孔娣，曹正華，荊晶，吳旭干，姜曉東*

（1.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部淡水種質(zhì)資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海海洋大學(xué)，上海 201306；2.浙江澳凌水產(chǎn)種業(yè)科技有限公司，浙江 湖州 313106；3.上海新弘生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司，上海 202150）

中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）（以下簡(jiǎn)稱河蟹）為方蟹科（Grapsidae），絨螯蟹屬（Eriocheir），是重要的經(jīng)濟(jì)甲殼品種之一，主要分布在我國(guó)東部自遼寧至福建各省的通海水域中，是傳統(tǒng)的水產(chǎn)養(yǎng)殖珍品，2019 年我國(guó)河蟹的養(yǎng)殖總產(chǎn)量達(dá)到77.87 萬(wàn)t[1-2]。隨著漁業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整，河蟹養(yǎng)殖逐漸成為很多地區(qū)實(shí)施精準(zhǔn)扶貧、拉動(dòng)經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)、促進(jìn)農(nóng)民增收的重要手段[3]。放養(yǎng)密度是影響甲殼類動(dòng)物生長(zhǎng)、存活、產(chǎn)量的主要因素，通過(guò)影響攝食，提高種間爭(zhēng)斗概率，進(jìn)而影響河蟹的生長(zhǎng)發(fā)育、營(yíng)養(yǎng)積累和免疫能力[4]。由于水產(chǎn)養(yǎng)殖的可使用土地資源有限，目前大部分養(yǎng)殖區(qū)域主要開(kāi)展河蟹高密度養(yǎng)殖。雖然高密度養(yǎng)殖，可有效提高河蟹的產(chǎn)量，但密度過(guò)高，會(huì)對(duì)養(yǎng)殖物種的養(yǎng)殖性能及經(jīng)濟(jì)效益產(chǎn)生負(fù)面影響[5-6]。因此，確定養(yǎng)殖最佳密度，對(duì)于提高養(yǎng)殖河蟹的品質(zhì)、產(chǎn)量及收益十分重要。

河蟹雌雄單性化養(yǎng)殖，有利于河蟹養(yǎng)殖管理和捕撈上市，如根據(jù)河蟹雌雄不同的營(yíng)養(yǎng)需求，研發(fā)和投喂相應(yīng)的飼料，根據(jù)雌雄不同的性腺發(fā)育情況分別捕撈上市等[7]。研究[8]表明，在池塘養(yǎng)殖條件下，雌雄河蟹在生殖蛻殼時(shí)間和性腺發(fā)育速度方面差異顯著。長(zhǎng)江流域雌蟹上市時(shí)間通常為10 月中下旬—12月，雄蟹上市時(shí)間為11 月中旬—12 月，略晚于雌蟹。此外，河蟹雌雄個(gè)體生殖蛻殼時(shí)間不同，蛻殼后的軟殼蟹通常會(huì)受到硬殼蟹的攻擊，導(dǎo)致成活率降低[9]。雖然消費(fèi)者對(duì)性腺指數(shù)和特征風(fēng)味較高的雌性河蟹的偏好高于雄性河蟹，但雄性河蟹的生長(zhǎng)速度快于雌性，收獲時(shí)雄性河蟹的規(guī)格也更大[10]。

目前已有研究評(píng)估了放養(yǎng)密度對(duì)河蟹養(yǎng)殖性能的影響。汪留全等[11]和董江水等[12]的研究結(jié)果表明，河蟹養(yǎng)殖過(guò)程中，蟹種每m2最佳放養(yǎng)量分別為1.0~1.2 和0.6 只，但這些研究均基于雌雄混養(yǎng)條件下得到的最佳蟹種放養(yǎng)密度，有關(guān)純雄養(yǎng)殖條件下放養(yǎng)密度對(duì)河蟹養(yǎng)殖性能的影響尚無(wú)報(bào)道?，F(xiàn)于2021 年2—11 月份開(kāi)展了不同密度對(duì)純雄河蟹生產(chǎn)性能的影響試驗(yàn)，擬為河蟹純雄單性化養(yǎng)殖的最適養(yǎng)殖密度提供理論依據(jù)，為養(yǎng)殖模式優(yōu)化提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)用蟹

試驗(yàn)地位于上海海洋大學(xué)崇明基地，選擇6 口規(guī)格相同的土池（15.0 m×10.0 m×1.5 m）。試驗(yàn)用扣蟹取自該基地扣蟹試驗(yàn)塘，初始體質(zhì)量為（8.45±0.44）g。設(shè)置低密度組（密度Ⅰ∶2 只/m2）和高密度組（密度Ⅱ∶3 只/m2），每組設(shè)3 個(gè)重復(fù)?？坌吩?0 mg/L 聚維酮碘溶液中浸泡消毒0.5 h 后，放養(yǎng)于試驗(yàn)池塘內(nèi)。

