李金萍

（內(nèi)蒙古呼倫貝爾市阿榮旗興安鎮(zhèn)綜合保障和技術(shù)推廣中心，內(nèi)蒙古 呼倫貝爾 162750）

1907年Tyzzer首次在家鼠身上發(fā)現(xiàn)隱孢子蟲，隨后在多種動物中也發(fā)現(xiàn)了該蟲，1976 年在美國首次發(fā)現(xiàn)人類感染隱孢子蟲的病例，表明隱孢子蟲病是一種重要的人畜共患寄生蟲病。隱孢子蟲主要寄生于動物的腸道，并主要引起幼齡動物腹瀉病。牛隱孢子蟲病主要見于犢牛，導(dǎo)致犢牛出現(xiàn)嚴(yán)重腹瀉甚至脫水癥狀，病情嚴(yán)重時可導(dǎo)致犢牛死亡。在我國內(nèi)蒙古、北京、廣東等省均有牛隱孢子蟲病的報道，并且在規(guī)?；B(yǎng)殖場中犢牛感染隱孢子蟲的情況較為嚴(yán)重，給我國肉牛和奶牛養(yǎng)殖均造成了嚴(yán)重的影響。本文對牛隱孢子蟲病的病原特征、流行病學(xué)、臨床癥狀和病理變化、診斷方法和防控措施進(jìn)行綜述，希望為犢牛隱孢子蟲病的防控工作提供參考。

1 病原

牛隱孢子蟲病的病原為隱孢子蟲科隱孢子蟲屬的多種寄生蟲，如安氏隱孢子蟲、鼠隱孢子蟲、小隱孢子蟲、牛隱孢子蟲和瑞氏隱孢子蟲，其中安氏隱孢子蟲和鼠隱孢子蟲是人畜共患的隱孢子蟲。隱孢子蟲蟲體較小，從形態(tài)上很難將不同的隱孢子蟲進(jìn)行區(qū)分，需要進(jìn)行分子生物學(xué)試驗鑒定。不同類型的隱孢子蟲卵囊大小不同，形態(tài)相近，卵囊呈圓形或卵圓形，卵囊壁光滑，無微孔、極粒和孢子囊，每個卵囊內(nèi)含有4個裸露的子孢子和1個殘體。隱孢子蟲主要寄生于宿主的上皮細(xì)胞內(nèi)，尤其是腸道上皮細(xì)胞。隱孢子蟲有三種生殖方式，分別為裂殖生殖、配子生殖和孢子生殖。宿主經(jīng)口感染隱孢子蟲成熟的卵囊后，子孢子從宿主小腸脫囊逸出，附著于腸上皮細(xì)胞，在胞膜和胞質(zhì)之間形成帶蟲空泡，隨后隱孢子蟲在空泡內(nèi)進(jìn)行無性繁殖。首先發(fā)育成滋養(yǎng)體，隨后發(fā)育為第一代裂殖體（6～8個裂殖體）、第二代裂殖體（4 個裂殖體）。第二代裂殖體分別發(fā)育為大配子體和小配子體，小配子體又分裂為16個無鞭毛小配子，隨后和大配子體形成合子。合子又可發(fā)育為薄壁型和后壁型兩種卵囊，但該階段卵囊無極帽和微孔。卵囊在宿主體內(nèi)完成孢子發(fā)育，內(nèi)含有4個子孢子和1 個殘體，但沒有孢子囊。薄壁型卵囊宿主可以自身感染，而厚壁型卵囊則通過糞便排出體外后才具有感染性。隱孢子蟲完成生活史一般為5～11 d。

2 流行病學(xué)

隱孢子蟲可感染多種動物，目前已知至少有240種動物可感染隱孢子蟲。在牛場中，帶蟲牛和患病牛是主要的傳染源，其糞便中含有大量的隱孢子蟲卵囊，通過污染水源和飼料傳播卵囊，此外，蒼蠅等節(jié)肢動物、飼養(yǎng)人員也可機(jī)械性地攜帶隱孢子蟲卵囊。各日齡的牛均可感染隱孢子蟲，但年齡較大的牛感染后一般不會表現(xiàn)臨床癥狀，感染的牛排出的卵囊數(shù)量較少，但是犢牛尤其是剛出生1～2周的犢牛感染后臨床癥狀較為嚴(yán)重，且糞便卵囊數(shù)量也較多。易感牛通過攝入被隱孢子蟲卵囊污染的飼料和飲水后感染，犢?？赏ㄟ^被隱孢子蟲卵囊污染的乳頭感染。

