樊曉紅

內(nèi)蒙古烏蘭察布市察哈爾右翼前旗動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，內(nèi)蒙古烏蘭察布 012200

雞腸炎型大腸桿菌病是禽大腸桿菌病的一種，常見(jiàn)癥狀為腸炎性腹瀉、免疫力低下，極易引起其他病原體繼發(fā)感染，嚴(yán)重制約集約化養(yǎng)禽場(chǎng)的健康發(fā)展[1]。因此，對(duì)于雞腸炎型大腸桿菌病感染的防治至關(guān)重要。目前，對(duì)于該病的防治策略主要是使用抗菌藥物，然而抗菌藥物的濫用很可能帶來(lái)細(xì)菌耐藥性增加以及藥物在動(dòng)物體內(nèi)長(zhǎng)期殘留等問(wèn)題。隨著科技的發(fā)展，養(yǎng)禽業(yè)逐漸步入現(xiàn)代化，但雞大腸桿菌病的感染仍困擾著大部分養(yǎng)殖場(chǎng)，需要以結(jié)合臨診和實(shí)驗(yàn)室診斷方法為基礎(chǔ)，研究出更有效的防治方法來(lái)減少該病帶來(lái)的損失。

1 病原學(xué)

大腸桿菌是一種革蘭氏陰性菌，大多數(shù)大腸桿菌菌株有鞭毛，因此具有較強(qiáng)的運(yùn)動(dòng)性，據(jù)報(bào)道被記錄的大腸桿菌血清型超過(guò)1 000 種，但與家禽疾病有關(guān)的大腸桿菌血清型較少。大腸桿菌通常存在于腸道、黏膜表面和羽毛中，雞的腸道中每克糞便約含有106個(gè)大腸桿菌菌落。大腸桿菌分為致病和非致病類(lèi)型，其中雞腸炎型大腸桿菌病是致病性禽大腸桿菌病的一種，在雞養(yǎng)殖中較為常見(jiàn)，發(fā)病廣泛[2]。

2 流行病學(xué)

任何年齡和品種的雞均可感染雞腸炎型大腸桿菌病，幼齡時(shí)最為易感，四季均可發(fā)病，特別在春季和冬季受氣候變化的影響，雞舍內(nèi)寒冷潮濕，通風(fēng)頻率減少，易于病發(fā)[3]。雞腸炎型大腸桿菌的傳播方式主要包括水平傳播和垂直傳播2 種方式，水平傳播即通過(guò)被雞腸炎型大腸桿菌污染的空氣、器具、飼料及水源等方式進(jìn)行傳播；垂直傳播即感染雞腸炎型大腸桿菌的母雞經(jīng)種蛋傳播給后代。雞腸炎型大腸桿菌多因飲水或飼料被污染，大腸桿菌經(jīng)口進(jìn)入腸道引發(fā)，因此環(huán)境因素對(duì)其感染與流行有重要影響，氣溫驟變、飼養(yǎng)密度高、雞舍臟污、糞便堆積、氨氣過(guò)多、溫差過(guò)大等條件均可加速雞腸炎型大腸桿菌的暴發(fā)和傳播[4]。

3 臨床癥狀及剖檢

腸炎型大腸桿菌感染雞的臨床癥狀主要是腹瀉，糞便惡臭，黃色，不成型，感染嚴(yán)重時(shí)在病雞糞便中可見(jiàn)脫落的腸黏膜。雞肛門(mén)下方羽毛潮濕粘連，沾有黃白色或者黃綠色的粥樣糞便[5]。除了消化道癥狀外，病雞后期還表現(xiàn)全身癥狀，如精神沉郁、食欲不振、羽毛雜亂、扎堆久站等，同時(shí)出現(xiàn)生長(zhǎng)遲緩、肉雞體重下降和蛋雞產(chǎn)蛋率降低等現(xiàn)象。剖檢可見(jiàn)腸內(nèi)容物稀薄呈流動(dòng)狀，腸道內(nèi)有卡他性炎癥，腸黏膜脫落嚴(yán)重，腸管內(nèi)明顯充氣擴(kuò)張變?yōu)榘胪该鳡?，小腸充血出血等。

4 診 斷

雞腸炎型大腸桿菌病感染后的臨床癥狀主要為胃腸道癥狀，且常伴隨呼吸道疾病的臨床特征，與新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感和傳染性鼻炎等疾病特點(diǎn)相似，因此需要分離鑒定、血清學(xué)鑒定或分子生物學(xué)鑒定等方法綜合判斷，確診該病。

4.1 病原分離鑒定

雞群有發(fā)病跡象時(shí)養(yǎng)殖場(chǎng)一般采取就地取材的方法，分為活體取樣和解剖取樣，活體取鼻腔和氣管內(nèi)分泌物，解剖取肝臟、脾臟和心包液等器官。病料無(wú)菌處理后，用涂布棒在麥康凱瓊脂固體培養(yǎng)基進(jìn)行涂布，37 ℃過(guò)夜培養(yǎng)24 h，觀察麥康凱瓊脂固體培養(yǎng)基上形成紅色、圓形隆起、光滑濕潤(rùn)、邊緣整齊、直徑1.5～2.5 mm 的小菌落；也可將病料涂布于伊紅美蘭瓊脂固體培養(yǎng)基上，37 ℃過(guò)夜培養(yǎng)24 h，觀察培養(yǎng)基上長(zhǎng)出紫黑色、具有金屬光澤的小菌落[6]。挑取單個(gè)菌落抹片于載玻片上，固定后用草酸銨結(jié)晶紫染1 min，用蒸餾水沖洗，加碘液覆蓋涂面染約1 min，流水沖洗后吸干水分，滴加95%乙醇脫色20～30 s，流水沖洗后吸干水分，番紅染色液染1 min 后，流水沖洗后吸干水分，將染色切片使用低倍顯微鏡觀察，可見(jiàn)大量?jī)啥蒜g圓、紅色的革蘭氏小桿菌即可確診。但是此方法耗時(shí)較長(zhǎng)，效率較低，出于成本考慮，在養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)用占比較少。

