唐 怡 易徐航 胡小玲△ 黃學(xué)娣 唐莉華

江梔子是一種產(chǎn)于江西的傳統(tǒng)道地藥材，以生產(chǎn)歷史悠久、國內(nèi)種植面積最大、質(zhì)量最優(yōu)，而馳名全國[1]。梔子收載于2020年版《中華人民共和國藥典·一部》[2]，炮制品種有生梔子、炒梔子和焦梔子。梔子揮發(fā)油占果實的12%左右，且富含亞油酸等營養(yǎng)物質(zhì)[3，4]。現(xiàn)代藥理研究表明梔子揮發(fā)油具有鎮(zhèn)靜、催眠、抗驚厥以及促進(jìn)學(xué)習(xí)記憶的作用[4]。近年來市場上經(jīng)營的梔子在質(zhì)量問題上出現(xiàn)一些情況，如用硫磺熏蒸提高藥材外觀色澤，或以次充好，以假亂真，嚴(yán)重影響到患者的用藥安全，制約了中藥市場的健康發(fā)展[5]。且生梔子炮制至焦梔子的過程中，隨著溫度的升高，揮發(fā)油的成分和含量受到一定影響。

本研究擬以生梔子、炒梔子和焦梔子為研究對象，參照2020年版《中華人民共和國藥典·一部》[2]梔子項下的檢驗項目，依次進(jìn)行檢測。另以氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)對江梔子不同炮制品的揮發(fā)油進(jìn)行成分鑒定和含量比較，淺析炮制對其成分的影響。從以上2方面考察梔子的質(zhì)量，為患者的安全用藥和臨床更加合理地使用江梔子的不同炮制品提供有益參考。

1 實驗材料

1.1 儀器XSP-15B顯微鏡(上海光學(xué)儀器五廠有限公司)；GZX-9140MBE型數(shù)顯電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)；SX2-5-12箱式電阻爐(紹興市尚城儀器制造有限公司)；高效液相色譜儀為Agilent 1260(Agilent公司，美國)；電子分析天平(BS110S，北京賽多利斯儀器有限公司)；25 ml堿式滴定管(超越儀器有限公司)；6000 C型二氧化硫殘留量測定儀(鄭州卓越玻璃儀器有限公司)；1000 ml圓底燒瓶(蜀牛玻璃儀器有限公司)；DZTW-1000型可調(diào)式電熱套(上海榮惠儀器科技有限公司)；1000 ml揮發(fā)油提取器(蜀牛玻璃儀器有限公司)；Agilent 8890型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)(美國安捷倫公司)。

1.2 試藥乙腈為色譜純(Tidea公司，美國)。二氯甲烷(西隴化工股份有限公司)、無水硫酸鈉(天津市大茂化學(xué)試劑廠)均為市售分析純；蒸餾水(自制)。生梔子采集于江西樟樹天齊堂中藥飲片規(guī)范化種植基地，經(jīng)江西省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院唐莉華副主任藥師鑒定為茜草科植物梔子GardeniajasminoidesEllis的干燥成熟果實。

2 實驗方法與結(jié)果

2.1 藥材預(yù)處理①生梔子:選擇上述江梔子藥材，除去雜質(zhì)，碾碎，過六號篩。②炒梔子:選擇上述江梔子藥材，除去雜質(zhì)，研碎，過六號篩。置燒熱的鍋中，130 ℃清炒法翻炒 120 s左右，炒至黃褐色，微有香氣，取出，冷卻。③焦梔子:選擇上述江梔子藥材，除去雜質(zhì)，研碎，過六號篩。置燒熱的鍋中，130 ℃清炒法翻炒 600 s左右，炒至表面焦褐色或焦黑色，果皮內(nèi)表面和種子表面為黃棕色或棕褐色，取出，冷卻。

2.2 性狀鑒別鑒定發(fā)現(xiàn)，生梔子、炒梔子和焦梔子的性狀大體一致，僅果皮和種子顏色有差異。三者性狀均符合2020年版《中華人民共和國藥典·一部》[2]規(guī)定。見圖1。

圖1 江梔子不同炮制品的性狀

2.3 顯微鑒別分別取生梔子、炒梔子和焦梔子粉末少量，進(jìn)行粉末鑒定。三者的顯微鑒別均符合2020年版《中華人民共和國藥典·一部》[2]規(guī)定。

2.4 薄層鑒別分別精密稱定生梔子、炒梔子和焦梔子粉末1.0 g，照薄層色譜法(通則0502)實驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，生梔子、炒梔子和焦梔子供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,均顯相同顏色的黃色斑點，符合2020年版《中華人民共和國藥典·一部》[2]規(guī)定。

2.5 水分測定分別取生梔子、炒梔子和焦梔子粉末3.0 g，平行6份，精密稱定。按2020年版《中華人民共和國藥典·四部》[6]通則0832第二法測定樣品水分，經(jīng)計算，生梔子、炒梔子和焦梔子的水分含量分別為7.0%、6.2%和5.5%，均符合規(guī)定(不得過8.5%)。

