楊妮，李瑩，朱嘉文，周先加，白家瑞，劉洋，惠竹梅*

1(西北農(nóng)林科技大學(xué) 葡萄酒學(xué)院，陜西 楊凌，712100)2(青海省輕工業(yè)研究所有限責(zé)任公司，青海 西寧，810001)

枸杞別稱茍起子、枸杞紅實(shí)、甜菜子等，味甘，性平，主要活性物質(zhì)有枸杞多糖、類胡蘿卜素、黃酮類化合物，具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗衰老、抗腫瘤等多種功能[1-6]。沙棘別稱黃酸刺、酸刺柳等，作為世界干旱地區(qū)中能夠?qū)⒔?jīng)濟(jì)、生態(tài)與社會(huì)效益有效結(jié)合的農(nóng)作物，果實(shí)營(yíng)養(yǎng)豐富，含有多種維生素、有機(jī)酸、微量元素、亞油素、沙棘黃酮、超氧化物等活性物質(zhì)和人體所需的各種氨基酸，具有獨(dú)特的藥用和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。研究表明，沙棘對(duì)心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、肝臟，以及抗氧化、免疫調(diào)節(jié)均有很好的效果[7-11]。枸杞、沙棘均具有提高免疫力的效果，但兩者配伍使用增強(qiáng)免疫力效果的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。為此，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)分析高、中、低3種不同劑量的枸杞沙棘配伍對(duì)小鼠免疫功能的影響，探討其增強(qiáng)免疫力功能的相關(guān)機(jī)制，為后續(xù)產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)以及臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)雄性昆明種小鼠，由湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供，共200只，體重18～22 g，動(dòng)物飼養(yǎng)室溫度為20～25 ℃，濕度為40%～70%。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼料生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(鄂)2008—0005；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK(鄂)2012—0065；批準(zhǔn)文號(hào)：2021-11-05。

1.2 材料與試劑

本研究所用的藥品為枸杞沙棘膠囊，由西安金牛生物工程有限公司提供，由枸杞子、沙棘、女貞子等為原料制成，人體推薦量2.1 g/d，折合沙棘生藥1.8 g/d，枸杞生藥2.4 g/d。

Hank′s液、RPMI1640培養(yǎng)基、臺(tái)酚藍(lán)，武漢普諾賽生命科技有限公司；刀豆蛋白(concanavalin A, ConA)、NP40，北京索萊寶科技有限公司；3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽[3-(4, 5)-dimethylthiahiazo (-z-yl)-3,5-di-phenytetrazoliumromide, MTT]，普洛麥格(北京)生物技術(shù)有限公司；乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase, LDH)，杭州聯(lián)科美訊生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司；甲醇，天津市富宇精細(xì)化工有限公司；丙酮、異丙醇、碳酸鈉、瓊脂糖、冰醋酸，合肥天健化工有限公司。

1.3 儀器與設(shè)備

YLS-25A打孔器，濟(jì)南益延科技發(fā)展有限公司；MK3酶標(biāo)儀，Thermo Labsystems；PTF-A500電子天平、PTT-A+200千分之一電子天平，福州華志科學(xué)儀器；LDZX-50KB立式壓力蒸汽滅菌器，上海申安醫(yī)療器械廠；BPN-80CH CO2培養(yǎng)箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；DHP-9162恒溫培養(yǎng)箱，上?；厶﹥x器制造有限公司；TDL-50B低速臺(tái)式離心機(jī)，上海安亭科技儀器廠；BSC-1000生物安全柜，蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司；UB203i顯微鏡，重慶奧普光電有限公司；T6-新世紀(jì)紫外分光光度計(jì)，北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；等。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 分組與給藥

