袁銘銘,張文,熊曉麗,鐘瑞建,吳良發(fā)
1.江西省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院,國家藥品監(jiān)督管理局中成藥質(zhì)量評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江西省藥品與醫(yī)療器械質(zhì)量工程技術(shù)研究中心,江西 南昌 330029;2.江西省知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)中心,江西 南昌 330029
大青葉為十字花科菘藍(lán)屬植物菘藍(lán)(Isatis indigoticaFort.)的干燥葉,具有清熱解毒,涼血消斑之功效。用于溫病高熱,神魂,發(fā)斑發(fā)疹,痄腮,喉痹,丹毒,癰腫[1]?,F(xiàn)代化學(xué)成分及藥理研究表明,其化學(xué)成分主要為生物堿類、有機(jī)酸類和黃酮類以及其他類。具有抗菌、抗內(nèi)毒素、抗炎、抗癌等藥理活性。本文對(duì)近年來國內(nèi)外大青葉化學(xué)成分、藥理作用進(jìn)行綜述,從而更好地開發(fā)利用該藥用資源。
迄今為止的化學(xué)研究結(jié)果表明,大青葉的化學(xué)成分主要為生物堿類,黃酮類、酚酸類以及其他類成分等。
大青葉中分離得到的生物堿主要為吲哚類生物堿和喹唑酮類生物堿。李薇等[2]從大青葉中分離得到5-羥基-2-吲哚酮。劉瑞等[3]使用HPLC-MS-MS鑒定出大青葉中含有黃嘌呤、次黃嘌呤。阮金蘭等[4]首次從大青葉中分離得到色胺酮。柳繼峰等[5-6]從大青葉中首次分離得到10H-indolo[3,2-b]quinoline、(E)-3-(3',5'-dimethoxy-4'-hydroxybenzylidene)-2-indolinone,2007 年分離得到兩個(gè)新生物堿類化合物9α,13α-Dihydroxylisopropylidenylisatisine A、Isatisine A。鄧湘昱等[7]從大青葉70%乙醇提取液中分離得到靛藍(lán)、青黛酮、脫氧鴨嘴花酮堿。姬志強(qiáng)等[8]從大青葉乙酸乙酯部位中分離得到靛玉紅和4(3H)-喹唑酮。李大偉等[9]從大青葉的水提取物中分離鑒定得到三個(gè)吲哚類生物堿indole-3-acetonitrile-4-methoxy-2-S-β-D-glucopyranoside、indole-3-acetonitrile-4-methoxy-2-S-β-D-Glucopyranoside、cappariloside A。Liu 等[10]從大青葉中分離得到6個(gè)新化合物和一個(gè)已知化合物,分別是Indiforine A、Indiforine B、Indiforine C、Indiforine D、Indiforine E、Indiforine F、methyl 2-(4-oxoquinazolin-3 (4H)-yl)benzoate。Liu 等[11]從大青葉中分離鑒定得到8 個(gè)有生物活性的對(duì)映體3S,2'S,7″R,8″S-Isatindigotindoline A、3R,2'R,7″S,8″R-Isatindigotindoline A、3S,2'S,7″S,8″R-Isatindigotindoline B、3R,2'R,7″R,8″SIsatindigotindoline B、3R,2'S,3″S,1'''S-Isatindigotindoline C、3S,2'R,3″R,1'''R-Isatindigotindoline C、3R,2'S,2″Risatindigotindoline D、3S,2'R,2″R-Isatindigotindoline D。Xi 等[12]從大青葉分離鑒定得到7 個(gè)新的鄰氨基苯甲酸衍生物,Isatiscaloids A、Isatiscaloids B、Isatiscaloids C、(+)-(2'R)-isatiscaloids D、(-)-(2'S)-isatiscaloids D、(-)-(2'S)-isatiscaloids E、(+)-(2'R)-isatiscaloids E?!吨胁菟帉W(xué)》中記載,大青葉中含有芥苷、新芥苷、菘藍(lán)苷[13]。鄭虎占等[14]在《中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用》中記載,大青葉中含有腺苷。劉瑞等[3]使用HPLC-MS2 鑒定出大青葉中含有胞苷、尿苷、鳥苷。
