宋 宇，包秀麗

(1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010050;2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院眼科，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010050)

纖維化是機(jī)體損傷修復(fù)過(guò)程中的重要步驟,在一些眼部疾病中，外傷、炎癥等常作為始動(dòng)因素激活細(xì)胞內(nèi)多種信號(hào)通路，刺激上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)發(fā)化為間充質(zhì)細(xì)胞，分泌膠原蛋白(Col)、纖連蛋白(FN)等細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)，引發(fā)視軸的纖維化，最終嚴(yán)重影響患者視力。手術(shù)是眼科疾病的主要治療手段之一，然而術(shù)后纖維化的發(fā)生仍影響著患者的視力。如何通過(guò)更簡(jiǎn)單、安全、有效的方法阻斷眼部術(shù)后纖維化的發(fā)生成為研究熱點(diǎn)。JNK信號(hào)通路屬于MAPK信號(hào)通路的一個(gè)重要分支，它與TGF-β、非經(jīng)典Wnt信號(hào)通路共同作用在促進(jìn)組織損傷修復(fù)中發(fā)揮著重要作用。多種研究發(fā)現(xiàn)，JNK抑制劑可以阻止細(xì)胞增殖、遷移、凋亡、上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的發(fā)生，從而阻斷疾病的發(fā)生發(fā)展。了解JNK信號(hào)通路在疾病發(fā)病機(jī)制中的作用，通過(guò)阻斷其中某一或某些關(guān)鍵作用點(diǎn)，阻止術(shù)后眼內(nèi)過(guò)度纖維化或許可以成為一種治療的可能。

1 JNK信號(hào)通路

1.1 概 述 JNK又稱應(yīng)激活化蛋白激酶(SAPK)，屬于MAPK家族。JNK蛋白共有3種表型，其中JNK1、JNK2各有4個(gè)亞型，廣泛表達(dá)于機(jī)體各個(gè)組織，JNK3有2個(gè)亞型，特異性表達(dá)于中樞系統(tǒng)、心臟平滑肌和睪丸中[1]。常見(jiàn)的JNK激活物有激素、神經(jīng)因子、生長(zhǎng)因子、腫瘤壞死因子(TNF)、炎性細(xì)胞因子、細(xì)胞內(nèi)外病原體、化學(xué)誘導(dǎo)劑等，它們分別與Wnt受體、G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)、受體酪氨酸激酶(RTKs)、TGF-β受體、TNF受體和Toll受體復(fù)合物(TLR)等結(jié)合，通過(guò)“三級(jí)”磷酸化的方式激活JNK蛋白，上調(diào)c-Jun、ETS樣蛋白-1(ELK1)、Smad4、p53、激活轉(zhuǎn)錄因子-2(ATF-2)和熱休克轉(zhuǎn)錄因子-1(HSF1)等靶基因的表達(dá)，或抑制活化T細(xì)胞核因子C1(NFATC1)、NFAT4和信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活蛋白3(STAT3)等的表達(dá)，調(diào)控細(xì)胞的增殖、分化，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，改變細(xì)胞的遷移和侵襲力[2]，參與多種腫瘤、纖維化等疾病的發(fā)生。由此可見(jiàn)，JNK信號(hào)通路能夠作為多種信號(hào)通路的作用節(jié)點(diǎn)廣泛應(yīng)對(duì)多種外界刺激，從而參與對(duì)機(jī)體的調(diào)節(jié)。

1.2 JNK信號(hào)通路的級(jí)聯(lián)反應(yīng) JNK信號(hào)通路的激活過(guò)程是一系列絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng)發(fā)生的過(guò)程。多種刺激激活位于細(xì)胞膜上的Rac、Rho和Cdc42等Rho GTP酶，活化的Rho GTP酶誘導(dǎo)膜近端絲裂原活化蛋白激酶(MAP3Ks)，如MAPK/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(MEKKs)、細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶-1(ASK1)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β活化激酶-1(TAK1)/TAK1-結(jié)合蛋白-1(TAB1)、混合譜系酶-3(MLK3)磷酸化?；罨腗AP3Ks同樣通過(guò)磷酸化的方式誘導(dǎo)絲裂原活化蛋白激酶-4，7(MKK4，7)的激活。MKK7作為JNK的特異性激活劑通過(guò)雙磷酸化JNK活化環(huán)內(nèi)第Ⅷ亞區(qū)的Thr-Pro-Tyr來(lái)激活不同亞型的JNK蛋白。被激活的JNK蛋白通過(guò)誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子激活劑激活蛋白-1(AP-1)的活化發(fā)揮作用[1,3]。