將200只雌性小鼠隨機(jī)分為5組進(jìn)行8項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，1組進(jìn)行遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(delayed type hypersensitivity, DTH),2組為小鼠測(cè)定和淋巴器官/體重比值測(cè)定和碳廓清實(shí)驗(yàn),3組為ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和自然殺傷細(xì)胞(natural killer cell, NK細(xì)胞)活性測(cè)定,4組為抗體生成細(xì)胞檢測(cè)和血清溶血素測(cè)定,5組為小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。每組40只小鼠隨機(jī)分為4小組，分別為枸杞沙棘膠囊粉低(0.35 g/kg·BW)、中(0.70 g/kg·BW)、高(1.05 g/kg·BW)3個(gè)劑量組，另設(shè)1個(gè)陰性對(duì)照組(蒸餾水)，每小組10只小鼠[12]。各組動(dòng)物按照劑量每天灌胃20 mL/kg枸杞沙棘膠囊粉1次，陰性對(duì)照組灌等量蒸餾水，連續(xù)灌胃30 d后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)[13]。

1.4.2 ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)

參考楊迪等[14]的方法并略作修改。小鼠經(jīng)口灌服枸杞沙棘膠囊粉和蒸餾水30 d后，頸椎脫臼處死。在無(wú)菌的環(huán)境中取脾，置于含有無(wú)菌Hank′s液的培養(yǎng)皿中輕輕磨碎，制成單個(gè)樣品細(xì)胞懸浮液，過(guò)200目篩網(wǎng)進(jìn)行篩選，用Hank′s液洗2次、離心10 min(1 000 r/min)后于1 mL的完全培養(yǎng)液中懸浮，計(jì)活細(xì)胞數(shù)(95%)并將細(xì)胞濃度調(diào)整為3×106個(gè)/mL。將每個(gè)樣品懸液分兩孔加入24孔培養(yǎng)板中，每孔1 mL，其中一孔加入75 μL ConA液，另一孔不加作為對(duì)照，于5% CO2的培養(yǎng)箱中37 ℃培養(yǎng)72 h。培養(yǎng)至68 h時(shí)，每孔吸取0.7 mL上清液的同時(shí)加入0.7 mL不含小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液和MMT(5 mg/mL)50 μL，之后繼續(xù)培養(yǎng)4 h至結(jié)束。結(jié)束后，每孔加入1 mL酸性異丙醇，使紫色結(jié)晶完全溶解，用分光光度計(jì)于波長(zhǎng)570 nm處測(cè)定OD值。

1.4.3 二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene, DNFB)誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)

參考楊迪等[14]的方法，用1%的DNFB進(jìn)行致敏，免疫后第5天用DNFB攻擊右耳，24 h后處死小鼠，用打孔器各取下左右耳殼直徑8 mm的耳片進(jìn)行稱重，用左右耳重量差表示DTH的程度。

1.4.4 血清溶血素的測(cè)定

參考史頂聰?shù)萚15]的方法并略作修改。取適量羊血，用生理鹽水清洗3次后離心10 min(2 000 r/min)，之后將羊血紅細(xì)胞[壓積綿羊紅細(xì)胞(sheep red blood cell，SRBC)]用生理鹽水配制成2%(體積分?jǐn)?shù))的細(xì)胞懸液，每只小鼠腹腔注射0.2 mL進(jìn)行免疫，免疫后4～5 d摘眼球采血并分離血清，于微量血凝板內(nèi)用生理鹽水稀釋，每孔100 μL，再加入100 μL 0.5%(體積分?jǐn)?shù))SRBC懸液混勻，之后將微量血凝實(shí)驗(yàn)板裝入濕潤(rùn)的平盤(pán)內(nèi)加蓋，于37 ℃溫箱孵育3 h后進(jìn)行血清溶血素測(cè)定。統(tǒng)計(jì)血球凝集度，計(jì)算相應(yīng)抗體積數(shù)。

1.4.5 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(半體內(nèi)法)

