元振杰，馬弘財，王冬經(jīng)，旦增歐珠，加 央，曾江勇*

（ 1.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學院畜牧獸醫(yī)研究所，省部共建青稞和牦牛種質(zhì)資源與遺傳改良國家重點實驗室，西藏 拉薩 850009 ； 2.白朗縣農(nóng)牧綜合服務中心，西藏 日喀則 857300 ； 3.拉孜縣農(nóng)牧綜合服務中心，西藏 日喀則 858100 ）

羊痘又稱羊天花，是一種由羊痘病毒（Capripoxvirus）引起的急性、熱性、接觸性傳染病[1-2]，主要特征是發(fā)熱、鼻炎、結(jié)膜炎、過度流涎、皮膚黏膜發(fā)生丘疹和皰疹病變[3-4]，主要感染山羊、綿羊和牛，人也可感染此病毒。羊痘病毒可引起山羊痘、綿羊痘和牛結(jié)節(jié)性疹塊病，上述疾病在血清性型上呈交叉反應，自然條件下不會發(fā)生交叉感染[5]。羊痘是最嚴重、危害最大的痘病[6]，可對養(yǎng)羊業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失[7]。2002年，羊痘病被世界動物衛(wèi)生組織（OIE）列為須申報的動物疾病，我國將其列為一類動物疾病[8]。羊痘主要在非洲北部和中部以及中東地區(qū)的部分國家流行[9-10]，在印度、孟加拉國、尼泊爾、巴基斯坦、俄羅斯等國家也有流行[11-12]。羊痘在我國大部分省份均有發(fā)生，但其流行呈明顯的地域性[9]，除上海、北京、遼寧等少數(shù)地區(qū)無疫情發(fā)生外，其他地區(qū)均有不同程度的流行[13]。日喀則市是西藏重要的養(yǎng)羊地區(qū)之一，是西藏“兩羊”（日喀則市崗巴羊、霍爾巴羊）的主要產(chǎn)地，也是我國重要的牧區(qū)之一。為研究日喀則市羊痘的免疫情況和感染風險，本試驗對日喀則5個縣（區(qū)）的主要種羊場進行隨機采樣和抗體檢測，評價羊痘的感染風險，為該地區(qū)羊痘的防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 主要試劑

試驗使用的羊痘/牛結(jié)節(jié)病抗體檢測試劑盒（Capripox/LSD Antibody ELISA Test Kit）購 自Biostone Animal Health LCC（批號：JS11849）。

1.2 血清樣本

2020年10月和2021年4月，在日喀則市桑珠孜區(qū)、拉孜縣、白朗縣、薩嘎縣、仲巴縣的主要種羊場，以統(tǒng)計學的方法進行抽樣，采集綿羊和山羊血清共1 472份。

1.3 檢測方法及結(jié)果判定

按照羊痘/牛結(jié)節(jié)病抗體檢測試劑盒說明書的操作方法對所有血清樣品進行抗體檢測。試驗均在省部共建青稞和牦牛種質(zhì)資源與遺傳改良國家重點實驗室中進行。

按照試劑盒說明書的判定標準進行結(jié)果判定。試驗有效性：陰性對照OD值小于0.4，陽性對照OD值大于0.4。

計算樣品PP值。樣品的PP值小于40%時，結(jié)果陰性；樣品PP值大于等于40%時，結(jié)果陽性。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用R軟件對檢測結(jié)果進行羊種、年齡、性別進行統(tǒng)計分析，卡方檢驗進行差異顯著分析。P<0.01表示差異極顯著，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

本研究共采集1 472份羊血清樣本。通過實驗室檢測，檢出抗體陽性420份，陽性率為28.53%。

2.1 不同品種羊的羊痘血清抗體檢測結(jié)果（見表1）

表1 不同品種羊的羊痘血清抗體檢測結(jié)果Tab.1 Detection results of serum antibodies to sheep pox in different breeds of sheep

由表1可知，山羊陽性率為54.15%（95%CI：47.1%~61.1%）,綿羊陽性率為24.39%（95%CI：22.0%~26.9%），兩種羊的陽性率在統(tǒng)計學中差異極顯著（P<0.01，OR=3.66，95%CI：2.70~4.96）。結(jié)果表明，與山羊相比，綿羊的抗體陽性率更低，疫苗免疫效果更差，感染風險更高。

2.2 不同年齡羊的羊痘血清抗體檢測結(jié)果（見表2）

表2 不同年齡羊的羊痘血清抗體檢測結(jié)果Tab.2 Detection results of serum antibodies to sheep pox in different age of sheep

