周杰，王文燕，劉雙青，張芬，林愛華

（1.中南民族大學(xué) 實(shí)驗(yàn)教學(xué)與工程訓(xùn)練中心，湖北 武漢 430074；2.中南民族大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，湖北 武漢 430074）

“倡導(dǎo)綠色實(shí)驗(yàn)，減少實(shí)驗(yàn)室危險化學(xué)品的使用”是實(shí)驗(yàn)室改革與發(fā)展的基本理念，也是實(shí)驗(yàn)教學(xué)始終面臨的一項需要不斷探索的重要課題。如何積極主動優(yōu)化實(shí)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備方法，不斷探索減少實(shí)驗(yàn)室危險化學(xué)品使用及危廢品的產(chǎn)生，確保實(shí)驗(yàn)室生物化學(xué)安全始終是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)工作的一項重要內(nèi)容。中南民族大學(xué)2014 年成立實(shí)驗(yàn)教學(xué)與實(shí)驗(yàn)室管理中心，將全校的基礎(chǔ)課程進(jìn)行整合，生命科學(xué)、藥學(xué)、生物醫(yī)學(xué)及資源與環(huán)境4個學(xué)院的基礎(chǔ)課程共計41 門歸類到基礎(chǔ)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室開設(shè)。經(jīng)過幾年的探索與實(shí)踐，生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容不斷改革、創(chuàng)新和發(fā)展，危險化學(xué)品的使用量在不斷減少。但是作為具體配制使用生物學(xué)?；返膶?shí)驗(yàn)技術(shù)人員，在長期的實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中深刻體會到關(guān)于生物學(xué)?；肥褂玫母母镞€有很大空間，如何積極主動地優(yōu)化實(shí)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備方法，不斷探索減少實(shí)驗(yàn)室危險化學(xué)品使用及危廢品的產(chǎn)生，確保實(shí)驗(yàn)室生物化學(xué)安全，始終是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)工作的一項重要內(nèi)容。

1 生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中?；肥褂眉拔U品產(chǎn)生中的問題與矛盾

1.1 在危化學(xué)品的使用及危廢品的產(chǎn)生中，實(shí)驗(yàn)老師和實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員關(guān)注的側(cè)重點(diǎn)不同

傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法是實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員根據(jù)實(shí)驗(yàn)老師提供的教學(xué)大綱，提前準(zhǔn)備好每一個實(shí)驗(yàn)項目需要試劑、耗材及儀器設(shè)備。這其中存在一個問題是，首先教學(xué)大綱是實(shí)驗(yàn)老師獨(dú)立于實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員之上的獨(dú)立決策，實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員無權(quán)參與，實(shí)驗(yàn)老師主要關(guān)注實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的完整性及培養(yǎng)方案中學(xué)生學(xué)時數(shù)的完成度，容易忽視危險化學(xué)品的使用；而實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員關(guān)注的則是危險化學(xué)品的使用情況，期待盡量少用或不用危險化學(xué)品。例如分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，對于實(shí)驗(yàn)要求較高的《動物肝臟RNA 提取實(shí)驗(yàn)》，為了降低RNA 酶污染，實(shí)驗(yàn)老師要求實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員用DEPC 水(有致癌性）對所有的實(shí)驗(yàn)材料、工具、儀器設(shè)備等進(jìn)行徹底的RNA 酶處理，達(dá)到極致的要求。但是由于實(shí)驗(yàn)結(jié)果受多方面因素的影響，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果非常不穩(wěn)定。對待這一個問題，老師更多關(guān)注實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作是否到位，較少關(guān)注學(xué)生實(shí)驗(yàn)過程RNA 酶污染，而實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員則更多關(guān)注到學(xué)生實(shí)驗(yàn)過程中的RNA 酶污染；其次每個實(shí)驗(yàn)項目需要提前配制的危化品數(shù)量如何確定，實(shí)驗(yàn)老師關(guān)注實(shí)驗(yàn)的方便快捷和學(xué)生的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，因而希望試劑配制數(shù)量多多益善，而實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員則需要嚴(yán)格訂購、保存、使用、管理?；罚J(rèn)真考慮存在的危險性以及需要承擔(dān)的風(fēng)險和責(zé)任，因而從自身安全及實(shí)驗(yàn)室安全考慮，則更為關(guān)注在實(shí)驗(yàn)教學(xué)課堂中盡量少用危險化學(xué)品[1,2]。

