劉躍進，劉 穎，黃竹青*

（1.沈陽恒生生物科技發(fā)展有限公司，遼寧 沈陽 110500；2.遼寧醫(yī)藥職業(yè)學(xué)院，遼寧 沈陽 110101）

鹿茸菇，學(xué)名荷葉離褶傘（Lyophyllum decastes），因其切片和中藥鹿茸切片相似而得名[1]，為食藥用型真菌，屬于擔子菌亞門（Basidiomycotina），白蘑科（Tricholomataceae），離褶傘屬（Lyophyllum）[2]。荷葉離褶傘野生資源豐富，主要分布于北半球溫帶地區(qū)，我國遼寧、云南、江蘇、四川等地均有分布。荷葉離褶傘子實體中蛋白質(zhì)、氨基酸含量較高，脂肪含量較低，而且富含人體所需的氨基酸17種，含有維生素B族、煙酸等大量元素，及鋅、銅、硒等有益微量元素，具有較高的營養(yǎng)價值[3-5]。同時，子實體中富含多糖，具有降血糖血脂、抗腫瘤等功效[6-7]。

荷葉離褶傘因其味鮮宜人，早就成為研究者的馴化對象。1973年，李植森使用蕨臺根、茅草等進行仿野生栽培[8]。1994年，Kang等用赤楊木屑和啤酒渣栽培獲得子實體[9]。Yoshihama研究發(fā)現(xiàn)可馴化形成子實體，并申報專利[10]。2005年，李林玉等研究了荷葉離褶傘菌絲培養(yǎng)的最佳碳源、氮源及其碳氮比[11]。2006年，魏生龍等研究了荷葉離褶傘子實體形成的最佳條件[12]。2007年，程繼紅等首次實現(xiàn)荷葉離褶傘工廠化栽培[13]。2019年，木村榮一介紹了日本鹿茸菇的栽培歷程，從20世紀90年代的工廠化技術(shù)不成熟、產(chǎn)品產(chǎn)量低，到2008年達到2 940.6 t的最高年產(chǎn)，后因種性問題而逐年減產(chǎn)[14]。

進入21世紀，鹿茸菇栽培已進入工廠化生產(chǎn)的時代。食用菌工廠化栽培是集智能化、自動化于一體的科學(xué)、高效栽培模式[15]，最佳的栽培配方是實現(xiàn)工廠化栽培最大效能的關(guān)鍵，該研究比較了2種不同的栽培配方，觀察其不同生長發(fā)育期的差異。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌種。供試菌種HS-L1為引進品種，保存于沈陽恒生生物科技發(fā)展有限公司菌種室。

1.1.2 培養(yǎng)基。配方1（P1）：玉米芯40%、木屑20%、麩皮20%、豆渣10%、玉米面5%、豆皮4%、碳酸鈣1%，含水量65%；配方2（P2）：玉米芯40%、木屑20%、金針菇菌糠20%、麩皮15%、玉米面3%、石膏1%、碳酸鈣1%，含水量65%；配方3（P3）：玉米芯23%、木屑35%、麩皮22%、玉米糠12%、草炭6%、石膏1%、碳酸鈣1%，含水量65%。

1.1.3 栽培工藝。采用聚丙烯塑料瓶（1 100 cc），每瓶裝濕料680 g，121℃高壓滅菌70 min，冷卻至22℃以下后，采用自動接種機接入液體種，接種量為25 mL。培養(yǎng)期培養(yǎng)室溫度20℃～25℃，其中定植期瓶間溫度保持在22℃，生長期和后熟期瓶間溫度保持在24℃，濕度75%，二氧化碳濃度3 000 mg/kg。采用平搔的方式搔菌后，補入10 mL水。出菇期溫度控制在18℃，空氣濕度95%以上，二氧化碳濃度小于2 500 mg/kg，光照強度300 Lux。當菇蓋直徑為1.5～2.0 cm，菇柄長度8～12 cm時進行采收。每個栽培配方5 000瓶，記錄每個栽培配方污染率、菌絲生長情況、采收情況及產(chǎn)量。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同栽培配方對培養(yǎng)期的影響

鹿茸菇的培養(yǎng)期分為3個階段，分別為定植期、生長期和后熟期，不同栽培料配方對鹿茸菇培養(yǎng)期影響不同。

2.1.1 定植期。圖1從左至右，依次為配方P1、P2和P3。接種2 d后，栽培配方P1和P2料面開始發(fā)菌，P2料面菌絲占瓶口料面的50%以上，P1料面菌絲占瓶口料面的20%左右，P3料面未發(fā)菌（圖1a）。接種5 d后，P2料面已被菌絲封面，P1料面菌絲占到50%以上，P3料面有零星菌絲長出（圖1b）。接種7 d后，P2料面菌絲不斷增厚，P1料面被菌絲封面，P3料面菌絲占瓶口料面的10%左右（圖1c）。從定植期看，栽培配方P2的發(fā)菌速度最快，P1其次，P3最慢

圖1 不同栽培料定植發(fā)菌情況對比（a、b、c分別為接種2 d、5 d、7 d的菌絲發(fā)菌情況）

2.1.2 生長期。菌絲封住料面后，進入生長期。接種10 d后，P1、P2瓶口和瓶身菌絲增多，P2菌絲濃白，料面有水珠。P3菌絲未封住料面，菌絲也沒有向下生長（圖2）。由于P3發(fā)菌緩慢，同時污染嚴重，不能與P1、P2同一進度培養(yǎng)。