2 TGF-β、Wnt信號(hào)通路對(duì)JNK的調(diào)節(jié)

目前，TGF-β和Wnt信號(hào)通路在纖維化疾病的重要作用已被廣泛認(rèn)可。既往研究[4]表明，TGF-β信號(hào)和非經(jīng)典Wnt信號(hào)激活相同的MAPK通路，提示JNK與TGF-β、Wnt信號(hào)緊密相連，共同影響組織器官纖維化、腫瘤的發(fā)生。

2.1 TGF-β對(duì)JNK的調(diào)節(jié) TGF-β是轉(zhuǎn)換生長(zhǎng)因子超家族中的一員，通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、遷移和分化的能力，在胚胎發(fā)育和組織穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用，介導(dǎo)惡性腫瘤、炎性疾病和纖維化疾病的發(fā)生。TGF-β信號(hào)通路可分為Smad依賴途徑和非Smad依賴途徑。JNK蛋白既可作為TGF-β信號(hào)的下游靶點(diǎn)，促進(jìn)Smad2/3的激活，誘導(dǎo)Bcl2蛋白的磷酸化，降低Bcl2蛋白的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，也可被TGF-β非Smad依賴途徑激活以發(fā)揮作用[5]。TGF-β通過(guò)磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)募集細(xì)胞膜上具有3SHc結(jié)構(gòu)域的支架蛋白、生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白-2(Grb2)、鳥(niǎo)苷酸交換因子SOS并激活Ras、Rac和Cdc42，誘導(dǎo)MEKK1/2和支架蛋白POSH介導(dǎo)的JNK信號(hào)通路的活化，促進(jìn)細(xì)胞EMT[3]。MAPK/JNK信號(hào)通路與TGF-β相互作用共同促進(jìn)細(xì)胞EMT和纖維化發(fā)生。MAPK/JNK通路中活化的Ras可促進(jìn)TGF-β/Smad2信號(hào)通路上調(diào)整合素α3β1、α2β1、α5β1、αVβ3的表達(dá)，改變細(xì)胞間黏附，促進(jìn)波形蛋白(VIM)、FN的表達(dá)，下調(diào)E-鈣黏蛋白(E-cadherin)的水平，促進(jìn)ColⅠ、ColⅤ的表達(dá)，提高細(xì)胞的遷移和侵襲力，促進(jìn)細(xì)胞EMT[6]。MAPK/JNK信號(hào)通路也可以調(diào)節(jié)TGF-β/活化素(Activin)和骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)的活性[7]，影響細(xì)胞EMT。

2.2 Wnt/JNK信號(hào)通路參與細(xì)胞EMT及細(xì)胞凋亡 Wnt蛋白在脊椎生物的發(fā)育過(guò)程中調(diào)控著細(xì)胞增殖、更新、凋亡，維持器官組織內(nèi)穩(wěn)態(tài)。根據(jù)其作用是否依賴β-catenin，Wnt信號(hào)通路分為經(jīng)典Wnt信號(hào)通路即Wnt/β-catenin信號(hào)通路和非經(jīng)典Wnt信號(hào)通路，后者主要包括Wnt/PCP(Wnt/JNK)和Wnt/Ca2+通路。非經(jīng)典Wnt蛋白與受體酪氨酸激酶樣孤兒受體(ROR)、Van Gogh樣蛋白(Vangl)和卷曲蛋白受體(Fzd)復(fù)合物結(jié)合，激活蓬亂蛋白(Dvl)介導(dǎo)的Rho/Rac GTP酶、Rho激酶(ROCK)信號(hào)激活JNK，促進(jìn)AP-1、ATF-2等表達(dá)，促進(jìn)球狀肌動(dòng)蛋白(G-Actin)聚合和纖維狀肌動(dòng)蛋白(F-Actin)網(wǎng)形成，調(diào)控細(xì)胞骨架重塑，促使細(xì)胞極性、黏附性、運(yùn)動(dòng)力發(fā)生改變[8]。Wnt/JNK信號(hào)通路還可以介導(dǎo)細(xì)胞凋亡。非經(jīng)典Wnt蛋白在Ror、Vangl的作用下激活Wnt/JNK信號(hào)通路，上調(diào)Bax/Bcl-2的比值，誘導(dǎo)凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9、細(xì)胞色素-c(Cyc)的表達(dá)啟動(dòng)細(xì)胞凋亡。通過(guò)降低細(xì)胞線粒體膜電位(ΔΨ)，抑制構(gòu)成線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔(mPTP)的關(guān)鍵成分之一VDAC的表達(dá)，促進(jìn)mPTP開(kāi)放釋放線粒體死亡因子，激活線粒體凋亡途徑促進(jìn)細(xì)胞凋亡[9]。

