何悅雙 劉 姣 顏 倩 楊佳迪 陳 夢(mèng) 趙丕文

(1 北京中醫(yī)藥大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,北京,100029; 2 北京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院,北京,100029)

2021年2月2日,據(jù)世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)公布,2020年全球確診癌癥的患者達(dá)1 930萬例,而死于癌癥的人數(shù)增加到1 000萬。其中乳腺癌是全球最常見的癌癥,在新增癌癥病例中占11.7%。乳腺癌多發(fā)于40～55歲的女性,其具有靶向差、難治性高、易于轉(zhuǎn)移等特點(diǎn),嚴(yán)重威脅著人類的健康。癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞(Cancer-associated Fibroblasts,CAFs)是癌癥基質(zhì)的重要活性成分,不但參與了乳腺癌的啟動(dòng)和進(jìn)展,在其轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)過程中也發(fā)揮著重要作用。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn),CAFs是雌激素受體(Estrogen Receptor,ER)陽性細(xì)胞,ER介導(dǎo)效應(yīng)與CAFs功能及由其調(diào)節(jié)的癌細(xì)胞遷移密切相關(guān)[1]。近年來研究發(fā)現(xiàn),除雌激素核受體ERα和ERβ外,另有一種膜雌激素受體——G蛋白耦聯(lián)雌激素受體(G Protein-coupled Estrogen Receptor,GPER)也可介導(dǎo)雌激素的相關(guān)效應(yīng),但與核受體ERα和ERβ主要介導(dǎo)基因組調(diào)節(jié)效應(yīng)相比,GPER主要介導(dǎo)多種快速非基因組調(diào)節(jié)效應(yīng)[2]。在CAFs中雌激素經(jīng)GPER介導(dǎo)觸發(fā)了一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,并將進(jìn)一步影響癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移[3]。

已有研究發(fā)現(xiàn),一些中藥單體不僅可以通過直接抑制癌細(xì)胞的增殖而發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng),也可通過調(diào)整腫瘤微環(huán)境的穩(wěn)態(tài)抑制腫瘤的增殖和轉(zhuǎn)移,具有降低化療和放療危害并最終延長患者的生存時(shí)間等優(yōu)勢(shì)[4]。中藥單體可以通過抑制CAFs中相關(guān)因子的釋放,進(jìn)而阻止乳腺癌上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal Transition,EMT)的發(fā)生,從而抑制乳腺癌的轉(zhuǎn)移。因此,本文總結(jié)了GPER與CAFs與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系,以及中藥單體作用于CAFs進(jìn)而抑制乳腺癌的增殖和轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制。

1 CAFs的功能及其在乳腺癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移中的作用

成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,在癌癥進(jìn)展的所有階段均與癌細(xì)胞相關(guān)[5]。在乳腺癌中,約80%的基質(zhì)成纖維細(xì)胞為CAFs,其活化表型可促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的增殖,并可在與原發(fā)腫瘤相似的轉(zhuǎn)移部位生長,是原發(fā)腫瘤微環(huán)境(Tumor Microenvironment,TM)中最具有代表性的細(xì)胞類型。CAFs主要由固有結(jié)締組織的成纖維細(xì)胞被癌細(xì)胞侵襲激活后產(chǎn)生,對(duì)癌癥的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移都具有重要影響,可以促進(jìn)癌細(xì)胞生長、侵襲和免疫抑制[6]。

研究發(fā)現(xiàn),在腫瘤發(fā)生之初,CAFs與正常成纖維細(xì)胞一樣,可以被腫瘤細(xì)胞分泌的生長因子募集到腫瘤基質(zhì)中,用以修復(fù)受損組織并抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲。然而隨著腫瘤的發(fā)展,CAFs繼續(xù)積聚細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular Matrix,ECM)蛋白、分泌生長因子并收縮和重塑ECM。CAFs自身也可以通過分泌生長因子和細(xì)胞因子[6-9],募集免疫細(xì)胞促進(jìn)腫瘤進(jìn)展[5,10],例如CAFs分泌的白細(xì)胞介素-32(Interleukin-32,IL-32)通過促分裂原活化的蛋白激酶(Mitogen Activated Protein Kinase,MAPK)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移[11],IL-33可以在轉(zhuǎn)移性TM中引發(fā)2型炎癥,進(jìn)而促進(jìn)乳腺癌肺轉(zhuǎn)移等[12]。同樣也能降解和重塑ECM成分,促進(jìn)EMT過程和誘導(dǎo)干細(xì)胞分化[7-10]。CAFs還可以通過直接接觸癌細(xì)胞,將癌細(xì)胞拉離原發(fā)腫瘤灶,以促進(jìn)癌癥的轉(zhuǎn)移[13]。