由表2可知，2歲及以下的陽性率為21.21%（95%CI：17.7%~25.1%），3~6歲陽性率為33.09%（95%CI：29.9%~36.4%），6歲及以上的陽性率為28.14%（95%CI：21.5%~35.6%），不同的年齡其陽性率統(tǒng)計學差異極顯著（P<0.01，OR=4.05，95%CI：2.07~7.94）。結(jié)果表明，與3~6歲的羊相比，其他年齡階段的羊抗體陽性率更低，免疫效果更差，感染風險更高。

2.3 不同性別羊的羊痘血清抗體檢測結(jié)果（見表3）

表3 不同性別羊的羊痘血清抗體檢測結(jié)果Tab.3 Detection results of serum antibodies to sheep pox in different genders of sheep

由表3可知，母羊陽性率為29.53%（95%CI：26.2%~33.0%），公羊的陽性率為27.55%（95%CI：24.4%~30.9%），性別之間陽性率在統(tǒng)計學差異不顯著（P>0.05，OR=1.10，95%CI：0.88~1.38）。結(jié)果表明，與母羊相比，公羊的抗體陽性率及疫苗免疫效果差異不顯著，感染風險均較高。

3 討論

日喀則市是西藏養(yǎng)殖羊的重要區(qū)域之一，而養(yǎng)羊也是西藏農(nóng)牧民重要的收入來源之一。羊痘不僅影響羊肉、羊毛、羊絨等產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量，還可導致羔羊死亡和母羊流產(chǎn)[6,14]，是嚴重影響我區(qū)養(yǎng)羊業(yè)發(fā)展的重要疫病之一。據(jù)調(diào)查，羊痘為西藏自治區(qū)綿羊和山羊強制性免疫的動物疫病之一，每年接種免疫一次。日喀則市采用羊痘滅活疫苗進行接種免疫，一般免疫時間為每年6~7月。本研究采樣時間為2020年10月和2021年4月，根據(jù)檢測結(jié)果，抗體總體陽性率為28.53%，感染風險較高。馬曉涓[15]曾對青海省海北州免疫羊群進行了抗體檢測，結(jié)果顯示，海北四縣的抗體陽性率分別為87.8%、96.7%、81.1%、27.8%。蔡峰山等[16]曾對甘肅省武威市涼州區(qū)500份免疫接種的羊群進行了血清抗體檢測，結(jié)果顯示抗體陽性率為79.0%。上述數(shù)據(jù)表明，即使接種羊痘疫苗，不同的地區(qū)其免疫效果仍存在一定的差異。

分析日喀則市羊痘抗體水平較低的原因可能為：日喀則市面積較大，疫苗送至各個地區(qū)路途遙遠，可能為避免疫苗在運輸時間和運輸條件等方面而影響免疫效果選擇使用滅活疫苗，與其他省份接種弱毒疫苗相比，免疫效果存在一定的差異。而且由于特殊的高原惡劣氣候，對疫苗免疫效果也具有一定影響。此外，由于本研究采樣檢測時間為4月和10月，此時正值牧草短缺季節(jié)，羊群營養(yǎng)水平較低，可能也會對抗體水平產(chǎn)生一定影響。

因此，建議進一步采取措施，及時查明免疫抗體水平較低的原因，從根源上解決此問題。應嚴格按照羊痘疫苗免疫注射規(guī)程做好免疫接種工作，加強疫苗運輸、保管安全，并確保免疫劑量、免疫方法、接種部位正確。同時，雖然進行了疫苗免疫接種，但仍須高度重視羊痘疫病的防控，特別要重點注意免疫效果較差、易感性更高的群體，如綿羊、3歲及以下和6歲及以上的羊。定期進行免疫檢測，掌握疫苗免疫后抗體變化情況，并采取必要的措施，使羊處于良好的免疫保護狀態(tài)。制定綜合的防控措施，注意圈舍的清潔衛(wèi)生，冬、春季節(jié)進行適當?shù)难a飼，做好防寒保暖工作，提高羊的抵抗力[15]。此外，禁止從羊痘的疫區(qū)引進羊[17]。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，日喀則市的5個縣（區(qū)）在進行羊痘免疫后抗體陽性率較低，感染風險較高，綿羊、老弱（3~6歲以外）免疫效果較差，應重點防范；應進一步開展調(diào)查，查明免疫抗體水平較低的原因，及時采取必要措施。