2.3 JNK與TGF-β、非經(jīng)典Wnt信號(hào)在機(jī)體纖維化中的作用 有研究[6]表明，Ras/TGF-β通過(guò)激活Wnt5a/PCP信號(hào)通路誘導(dǎo)細(xì)胞EMT發(fā)生，同時(shí)，Wnt5a作為TGF-β1的下游作用位點(diǎn)與Fzd6/Fzd8結(jié)合，在酪氨酸蛋白激酶7(PTK7)共受體和膠原三螺旋重復(fù)序列蛋白1(CTHRC1)的作用下，激活下游RhoA、Rac，促進(jìn)JNK的表達(dá)并誘導(dǎo)NFATc1的活化和核轉(zhuǎn)位，促進(jìn)細(xì)胞遷移和侵襲，刺激肌成纖維細(xì)胞內(nèi)Col、FN、VIM的表達(dá)，促進(jìn)組織纖維化，沉默Wnt5a基因或抑制Wnt/JNK可阻止細(xì)胞遷移、逆轉(zhuǎn)細(xì)胞EMT發(fā)生，阻斷TGF-β對(duì)Wnt5a的誘導(dǎo)，降低Col和FN的表達(dá)，逆轉(zhuǎn)纖維化[10-11]。TGF-β介導(dǎo)的Wnt5a/JNK1還可通過(guò)磷酸化Paxillin、促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白-1、2(MMP1、2)、細(xì)胞間黏附分子(ICAM)和CD44的表達(dá)，上調(diào)VIM含量，降低E-cadherin的水平，促使上皮細(xì)胞發(fā)生EMT，促進(jìn)細(xì)胞遷移[12]。不僅如此，Wnt-Fzd/ROR-Gα12/13-Rho/Lats1/2-YAP/TAZ-TEAD軸通過(guò)上調(diào)整合素αVβ6的表達(dá),促進(jìn)TGF-β1/Smad2/3的激活，促進(jìn)細(xì)胞增殖、EMT及纖維化[13]。Wnt5a與Fzd結(jié)合，通過(guò)誘導(dǎo)Dvl2和c-Jun磷酸激活Wnt/JNK信號(hào)通路，同時(shí)誘導(dǎo)內(nèi)源性Yes相關(guān)蛋白(YAP)去磷酸化和TAZ(具有 PDZ 結(jié)合基序的轉(zhuǎn)錄共激活因子)積聚。Wnt5a與Fzd1或ROR1-Fzd2/5共受體結(jié)合，在GPCR的Gα12/13作用下激活RhoA、Rac1,通過(guò)抑制腫瘤抑制基因-1/2(Lats1/2)激活YAP和TAZ，隨后YAP/TAZ發(fā)生核轉(zhuǎn)位及核積累，激活轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)因子TEA結(jié)構(gòu)域TEAD，上調(diào)下游靶基因Wnt5a、Wnt5b、Dickkopf1(Dkk1)、BMP4和胰島素樣生長(zhǎng)因子-4(IGFBP4)的表達(dá)，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、遷移[13-14]。JNKs通過(guò)促進(jìn)Lats1與其負(fù)調(diào)控因子LIM結(jié)構(gòu)域包含蛋白-1(LIMD1)的結(jié)合抑制Lats的活性，激活YAP并促進(jìn)其核轉(zhuǎn)位、增加其轉(zhuǎn)錄活性，促進(jìn)細(xì)胞增殖[15]。這些研究表明，Wnt/JNK與TGF-β信號(hào)通路相互作用，共同參與細(xì)胞纖維化的形成，也為其在眼部纖維化中的作用指出了方向。