圖2 不同栽培料接種10 d菌絲生長情況對比

接種25 d后，P1、P2瓶口邊緣菌絲變黃，瓶身大面積發(fā)菌，P2比P1菌絲量多、菌絲厚，瓶底大面積發(fā)菌，但仍未發(fā)滿（圖3）。

圖3 不同栽培料接種25 d菌絲生長情況對比

接種40 d后，P1、P2瓶口菌絲濃白，邊緣菌絲稍老化，P2瓶身菌絲發(fā)滿，菌絲厚實，菌絲薄厚均勻，P1瓶身菌絲仍未發(fā)滿，菌絲薄厚不均勻，P1、P2瓶底菌絲發(fā)滿，P2菌絲比P1多且厚（圖4）。

圖4 不同栽培料接種40 d菌絲生長情況對比

2.1.3 后熟期。接種50 d后，P1、P2瓶底菌絲發(fā)滿。P1、P2瓶口菌絲濃白，邊緣菌絲老化，P2比P1老化嚴重，P1、P2瓶身菌絲發(fā)滿，P1菌絲薄厚不均勻，有黃色夾雜著白色的菌斑生成但不明顯，P2菌絲薄厚均勻，且有大面積的黃色夾雜著白色的菌斑生成。將P1、P2進行刨瓶，發(fā)現(xiàn)P1和P2菌絲較多，但P2明顯菌絲更細、更密，培養(yǎng)料也相對較軟，P2已完成菌絲后熟（圖5）。

圖5 不同栽培料接種50 d菌絲生長情況對比

2.2 不同栽培配方對出菇期的影響

菌絲完成后熟后，采用平搔的方式進行機械搔菌，同時每瓶補入10 mL水。搔菌3 d后，菌絲開始恢復(fù)，菌絲量少，氣生菌絲多。P2比P1菌絲恢復(fù)略快，P1有吐黃水現(xiàn)象。7 d時，P2菌絲已完全覆面，P1部分覆面不完全。12 d時，P1和P2均覆面完全，料面有冷凝水（圖6）。

圖6 不同栽培料搔菌12 d菌絲生長情況對比（左圖P1，右圖P2）

搔菌24 d，現(xiàn)菇芽。P2出芽整齊，菇芽比P1粗壯。P1部分出芽多，部分出芽少，均一度較低（圖7）。

圖7 不同栽培料出芽情況對比（左圖P1，右圖P2）

搔菌40 d，子實體達到采收的標準。P1和P2高度、整齊性相差不多（圖8）。但P2的有效芽數(shù)為40～42個，P1的有效芽數(shù)為28～33個，P2比P1高21.43%。P2的單瓶菇重為（236.04±4.17）g，P1的單瓶菇重為（127.52±1.79）g，P2是P1的1.85倍。

圖8 不同栽培料出菇情況對比（左圖P1，右圖P2）

2.3 不同栽培配方對生長發(fā)育的影響

栽培配方P2完成整個栽培期需要90 d，比P1縮短了20 d，其中發(fā)菌期縮短了13 d，出菇期縮短了7 d。P2的污染率為2.06%，比P1降低了5個百分點（表1）。

表1 不同栽培配方對鹿茸菇生長發(fā)育的影響比較

3 結(jié)論與討論

鹿茸菇工廠化栽培經(jīng)歷了多年的發(fā)展，從適合工廠化栽培菌種的選育，到最佳工廠化栽培料的篩選，及機械化生產(chǎn)設(shè)備，每一個環(huán)節(jié)均直接影響鹿茸菇的產(chǎn)量和品質(zhì)。工廠化栽培鹿茸菇與金針菇、真姬菇等比較成熟的工廠化栽培食用菌相比，栽培過程中有較多的相似之處，但鹿茸菇的菌絲生長速度較其他工廠化食用菌品種較低，因此，在培養(yǎng)定植前期發(fā)菌溫度要偏高2℃～3℃，保障菌絲快速萌發(fā)，減少被綠霉侵染的風險，降低污染率。

后熟是鹿茸菇的菌種特性，如果后熟時間不足，會嚴重影響子實體的產(chǎn)量。該研究的栽培配方P2不僅能保證高產(chǎn)，而且有一個顯著的后熟標志。在菌絲長滿栽培瓶后，在瓶身會出現(xiàn)大小不一的黃色斑塊，斑塊的出現(xiàn)代表著菌絲后熟完成，可以進入出菇階段。后熟斑塊的大小、出現(xiàn)時間與子實體產(chǎn)量和品質(zhì)的關(guān)系，將是下一步研究的重點。鹿茸菇菌絲完成后熟后，菌絲更細、更密，培養(yǎng)料也相對較軟，這與栽培料的配方有密切關(guān)系。P2中添加了金針菇的菌糠，菌糠中含有大量的纖維素、半纖維素、木質(zhì)素及菌絲體等，為菌絲生長提供充足了碳源[16]。金針菇菌糠的用量占比對鹿茸菇栽培的影響，也是研究的另一個方向。