1.2 養(yǎng)殖管理

扣蟹放養(yǎng)前，每口池塘用漂白粉（南通市高陽(yáng)漂白粉有限公司生產(chǎn)）10 kg 對(duì)池塘消毒。10~15 d 后種植伊樂(lè)藻，株距2 m，行距2 m，并根據(jù)水草的生長(zhǎng)情況與外界氣候變化，合理控制池塘水位。夏季高溫期水位保持為1.0~1.2 m，養(yǎng)殖初期，主要種植伊樂(lè)藻，后期再搭配種植水花生，及時(shí)割除過(guò)多的伊樂(lè)藻，防止河蟹夜間和陰雨天缺氧。為了調(diào)節(jié)水質(zhì)及控制野雜魚，分別于3 和5 月份，在每口池塘中放養(yǎng)5 條白鰱和5 條鱖種。5—6 月份，每口池塘投放10 kg 左右螺螄作為補(bǔ)充餌料，同時(shí)起到清除殘餌和凈化水質(zhì)的作用。當(dāng)池塘水溫升至12 ℃后，每天17：00 左右投喂配合飼料（浙江澳華飼料公司生產(chǎn)），投喂量為蟹體質(zhì)量的3%~5%。每口成蟹試驗(yàn)塘設(shè)置1 個(gè)食臺(tái)，用于觀察當(dāng)天其吃食情況，根據(jù)水溫和殘餌及時(shí)調(diào)整投喂量。7 月初開(kāi)始，晚上給每口試驗(yàn)塘開(kāi)啟底部微孔增氧。定期檢測(cè)每口成蟹塘的氨氮（＜0.4 mg/L）、溶解氧（＞3 mg/L）、pH 值（7.0～9.0）以及亞硝酸鹽氮（＜0.15 mg/L）等水質(zhì)指標(biāo)。根據(jù)池塘水質(zhì)狀況，每半個(gè)月更換掉試驗(yàn)池塘30%~50%的水體，保持試驗(yàn)塘水質(zhì)良好。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 生長(zhǎng)性能

自5 月15 日起，每隔60 d 左右，每口池塘用地籠網(wǎng)隨機(jī)抓捕雄體15 只，擦干河蟹體表水分后，用電子天平精確稱量（精確到0.01 g），據(jù)此計(jì)算各采樣時(shí)間點(diǎn)河蟹的質(zhì)量增加率（WGR）和特定增長(zhǎng)率（SGR），計(jì)算公式如下：

式中：t1——前一次采樣時(shí)間，d；t2——后一次采樣時(shí)間，d；W1——日齡t1時(shí)成蟹的平均質(zhì)量，g；W2——日齡t2時(shí)成蟹的平均質(zhì)量，g。

1.3.2 生殖蛻殼和性腺發(fā)育

自8 月10 日起，每隔20 d，每個(gè)池塘隨機(jī)采樣30 只個(gè)體，統(tǒng)計(jì)各池塘內(nèi)河蟹完成生殖蛻殼的個(gè)體比例，根據(jù)王武等[13]的方法，判斷采樣個(gè)體是否已經(jīng)完成生殖蛻殼：雄體主要依據(jù)交接器是否突出和硬化、大螯絨毛覆蓋面積和長(zhǎng)度、殼是否為青色等來(lái)判斷，據(jù)此計(jì)算生殖蛻殼率（%）。

為了比較各組成蟹性腺發(fā)育速度，當(dāng)觀察到完成生殖蛻殼的比例達(dá)到80%后，于10 月5 日起，每隔20 d 從各池塘內(nèi)隨機(jī)采集3 只蟹，擦去體表水分后，精確稱量體質(zhì)量（精確到0.01 g），隨后解剖取出全部肝胰腺和性腺并稱量（精確到0.01 g），據(jù)此計(jì)算肝胰腺指數(shù)（HSI）和性腺指數(shù)（GSI）。計(jì)算公式如下：

式中：WH——肝胰腺質(zhì)量，g；WG——性腺質(zhì)量，g；W——對(duì)應(yīng)的河蟹體質(zhì)量，g。

1.3.3 平均體質(zhì)量、成活率、產(chǎn)量和飼料系數(shù)

11 月20 日，試驗(yàn)結(jié)束后，抽干池塘水，分別統(tǒng)計(jì)各池塘試驗(yàn)蟹雌雄個(gè)體存活數(shù)量。對(duì)捕獲的試驗(yàn)蟹逐一進(jìn)行稱量，計(jì)算每口池塘雌雄試驗(yàn)蟹的平均規(guī)格。根據(jù)每個(gè)池塘試驗(yàn)蟹的初始放養(yǎng)量及最終捕獲量，計(jì)算最終存活率；根據(jù)蟹的總質(zhì)量和實(shí)際水體面積計(jì)算單位面積產(chǎn)量；并根據(jù)餌料投喂量、試驗(yàn)蟹初質(zhì)量及試驗(yàn)蟹終質(zhì)量計(jì)算飼料系數(shù)（FCR），飼料系數(shù)計(jì)算公式如下：