3 JNK與TGF-β、非經(jīng)典Wnt信號(hào)在眼部纖維化中的作用

3.1 角膜損傷修復(fù)

3.1.1 角膜基質(zhì)的修復(fù)：創(chuàng)傷、手術(shù)、感染等損傷刺激激活多種細(xì)胞炎癥因子并誘導(dǎo)角膜基質(zhì)細(xì)胞EMT及纖維化的發(fā)生。瞬時(shí)受體電位(TRPA1)通過(guò)TGF-β1影響堿燒傷后角膜炎的炎性反應(yīng)和瘢痕修復(fù)。在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，TRPA1是MAPK信號(hào)通路被完全激活的必要條件。阻斷TRPA1的激活伴TGF-β1、白細(xì)胞介素-6(IL-6)和α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)的表達(dá)下調(diào)及JNK等MAPK蛋白激活的阻斷，從而抑制角膜嚴(yán)重、持續(xù)的炎癥和纖維化反應(yīng)[16]。Shi等[17]在大鼠角膜穿通傷模型中發(fā)現(xiàn)，JNK是調(diào)節(jié)成纖維細(xì)胞內(nèi)TGF-β1介導(dǎo)的結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)大量分泌的關(guān)鍵蛋白。結(jié)膜下注射SP600125抑制JNK可以有效抑制TGF-β1誘導(dǎo)的CTGF表達(dá)及成纖維細(xì)胞的增殖和細(xì)胞內(nèi)FN、ColI的過(guò)度表達(dá)，從而阻斷肌成纖維細(xì)胞的過(guò)度增殖和角膜瘢痕的形成。Jeon等[18]在貓角膜纖維母細(xì)胞中觀察到過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-γ(PPARγ)可以阻斷TGF-β1誘導(dǎo)的CTGF水平升高，結(jié)合前人研究推測(cè)PPARγ配體可通過(guò)抑制JNK的激活阻斷CTGF的上調(diào)或減少CTGF受體如低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白-1(LRP1)、甘露糖6-磷酸/胰島素樣生長(zhǎng)因子-2受體(M6P/IGF-2-R)的合成，從而降低細(xì)胞對(duì)CTGF的敏感性。這些研究表明，TGF-β和JNK共同參與了角膜基質(zhì)的瘢痕修復(fù)，抑制JNK或許可以抑制TGF-β對(duì)角膜纖維化的影響。然而，JNK抑制劑在角膜瘢痕的治療中研究仍較少，未來(lái)仍需要進(jìn)一步探索研究。