1.2 實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員的勞動強(qiáng)度與實(shí)驗(yàn)課堂產(chǎn)生危廢品數(shù)量之間的矛盾

目前生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室每學(xué)年要面向全校4 個學(xué)院的本科生開設(shè)近6000 人次的生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)，要使用大量的危險化學(xué)品，同時產(chǎn)生大量的危廢品。因?yàn)樯飳W(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)實(shí)驗(yàn)項目多，需要使用的危險化學(xué)品相對也較多，所以實(shí)驗(yàn)室要配制大量的有毒有害試劑（化生藥實(shí)驗(yàn)室的教學(xué)和科研都涉及到類似的情況）。但是有毒有害試劑的配制有一個特殊性：比如按照實(shí)驗(yàn)教案要求一堂實(shí)驗(yàn)課需要4 升有毒有害試劑，如果一次配制10 升的話，就能夠充分保證學(xué)生實(shí)驗(yàn)課堂的安全用量，應(yīng)付任何意外（學(xué)生操作失誤及重復(fù)實(shí)驗(yàn)等），一堂課下來實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員就可以輕輕松松過關(guān)、減少了很多的工作量。但是如果一次只配制5升的話，實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員就需要主動到實(shí)驗(yàn)課堂上指導(dǎo)學(xué)生?；返氖褂眉白⒁馐马?，并隨時關(guān)注實(shí)驗(yàn)教學(xué)課堂上學(xué)生實(shí)驗(yàn)動態(tài)以及是否會發(fā)生意外及重做的情況，時刻準(zhǔn)備重新熟練配制，以補(bǔ)充不足，保證實(shí)驗(yàn)課的順利進(jìn)行。這樣一來，對實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員來說必須參與到學(xué)生的實(shí)驗(yàn)教學(xué)中去，整個實(shí)驗(yàn)課堂是緊張而忙綠的，而且要增加一倍的工作量，甚至受到老師和學(xué)生的誤解，但是結(jié)果是減少5 升“有毒有害廢液”的產(chǎn)生。每學(xué)期學(xué)校都要處理幾次?；罚瑪?shù)量也是觸目驚心的。這是一個很現(xiàn)實(shí)的但是又不容易引起注意和重視的問題。

1.3 實(shí)驗(yàn)老師對學(xué)生的管理難度與產(chǎn)生危廢品數(shù)量之間的矛盾

實(shí)驗(yàn)教學(xué)課堂的方便、快捷、安全和對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的追求是實(shí)驗(yàn)老師和學(xué)生關(guān)注的重點(diǎn)，但是如果單純追求方便、快捷，容易忽視實(shí)驗(yàn)過程中對實(shí)驗(yàn)學(xué)生的管理，實(shí)驗(yàn)教學(xué)課堂就容易產(chǎn)生大量的危廢品。比如在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中，每個實(shí)驗(yàn)項目的完成需要大量不同的試劑，在實(shí)驗(yàn)的過程中試劑的量取是使用移液器還是玻璃移液管，在實(shí)驗(yàn)老師、實(shí)驗(yàn)學(xué)生與實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員之間存在一個很大的分歧。傳統(tǒng)的方法是使用玻璃移液管，每取完一種試劑清洗一下移液管即可繼續(xù)使用，不產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)垃圾廢品，但是需要學(xué)生具備耐心、細(xì)心和較高的操作水平，而且在操作中有更多時間對實(shí)驗(yàn)原理和實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行思考。但是近幾年隨著實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)的提高和實(shí)驗(yàn)條件改善，實(shí)驗(yàn)老師和學(xué)生對實(shí)驗(yàn)設(shè)備和耗材的使用也提出了更高的要求。目前生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室面向3 個學(xué)院開設(shè)的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，許多實(shí)驗(yàn)老師就提出了要求使用移液器。移液器的使用的確方便、快捷，但是移液器價格昂貴，使用要求高，需要定期校準(zhǔn)，如果學(xué)生不能規(guī)范使用，不僅容易損壞而且很容易污染，而且進(jìn)一步造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不準(zhǔn)確，無形之中又增加了危廢品的產(chǎn)生；每取完一種試劑就要更換一次塑料槍頭，一堂課下來就會產(chǎn)生大量的塑料槍頭垃圾，每學(xué)年僅塑料垃圾就幾十箱。