參考楊迪等[14]的方法并略作修改。小鼠經(jīng)口灌服枸杞沙棘膠囊粉和蒸餾水30 d后，每只小鼠均腹腔注射20%(體積分?jǐn)?shù))的雞紅細(xì)胞懸液1 mL，頸椎脫臼處死后注射生理鹽水2 mL，轉(zhuǎn)動(dòng)鼠板1 min后吸出腹腔洗液1 mL平均滴于2片載玻片上，放入濕潤(rùn)的容器內(nèi)37 ℃孵育30 min，之后用生理鹽水漂洗晾干，用1∶1(體積比)的甲醇丙酮溶液固定，4%(體積分?jǐn)?shù))Giemsa-磷酸緩沖液染色，再用蒸餾水漂洗晾干。鏡檢，油鏡下計(jì)數(shù)100個(gè)巨噬細(xì)胞，吞噬率和吞噬指數(shù)的計(jì)算分別如公式(1)、公式(2)所示：

(1)

(2)

1.4.6 小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)

參考史頂聰?shù)萚15]的方法并加以修改。各組小鼠末次給藥1 h后，尾靜脈注射印度墨汁(生理鹽水稀釋4倍)10 mL/kg，2 min(t1)和10 min(t2)分別從小鼠內(nèi)眥靜脈叢采血20 μL，并迅速加入到2 mL 0.1%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))碳酸鈉溶液中搖勻，于紫外分光光度計(jì)600 nm處測(cè)定吸光值。之后將小鼠處死后取肝臟和脾臟分別稱重，吞噬指數(shù)(α)的計(jì)算如公式(3)所示：

(3)

式中：K為未經(jīng)校正吞噬指數(shù)；OD1為t1時(shí)(2 min)血標(biāo)本光密度值；OD2為t2時(shí)(10 min)血標(biāo)本光密度值。

1.4.7 抗體生成細(xì)胞檢測(cè)(Jerne改良玻片法)

參考楊迪等[14]的方法并略作修改。SRBC注射免疫方法同1.4。將SRBC免疫4 d后的小鼠處死，取出脾臟，脾臟處理方法同1.4.2，最后將細(xì)胞懸浮在5 mL RPMI1640培養(yǎng)液中計(jì)數(shù)，并將細(xì)胞濃度調(diào)整為5×106個(gè)/mL。

空斑的測(cè)定：將表層培養(yǎng)基(1 g瓊脂糖+雙蒸水至100 mL)加熱溶解后45～50 ℃保溫，與等量pH 7.2～7.4、2倍濃度的Hank′s液混合后分裝，每管0.5 mL，再向管內(nèi)加50 μL 10%(體積分?jǐn)?shù))用SA緩沖液配制的SRBC和20 μL脾細(xì)胞懸液(5×106個(gè)/mL)，迅速混勻，傾倒于已刷瓊脂糖薄層的玻片上做平行片，待瓊脂凝固后，將玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育1.5 h，然后用SA緩沖液稀釋補(bǔ)體(1∶8，體積比)加入玻片架凹槽內(nèi)，繼續(xù)溫育1.5 h后，計(jì)數(shù)溶血空斑數(shù)。各劑量組結(jié)果與陰性對(duì)照組進(jìn)行方差分析。

1.4.8 NK細(xì)胞活性測(cè)定

參考楊迪等[14]方法并略作修改，實(shí)驗(yàn)前24 h將靶細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)。使用前用Hank′s液洗3次、RPMI1640完全培養(yǎng)液將細(xì)胞濃度調(diào)整為4×105個(gè)/mL。

無(wú)菌取脾，脾臟處理方法同1.4.2，1 000 r/min離心10 min后棄上清液并彈起細(xì)胞漿，加入0.5 mL滅菌水20 s對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行裂解，再加入Hank′s液8 mL和2倍的Hank′s液0.5 mL，1 000 r/min離心10 min，加入含10%小牛血清的RPMI1640完全培養(yǎng)液1 mL進(jìn)行重懸，1%(體積分?jǐn)?shù))冰醋酸稀釋后計(jì)數(shù)，并調(diào)整細(xì)胞濃度為2×107個(gè)/mL。

取靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞各10 μL，加入U(xiǎn)型96孔培養(yǎng)板中：靶細(xì)胞自然釋放孔加靶細(xì)胞和培養(yǎng)液各100 μL，靶細(xì)胞最大釋放孔加靶細(xì)胞和1% NP40各10 μL，分別設(shè)3個(gè)平行孔，于5%的CO2培養(yǎng)箱中37 ℃培養(yǎng)4 h，1500 r/min離心5 min，每孔吸取上清100 μL加入96孔平底培養(yǎng)板中，同時(shí)加入LDH基質(zhì)液100 μL，反應(yīng)8 min，每孔加入1 mol/L的HCL 30 μL，在酶標(biāo)儀490 nm處測(cè)定光密度值(OD)，NK細(xì)胞活性的計(jì)算如公式(4)所示：

(4)

2 結(jié)果與分析

2.1 各劑量組受試物對(duì)小鼠體重的影響

由表1可知，各組小鼠生長(zhǎng)發(fā)育情況良好，體重穩(wěn)定增加，與陰性對(duì)照組比較，各劑量組小鼠體重均無(wú)顯著變化，說(shuō)明枸杞沙棘膠囊粉對(duì)小鼠體重影響不顯著。

表1 各劑量組受試物對(duì)實(shí)驗(yàn)組小鼠體重的影響Table 1 Effect of test substance in each dose group on body weight of mice in the test group

2.2 各劑量組受試物對(duì)小鼠淋巴器官/比重比值的影響

脾臟是人體最大的淋巴器官，參與機(jī)體多種免疫反應(yīng)。T淋巴細(xì)胞是整個(gè)淋巴器官的發(fā)育和機(jī)體免疫不可或缺的，而胸腺產(chǎn)生T淋巴細(xì)胞，所以胸腺的損傷和退化會(huì)導(dǎo)致T淋巴細(xì)胞的減少，降低機(jī)體免疫力。由表2可知，小鼠經(jīng)口灌服沙棘枸杞膠囊粉和蒸餾水30 d后，胸腺/體重的比值和脾臟/體重的比值均無(wú)明顯變化，且與陰性對(duì)照組比較無(wú)顯著差異(P>0.05)，說(shuō)明各劑量組受試物對(duì)小鼠免疫系統(tǒng)無(wú)損傷。

表2 各劑量組受試物對(duì)小鼠淋巴器官/體重比值的影響Table 2 Effect of test substance of each dose group on the ratio of lymphoid organs/specific gravity of mice

2.3 各劑量組受試物對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力及小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響

淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化可以在體外檢測(cè)淋巴細(xì)胞的應(yīng)答能力。由表3可知，與陰性對(duì)照組相比，中、低劑量組均無(wú)顯著變化(P>0.05)，而高劑量組能夠顯著增強(qiáng)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力。

遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)又稱“遲發(fā)型超敏反應(yīng)”，是由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的一種超敏反應(yīng)。它的發(fā)生不需要抗體或補(bǔ)體參加，是在變應(yīng)原作用下形成致敏淋巴細(xì)胞，當(dāng)機(jī)體再次接觸相同變應(yīng)原時(shí)，會(huì)表現(xiàn)出一種遲緩的、以單個(gè)核細(xì)胞浸潤(rùn)和細(xì)胞變性壞死為特征的局部變態(tài)反應(yīng)性炎癥。經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試物30 d后，用耳腫脹法進(jìn)行DNFB誘導(dǎo)的DTH實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，低、中、高劑量組的耳殼增重均高于陰性對(duì)照組，且與陰性對(duì)照組相比，中劑量組差異明顯(P<0.05)，高劑量組差異顯著(P<0.01)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表3 各劑量組受試物對(duì)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞 轉(zhuǎn)化能力及小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)的影響Table 3 Effects of test substances in each dose group on ConA induced splenic lymphocyte transformation ability and delayed allergic reaction in mice