式中：WF——消耗的飼料總質(zhì)量，g；WT——最終養(yǎng)成成蟹總質(zhì)量，g；W0——起始放養(yǎng)扣蟹總質(zhì)量，g。

1.3.4 規(guī)格分布

對(duì)最終捕獲的所有成蟹按體質(zhì)量進(jìn)行規(guī)格分級(jí)：<125.0,125.0~149.9，150.0~174.9，175.0~199.9，200.0~224.9，225.0~249.9 和≥250.0g，并分別統(tǒng)計(jì)各種規(guī)格所占比例。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 26.0 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果均以（平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤）表示。采用Levene 法進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，當(dāng)不滿足齊性方差時(shí)，對(duì)百分比數(shù)據(jù)進(jìn)行反正弦或平方根處理。采用雙尾t-test 分析不同放養(yǎng)密度下各指標(biāo)差異。當(dāng)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換后仍不滿足齊性方差時(shí)，采用Mann-Whiteny U-test 進(jìn)行非參數(shù)檢驗(yàn)，取P<0.05 為差異顯著。在GraphPad Prism 9 軟件上繪制相關(guān)圖表。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長(zhǎng)性能

不同放養(yǎng)密度對(duì)雄蟹在成蟹階段平均體質(zhì)量的影響見(jiàn)圖1。由圖1 可見(jiàn)，密度Ⅰ組中雄體在成蟹養(yǎng)殖階段的平均體質(zhì)量一直大于密度Ⅱ組，其中9 月份時(shí)，2 個(gè)密度組的平均體質(zhì)量差異顯著（P＜0.05）。

圖1 放養(yǎng)密度對(duì)雄蟹在成蟹階段平均體質(zhì)量的影響

不同放養(yǎng)密度對(duì)雄蟹在成蟹階段WGR 和SGR的影響見(jiàn)圖2（a）（b）。各組試驗(yàn)蟹每個(gè)月的WGR 在成蟹養(yǎng)殖階段呈降低趨勢(shì)，其中5—7 月份和9—11月份期間，密度Ⅱ組WGR 大于密度Ⅰ組。在3—9 月份生長(zhǎng)采樣數(shù)據(jù)中，不同密度組的SGR 差異情況與WGR 趨勢(shì)一致，但在9—11 月份的生長(zhǎng)采樣數(shù)據(jù)中，2 個(gè)指標(biāo)結(jié)果相反。各組試驗(yàn)蟹每個(gè)月的WGR在成蟹養(yǎng)殖階段呈降低趨勢(shì)，其中5—7 月份和9—11 月份期間，密度Ⅱ組WGR 大于密度Ⅰ組。

圖2 放養(yǎng)密度對(duì)雄蟹在成蟹階段WGR 和SGR 的影響

2.2 性腺發(fā)育

不同放養(yǎng)密度對(duì)雄蟹在成蟹階段生殖蛻殼率的影響見(jiàn)圖3。試驗(yàn)期間，不同密度組河蟹的生殖蛻殼率均呈上升趨勢(shì)，其中密度Ⅱ組個(gè)體，在8 月10日、8 月30 日及9 月20 日3 次采樣時(shí)間點(diǎn)的生殖蛻殼率，均低于密度Ⅰ組，但各組之間均無(wú)顯著差異。

圖3 放養(yǎng)密度對(duì)雄蟹在成蟹階段生殖蛻殼率的影響

不同放養(yǎng)密度對(duì)雄蟹在成蟹階段GSI 和HSI 的影響見(jiàn)圖4（a）（b）。隨著時(shí)間的增加，2 組GSI 均呈上升趨勢(shì)，且10—11 月份上升幅度較大。就組間差異而言，密度Ⅰ組雄蟹在3 個(gè)采樣時(shí)間點(diǎn)的GSI 均高于密度Ⅱ組個(gè)體。不同采樣時(shí)間點(diǎn)的HSI 變化不明顯，并且組間差異也不明顯。

圖4 放養(yǎng)密度對(duì)雄蟹在成蟹階段GSI 和HSI 的影響

2.3 成活率、平均體質(zhì)量、產(chǎn)量和餌料系數(shù)

不同養(yǎng)殖密度對(duì)成蟹階段養(yǎng)殖效果的影響見(jiàn)表1。由表1 可見(jiàn)，密度Ⅰ組最終平均體質(zhì)量及最終成活率均高于密度Ⅱ組，但組之間差異不顯著。與之相反，密度Ⅰ組最終產(chǎn)量及餌料系數(shù)均低于密度Ⅱ組，兩組之間同樣差異不顯著。