因?yàn)榻巧鸵暯堑牟煌瑢?dǎo)致實(shí)驗(yàn)老師、實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員和實(shí)驗(yàn)學(xué)生之間矛盾的產(chǎn)生，進(jìn)而導(dǎo)致大量不必要危險化學(xué)品但的使用及危廢品的產(chǎn)生，不僅造成了環(huán)境污染，也對廣大師生的身心健康帶來了一定的危害。是對于這一問題，無法完全從規(guī)章制度上對危險化學(xué)品的使用及危廢品的產(chǎn)生進(jìn)行精準(zhǔn)的量化考核。首先這是一個“責(zé)任心”的問題，“責(zé)任心”是無法量化考核的；其次，還會引起更多的問題，比如導(dǎo)致危廢品直接進(jìn)下水道和垃圾箱。

2 生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中生物化學(xué)安全現(xiàn)狀及采取的措施和方法

目前生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室每年訂購使用的危化品及相應(yīng)危廢品的產(chǎn)生主要來自生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室，生物化學(xué)的安全隱患也主要來自該實(shí)驗(yàn)室。我們從生物化學(xué)和分子生物學(xué)兩門實(shí)驗(yàn)教學(xué)課程入手，針對大量使用?；返膶?shí)驗(yàn)項目和大量產(chǎn)生危廢品的操作過程進(jìn)行梳理、討論，提出優(yōu)化方案，以實(shí)驗(yàn)教學(xué)課堂為平臺，通過學(xué)生的實(shí)驗(yàn)室開放，設(shè)計一系列實(shí)驗(yàn)對照，經(jīng)過全體師生全員參與進(jìn)行課堂驗(yàn)證，主動引導(dǎo)實(shí)驗(yàn)老師及實(shí)驗(yàn)學(xué)生不斷優(yōu)化實(shí)驗(yàn)過程和實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備條件，在落小、落細(xì)、落實(shí)上下功夫，最大限度地減少?；返氖褂煤臀U品的產(chǎn)生。因此，需要實(shí)驗(yàn)老師和實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員及實(shí)驗(yàn)學(xué)生達(dá)成共識，共同制定一套完整的關(guān)于優(yōu)化實(shí)驗(yàn)教學(xué)和實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備方法、減少危險化學(xué)品的使用和危廢品產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)教學(xué)方案，并在日后的實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中不斷進(jìn)行優(yōu)化改革[3-5]。

2.1 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)

2.1.1 現(xiàn)狀

（1）?；返氖褂?/p>

生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中《糖的呈色反應(yīng)》涉及全校三個學(xué)院共10 個專業(yè)約600 個學(xué)生，是使用?；泛彤a(chǎn)生危廢品最多的實(shí)驗(yàn)，用到7 種?；罚ò饬蛩帷恹}酸、1-萘酚、蒽酮、間苯二酚、3,5-二羥基甲苯、乙酸），其中濃硫酸、濃鹽酸的用量很大，危險性也最大。盡管各種預(yù)案及注意事項反復(fù)強(qiáng)調(diào)，但是由于實(shí)驗(yàn)學(xué)生數(shù)量龐大且學(xué)生的實(shí)際操作能力的局限等各種因素影響，各種事故時有發(fā)生。如由于試驗(yàn)品容易濺到學(xué)生皮膚上，給廣大師生造成了較大的恐慌；同時因?yàn)槭褂玫幕瘜W(xué)試劑較多，實(shí)驗(yàn)課堂學(xué)生數(shù)量爆滿，盡管開啟了通風(fēng)系統(tǒng)，但是在整個實(shí)驗(yàn)過程中，危險化學(xué)品的氣味彌漫教室，空氣污濁，給廣大師生的身心健康帶來了一定的危害。由于儲存、配制、管理及實(shí)驗(yàn)廢液處理都有很大的危險性，影響到實(shí)驗(yàn)室的安全；大量的廢液產(chǎn)生也造成了一定的社會危害，給實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員造成了一定的心理陰影。

（2）危廢品的產(chǎn)生

為了滿足實(shí)驗(yàn)老師及實(shí)驗(yàn)學(xué)生對實(shí)驗(yàn)試劑多多益善的要求，同時也減少實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員自身的工作量，試劑配制量一般在1.5～2.0 倍之間。特別是在?；返呐渲品矫?，為保證不需要第二次配制，一般的配制余量都較大，這樣實(shí)驗(yàn)老師和實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員可以不深入課堂，不必為課堂是否出現(xiàn)重做情況而擔(dān)心，更不存在重新配制試劑的情況，既受到老師和學(xué)生的歡迎又減少了工作量，但結(jié)果是產(chǎn)生了大量的危廢品。