大量臨床數(shù)據(jù)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果均證明了癌癥包塊內(nèi)聚集的CAFs在癌癥進(jìn)展中起作用以及基質(zhì)微環(huán)境對(duì)抑制癌癥發(fā)展的貢獻(xiàn)[14-15]。此外,間質(zhì)成纖維細(xì)胞可能促進(jìn)局部產(chǎn)生雌激素,甚至通過與重要的轉(zhuǎn)導(dǎo)通路(如被生長因子激活的通路)的串?dāng)_進(jìn)一步刺激了乳腺癌腫塊的生長[12]。所以如何通過抑制CAFs的增殖從而減少癌細(xì)胞的增殖、黏附和擴(kuò)散或可成為癌癥防治的新策略。

2 GPER在乳腺癌CAFs中的定位及意義

GPER多定位在細(xì)胞膜上,在多種亞細(xì)胞結(jié)構(gòu),如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、核糖體以及細(xì)胞核中也有存在[2]。在CAFs中,GPER定位于乳腺CAFs的核內(nèi),雌激素在CAFs的核內(nèi)刺激GPER和磷酸化EGFR之間的相互作用,從而導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)錄和相關(guān)的生物學(xué)反應(yīng)[16]。PUPO等[17]和LAPPANO等[18]通過電子顯微鏡觀察確定了GPER定位于從乳腺癌患者中提取的CAFs的核室中,首次證明了在GPER序列中存在一個(gè)假定的核定位序列(Nuclear Localization Sequence,NLS),它以輸入蛋白(Importin)依賴性方式調(diào)節(jié)CAFs中的受體核易位。在雌激素的作用下,GPER通過與靶基因c-fos的啟動(dòng)子區(qū)域內(nèi)假定的ATRS基序結(jié)合,介導(dǎo)c-fos和結(jié)締組織生長因子(Connective Tissue Growth Factor,CTGF)的上調(diào),NLS參與GPER的核輸入,GPER通過輸入蛋白依賴性機(jī)制轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中。

GPER在乳腺癌中可從胞漿膜逆行轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的下級(jí)結(jié)構(gòu),最終定位于細(xì)胞核周圍[17],表明GPER在細(xì)胞功能改變時(shí),以一種“來回穿梭”的形式存在于細(xì)胞內(nèi),這樣的“胞漿轉(zhuǎn)位”現(xiàn)象在乳腺癌CAFs中也存在。生理狀態(tài)下的TM是一個(gè)非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),所以CAFs可能受到其中多種成分的影響,腫瘤實(shí)質(zhì)細(xì)胞與CAFs是乳腺癌細(xì)胞中重要的組成部分,所以在體內(nèi)環(huán)境中乳腺癌細(xì)胞可能影響CAFs中GPER的細(xì)胞內(nèi)定位。余騰驊等[19]證明單獨(dú)培養(yǎng)的GPER定位于CAFs的細(xì)胞核,與人乳腺癌細(xì)胞MCF-7及MDA-MB-468細(xì)胞共培養(yǎng)后,細(xì)胞中的GPER出現(xiàn)胞漿轉(zhuǎn)位,雌激素和G1處理后,共培養(yǎng)條件下的CAFs中的成纖維細(xì)胞生長因子2(Fibroblast Growth Factor 2,FGF2)含量均明顯增加,且2種乳腺癌細(xì)胞的增殖能力增強(qiáng),FGF2中和抗體可使該現(xiàn)象不出現(xiàn),證明了CAFs中GPER的胞漿轉(zhuǎn)位現(xiàn)象有利于雌激素/GPER/FGF2通路的活化,從而可能促進(jìn)乳腺癌的進(jìn)展。