4.2 血清學(xué)診斷

血清學(xué)方法廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖場(chǎng)。常用的方法有酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）、酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)（ELISpot）、血清平板凝集試驗(yàn)（SPA）、膠體金和血凝抑制試驗(yàn)（HI）等。ELISA 法只需抗原抗體特異性結(jié)合，就能快速、靈敏、高效、便捷地確診雞大腸桿菌感染。ELISpot 法特異性強(qiáng)，靈敏度高，假陽(yáng)性少，結(jié)果可復(fù)查。SPA 法僅需少量血清，加入等量抗原，就能快速高效地確診感染。膠體金方法使用方便、成本低、檢測(cè)結(jié)果直觀，可快速確診感染。HI 法經(jīng)濟(jì)、快速、便捷，可批量確診感染，但可重復(fù)性差。血清學(xué)方法鑒定具有取材方便、操作簡(jiǎn)單、高效快速、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，逐漸成為確診雞大腸桿菌的主流方法。

4.3 分子生物學(xué)鑒定

分子生物學(xué)方法是養(yǎng)殖場(chǎng)確診MG 感染的重要方法，常用的方法有聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）、熒光定量PCR（RT-PCR）、蛋白質(zhì)免疫印跡（WB）等[7]。PCR 法可快速?gòu)?fù)制病原DNA，具有極高的靈敏度和特異性，是診斷中最準(zhǔn)確和常用的方法。RT-PCR 法僅需微量DNA 即可進(jìn)行定量檢測(cè)，適用性廣，靈敏度高，但對(duì)引物要求較高，一般為實(shí)驗(yàn)室診斷方法。WB 法重復(fù)性高、特異性強(qiáng)、認(rèn)同度高，但是操作復(fù)雜，容易失誤。分子生物學(xué)具有準(zhǔn)確、快速、高效等優(yōu)點(diǎn)，但是儀器造價(jià)較高，不適合小型養(yǎng)殖場(chǎng)。

5 防 治

5.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

雞場(chǎng)要控制大腸桿菌感染雞群，需要有良好的飼養(yǎng)、隔離和防疫環(huán)境，飼料配比科學(xué)，飼養(yǎng)密度合理，建立完善的消毒制度，定期交叉使用消毒藥對(duì)雞舍和用具進(jìn)行消毒，盡量避免應(yīng)激因素的產(chǎn)生。針對(duì)感染雞進(jìn)行分籠飼養(yǎng)，將病死雞及時(shí)進(jìn)行無(wú)害化處理[8]。通過(guò)改善飼養(yǎng)管理?xiàng)l件，科學(xué)提升飼料中營(yíng)養(yǎng)配比，增強(qiáng)雞群免疫功能，才能有效減少該病的感染幾率。

5.2 疫苗接種

疫苗接種是較為有效的預(yù)防大腸桿菌感染的措施，目前國(guó)內(nèi)外廣泛使用滅活疫苗進(jìn)行預(yù)防。接種滅活疫苗能誘導(dǎo)家禽體內(nèi)產(chǎn)生大量抗體，抑制大腸桿菌感染和其他疾病的產(chǎn)生，相對(duì)活疫苗來(lái)說(shuō)安全性更好。但滅活苗沒(méi)有清除病禽體內(nèi)野生毒株的能力，無(wú)法抵抗毒性較強(qiáng)的菌株侵襲機(jī)體，且一般需要接種2 次才能達(dá)到預(yù)期效果，極易引起雞群應(yīng)激[9]。

5.3 藥物防治

我國(guó)主要使用抗生素藥物來(lái)防治雞腸炎型大腸桿菌病感染，目前臨床上常用的藥物有磺胺類(lèi)以及呋喃類(lèi)藥物如恩諾沙星等。由于大腸桿菌對(duì)許多抗生素敏感，抗生素在治療該病感染方面有非常重要的作用，但隨著近年來(lái)抗生素的濫用、錯(cuò)用，導(dǎo)致耐藥菌株在藥物暴露壓力下數(shù)量持續(xù)增加，減弱了抗生素對(duì)雞腸炎型大腸桿菌病的治療效果[10]，且存在停藥后復(fù)發(fā)和藥物殘留等問(wèn)題。

中藥有著副作用少、不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)用中藥治療雞腸炎型大腸桿菌感染的研究日益增多。研究[11]發(fā)現(xiàn)，由中藥配伍組方加工而成的中藥制劑對(duì)于雞腸炎型大腸桿菌感染有著良好的治療效果，呂顏枝等[11]通過(guò)試驗(yàn)證明傳統(tǒng)中醫(yī)白頭翁湯可以有效治療雞大腸桿菌病，且療效呈劑量依賴(lài)性。同時(shí)，在家禽的日常飼料中混飼增強(qiáng)免疫力、健脾養(yǎng)胃的中藥添加劑可以有效提高病雞的日均采食量，增強(qiáng)病雞自身免疫力和抵抗力。

6 結(jié) 語(yǔ)

雞腸炎型大腸桿菌病作為一種臨床常見(jiàn)的雞細(xì)菌病，嚴(yán)重危害雞群的健康生長(zhǎng)，制約了養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。因此，養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，做好綜合防治措施，科學(xué)防控雞腸炎型大腸桿菌病，以促進(jìn)養(yǎng)殖行業(yè)的綠色健康發(fā)展。