2.1.2 采取的措施及方法

生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課程關(guān)聯(lián)生科院、藥學(xué)院，生醫(yī)學(xué)院三個學(xué)院12 個專業(yè)共30 名老師和800 名學(xué)生，加上實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員，共隸屬4 個不同的行政單位。實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員作為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)團(tuán)隊的紐帶，必須自覺把握生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)危化品的使用情況，提出合理可行的方案，通過與課程負(fù)責(zé)人及全體老師溝通協(xié)商，不斷改進(jìn)方案，并自覺作為方案實(shí)施的負(fù)責(zé)人，積極推動實(shí)施。

（1）促進(jìn)《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)》全體實(shí)驗(yàn)老師溝通交流

目前生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室已配合生科院完成了《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課程》視頻錄制工作，內(nèi)容涵蓋3 個學(xué)院開設(shè)的《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課程》的共10 個實(shí)驗(yàn)項目，并在中南民族大學(xué)課程學(xué)習(xí)中心上線。生科院的學(xué)生統(tǒng)一進(jìn)入學(xué)習(xí)通進(jìn)行學(xué)習(xí)，通過碎片化時間進(jìn)行課前預(yù)習(xí)，提前了解實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及實(shí)驗(yàn)中?；返奈ｋU性和注意事項，為減少課堂?；返膫ζ鸬搅朔e極的作用。

在此基礎(chǔ)上，開展下一步工作，首先促成其他學(xué)院的學(xué)生統(tǒng)一進(jìn)入學(xué)習(xí)通進(jìn)行學(xué)習(xí)；其次組織參加開放實(shí)驗(yàn)的學(xué)生完成《糖的呈色反應(yīng)》實(shí)驗(yàn)中用到濃硫酸的毛利氏反應(yīng)和蒽酮反應(yīng)錄制短視頻，在課堂課件PPT 中演示，實(shí)現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)教學(xué)課堂具體的實(shí)驗(yàn)操作中學(xué)生用水代替濃硫酸的試劑進(jìn)行假想模擬該實(shí)驗(yàn)，與視頻演示相配合，既實(shí)踐了一種操作方法，又避免使用濃硫酸，使得實(shí)驗(yàn)真實(shí)有趣、科學(xué)安全。

通過以上措施的實(shí)施，率先在生科院的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)《糖的呈色反應(yīng)》這一實(shí)驗(yàn)項目中，去掉毛利氏反應(yīng)和蒽酮反應(yīng)的實(shí)際操作，減少實(shí)驗(yàn)室濃硫酸的使用。通過生科院學(xué)生實(shí)驗(yàn)效果考察及與其他學(xué)院實(shí)驗(yàn)老師的溝通交流進(jìn)一步推廣應(yīng)用其它學(xué)院的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，實(shí)現(xiàn)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室去濃硫酸實(shí)驗(yàn)的目的。

（2）實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員主動打造“綠色實(shí)驗(yàn)室”

結(jié)合歷年實(shí)驗(yàn)教學(xué)的課堂經(jīng)驗(yàn)，對需要配制的?；罚貏e是《糖的呈色反應(yīng)》實(shí)驗(yàn)中需要的?；吩噭稍瓉淼?.5～2.0倍配制量降低到1.2 倍配制量，這樣實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員必須和實(shí)驗(yàn)老師一起深入課堂，指導(dǎo)學(xué)生正確量取?；吩噭瓤梢杂行Х乐刮ｋU發(fā)生，又能及時及時掌握試劑使用情況，如果出現(xiàn)重新實(shí)驗(yàn)的情況，實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員可以根據(jù)具體情況快速在各個小組之間調(diào)劑試，互補(bǔ)使用或快速重新熟練配制試劑，以保證學(xué)生實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。雖然實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員無形中增加了工作量，但是最大限度降低了危化品的使用和危廢品的產(chǎn)生。