迄今為止,GPER在細(xì)胞核中的功能仍有待充分驗(yàn)證。研究表明,這些受體具有與膜相關(guān)蛋白相互作用的能力,使膜相關(guān)蛋白易位到細(xì)胞核中,并能調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄[20-22]。通過單分子NLS進(jìn)行的GPER核區(qū)室化可以更好地理解該受體的生物學(xué)特性,也為詮釋其調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄的可能性開辟了新途徑。

3 GPER在CAFs中活化后對(duì)乳腺癌增殖和轉(zhuǎn)移的影響

關(guān)于CAFs中GPER活化后對(duì)癌細(xì)胞發(fā)生和遷移行為的影響是近幾年該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。CAFs能夠通過TM中釋放的相關(guān)因子,維持癌細(xì)胞的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移[23-24],而GPER介導(dǎo)相關(guān)因子的表達(dá),也對(duì)癌細(xì)胞的增殖起到關(guān)鍵作用。

CAFs為癌細(xì)胞提供了支持其侵襲、擴(kuò)散的微環(huán)境[24-27]。YANG和YAO[28]發(fā)現(xiàn)與正常成纖維細(xì)胞(Normal Fibroblast,NF)相比,CAFs可以促進(jìn)MDA-MB-231細(xì)胞的增殖,遷移和侵襲。1型膠原蛋白(Collagen-1,coll-1)是TM因子之一,可調(diào)節(jié)癌細(xì)胞的生存、增殖、轉(zhuǎn)移和侵襲。CAFs中Coll-1的表達(dá)量與GPER的表達(dá)量正相關(guān),GPER的下調(diào)抑制Coll-1的表達(dá),從而誘導(dǎo)了細(xì)胞增殖的減少、S期的阻滯和MDA-MB-231細(xì)胞遷移與侵襲的抑制。證明了CAFs中GPER的上調(diào)可以促進(jìn)三陰性乳腺癌(Triple Negative Breast Cancer,TNBC)的增殖,侵襲和遷移;而GPER的下調(diào)對(duì)TNBC癌細(xì)胞的作用相反,且GPER的表達(dá)水平與TNBC的預(yù)后正相關(guān)[29]。

研究表明,類固醇受體和生長因子受體之間的功能性相互作用對(duì)乳腺癌的進(jìn)展起著至關(guān)重要的作用[30-32]。Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是一種經(jīng)典的細(xì)胞間通信機(jī)制,在許多細(xì)胞類型和不同發(fā)育階段起作用,在哺乳動(dòng)物發(fā)育過程中,Notch信號(hào)控制著器官發(fā)生的各個(gè)方面,包括神經(jīng)發(fā)生、血管發(fā)生、肌發(fā)生和造血等[32],研究表明,Notch通路的失調(diào)與癌癥干細(xì)胞更新、血管生成和化學(xué)抗性有關(guān)。雌激素在GPER和Notch通路之間進(jìn)行正向串?dāng)_,在CAFs中GPER參與了Notch依賴性轉(zhuǎn)錄,觸發(fā)了Notch/Snail信號(hào)通路,從而引起EMT的發(fā)生[33]。證明了Notch信號(hào)通路介導(dǎo)了乳腺癌細(xì)胞和CAFs中雌激素GPER信號(hào)通路,且雌激素可通過該機(jī)制刺激乳腺癌的進(jìn)展。

