其相對(duì)含量差異較大。青果、白果和鮮葉中正辛酸含量分別為20.817%、10.939%和4.853%，反-3-己烯-1醇為2.347%、0.568%和21.875%，水楊酸甲酯為22.651%、0.759%和6.603%，芳樟醇為1.873%、11.78%和2.965%。諾麗青果與白果中主要化學(xué)成分差異也較大，青果和白果正辛酸含量分別為20.817%和10.939%，反-3-己烯-1醇含量分別為2.347%和0.568%，水楊酸甲酯含量分別為22.651%和0.759%，芳樟醇含量分別為1.873%和11.78%，己酸乙酯含量分別為0.843%和6.401%，辛酸乙酯含量分別為1.6%和3.778%，癸醛含量分別為1.074%和7.341%，壬醛含量分別為1.436%和5.969%，2-甲基苯并呋喃含量分別為6.702%和12.419%，正己酸含量分別為4.78%和3.213%。與鮮果不同，諾麗鮮葉中獨(dú)有的主要化合物為乙酸葉醇酯（19.507%）、環(huán)己烷（6.672%）、1-戊烯-3-醇（5.971%）、2-已烯醛（3.294%）和3-甲基庚烷-2-醇（2.958%）。

3 討論與結(jié)論

3.1 討論

本研究對(duì)海口產(chǎn)諾麗青果、白果和鮮葉中揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行了研究，分別鑒定出揮發(fā)性成分30、31和27個(gè)，主要涉及醇類、酯類、酸類、醛類、等9類化合物。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同成熟度的諾麗鮮果，揮發(fā)性化學(xué)成分種類和相對(duì)含量差異較大，而鮮果和鮮葉的揮發(fā)性成分也存在較大的差異。

目前，常用的諾麗加工方式多采用的是白色或黃色諾麗鮮果進(jìn)行發(fā)酵制備酵素，鮮少使用青果。本研究發(fā)現(xiàn)，諾麗青果與白果中主要化學(xué)成分差異較大，青果中有醇類化合物12個(gè)，占28.954%；酯類5個(gè)，占27.134%；酸類5個(gè)，占30.349%。白果中有醇類9個(gè)，占31.335%；酯類8個(gè)，占20.677%；酸類4個(gè)，占16.544%。青果和白果中含量較高的單體化合物有正辛酸（20.817%和10.939%）、水楊酸甲酯（22.651%和0.759%）、芳樟醇（1.873%和11.78%）、己酸乙酯（0.843%和6.401%）、辛酸乙酯（1.6%和3.778%）、癸醛（1.074%和7.341%）、壬醛（1.436%和5.969%）、2-甲基苯并呋喃（6.702%和12.419%）、正己酸（4.78%和3.213%）。這與龔敏等[15]、羊青等[16]、黃惠玲等[20]測定結(jié)果差別較大。龔敏等[15]采用95%乙醇滲濾提取諾麗鮮果濃縮后，用乙醚萃取蒸干，再用GC-MS測定其揮發(fā)性成分共有21個(gè)，分別為脂肪酸、酯類、烷類、醛類和酮類化合物，其中脂肪酸含量最高，占43.34%，含量較高的分別為雙(2-乙基己基)酞酸、十八烯酸、正十六酸、辛酸。而本研究未檢測出雙(2-乙基己基)酞酸、十八烯酸、正十六酸等成分。羊青等[16]采用水蒸氣蒸餾法制備了3個(gè)產(chǎn)地的諾麗鮮果的揮發(fā)油，研究發(fā)現(xiàn)，采用GC-MS測定出儋州、澄邁和萬寧3個(gè)產(chǎn)地的諾麗鮮果分別有26、20和19個(gè)化學(xué)成分。以脂肪酸為主，含量最高的為辛酸，此外還有酯類、醇類和酚類化合物。3個(gè)產(chǎn)地共有成分主要為辛酸、癸酸、己酸、辛酸甲酯、硬脂酸、軟脂酸等，而本研究未檢測出硬脂酸、軟脂酸等。本研究發(fā)現(xiàn)，醇類、酯類和酸類為主要成分，含量較高的成分為正辛酸、正己酸、辛酸乙酯、己酸乙酯、2-甲基苯丙呋喃、楊酸甲酯、芳樟醇等。造成以上結(jié)果差異的原因可能是由于本研究直接采用的諾麗鮮果進(jìn)行固相微萃取技術(shù)提取揮發(fā)性成分后直接進(jìn)行GC-MS分析。黃惠玲等[20]將諾麗果的乙醚萃取物，甲酯化后，采用GC-MS和GC定性定量分析了諾麗中脂肪酸，共分離出17個(gè)脂肪酸，其中飽和脂肪酸主要為十六酸（棕櫚酸）、十八酸（硬脂酸）、辛酸、己酸、丁酸、癸酸、十七酸和二十酸等；不飽和脂肪酸主要為亞油酸、油酸、反油酸、棕櫚油酸，與本研究結(jié)果差異較大。本研究測定結(jié)果中未發(fā)現(xiàn)亞油酸、油酸、棕櫚油酸等不飽和脂肪酸。導(dǎo)致差異大的原因，主要應(yīng)該是由于上述研究進(jìn)行了乙醚萃取和甲酯化，導(dǎo)致鑒定出的化合物種類與本研究的差異。