2.6 灰分測定取生梔子、炒梔子和焦梔子2.5 g，平行6份，精密稱定， 按2020年版《中華人民共和國藥典·四部》[6]“灰分測定法”項下方法測定樣品總灰分，經(jīng)計算，生梔子、炒梔子和焦梔子的總灰分為4.0%、3.7%和4.5%，均符合規(guī)定(不得過6.0%)。

2.7 二氧化硫殘留物檢查取生梔子、炒梔子和焦梔子10.0 g，平行6份，精密稱定，按2020年版《中華人民共和國藥典·四部》[6]通則2331第一法檢測，結(jié)果顯示生梔子、炒梔子和焦梔子的二氧化硫殘留量均未檢出，表明江梔子并未硫熏。

2.8 梔子苷的含量測定按照2020版《中華人民共和國藥典·一部》[2]項下的梔子苷含量測定條件取生梔子、炒梔子、焦梔子各0.1 g，按供試品溶液制備方法進(jìn)行制備，每個樣品平行6份，生梔子、炒梔子、焦梔子的梔子苷含量為5.19%、5.59%和4.25%，均符合《中國藥典·一部》[2]規(guī)定(生梔子、炒梔子和焦梔子的梔子苷含量不得少于1.8%、1.5%和1.0%)。

2.9 揮發(fā)油的提取及總揮發(fā)油含量測定分別稱取上述藥材粉末100.0 g于圓形揮發(fā)油提取器中，加6倍量蒸餾水浸泡過夜，后置于1000 ml電熱套中，提取 6 h至揮發(fā)油量不再增加為止。經(jīng)計算，生梔子、炒梔子和焦梔子的揮發(fā)油質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.8，0.9和 0.1 μl·g-1(僅2滴)。

2.9.1 氣相色譜和質(zhì)譜條件升溫程序為：50 ℃保持 15 min，以 4 ℃/min的速度升溫到 130 ℃，再以 10 ℃/min 的速度升溫到220 ℃，再以10 ℃/min 的速度升溫到280 ℃，保持10 min。分流比50∶1，進(jìn)樣量1.0 μl。柱箱溫度：40.0 ℃，進(jìn)樣溫度：280.0 ℃；總流量：14.0 ml·min-1、柱流量：1.00 ml·min-1、吹掃流量：3.0 ml·min-1；壓力：49.5 kPa。四級桿溫度230 ℃。譜圖檢索采用NIST17譜庫進(jìn)行檢索，然后對化合物進(jìn)行定性。

2.9.2 氣質(zhì)實驗結(jié)果與分析依據(jù)上述色譜和質(zhì)譜條件，得到圖2的總離子流圖。因焦梔子的含量極少(僅2滴)，無法進(jìn)樣，故未列出。見表1。

圖2 生梔子(Ⅰ) 炒梔子(Ⅱ)揮發(fā)油GC-MS總離子流圖

表1 江梔子揮發(fā)油的成分及其相關(guān)信息

續(xù)表1 江梔子揮發(fā)油的成分及其相關(guān)信息

3 討論

3.1 江梔子的顏色變化江梔子由生梔子炮制至焦梔子的過程中，僅果皮和種子顏色有差異?？赡芘c江梔子中色素相關(guān)成分，比如西紅花苷Ⅰ和西紅花苷Ⅱ的含量加減有關(guān)[7，8]。

3.2 江梔子水分和灰分的變化由2.5結(jié)果可知，生梔子炮制至焦梔子的過程中水分含量逐漸降低，可能隨著炮制溫度的提高，水分不斷蒸發(fā)。生梔子、炒梔子和焦梔子的總灰分呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢?；曳譁y定的是中藥表面附著的不揮發(fā)性無機鹽類(外來泥沙)?？赡茈S著梔子炭化發(fā)展的趨勢，少許梔子炭已生成，灰分測定值就此升高。

3.3 江梔子的梔子苷含量變化梔子苷是現(xiàn)行《中華人民共和國藥典·一部》[2]中梔子含量的檢測指標(biāo)[7]。本實驗的生梔子、炒梔子和焦梔子中梔子苷的含量呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，可能是因為隨著炮制時間的延長，組織變得疏松，更多的梔子苷得到釋放。后溫度再升高，部分梔子苷分解或裂解。

3.4 江梔子不同炒制品揮發(fā)油的成分含量比較生梔子炮制至炒梔子中，有13個成分含量降低，另有7個成分含量升高。推測含量降低13個成分有可能過氧基或羰基不穩(wěn)定，容易裂解，或長碳鏈容易斷掉，從而含量降低。含量升高的7個成分中，均為長碳結(jié)構(gòu)，猜測炮制過程中，生梔子的有些成分組成了新的長碳物質(zhì)。見表1。

綜上，生梔子、炒梔子和焦梔子均符合2020年版《中華人民共和國藥典·一部》[2]質(zhì)量規(guī)定，未存在以次充好、以假亂真的現(xiàn)象，且未用硫熏提高賣相，可以安全應(yīng)用于臨床。另生梔子和炒梔子的揮發(fā)油成分和含量差異顯著，為江梔子的不同炮制品的不同臨床用途提供了基礎(chǔ)的數(shù)據(jù)支撐。