GPER是缺氧誘導(dǎo)因子1α(Hypoxia Inducible Factor-1α,HIF-1α)的轉(zhuǎn)錄靶點(diǎn),并在缺氧性乳腺TM中激活血管內(nèi)皮生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)表達(dá)和血管生成,有資料顯示,具有血管生成作用的胰島素樣生長因子1(Insulin-like Growth Factors,IGF1)/胰島素樣生長因子1受體(IGF1R)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可激活乳腺癌細(xì)胞中的GPER。ERNESTINA M等[34]分析了近5 000例乳腺癌患者的基因表達(dá)數(shù)據(jù),并使用來自患者乳腺腫瘤包塊的原代CAFs細(xì)胞,研究GPER在調(diào)節(jié)IGF1觸發(fā)的VEGF表達(dá)和血管生成中的作用,確定了IGF1/IGF1R信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)參與細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK1/2)和蛋白激酶B(AKT)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路來誘導(dǎo)HIF-1α,也影響了其靶點(diǎn)GPER和VEGF的表達(dá)。HIF-1α和GPER之間的功能合作對(duì)于IGF1誘導(dǎo)的VEGF的轉(zhuǎn)錄激活至關(guān)重要,HIF-1α和GPER都參與了VEGF誘導(dǎo)的人血管內(nèi)皮細(xì)胞管形成。

CIRILLO等[35]發(fā)現(xiàn),一種具有致癌作用的環(huán)境污染物3-甲基膽固醇(3-methylcholanthrene,3MC),可通過SkBr3細(xì)胞和CAFs中的芳香烴受體(Aryl Hydrocarbon Receptor,AHR)和GPER激活人表皮生長因子受體(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(Extracellular Signal-regulated Kinases,ERK)/c-Fos信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,上調(diào)細(xì)胞周期素(Cyclin)D1/A/E,從而刺激乳腺癌SkBr3細(xì)胞和CAFs,促進(jìn)乳腺癌的發(fā)展。

總體而言,GPER活化后介導(dǎo)了一系列的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,促進(jìn)了CAFs釋放相關(guān)因子,進(jìn)而對(duì)乳腺癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移起到一定的作用,這些發(fā)現(xiàn)為利用TM靶向治療乳腺癌提供了新方向。

4 雌激素作用于乳腺癌CAFs的GPER介導(dǎo)機(jī)制

作為乳腺癌發(fā)展的關(guān)鍵因素,CAFs參與了與癌癥相關(guān)的轉(zhuǎn)移行為,包括釋放各種生長因子、細(xì)胞因子、蛋白酶和激素(包括雌激素)介導(dǎo)的增殖、轉(zhuǎn)移和侵襲。實(shí)際上,雌激素是乳腺癌微環(huán)境中的活躍分子,在生理和病理生理?xiàng)l件下都影響著乳腺癌基質(zhì),如CAFs等的活性和行為,GPER可以作為該細(xì)胞應(yīng)答雌激素相關(guān)效應(yīng)的重要介導(dǎo)者[36]。CAFs可在生理水平雌激素作用下,快速誘導(dǎo)ERK的磷酸化和早期基因如c-fos和結(jié)締組織生長因子(Connective Tissue Growth Factor,CTGF)以及Cyclin D1的表達(dá),且上述效應(yīng)由GPER介導(dǎo)[37]。

GPER通過激活EGFR信號(hào)通路發(fā)揮作用,介導(dǎo)多種信號(hào)通路[38]。GPER的激活可導(dǎo)致肝素結(jié)合生長因子(Heparin Binding Epidermal Growth Factor,HB-EGF)的釋放,進(jìn)而觸發(fā)EGFR/ERK通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)[39]。CAFs中的GPER活化后可介導(dǎo)雌激素對(duì)癌癥相關(guān)基質(zhì)的作用,并且CAFs可能通過GPER/EGFR/ERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與雌激素產(chǎn)生的正反饋回路來促進(jìn)乳腺癌的進(jìn)展,特別是腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞抗性[40]。

LUO等[41]觀察到雌激素以及G1以劑量依賴的方式觸發(fā)乳腺癌CAFs瞬時(shí)細(xì)胞指數(shù)升高,這一促進(jìn)作用可以被GPER選擇性拮抗劑G15阻斷,證明GPER介導(dǎo)了乳腺癌CAFs中的黏附/擴(kuò)散、增殖和遷移,雌激素可能會(huì)影響與癌癥相關(guān)的基質(zhì),并通過CAFs促進(jìn)乳腺癌的發(fā)展。LUO等[42]還發(fā)現(xiàn),盡管MCF-7的CAFs中,雌激素的效應(yīng)更多地與ERα介導(dǎo)作用相關(guān),但也觀察到GPER觸發(fā)的快速信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程可調(diào)控雌激素效應(yīng)基因,如c-fos、B細(xì)胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Cyclin D1/A/E、CTGF和早期生長反應(yīng)因子1(Early Growth-Response Factor 1,ERR-1)等的表達(dá)。因此,可以證明CAFs中的GPER活化后與乳腺癌細(xì)胞的增殖、學(xué)抗性和轉(zhuǎn)移有關(guān)。