2.4 各劑量組受試物對(duì)小鼠血清溶血素水平的影響

用綿羊紅細(xì)胞免疫小鼠，可以引發(fā)小鼠血清中的特異性抗綿羊紅細(xì)胞抗體的產(chǎn)生，該抗體是一種溶血素，能夠溶解綿羊紅細(xì)胞。由表4可知，與陰性對(duì)照組比較，各劑量組的小鼠抗體積數(shù)均增高，且中劑量組抗體積數(shù)最大，顯著高于陰性對(duì)照組(P<0.05)。由于在增強(qiáng)小鼠體液免疫功能方面，影響作用并不隨劑量增大而增強(qiáng)，中劑量組效果最佳，可能是因?yàn)閯┝窟^(guò)大對(duì)機(jī)體產(chǎn)生其他作用而影響體液免疫功能，具體原因有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

表4 各劑量組受試物對(duì)小鼠血清溶血素水平的影響Table 4 Effect of test substance in each dose group on serum hemolysin level of mice

2.5 各劑量組受試物對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力的影響

巨噬細(xì)胞又稱組織細(xì)胞，主要功能是對(duì)細(xì)胞碎片和病原體進(jìn)行識(shí)別、吞噬和消化，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞對(duì)病原體作出反應(yīng)。由表5可知，各劑量組受試物的吞噬率均大于陰性對(duì)照組，且隨著劑量的升高，吞噬率逐漸升高。與陰性對(duì)照組相比，高劑量組能提高吞噬指數(shù)，且差異顯著(P<0.05)。

2.6 各劑量組受試物對(duì)小鼠碳廓清功能的影響

由表6可知，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試物30 d后，與陰性對(duì)照組相比，低、中劑量組的吞噬指數(shù)α均無(wú)顯著變化(P>0.05)，而高劑量組能顯著提高小鼠碳廓清吞噬指數(shù)(P<0.05)。

表5 各劑量組受試物對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞 紅細(xì)胞能力的影響Table 5 Effects of test substances in each dose group on the ability of mouse peritoneal macrophages to phagocytize chicken erythrocytes

表6 各劑量組受試物對(duì)小鼠碳廓清功能的影響Table 6 Effect of test substance in each dose group on carbon clearance function of mice

2.7 各劑量組受試物對(duì)小鼠抗體生成細(xì)胞功能的影響

經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試物30 d后，用半數(shù)溶血值法測(cè)定小鼠的血清半數(shù)溶血值(HC50)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。由表7可知，與陰性對(duì)照組比較，低、中劑量組的溶血空斑數(shù)無(wú)顯著變化(P>0.05)，而高劑量組能顯著提高抗體生成細(xì)胞數(shù)量(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表7 各劑量組受試物對(duì)小鼠抗體生成細(xì)胞功能的影響Table 7 Effect of test substance in each dose group on the function of antibody producing cells in mice

2.8 各劑量組受試物對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響

NK細(xì)胞是機(jī)體重要的免疫細(xì)胞，不僅與抗腫瘤、抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)有關(guān)，并且能夠識(shí)別靶細(xì)胞、殺傷介質(zhì)，在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生。由表8可知，與陰性對(duì)照組比較，低、中劑量組的NK細(xì)胞活性均無(wú)顯著變化(P>0.05)，高劑量組能夠增加小鼠NK細(xì)胞活性，且差異顯著(P<0.05)。

表8 各劑量組受試物對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響Table 8 Effect of test substance in each dose group on NK cell activity in mice

