王瑩瑩，張賢培，劉震陽，閆麗娜，高 霞*

(1.河北省石家莊市疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病防治所，河北 石家莊050011 ；2.河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院，河北 石家莊 050017；3.河北醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)教研室、河北省環(huán)境與人群健康重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北 石家莊 050017)

肝癌是臨床上常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，全球每年約有84.1萬新發(fā)病例和78.2萬病死病例[1]，其中超過50%的肝癌新發(fā)病例發(fā)生在中國。2018年，在我國常見惡性腫瘤發(fā)病率、腫瘤致死病因中，肝癌分別位列第4位和第2位。慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染目前是我國肝癌發(fā)病的重要誘因，肝炎變成肝纖維化、肝硬化，進(jìn)而演變成肝癌[2-4]。最新研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞膜上的單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(monocarboxylate transporter，MCT)與腫瘤細(xì)胞的非控制性增長有關(guān)，而SLC16A11和SLC16A13編碼的蛋白質(zhì)MCT11、MCT13就屬于MCT家族，但是SLC16A11和SLC16A13是否與肝癌發(fā)生發(fā)展有關(guān)尚不明確[5-7]。本研究將探討SLC16A11 rs13342692與SLC16A13 rs4796576基因多態(tài)性與乙型肝炎相關(guān)性肝癌的關(guān)聯(lián)性。

1 資 料 與 方 法

1.1一般資料 選取2010年1月-2014年3月于河北醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院、第二醫(yī)院、第四醫(yī)院和河北省石家莊市第五醫(yī)院的住院患者和體檢人群1 039例，其中健康體檢者370例和HBV自然清除(natural clearance，NC)者248例分別為對(duì)照組，乙型肝炎相關(guān)性肝癌(HBV相關(guān)肝癌)患者421例為病例組。其中病例診斷標(biāo)準(zhǔn)符合由中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)和中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)聯(lián)合制定的2010版《慢性乙型肝炎防治指南》。

本研究經(jīng)河北醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過。所有研究對(duì)象均知情同意且簽署知情同意書。

1.2樣本含量 采用PASS 2005軟件計(jì)算樣本含量，取雙側(cè)α=0.05，檢驗(yàn)效能1-β=0.85，罕見等位基因頻率(minor allele frequency，MAF)取15%，比值比OR=2，對(duì)照組與病例組人數(shù)比值為1∶1，經(jīng)計(jì)算每組所需最少樣本含量為237。本研究各組樣本含量均達(dá)到237例以上，其檢驗(yàn)效能將大于85%。

1.3資料收集和錄入 本研究在獲取研究對(duì)象的知情同意后，收集了患者的基本信息(性別、年齡、吸煙、飲酒等)，抽取其5 mL外周靜脈乙二胺四乙酸抗凝血，提取基因組DNA，運(yùn)用Sequenom實(shí)驗(yàn)平臺(tái)進(jìn)行SLC16A11 rs13342692與SLC16A13 rs4796576的基因分型。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用IBM SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料比較采用K-WH秩和檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)和χ2分割法?；蚨鄳B(tài)性與乙型肝炎相關(guān)性肝癌的關(guān)聯(lián)性分析采用二分類Logistic回歸分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.13組一般情況比較 3組性別、年齡、吸煙與飲酒比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 3組一般情況比較Table 1 Comparison of general conditions of three groups

2.2哈-溫平衡檢驗(yàn)(H-W平衡) 健康對(duì)照組和病例組的SLC16A11 rs13342692與SLC16A13 rs4796576兩個(gè)位點(diǎn)基因型進(jìn)行了哈-溫平衡檢驗(yàn)，均符合H-W平衡(P>0.05)，見表2。

表2 哈-溫平衡檢驗(yàn)Table 2 Hardy-Weinberg test (例數(shù))

2.3SLC16A11和SLC16A13基因型分布情況分析 SLC16A13 rs4796576的基因型分布在共顯性模型中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但該基因位點(diǎn)在其顯性和隱形模型比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，SLC16A11 rs13342692的基因型分布在其共顯性、顯性和隱性模型中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表3。

表3 SLC16A11和SLC16A13基因型分布情況Table 3 Genotype distribution of SLC16A11 and SLC16A13 (例數(shù))