李薇等[2]從大青葉中分離鑒定得到煙酸和琥珀酸。阮金蘭等[4]從大青葉中首次分離得到焦谷氨酸。柳繼峰等[5]從大青葉中分離得到苯甲酸、鄰氨基苯甲酸。鄧湘昱等[7]從大青葉70%乙醇提取液中首次分離得到焦脫鎂葉綠酸a 甲酯、焦脫鎂葉綠酸a 乙酯。李雪虎等[15]從大青葉95%乙醇提取液中分離得到亞油酸-1-單甘油酯、水楊酸、丁香酸。姬志強(qiáng)等[8]從大青葉石油醚部位分離得到十八酸、亞油酸。鄭虎占等[14]從大青葉中分離得到棕櫚酸。李大偉等[9,16]從大青葉水提取物中分離得到3 個(gè)新化合物,2-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)succinic acid、(E)-3-(4-(1-carboxy-2-hydroxyethoxy)-3,5-dimethoxyphenyl) acrylic acid、3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl) pentanedioic acid。
柳繼峰等[5]從大青葉中首次分離得到6-β-D-glucopyranosyldiosmetin。鄧湘昱等[7]從大青葉中首次分離得到異牡荊素-6'-O-吡喃葡萄糖苷、異葒草苷、異葒草苷-3'-O-吡喃葡萄糖苷、肥皂草苷。姬志強(qiáng)等[8]從大青葉中分離鑒定得到異牡荊素。
姬志強(qiáng)等[8]從大青葉中分離得到β-谷甾醇。柳繼鋒等[5]從大青葉中首次分離得到落葉松脂素、(+)-異落葉松樹脂醇。李雪虎等[15]首次從大青葉中分離鑒定得到香草醛。此外,大青葉中還含有萜類化合物。鄧湘昱等[7]從大青葉中首次分離得到單帖類化合物loliolide。李大偉等[9]從大青葉中首次分離得到4 個(gè)倍半萜類化合物5β,6α-dihydroxy-3β-(β-D-glucoyranosyloxy)-7-megastigmen-9-one、(6R,9S)-3-oxo-α-ionol-β-D-glucopyranoside、(6R,9R)-3-oxo-α-ionol-β-Dglucopyranoside、saussureoside B 和一個(gè)苷類化合物丁香苷。
胡永金等[16]為研究大青葉提取物的抗菌效果,所采取的方式為濾紙片擴(kuò)散法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在含量約為百分之四到百分之七時(shí),對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用最大,其后分別為:沙門菌、李斯特菌、炭疽桿菌、豬糞鏈球菌、大腸桿菌。包俊[17]用經(jīng)改進(jìn)的藥基法,測(cè)定了大青葉甲醇提取物的抗菌活性。結(jié)果顯示,大青葉對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用較強(qiáng),然后依次是腸炎沙門菌耐藥株>大腸埃希菌標(biāo)準(zhǔn)珠>酵母菌耐藥株>肺炎克雷伯菌耐藥株>白念珠菌耐藥株,且革蘭陽性菌>革蘭陰性菌。陳言峰、鄒記興[18]研究發(fā)現(xiàn),大青葉提取液對(duì)遲緩愛德華氏菌有明顯的抑菌作用。劉富康等[19]通過分光光度法,檢測(cè)了大青葉醇提物中粗黃酮提取量的濃度,將其進(jìn)行了抑菌圈實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明大青葉的粗黃酮萃取率具有顯著抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和李斯特菌生長的效果。