目前三個學(xué)院開設(shè)的《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》有的學(xué)院操作使用玻璃移液管量取試劑，有的學(xué)院學(xué)院是使用移液槍。首先完成移液器和玻璃移液管的使用方法及使用注意事項錄制短視頻，在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)第一堂課的課件PPT 中演示，通過比較兩者使用的優(yōu)缺點(diǎn)，使學(xué)生形成感性認(rèn)識，并在實(shí)驗(yàn)開始前進(jìn)行移液器和玻璃移液管的使用練習(xí)；其次，逐步推進(jìn)使用玻璃移液管，生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)開設(shè)的特點(diǎn)是同一個實(shí)驗(yàn)項目分別在3 個不同的教室同時開設(shè)。首先在一個教室率先改用玻璃移液管，其他教室繼續(xù)對比使用移液槍，通過現(xiàn)場試驗(yàn)結(jié)果對照，用事實(shí)說話，促成老師和學(xué)生互相交流對比，最后達(dá)成共識，統(tǒng)一使用玻璃移液管。從源頭上減少危廢品的產(chǎn)生[5,6]。

2.2 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

2.2.1 現(xiàn)狀

（1）?；返氖褂?/p>

DNA、RNA 的相關(guān)內(nèi)容是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中必學(xué)知識點(diǎn)，每年要面向生命科學(xué)學(xué)院、藥學(xué)院、生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院有近八百名本科生開設(shè)相關(guān)實(shí)驗(yàn)項目。但是目前實(shí)驗(yàn)室開設(shè)的《動物肝臟總RNA 提取實(shí)驗(yàn)》準(zhǔn)備工作相當(dāng)麻煩、工作量巨大，用到大量有毒有害的試劑（DEPC 水等），而且實(shí)驗(yàn)用到的試劑盒價值昂貴，加上實(shí)驗(yàn)結(jié)果受多方面的影響，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果很不穩(wěn)定。這個問題一直困擾實(shí)驗(yàn)老師、實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員和實(shí)驗(yàn)學(xué)生。其中如何降低RNA 酶污染，防止RNA 降解是該實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵，是實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作的核心目標(biāo)和宗旨，也是實(shí)驗(yàn)課堂上實(shí)驗(yàn)老師科學(xué)指導(dǎo)與學(xué)生規(guī)范操作的根本任務(wù)。如何真正優(yōu)化RNA 提取實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作、實(shí)驗(yàn)過程及實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員和實(shí)驗(yàn)老師需要積極解決的問題[7,8]。

（2）危廢品的產(chǎn)生

為了防止實(shí)驗(yàn)過程中RNA 酶污染，實(shí)驗(yàn)老師要求1.5 mL Ep管及槍頭、槍頭盒必須用無RNase 的新購專用管，因此產(chǎn)生大量的塑料垃圾。實(shí)驗(yàn)老師鼓勵學(xué)生全程帶手套和口罩，整個實(shí)驗(yàn)課堂一個學(xué)生要更換幾次手套和口罩，產(chǎn)生大量的實(shí)驗(yàn)垃圾。

2.2.2 采取的措施及方法

RNA 酶是一類生物活性非常穩(wěn)定的酶類，除了細(xì)胞內(nèi)源RNA 酶外，外界環(huán)境中均存在RNA 酶，嚴(yán)格的RNA 提取實(shí)驗(yàn)必須在無RNase 的環(huán)境中進(jìn)行。但是由于實(shí)驗(yàn)條件所限，實(shí)驗(yàn)只能在教室的露天空氣中進(jìn)行，增加了外源RNA 酶污染潛在危險，也給實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性帶來了一定的困難。

總結(jié)多年《動物總RNA 提取實(shí)驗(yàn)》課堂經(jīng)驗(yàn)，由于實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員準(zhǔn)備方法的不同，老師與學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作水平的不同，導(dǎo)致了實(shí)驗(yàn)過程及實(shí)驗(yàn)結(jié)果的巨大差異?？偨Y(jié)發(fā)現(xiàn)，抑制細(xì)胞內(nèi)源RNA酶是順利產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)結(jié)果的關(guān)鍵，抑制外源RNA 酶是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的基本保證，但是實(shí)驗(yàn)操作速度及操作方法是控制外源RNA 酶的關(guān)鍵因素。

（1）關(guān)于細(xì)胞內(nèi)源RNA 酶抑制

①使用Trizol 試劑，已有文獻(xiàn)記載，Trizol 試劑中含有強(qiáng)烈的RNA 酶抑制劑，組織樣品用Trizol 充分研磨不用擔(dān)心RNA 的降解。②實(shí)驗(yàn)過程中用無Rnase 的0.1%DEPC 水（從生物公司購買）直接溶解RNA。③用75%乙醇（0.1%DEPC 水）做進(jìn)一步的處理，以上3 個措施已經(jīng)能夠充分抑制細(xì)胞內(nèi)源RNA 酶，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的合理性。