前文提到余騰驊等[19]證明乳腺癌CAFs中雌激素/GPER/蛋白激酶A(PKA)/FGF2通路可能在癌癥轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。SANTOLLA等[43]發(fā)現(xiàn),經(jīng)過雌激素刺激后的CAFs的條件培養(yǎng)基與MAD-MB-231細(xì)胞共培養(yǎng),激活了FGF2/成纖維細(xì)胞生長因子受體1(Fibroblast Growth Factor Receptor 1,FGFR1)旁分泌信號(hào),促進(jìn)了CTGF的表達(dá),導(dǎo)致MDA-MB-231細(xì)胞的遷移和侵襲。證實(shí)了雌激素和GPER激動(dòng)劑G1通過GPER-EGFR-ERK1/2通路誘導(dǎo)了FGF2的上調(diào)和分泌,從而激活ER陰性乳腺癌CAFs中的GPER/EGFR/ERK/c-fos/激活蛋白-1(Activator Protein1,AP-1)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)。FGFR1是最常擴(kuò)增的FGFRs家族成員,其擴(kuò)增/表達(dá)與乳腺癌患者的生存率下降相關(guān),通過以上發(fā)現(xiàn)表明,GPER與FGF2/FGFR1旁分泌激活轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制相關(guān),可能促進(jìn)乳腺癌的發(fā)展。

沉默調(diào)節(jié)蛋白的表達(dá)在許多癌細(xì)胞中會(huì)發(fā)生改變,有研究發(fā)現(xiàn),在乳腺癌細(xì)胞中,煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)+依賴的組蛋白脫乙?；赋聊畔⒄{(diào)節(jié)因子1(Silence Information Regulator1,SIRT1)對(duì)由ERα介導(dǎo)的致癌信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。SANTOLLA等[44]確定了在SkBr3細(xì)胞和CAFs中,雌激素和G-1可以通過GPER誘導(dǎo)SIRT1的表達(dá),并繼續(xù)激活EGFR/ERK/c-fos/AP-1轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,因此推測SIRT1可能包含在由雌激素通過GPER促成乳腺癌進(jìn)展的轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)中。

因?yàn)榇萍に厥侨橄偌?xì)胞外基質(zhì)循環(huán)調(diào)節(jié)的主要驅(qū)動(dòng)力,癌細(xì)胞的發(fā)展又受到多種因素和機(jī)制的影響,而雌激素和CAFs在癌癥進(jìn)展中起著至關(guān)重要的作用,因此了解雌激素及其受體和CAFs在癌癥發(fā)生和轉(zhuǎn)移中的作用將旨在創(chuàng)新抗癌策略,尋找癌癥治療新靶點(diǎn)開拓更廣闊的前景,通過調(diào)節(jié)雌激素作用于TM或可成為治療乳腺癌的新思路。

5 中藥及其活性成分作用于乳腺癌CAFs的GPER介導(dǎo)機(jī)制

近年來中藥單體的抗癌作用已被廣泛研究,有希望運(yùn)用于增生性腫瘤的治療,研究發(fā)現(xiàn)其抗癌效應(yīng)與改善TM密切相關(guān),可通過調(diào)節(jié)TM中的相關(guān)因子抑制癌癥的發(fā)生發(fā)展。HAO等[45]證實(shí)夏枯草多糖(PVP)可以通過抑制CAFs中堿性成纖維細(xì)胞生長因子(Basic Fibroblast Growth Factor,bFGF)的表達(dá)來抑制CAFs的生長和遷移,從而對(duì)乳腺癌SkBr-3細(xì)胞的增殖起到間接性抑制作用。中藥單體可通過多種機(jī)制調(diào)節(jié)腫瘤基質(zhì),尤其是CAFs,從而使增生性TM正常化,以改善化學(xué)治療藥物和納米藥物的不良反應(yīng)。同時(shí),中藥單體可以抑制癌癥相關(guān)基質(zhì)與癌細(xì)胞之間的相互作用,從而抑制癌細(xì)胞的增殖、侵襲、遷移和耐藥性[46]。