許濤等[20]研究發(fā)現(xiàn),4(3H)-喹唑酮通過阻止H1N1 型流感病毒的吸附、增殖而發(fā)揮作用。喻淑慶等[21]采用MTT 比色法,發(fā)現(xiàn)大青葉提取物可以抑制已經(jīng)進(jìn)入細(xì)胞中的單純皰疹病毒Ⅱ型的復(fù)制和增殖。劉釗等[22]研究發(fā)現(xiàn),大青葉單體能夠抑制呼吸道合胞病毒和柯薩奇病毒B3 在Hep-2 細(xì)胞中的增殖,但是沒有直接滅活作用,對(duì)病毒的吸附也不起作用。高博等[23]應(yīng)用CPE 法、MTT 法和實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 法發(fā)現(xiàn),大青葉水溶性提取物對(duì)登革熱病毒具有體外抑制作用,且其細(xì)胞毒性小,半數(shù)毒性濃度為 4.68 mg/mL。羅芬[24]發(fā)現(xiàn)大青葉水提物可能通過提高人體免疫力而達(dá)到抗甲型流感病毒的作用。
崔旭、李會(huì)端[25]研究表明,大青葉總黃酮對(duì)羥基自由基(·OH)有較強(qiáng)的清除率。
Yu 等[26]采用脫機(jī)DPPH 自由基清除法測(cè)定大青葉乙醇提取液的抗氧化活性,并采用PLS 模型簡單地探討其指紋圖譜效價(jià)關(guān)系。結(jié)果表明,大青葉乙醇提取液具有抗氧化活性。朱俊杰、徐靜[27]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,大青葉不同功能部分均可提高HepG2 細(xì)胞的抗氧化能力,其中乙酸乙酸部位效果最大,對(duì)其他部分的抑制能力為水部位,醇提取物,正丁醇部位。閆俊等[28]采用鐵離子還原能力法(FRAP)測(cè)定大青葉中不同化學(xué)組成的抗氧化能力,結(jié)果發(fā)現(xiàn)以乙酸丙烯相的抗氧化活性為最高。
方建國等[29]對(duì)大青葉抗內(nèi)毒素活性部位進(jìn)行篩選,發(fā)現(xiàn)正丁醇相的體內(nèi)外抗內(nèi)毒素活性均最強(qiáng),體外實(shí)驗(yàn)中其余部位抗內(nèi)毒素活性乙酸乙酯相>氯仿相>水相>石油醚相,體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中水相>乙酸乙酯相>氯仿相>石油醚相。黃繼全[30]對(duì)大青葉氯仿提取物進(jìn)行體內(nèi)外抗內(nèi)毒素實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)其可以抗大腸桿菌O111B4 內(nèi)毒素。
Nam 等[31]發(fā)現(xiàn)大青葉中的化學(xué)成分靛玉紅是慢性粒細(xì)胞白血病的有效治療藥物。夏小艷等[32]利用兩個(gè)模型(斑馬魚藥物篩選模型,雞胚絨毛尿囊膜模型)檢測(cè)靛玉紅的抑制血管生成作用。結(jié)果表明,靛玉紅具有顯著的抗血管生成活性。簡曉順等[33]采用血清藥理學(xué)方法,發(fā)現(xiàn)大青葉乙醇提取液能抑制腫瘤細(xì)胞株K562 和S180 的生長和增殖。
趙紅等[34]研究發(fā)現(xiàn),大青葉的水煎液可以使小鼠的免疫功能上調(diào),其機(jī)制可能是促進(jìn)淋巴細(xì)胞IL-2 的分泌。Poudel 等[35]通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),異金雀花素可抑制脂肪生成轉(zhuǎn)錄因子,從而抑制脂肪細(xì)胞分化和脂肪代謝相關(guān)的基因的表達(dá)水平,這可能是通過上調(diào)insig-1 和2 來實(shí)現(xiàn)。
研究表明,大青葉醇沉物質(zhì)和總有機(jī)酸萃取物質(zhì),都對(duì)由二甲苯類引起的老鼠耳腫有顯著的抑制作用,且對(duì)干酵母引起的高熱有顯著降溫效果。結(jié)果顯示,大青葉醇沉物和總有機(jī)酸提取液有解熱、抗炎效果[36-37]。
大青葉作為一個(gè)具有確切療效的傳統(tǒng)中藥,近年來國內(nèi)外學(xué)者雖對(duì)大青葉的化學(xué)成分和藥理作用有所研究,但總體上研究較少。因此,需要繼續(xù)對(duì)其活性物質(zhì)進(jìn)行研究,對(duì)化學(xué)成分與藥理作用之間的關(guān)系進(jìn)行更深入系統(tǒng)的研究,明確其物效基礎(chǔ)。