（2）關(guān)于外源RNA 酶抑制

設(shè)計一系列對照實(shí)驗(yàn)：①不同層次學(xué)生分三組進(jìn)行對照實(shí)驗(yàn)，A.參加湖北省生物學(xué)競賽的同學(xué)競賽前的實(shí)驗(yàn)室開放性訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)；B.已經(jīng)出色做過《動物總RNA 提取實(shí)驗(yàn)》的學(xué)生進(jìn)行第二次開放實(shí)驗(yàn)；C.隨機(jī)抽取第一次進(jìn)行《動物總RNA 提取實(shí)驗(yàn)》實(shí)驗(yàn)課堂上的部分同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。每一組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的學(xué)生部分同學(xué)全程戴口罩手套、部分同學(xué)全程不戴口罩手套。②相同的實(shí)驗(yàn)條件下不同課堂進(jìn)行實(shí)驗(yàn)對照。③不同實(shí)驗(yàn)條件下不同課堂進(jìn)行實(shí)驗(yàn)對照。

2.2.3 實(shí)驗(yàn)效果比對

通過學(xué)生的開放實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證對照發(fā)現(xiàn)：①對實(shí)驗(yàn)耗材和玻璃器皿采用121℃、40min 高壓滅菌能夠滿足抑制外源RNA 酶的要求，達(dá)到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的合理性，與DEPC 水進(jìn)行處理的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相差無幾，所以不需要延續(xù)多年傳統(tǒng)的方法使用大量的DEPC水進(jìn)行處理及采取一些極致措施來消除外源RNA 酶；②抑制外源RNA 酶的關(guān)鍵因素是學(xué)生的實(shí)際操作能力、實(shí)驗(yàn)操作速度和操作方法。

因此，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果對照，引導(dǎo)老師和學(xué)生把保證《動物肝臟總RNA 提取實(shí)驗(yàn)》成功的關(guān)注重點(diǎn)轉(zhuǎn)移到加強(qiáng)課堂管理、提高學(xué)生操作技能培養(yǎng)上來。通過減少DEPC 水等危險化學(xué)品的使用及塑料危廢品的產(chǎn)生，從根本上實(shí)現(xiàn)了“優(yōu)化《動物肝臟總RNA 提取實(shí)驗(yàn)》的實(shí)驗(yàn)過程及實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備方法，減少實(shí)驗(yàn)室危害”。

3 結(jié)語

高校生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室在開展實(shí)驗(yàn)教學(xué)活動過程中不可避免地要用到危險化學(xué)品并產(chǎn)生危廢品，由于參與教學(xué)科研的人數(shù)眾多，高校生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室?；泛蛯?shí)驗(yàn)廢棄物已經(jīng)成為一個不容忽視的小型污染源，是實(shí)驗(yàn)室安全管理的一大隱患。而危廢品自行處理困難，都是由實(shí)驗(yàn)室自行回收后交專業(yè)公司進(jìn)行處理，不但影響環(huán)境而且花費(fèi)大量的處理費(fèi)。所以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備方法，從源頭上減少危化品的使用和危廢品的產(chǎn)生，是從根本上解決這一問題的關(guān)鍵。作者所在的中南民族大學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室，通過對大量使用危險化學(xué)品的實(shí)驗(yàn)項目和大量產(chǎn)生危廢品的操作過程進(jìn)行梳理、討論并提出優(yōu)化方案，制定了一套完整的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)教學(xué)和實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備方法、減少危險化學(xué)品的使用和危廢品產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)教學(xué)方案，并在具體的實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中進(jìn)行實(shí)施；實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員通過自覺行動和主動作為減少?；返呐渲茢?shù)量，并積極深入課堂指導(dǎo)監(jiān)督學(xué)生對危化品的使用，引領(lǐng)老師和學(xué)生養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣。通過上述一系列措施的實(shí)施，生物化學(xué)和分子生物學(xué)兩門實(shí)驗(yàn)課的?；肥褂昧亢臀U品的產(chǎn)生量都明顯降低，逐步實(shí)現(xiàn)了建設(shè)節(jié)能環(huán)保綠色實(shí)驗(yàn)室的管理理念，并在日后的實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中不斷進(jìn)行優(yōu)化改革[9，10]。