3 討論與結(jié)論

免疫功能是維護(hù)自身健康的重要的生理機(jī)能。機(jī)體的免疫功能由免疫系統(tǒng)擔(dān)任，與身體的健康狀態(tài)密切相關(guān)。免疫力低下是導(dǎo)致身體亞健康的重要原因之一，長(zhǎng)期的亞健康狀態(tài)也會(huì)導(dǎo)致機(jī)體免疫功能的減退[16-17]。機(jī)體免疫功能低下會(huì)導(dǎo)致機(jī)體功能的衰退，可引發(fā)多種疾病，最主要表現(xiàn)為易感染、容易疲倦等。世界衛(wèi)生組織調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，全球有超75%的人群處于亞健康狀態(tài)[18]，亞健康狀態(tài)現(xiàn)患率與年齡成正相關(guān)，目前我國(guó)老年人處于亞健康狀態(tài)者高達(dá)90%[19]，亞健康問(wèn)題已經(jīng)成為全球流行的亟需解決的問(wèn)題。黨的十九大提出“健康中國(guó)”戰(zhàn)略的重大決策部署，目前我國(guó)已經(jīng)進(jìn)入已預(yù)防為主，倡導(dǎo)健康文明生活方式，預(yù)防重大疾病。因此，如何減少亞健康的患病率，改善人體亞健康狀態(tài)，提高免疫力將會(huì)是未來(lái)研究的熱點(diǎn)問(wèn)題[20-21]。

研究表明，枸杞和沙棘均具有很好的增強(qiáng)免疫力的功效。枸杞多糖能夠增強(qiáng)細(xì)胞介入免疫和體液免疫反應(yīng)，進(jìn)而提高機(jī)體免疫力；適當(dāng)濃度的枸杞多糖或可促進(jìn)免疫器官的發(fā)育。枸杞多糖通過(guò)下調(diào)衰老基因的表達(dá)、調(diào)控P13K/AKT信號(hào)通路抵抗細(xì)胞氧化等方法，增強(qiáng)免疫細(xì)胞抗氧化、抗疲勞的能力，減緩免疫細(xì)胞衰老。此外，枸杞多糖能夠通過(guò)調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)分子的表達(dá)以調(diào)節(jié)老齡T細(xì)胞的凋亡，調(diào)節(jié)免疫活性；還可影響腸道通透性和組織學(xué)變化，增強(qiáng)腸道抗氧化能力，激活腸道中存在的T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及派氏結(jié)等免疫細(xì)胞[22]。

沙棘可以增加小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬功能，促進(jìn)體液免疫及淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。沙棘粉具有調(diào)節(jié)血脂、減輕肝臟氧化損傷、預(yù)防血脂代謝紊亂的作用。沙棘多糖能夠顯著促進(jìn)巨噬細(xì)胞的增殖、細(xì)胞因子的釋放；在體內(nèi)，沙棘多糖能夠增強(qiáng)免疫低下小鼠的免疫器官指數(shù)、提升小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬功能、提高脾臟組織中細(xì)胞因子的水平[23]。

本研究所用的受試物是由枸杞、沙棘配伍組成，對(duì)小鼠進(jìn)行一系列提高免疫力的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，與陰性對(duì)照組比較，高劑量組能夠顯著增強(qiáng)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力及DNFB誘導(dǎo)的DTH反應(yīng)、吞噬率、吞噬指數(shù)、小鼠碳廓清吞噬指數(shù)、NK細(xì)胞活性及抗體生成細(xì)胞數(shù)量，差異顯著(P<0.05)；中劑量組可顯著提高小鼠抗體積數(shù)，差異顯著(P<0.05)。根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與技術(shù)評(píng)價(jià)規(guī)范》(2003)版，該產(chǎn)品對(duì)細(xì)胞和體液免疫功能測(cè)定結(jié)果均為陽(yáng)性，該產(chǎn)品具有增強(qiáng)免疫力的功效。且實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，由枸杞、沙棘配伍的產(chǎn)品不良反應(yīng)較少，不會(huì)破壞機(jī)體正常的免疫功能，安全性高，且效果好，本研究可為后續(xù)枸杞沙棘的綜合利用開(kāi)發(fā)提供思路。目前對(duì)于枸杞、沙棘提高免疫力的量效關(guān)系、構(gòu)效關(guān)系仍不清楚，對(duì)于其調(diào)節(jié)免疫機(jī)制，還需進(jìn)行大量實(shí)驗(yàn)研究予以證實(shí)。因此，可加強(qiáng)對(duì)這2種中藥的基礎(chǔ)研究，為其進(jìn)一步臨床應(yīng)用及資源開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。