3.1.2 角膜上皮的修復(fù)：角膜上皮損傷后，多種炎癥因子刺激一部分上皮細(xì)胞發(fā)生凋亡反應(yīng)，另一部分則轉(zhuǎn)分化為成纖維細(xì)胞，增殖并遷移到傷口部位參與損傷修復(fù)[19-20]。在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，受損的角膜上皮細(xì)胞中，Wnt7a與Fzd9/10受體結(jié)合，通過(guò)Dvl2激活RacG12，激活c-Jun和AP-1，上調(diào)MMP12的表達(dá)，從而促進(jìn)角膜上皮的增殖、遷移，促進(jìn)角膜上皮的愈合。Saika等[21]則表明，TGF-β信號(hào)異常時(shí)，JNK信號(hào)通路的激活會(huì)抑制角膜上皮細(xì)胞的遷移、增殖，從而導(dǎo)致角膜愈合的延遲。在該實(shí)驗(yàn)中，敲除了Ⅱ型TGF-β受體(TBR-Ⅱ)的Tbr2ce△/ce△小鼠在創(chuàng)傷愈合早期，細(xì)胞內(nèi)的JNK信號(hào)通路被激活，ATF-2與AP-1結(jié)合細(xì)胞周期停滯于G1/S期，細(xì)胞增殖被抑制。抑制JNK可以抑制ATF-2的磷酸化，解除細(xì)胞周期的阻滯，這與Lyu等[20]的研究結(jié)果似乎相反，故推測(cè)出現(xiàn)上述兩個(gè)截然相反的結(jié)果原因如下：①與Saika等不同，Lyu等[20]所選取的實(shí)驗(yàn)對(duì)象為去除內(nèi)皮層的人類供體的角鞏膜緣供給的原代人類角膜上皮細(xì)胞(HCEC)，Wnt7a/JNK在活體實(shí)驗(yàn)中如何發(fā)揮作用仍有待進(jìn)一步研究；同時(shí)，在不同組織、器官中通過(guò)不同Wnt配體或受體激活的JNK對(duì)細(xì)胞的遷移影響不同，Wnt5a、Wnt5b通過(guò)激活JNK上調(diào)MMP2、MMP9的表達(dá)，促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞COLO 205遷移[22]，Wnt11/Fzd7激活JNK促進(jìn)HCT-116細(xì)胞遷移[23]，而Wnt7a/Fzd9通過(guò)激活JNK通路抑制非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)[24]，Wnt7a/JNK如何影響活體角膜上皮的損傷修復(fù)仍需進(jìn)一步研究。②在角膜傷口愈合過(guò)程中TGF-β/Smad信號(hào)與MAPK信號(hào)通路常常共同作用，促進(jìn)創(chuàng)傷愈合，Saika等[21]設(shè)計(jì)的動(dòng)物模型中阻斷了TGF-β信號(hào)通路，導(dǎo)致異常MAPK信號(hào)通路的激活，創(chuàng)傷愈合延遲。多種上游因子都可能觸發(fā)JNK的激活，而Wnt蛋白是否在其中發(fā)揮作用，Wnt/JNK信號(hào)通路如何發(fā)揮作尚不明確。③角膜愈合是一個(gè)動(dòng)態(tài)過(guò)程，不同信號(hào)通路此消彼長(zhǎng)，多種通路協(xié)同作用共同完成受損組織的修復(fù)愈合。故而對(duì)JNK信號(hào)通路與Wnt、TGF-β間的相互作用機(jī)制的進(jìn)一步探索研究要聯(lián)系整體環(huán)境。盡管如此，JNK與TGF-β、Wnt信號(hào)通路在角膜上皮修復(fù)中的共同作用不可忽視，值得我們進(jìn)一步探索。

3.2 青光眼中的纖維化 小梁網(wǎng)(TM)是房水流出途徑的主要組成部分，TM纖維化可以導(dǎo)致房水流出阻力增加，眼壓升高，促使青光眼的發(fā)生。Takahashi等[25]通過(guò)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，ECM-JNK-paxillin通路誘導(dǎo)細(xì)胞EMT發(fā)生，促進(jìn)大量FN的表達(dá)，導(dǎo)致TM纖維化。使用SP600125抑制TM內(nèi)ECM-JNK-paxillin通路，降低TM細(xì)胞對(duì)TGF-β2的敏感性，可有效抑制TM細(xì)胞中FN的表達(dá)及細(xì)胞EMT改變。傳統(tǒng)的青光眼手術(shù)將房水通過(guò)人工引流途徑排入結(jié)膜下從而降低眼壓。TGF-β1通過(guò)非Smad依賴途徑如，p38MAPK、JNK、ERK和PI3K/Akt通路上調(diào)miRNAs143和145的表達(dá)，誘導(dǎo)細(xì)胞EMT及結(jié)膜下纖維化。SP600125可以抑制人Tenon囊成纖維細(xì)胞(HTF)內(nèi)TGF-β1對(duì)miRNAs143和145的誘導(dǎo)，抑制青光眼術(shù)后HTF的增殖及ECM收縮，抑制術(shù)后纖維化的發(fā)生[26]。由此可見(jiàn)，青光眼中的纖維化反應(yīng)存在JNK和TGF-β的相互作用，JNK抑制劑或許可以成為延緩疾病發(fā)展、預(yù)防術(shù)后纖維化的藥物之一。