YAO等[47]發(fā)現(xiàn),來自中藥青蒿的青蒿琥脂和二氫青蒿素可以抑制CAFs誘導(dǎo)的乳腺癌細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移,也可以通過抑制轉(zhuǎn)化生長因子β(Transforming Growth Factor-β,TGF-β)信號(hào)促使CAFs凋亡。大黃素可通過抑制CAFs分泌TGF-β阻止乳腺癌EMT的發(fā)生[48],黃連素與其有相似的效果[49],也可通過抑制CAFs分泌TGF-β,從而抑制PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路活性抑制乳腺癌的EMT。有研究表明,在乳腺癌CAFs中,PI3K/AKT信號(hào)通路可以誘導(dǎo)CAFs中的GPER轉(zhuǎn)運(yùn),在前文中提到CAFs中GPER的胞漿轉(zhuǎn)位現(xiàn)象有利于雌激素/GPER信號(hào)通路活化,從而可能促進(jìn)乳腺癌的進(jìn)展[38];所以黃連素在CAFs中抑制PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路的活性可能與其經(jīng)GPER介導(dǎo)的雌激素樣作用相關(guān)。

姜黃素(二氟甲酰甲烷)是中藥姜黃的一種多酚類衍生物,已被證實(shí)具有抗癌活性,可以對(duì)致癌基因表達(dá),細(xì)胞周期調(diào)節(jié),細(xì)胞凋亡,癌癥發(fā)生和轉(zhuǎn)移的多種生物學(xué)途徑起作用[50-51]。姜黃素可以通過作用于CAFs進(jìn)而影響胰腺癌、前列腺癌的EMT和侵襲[52]。在乳腺癌中,姜黃素可以上調(diào)CAFs中的P16、P21、P53等抑癌基因水平,并抑制JAK2/STAT3信號(hào)通路,減少旁分泌IL-6、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9、TGF-β和基質(zhì)細(xì)胞衍生因子(Stromal Cell-derivedFactor1,SDF-1)等因子抑制乳腺癌細(xì)胞的侵襲/遷移[53]。磷酸葡萄糖異構(gòu)酶/自分泌運(yùn)動(dòng)因子(Phosphoglucose Isomerase/Autocrine Motility Factor,PGI/AMF)在糖酵解和糖異生中起重要作用,并與癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān),能夠誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞EMT[54]。AMF可以通過降低AMF受體和GPER的水平,從而激活A(yù)KT和ERK信號(hào)通路,抑制JAK/STAT信號(hào)通路激活[55]。瘦素作為促有絲分裂因子可能在人類癌癥的發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用,因此被認(rèn)為是乳腺癌治療的新方向[56]。有研究表明,瘦素基因的表達(dá)可以通過激活雌激素受體來調(diào)節(jié),而姜黃素可以抑制瘦素基因表達(dá)和分泌,且姜黃素對(duì)瘦素的作用與ERα的表達(dá)正相關(guān)[57]。因此,姜黃素可能通過雌激素/GPER信號(hào)通路作用于乳腺癌CAFs,并抑制JAK2/STAT3信號(hào)通路發(fā)揮抗癌效應(yīng)。