3 致病機(jī)制

目前，隱孢子蟲的致病機(jī)制尚未完全闡明。隱孢子蟲主要寄生于腸上皮細(xì)胞刷狀緣空泡內(nèi)，蟲體寄生后腸黏膜表面呈凹陷或火山口狀，當(dāng)蟲體數(shù)量增多后可導(dǎo)致腸上皮細(xì)胞絨毛萎縮、變短、變粗或融合、移位和脫落，上皮細(xì)胞老化和脫落的速度加快。宿主小腸黏膜廣泛受損，腸黏膜表面積減少，導(dǎo)致宿主腸道吸收功能降低，脂肪和糖類吸收功能受損，從而導(dǎo)致宿主出現(xiàn)腹瀉癥狀。隱孢子蟲寄生可導(dǎo)致宿主腸黏膜表面積縮小，多種黏膜酶數(shù)量降低，這可能是引起腹瀉的主要原因之一。

4 臨床癥狀和病理變化

感染犢牛的潛伏期為7 d，排卵囊高峰期為7 d，高峰期可持續(xù)5 d，排卵囊持續(xù)時間為10 d。新生犢牛對隱孢子蟲的敏感度最高，1～8 月齡的犢牛發(fā)病率較高，尤其是3～4 周齡的犢牛癥狀更為嚴(yán)重?；疾倥＞癯劣簦瑓捠?，腹瀉，糞便中可混有大量的纖維素性滲出物，有時可見血液?；疾倥ＩL發(fā)育停滯，極度消瘦，有時體溫升高。犢牛死亡率可達(dá)16%～40%，其中4～30日齡的犢牛死亡率最高，耐過的犢牛生長發(fā)育受阻，生長性能嚴(yán)重下降?；疾∨５闹饕∽兲卣鳛榭漳c絨毛層萎縮和損傷，腸黏膜固有層中的淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞增多，呈現(xiàn)出典型的腸炎病變，在腸道病變部位可見大量的隱孢子蟲各階段蟲體。

5 診斷方法

通常出現(xiàn)腹瀉并且使用抗生素治療無效的犢?？赡芑加须[孢子蟲病，確診該病需進(jìn)行實驗室檢測?？刹杉疾∨５募S便進(jìn)行飽和蔗糖溶液漂浮試驗，若在溶液內(nèi)發(fā)現(xiàn)隱孢子蟲卵囊即可確診。不同隱孢子蟲株的卵囊可存在一定的差異。鼠隱孢子蟲卵囊呈卵圓形，無卵膜孔和極體，平均大小為7.38 μm×5.6 μm，長寬比為1.32∶1，孢子化的卵囊內(nèi)有4 個子孢子和顆粒狀殘體，細(xì)胞核靠近后端。小隱孢子蟲卵囊呈球形或卵圓形，平均大小為5.3 μm×4.8 μm，長寬比為1.1∶1，孢子化卵囊有4 個子孢子和顆粒狀殘體，子孢子大小為4.9 μm×2.0 μm，細(xì)胞核靠近鈍端。安氏隱孢子蟲卵囊呈卵圓形，平均大小為7.25 μm×6.33 μm，長寬比為1.22∶1，囊壁透明，厚度為1μm，無微孔和極粒，孢子化卵囊內(nèi)有4 個子孢子和1 個殘體。牛隱孢子蟲的卵囊呈近圓形，大小為4.76～5.35 μm×4.17～4.76 μm，長寬比1.06∶1，孢子化卵囊內(nèi)有4個子孢子，無孢子卵囊。瑞氏隱孢子蟲卵囊近圓形，體積較小，大小為3.38～3.50 μm×3.49～3.61 μm，長寬比為1.03∶1。

對于病死的犢牛也可采集犢牛的腸道組織制備成切片或涂片，采取姬姆薩染色或者萋-尼氏染色，在顯微鏡下觀察蟲體。此外，也可使用提取患病牛直腸糞便、病變腸道等樣品的核酸進(jìn)行PCR 檢測隱孢子蟲特異性的核酸序列。還可使用ELISA、膠體金快速診斷試紙條等診斷該病。

6 防治

目前，犢牛隱孢子蟲病無特效的治療藥物，對于患病牛進(jìn)行對癥治療和支持療法，如腹瀉嚴(yán)重的牛應(yīng)及時止瀉、補(bǔ)液、糾正酸中毒。有研究使用抗球蟲藥物、抗生素和磺胺類藥物治療患病動物，但治療效果較差，然而，部分中藥和組方在治療隱孢子蟲病時表現(xiàn)出一定的效果，是目前隱孢子蟲病治療藥物研究的重要方向。