3.3 白內(nèi)障 白內(nèi)障是世界性的致盲性疾病之一。JNK的激活可影響晶狀體上皮細(xì)胞(LECs)的增殖[27]、遷移[28]、凋亡[29]和EMT[30]發(fā)生。抑制JNK活性，胚眼發(fā)育伴有明顯的小眼癥和晶狀體缺損[28]。在TGF-β誘導(dǎo)的白內(nèi)障中，非經(jīng)典Wnt蛋白Wnt5a、受體Fzd2等有所上調(diào)[31]，提示非經(jīng)典Wnt信號(hào)通路與TGF-β在促晶狀體纖維化中存在相關(guān)性。有研究表明，穿心蓮內(nèi)酯(Andrographolide)，異名穿心蓮乙素,分子式C20H30O5,可通過(guò)抑制LECs中pJNK的表達(dá)，抑制TGF-β2和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)誘導(dǎo)的α-SMA、FN、ColⅣ和VM的表達(dá)，從而抑制LECs EMT[30]。但只能側(cè)面提示pJNK在TGF-β和bFGF誘導(dǎo)的白內(nèi)障中發(fā)揮了一定的作用，JNK與TGF-β、Wnt信號(hào)通路如何在LECs纖維化中發(fā)揮作用，Wnt/JNK信號(hào)通路是否參與了TGF-β誘導(dǎo)的白內(nèi)障的形成有待深入研究。在糖尿病性白內(nèi)障中，TGF-β和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)的水平增加，同時(shí)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激使ROS、pERK1/2和pJNK1/2的水平上調(diào)，晶狀體細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡的平衡被破壞，兩者共同促進(jìn)了白內(nèi)障的發(fā)生[32-33]。抑制醛糖還原酶(AR)可以顯著抑制TGF-β和FGF誘導(dǎo)下LECs的增殖以及α-SMA、β-晶體蛋白(β-crystalin)和ICAM1的表達(dá)，同時(shí)也阻止了bFGF誘導(dǎo)的ERK1/2、JNK和NF-κB的激活[34]。這表明TGF-β/FGF參與下AR誘導(dǎo)的白內(nèi)障形成中存在JNK的激活，抑制JNK或許能延緩糖尿病性白內(nèi)障的發(fā)展。

3.4 視網(wǎng)膜纖維化疾病 年齡相關(guān)性黃斑變性(AMD)的終末期、增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變(PDR)、增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(PVR)等都伴隨著視覺(jué)細(xì)胞的損害及視網(wǎng)膜纖維化的發(fā)生，對(duì)患者視力造成嚴(yán)重的、不可逆的損傷。網(wǎng)膜前膜(ERM)和(或)視網(wǎng)膜下纖維膜(SRM)的形成是上述疾病的特征性表現(xiàn)，其關(guān)鍵病理機(jī)制是視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細(xì)胞EMT的發(fā)生[35]。L-肉堿(LC)(β-羥基-γ-N-三甲基丁酸銨)通過(guò)阻斷Erk1/2和JNK信號(hào)通路，上調(diào)PPARγ的表達(dá)，抑制TGF-β1誘導(dǎo)的FN、α-SMA的表達(dá)，促進(jìn)ECadherin的表達(dá)，從而抑制RPE的EMT[36]。維甲酸受體-γ(RAR-γ)激動(dòng)劑R667可以抑制TGF-β2誘導(dǎo)的Smad2和Akt的激活及樁蛋白paxillin、ERK、p38和JNK磷酸化，抑制α-SMA、FN的表達(dá)，抑制RPE細(xì)胞EMT，抑制Col的表達(dá)，抑制SRM的形成[37]。TGF家族在RPE細(xì)胞EMT中發(fā)揮了至關(guān)重要的作用[38]，這些研究從側(cè)面提示在TGF-β誘導(dǎo)的RPE細(xì)胞的EMT及纖維化過(guò)程中存在JNK信號(hào)通路的激活，同時(shí)也直接表明抑制JNK可有效抑制纖維化的發(fā)生，為視網(wǎng)膜纖維化疾病的治療提供思路和實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)。

4 JNK信號(hào)通路與其他促纖維化因子在纖維化眼病中的作用

4.1 JNK信號(hào)通路與肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF) 在白內(nèi)障中，HGF激活JNK/SAPK(p54和p46)，促進(jìn)ATF-2和c-Jun的活化，上調(diào)細(xì)胞周期蛋白-1(Cyclin D1)的表達(dá)，刺激LECs進(jìn)入S和G2/M周期，促進(jìn)LECs的增殖。JNK抑制劑SP600125可顯著抑制Cyclin D1的表達(dá)，抑制LECs的增殖[39]。