白藜蘆醇首先在20世紀(jì)70年代首次在葡萄中發(fā)現(xiàn),后來在中藥虎杖和桑椹中也發(fā)現(xiàn)含有這種成分。白藜蘆醇可以通過抑制CAFs條件培養(yǎng)基處理過的乳腺癌細(xì)胞分泌的cyclinD1、c-Myc、MMP-2和MMP-9等因子,從而抑制轉(zhuǎn)錄因子SOX2(SRY-box Transcription Factor,SOX2)的表達(dá)和AKT及STAT3的激活,使乳腺癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲被抑制[58]。白藜蘆醇可以在T47D乳腺癌細(xì)胞系中,通過劑量依賴的方式引起p53的凋亡以及ER的下調(diào)[59]。白藜蘆醇可以從mRNA和蛋白水平下調(diào)ER、IGF-1受體、p-AKT 1/2/3和cyclinD1的表達(dá),抑制雌激素和雙酚A(Bisphenol A,BPA)在卵巢癌細(xì)胞系BG1中的增殖[60]。雙酚A可通過與ERα、ERβ或GPER相互作用,發(fā)揮類似雌激素的活性。因此,白藜蘆醇在乳腺癌癥中可以下調(diào)ER致雌激素效應(yīng)減弱,發(fā)揮抑制癌癥基質(zhì)細(xì)胞增殖、抑制乳腺癌的效應(yīng)。

目前,中藥單體通過影響癌細(xì)胞與CAFs的相互作用對(duì)抗增生性腫瘤已經(jīng)有很多實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù),但中藥單體作為天然雌激素樣成分與CAFs中的雌激素受體結(jié)合,從而串?dāng)_TM和癌癥細(xì)胞之間的聯(lián)絡(luò)卻少有提及。因?yàn)榇萍に厥侨橄偌?xì)胞外基質(zhì)循環(huán)調(diào)節(jié)的主要驅(qū)動(dòng)子,中藥單體是否可以通過雌激素/GPER信號(hào)通路對(duì)CAFs和乳腺癌胞進(jìn)行串?dāng)_從而發(fā)揮抗癌作用,值得進(jìn)一步深入研究。

6 討論

近年來,由于GPER陽性細(xì)胞—CAFs可以通過分泌生長因子和細(xì)胞因子促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移,而得到了廣泛關(guān)注。在CAFs中,GPER定位于核室內(nèi),其活化后可以通過介導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路和增殖、遷移相關(guān)因子的表達(dá)從而影響乳腺癌的發(fā)展。而很多中藥及其活性成分都被報(bào)道過可以通過作用于CAFs中的GPER介導(dǎo)機(jī)制從而抑制乳腺癌的發(fā)展。

CAFs是TM中的重要角色,可參與促進(jìn)癌癥的發(fā)生和發(fā)展。例如,CAFs可通過分泌趨化因子、生長因子而發(fā)揮旁分泌作用,進(jìn)而促進(jìn)增生腫瘤的侵襲性和化學(xué)治療耐受性[61]。因此,人們?cè)诮鼛啄甑难芯空J(rèn)識(shí)到CAFs是降低抗化療藥耐藥性和癌癥復(fù)發(fā)的化學(xué)療法的較重要的靶點(diǎn)之一。除了抑制癌細(xì)胞的增殖外,許多中藥單體還具有靶向不同類型基質(zhì)細(xì)胞的能力,從而對(duì)增生性腫瘤細(xì)胞的侵襲、增殖和遷移表現(xiàn)出間接抑制作用。這些中藥單體通常通過各種信號(hào)通路調(diào)節(jié)TM,在癌癥治療中起著全面的協(xié)調(diào)作用。近年來,GPER作為一種新型的細(xì)胞增殖、遷移介導(dǎo)分子已引起越來越多的關(guān)注。尤其是現(xiàn)已證明,GPER可以作為轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子介導(dǎo)CAFs對(duì)雌激素的應(yīng)答反應(yīng),引發(fā)細(xì)胞增殖、遷移、黏附/擴(kuò)散等;GPER參與了CAFs衍生因子對(duì)乳腺癌細(xì)胞侵襲性特征的旁分泌作用,而GPER在CAFs中的胞漿轉(zhuǎn)位現(xiàn)象更是為抑制乳腺癌的發(fā)展提供了新思路?？傮w而言,大量研究使人們對(duì)GPER在CAFs中的作用有了進(jìn)一步的了解,關(guān)于中藥單體激活CAFs中的GPER信號(hào)通路在防治乳腺癌中的應(yīng)用,還需要更全面、更深入的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)進(jìn)行探索,以進(jìn)一步揭示雌激素/GPER信號(hào)通路在癌細(xì)胞和TM中的作用,尋找和建立更高效、更具針對(duì)性的抗癌策略。

利益沖突聲明：無。