除了無特效治療藥物，目前也無疫苗可用于牛隱孢子蟲病的防控，因此該病的防控主要采取加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和防止病原傳入。首先，應(yīng)防止隱孢子蟲進(jìn)入牛場。隱孢子蟲主要通過帶蟲?；蚧疾∨＿M(jìn)入牛場，因此需要引進(jìn)新牛的牛場應(yīng)做好相關(guān)的檢測，不從流行該病的牛場引入新牛。其次，由于隱孢子蟲感染后僅有犢?？沙霈F(xiàn)較為明顯的臨床癥狀，而成年牛感染后通常成為隱性帶蟲牛，因此對于流行過隱孢子蟲病的牛場應(yīng)定期進(jìn)行隱孢子蟲檢測，區(qū)分帶蟲牛和健康牛，并采取分別管理。對于長期帶蟲的母牛應(yīng)進(jìn)行淘汰處理，以防犢牛感染。在牛隱孢子蟲防控工作中，消毒是重要的一環(huán)。隱孢子蟲的卵囊對不同的消毒劑敏感程度不同，因此，選擇適合的消毒方法尤為重要。目前已知碘酊、氫氧化鈉、煤皂酚和次氯酸等對隱孢子蟲的卵囊無效，常用的消毒劑中10%甲醛、5%氨水和漂白粉對隱孢子蟲卵囊具有較好的抑殺作用。可使用10%的甲醛消毒液加熱至65～75 ℃處理30 min，可有效殺死隱孢子蟲卵囊，該方法常用于毛巾、毛刷等養(yǎng)殖工具的消毒?；钚月葹?%的漂白粉則常用于牛床、運動場、水槽、飼料槽、土壤和糞便的消毒。5%氨水可噴灑飼料槽、牛床、運動場進(jìn)行消毒，但應(yīng)注意氨水對?？僧a(chǎn)生刺激，因此應(yīng)避免牛接觸氨水。犢牛是牛隱孢子蟲病的多發(fā)群體，因此應(yīng)對犢牛進(jìn)行單獨飼養(yǎng)，定期清洗母牛乳頭，防止其被隱孢子蟲卵囊污染。同時還應(yīng)注意，在斷奶前后應(yīng)加強(qiáng)對犢牛的飼養(yǎng)工作，飼料更換應(yīng)采取逐步更換的方式，也可為犢牛喂食增強(qiáng)免疫水平的中草藥、維生素和微生態(tài)制劑，以增強(qiáng)犢牛的抗病能力。對于表現(xiàn)出嚴(yán)重腹瀉的犢牛，應(yīng)及時隔離飼喂，診斷發(fā)病原因，若為隱孢子蟲感染引起的腹瀉，應(yīng)采取支持療法和對癥治療，對于經(jīng)濟(jì)價值較低或患病嚴(yán)重的犢?？商蕴幚恚疾∨５募S便應(yīng)進(jìn)行無害化處理。此外，還應(yīng)對同群牛感染隱孢子蟲的情況進(jìn)行檢測，將感染牛和健康牛分欄飼喂，降低隱孢子蟲傳播造成的經(jīng)濟(jì)損失。

7 結(jié)語

近年來，牛規(guī)?；B(yǎng)殖程度逐步提高，同時也導(dǎo)致牛疫病和寄生蟲病的頻發(fā)，其中隱孢子蟲的感染率也有上升的趨勢。因此，牛場養(yǎng)殖工作人員應(yīng)加強(qiáng)對犢牛隱孢子蟲病的防控意識，了解隱孢子蟲對牛的危害，采取科學(xué)的方式防控該病。與此同時，由于對隱孢子蟲的致病機(jī)制和傳染機(jī)制方面仍存在知識空白，因此尚未研發(fā)出抗牛隱孢子蟲病的特效藥和疫苗，這要求從事獸醫(yī)科研工作的人員加強(qiáng)對隱孢子蟲相關(guān)的致病機(jī)制的基礎(chǔ)研究，根據(jù)其生長發(fā)育特點研發(fā)出特效的抗隱孢子蟲的藥物和疫苗，為牛隱孢子蟲病的防治提供有效的手段，從而降低牛隱孢子蟲病的發(fā)病率，降低由該病造成的經(jīng)濟(jì)損失。□