4.2 JNK信號(hào)通路與成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF) 在FGF作用下，LECs內(nèi)Fzd、Dvl、Rho GTP酶、pJNK的表達(dá)增高，細(xì)胞骨架的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，細(xì)胞的遷移力增強(qiáng)[40]。白花丹素(PLB)可以顯著抑制FGF-2(10 ng/ml)誘導(dǎo)的JNK的磷酸化，抑制ARPE-19細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，抑制MMP-2/9、Col Ⅰ、Col Ⅳ和Col Ⅵ的表達(dá)[41]。

4.3 JNK信號(hào)通路與表皮生長(zhǎng)因子(EGF) EGF與JNK共同作用誘導(dǎo)的ARPE-19細(xì)胞增殖和遷移。Survivin抑制劑YM155通過(guò)上調(diào)pJNK，誘導(dǎo)ARPE-19細(xì)胞內(nèi)吞表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR),從而減弱了EGF誘導(dǎo)的ARPE-19細(xì)胞的增殖和遷移能力[42]。

4.4 JNK信號(hào)通路與血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF) PDGF可以誘導(dǎo)PVR中RPE細(xì)胞的增殖和遷移效應(yīng)。藏紅花(Crocin)中富含的抗氧化劑藏紅花酸類胡蘿卜素(簡(jiǎn)稱藏紅花酸)通過(guò)誘導(dǎo)PI3K/Akt和ERK、p38、JNK的激活，誘導(dǎo)ARPE-19細(xì)胞的凋亡，同時(shí)抑制血小板衍生生長(zhǎng)因子受體β(PDGFRβ)的表達(dá)，抑制PDGF-Rβ誘導(dǎo)的ARPE-19細(xì)胞增殖和遷移[43]。這些研究都表明，JNK信號(hào)通路與多種促纖維因子共同作用直接或間接參與纖維化眼病的發(fā)生，為JNK信號(hào)通路在防治眼部纖維化疾病中的藥理作用提供理論支持和研究思路。

5 結(jié) 語(yǔ)

在眼部纖維化疾病中，手術(shù)、外傷、炎癥等刺激激活存儲(chǔ)在房水和玻璃體中的細(xì)胞炎癥因子，激活多種信號(hào)通路，促進(jìn)纖維化眼病的發(fā)生。JNK蛋白既能被非經(jīng)典Wnt蛋白激活，也能在TGF-β刺激下與多種細(xì)胞因子、炎癥因子共同參與組織損傷修復(fù)。研究表明，抑制JNK可抑制細(xì)胞EMT，阻斷腫瘤及纖維化疾病的發(fā)生。SP600125、AS602801和JNK-IN-8具有良好的抗癌前景且研究廣泛；肽類抑制劑JNKi1通過(guò)干擾JIP1與MAPK的結(jié)合抑制JNK活性已被成功地用于小鼠腫瘤模型的治療研究；異喹諾酮類衍生物AV-7、新型抑制肽PYC98、PYC71N、金剛烷基氮喹諾酮可選擇性抑制JNK1的活性，被用于腫瘤治療的研究；6-苯胺基吲唑類化合物、20-苯胺基-4、40-聯(lián)吡啶類化合物、異惡唑類化合物、XG10291和吡啶酮類化合物對(duì)JNK3有選擇性抑制作用，對(duì)神經(jīng)退行性疾病的治療有重要意義[44]。多種中醫(yī)藥物通過(guò)抑制JNK抑制細(xì)胞凋亡達(dá)到治療目的[45]。藏紅花素是一種名貴中藥材，具有抗氧化、抗炎的作用[46]。藏紅花可通過(guò)下調(diào)視網(wǎng)膜中p38、JNK、NF-κB和c-Jun的磷酸化水平,阻斷Caspase 3蛋白的表達(dá)，抑制視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGCs)的凋亡，減輕神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突損傷[47-48]。然而對(duì)JNK抑制劑的臨床應(yīng)用仍缺乏更多的證據(jù)。因此，了解JNK信號(hào)通路在眼病纖維化疾病的發(fā)病機(jī)制中的作用，或許可以為纖維化眼病的藥物治療打開(kāi)新思路。