2.4SLC16A11和SLC16A13基因多態(tài)性與HBV相關(guān)肝癌的關(guān)系 以年齡、性別、吸煙、飲酒及各基因多態(tài)性為自變量，以HBV相關(guān)性肝癌與否為因變量，進(jìn)行二分類Logistic回歸分析，變量賦值情況見表4。結(jié)果顯示，控制年齡、性別、吸煙和飲酒的影響后，SLC16A11 rs13342692與SLC16A13 rs4796576基因多態(tài)性與HBV相關(guān)肝癌的關(guān)聯(lián)性分析結(jié)果見表5。與健康人群相比，SLC16A11 rs13342692與SLC16A13 rs4796576基因某一基因型與HBV相關(guān)肝癌不相關(guān)(P>0.05)。以HBV自然清除人群為對(duì)照，與AA基因型相比，攜帶SLC16A13 rs4796576位點(diǎn)AG基因型與HBV相關(guān)肝癌相關(guān)(P=0.019)；在該基因顯性模型中，攜帶G等位基因位點(diǎn)相對(duì)攜帶C等位基因位點(diǎn)與HBV相關(guān)肝癌相關(guān)(P=0.017)。SLC16A11rs13342692與SLC16A13 rs4796576位點(diǎn)其他基因型與HBV相關(guān)肝癌不相關(guān)(P>0.05)。

表4 變量賦值表Table 4 Information of variable assignment table

表5 基因位點(diǎn)與HBV相關(guān)肝癌的關(guān)聯(lián)性分析Table 5 Analysis of association between gene loci and HBV-related LC

表5 (續(xù))

3 討 論

本研究采用病例對(duì)照研究的方法，通過健康對(duì)照、HBV自然清除者以及乙型肝炎相關(guān)性肝癌患者，分析了SLC16A11基因的rs1334269位點(diǎn)和SLC16A13基因的rs4796576位點(diǎn)的基因型在不同人群中的分布情況及分布特點(diǎn)。研究結(jié)果顯示病例組與對(duì)照組在年齡、性別、吸煙與飲酒等方面比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HBV相關(guān)肝癌組年齡顯著高于正常組與自然清除組，HBV相關(guān)肝癌組中男性占比也顯著高于其他組別，同時(shí)吸煙飲酒者在HBV相關(guān)肝癌組中也占有更高的比例。

SLC16A13 rs4796576基因的GA基因型相較于HBV自然清除組，在HBV相關(guān)肝癌患者中更為多見；同時(shí)當(dāng)基因以共顯性模型表達(dá)時(shí)，與HBV自然清除人群作對(duì)照 AG基因型與AA型相比，可以顯著增加患癌風(fēng)險(xiǎn)(OR=1.544，95%CI:1.073～2.224)；當(dāng)基因以顯性模型表達(dá)時(shí)，攜帶G等位基因位點(diǎn)也同樣顯著增加患癌的風(fēng)險(xiǎn)(OR=1.530，95%CI:1.079～2.170)。顯示SLC16A11 rs1334269基因位點(diǎn)在試驗(yàn)組與對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

SLC16A家族成員在腫瘤發(fā)生和腫瘤進(jìn)展中起關(guān)鍵作用。SLC16A11和SLC16A13編碼的蛋白質(zhì)MCT11、MCT13屬于MCT家族。MCTs在腫瘤過程中乳酸的轉(zhuǎn)運(yùn)、pH的調(diào)節(jié)、腫瘤細(xì)胞的高糖酵解表型和酸抵抗表型的維持環(huán)節(jié)中發(fā)揮了主要作用[8-10]。此外，MCTs 介導(dǎo)的乳酸轉(zhuǎn)運(yùn)還能在腫瘤細(xì)胞其他惡性表型，比如免疫逃逸和生成腫瘤血管等過程中起到促進(jìn)作用[11-15]。本研究顯示，SLC16A13基因rs4796576位點(diǎn)與乙型肝炎相關(guān)性肝癌可能有關(guān)，攜帶G等位基因可能是患癌的危險(xiǎn)因素。但本研究結(jié)果僅針對(duì)乙型肝炎相關(guān)性肝癌患者和乙型肝炎自然清除人群，作共顯性模型分析時(shí)，顯示SLC16A13基因rs4796576的AG基因型與AA型相比高。此研究結(jié)果的得出目前尚缺乏具體的機(jī)制研究來進(jìn)行支持，存在一定的局限性，尚待進(jìn)一步研究和探討。