此外還發(fā)現(xiàn)，諾麗鮮葉與諾麗果實(shí)中化學(xué)成分差異也較大，諾麗鮮葉中獨(dú)有的主要化合物為乙酸葉醇酯（19.507%）、環(huán)己烷（6.672%）、1-戊烯-3-醇（5.971%）、2-已烯醛（3.294%）和3-甲基庚烷-2-醇（2.958%），其他的含量較高的化合物為反-3-己烯-1醇（21.875%）、水楊酸甲酯（6.603%）、正辛酸（4.853%）。這與馬金爽等[21]的研究結(jié)果差異較大，其采用水蒸氣蒸餾法提取諾麗葉揮發(fā)油，使用GC-MS鑒定其化學(xué)成分，共鑒定出53中化合物，主要化合物為二苯胺（14.205%）、正二十三烷（7.108%）、鄰苯二甲酸二丁酯（6.907%）、鄰苯二甲酸單（2－乙基己基）酯（5.028%）、正二十六烷（4.977%）、二十二烷（3.856%）等，這可能是由于上述研究采用的是三亞產(chǎn)諾麗葉片，而本研究的是?？诋a(chǎn)諾麗葉片，并且二者測定所用材料制備方法不同。

3.2 結(jié)論

綜上結(jié)果，?？诋a(chǎn)諾麗青果、白果和鮮葉中揮發(fā)性成分種類和相對(duì)含量差異較大，這主要與不同的采收時(shí)間、采收部位以及鮮果的不同成熟度有關(guān)。諾麗由于其獨(dú)特的功能特性和豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，已成為全球較暢銷的健康產(chǎn)品之一。海南是我國最適宜大面積種植諾麗的地區(qū)，因此，研究海南不同產(chǎn)地諾麗果實(shí)和葉片以及不同成熟度鮮果中揮發(fā)性成分積累變化，有助于分析和評(píng)價(jià)諾麗產(chǎn)品質(zhì)量和標(biāo)準(zhǔn)制定，為諾麗的開發(fā)利用提供數(shù)據(jù)支持，也為諾麗種植地的選擇提供參考依據(jù)。

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Analysis of Volatile Components in Green Fruits, White Fruits and Fresh Leaves ofL. Produced in Haikou

WANG Dan1JIANG Qian1QI Lixin2ZHAO Haipeng2CHEN Xiaolu1YU Fulai1

(1. Tropical Crops Genetic Resources Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences/Key Laboratory of Biology and Cultivation of Chinese Medicinal Materials, Ministry of Agriculture and Rural Affairs/Hainan Provincial Engineering Research Center for Tropical medicinal plants, Haikou, Hainan 571101, China; 2. Weifang Inspection and Testing Center, Weifang, Shandong 261200, China)

Solid phase microextraction combined with gas chromatography-mass spectrometry was used to determine the volatile components in green fruits, white fruits and fresh leaves ofL. produced in Haikou. 30, 31 and 27 compounds were identified from green fruits, white fruits and fresh leaves of, mainly involving 9 compounds: alcohols, esters, acids, aldehydes, naphthalene, alkanes, nitrogen-containing compounds, olefins and ketones. Among them, the number and content of alcohol components identified were the highest. There were 12, 9 and 12 alcohol components in green fruits, white fruits and fresh leaves, respectively, accounting for 28.594%, 31.335% and 44.664% of the total relative contents, respectively. There were 14 compounds simultaneously in green fruits, white fruits and fresh leaves, mainly including octanoic acid, methyl salicylate, 3-Hexen-1-ol, (E)-, linalool, hexanoic acid, nonanal and decanal. Different sources lead to great differences in their relative contents. The contents of octanoic acid were 20.817%, 10.939% and 4.853%, methyl salicylate were 22.651%, 0.759% and 6.603%, 3-Hexen-1-ol, (E)- were 2.347%, 0.568% and 21.875%, and linalool were 1.873% 11.78% and 2.965% in green fruits, white fruits and fresh leaves, respectively. It could be seen that the types and relative contents of volatile components in fresh fruits with different maturity and fresh leaves of inwere significantly different.

L.; green fruits; white fruits; fresh leaves; volatile chemical components; GC-MS; Haikou

S567

A

10.12008/j.issn.1009-2196.2022.09.010

2022-05-08；

2022-05-26

海南省自然科學(xué)基金高層次人才項(xiàng)目“諾麗對(duì)小鼠酒精性肝損傷的預(yù)防作用研究”（No.2019RC318）；中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)“藥用植物結(jié)構(gòu)發(fā)育和功能研究”（No.1630032022022）。

王丹（1982—），女，博士，副研究員，研究方向?yàn)槟纤庂Y源研究與開發(fā)，E-mail：wang_dan1414@163.com。

于福來（1983—），男，博士，副研究員，研究方向?yàn)槟纤庂Y源研究，E-mail：fulai.yu@163.com。

（責(zé)任編輯 龍婭麗）