表1 放養(yǎng)密度對(duì)雄蟹在成蟹階段的最終平均規(guī)格、成活率、產(chǎn)量和餌料系數(shù)的影響

放養(yǎng)密度對(duì)雄蟹最終規(guī)格分布的影響見(jiàn)圖5。由圖5 可見(jiàn)，密度Ⅰ組成蟹規(guī)格為150.0~224.9 g，其中175.0~199.9 和200.0~224.9 g 規(guī)格，密度Ⅰ組所占比例顯著高于密度Ⅱ組（P<0.05）；密度Ⅱ組成蟹規(guī)格為125.0~149.9 和150.0~174.9 g，其中125.0~149.9 g 規(guī)格密度Ⅰ組所占比例顯著低于密度Ⅱ組（P<0.05）。

圖5 放養(yǎng)密度對(duì)雄蟹最終規(guī)格分布的影響

3 討論

3.1 生長(zhǎng)性能差異

放養(yǎng)密度是影響水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)性能最重要的因素之一[14]。本試驗(yàn)中，蟹種高放養(yǎng)密度對(duì)河蟹的生長(zhǎng)性能產(chǎn)生了負(fù)面影響，這在之前的稻蟹共生養(yǎng)殖模式[15]及雌雄混養(yǎng)池塘養(yǎng)殖模式[11-12]中也有類似的報(bào)道。根據(jù)之前關(guān)于其他水生物養(yǎng)殖的研究結(jié)果[16]，為了獲取食物、空間及棲息地等有限的生存資源，高密度養(yǎng)殖會(huì)增加養(yǎng)殖對(duì)象之間的爭(zhēng)斗頻率，增加日?；顒?dòng)能量的消耗，降低生長(zhǎng)能量。此外，養(yǎng)殖密度過(guò)高，導(dǎo)致水質(zhì)惡化，也是影響?zhàn)B殖動(dòng)物生長(zhǎng)的重要因素。有研究[17-18]表明，通過(guò)換水、增氧、尾水經(jīng)過(guò)凈化后循環(huán)使用等方式，對(duì)生產(chǎn)系統(tǒng)進(jìn)行良好的管理，可以使水體保持良好的狀態(tài)。而本試驗(yàn)中，通過(guò)定期換水及使用功能性益生菌，合理調(diào)控了水質(zhì)，河蟹生長(zhǎng)性能還是下降，可能不是水質(zhì)問(wèn)題[19]。

3.2 性腺發(fā)育差異

通過(guò)對(duì)河蟹生殖蛻殼率和GSI 的觀察，可以直接了解河蟹的性腺發(fā)育狀況[20]。有研究表明，高密度養(yǎng)殖會(huì)對(duì)甲殼動(dòng)物的性腺發(fā)育或繁殖性能產(chǎn)生負(fù)面影響。戴習(xí)林等[21]發(fā)現(xiàn)，高密度養(yǎng)殖羅氏沼蝦，其性腺發(fā)育比低密度組晚10 d 左右；Coman 等[22]發(fā)現(xiàn)，較高養(yǎng)殖密度，降低了斑節(jié)對(duì)蝦的孵化率和產(chǎn)卵率。然而，在克氏原螯蝦的一項(xiàng)研究中，養(yǎng)殖密度與卵巢發(fā)育呈正相關(guān)關(guān)系，表現(xiàn)為隨著養(yǎng)殖密度的增加，成熟指數(shù)值從2.33 增加至6.36，產(chǎn)卵率從0%增加至46%[23]。本試驗(yàn)中，蟹種放養(yǎng)密度未對(duì)蟹的性腺發(fā)育產(chǎn)生積極或消極的影響，即生殖蛻殼率和GSI 在不同密度組之間差異較小。雄蟹天生攻擊性強(qiáng)，在純雄池塘養(yǎng)殖條件下，因領(lǐng)地、食物競(jìng)爭(zhēng)等因素，引起養(yǎng)殖中后期成活率較低，間接導(dǎo)致養(yǎng)殖后期密度下降，在該密度下，可能不足以影響河蟹雄體的性腺發(fā)育。

3.3 養(yǎng)殖效果差異

本試驗(yàn)中，隨著1 m2試驗(yàn)蟹放養(yǎng)量從2 增至3只，其最終成活率從42.62%下降至35.71%，同類相食，可能是高密度養(yǎng)殖條件下河蟹死亡的主要原因，并且隨著密度的增加其現(xiàn)象更加嚴(yán)重[24]。實(shí)踐證明，使用合適的庇護(hù)所，可以減少水生生物同類相食現(xiàn)象，從而提高其存活率和單位面積產(chǎn)量[25]。伊樂(lè)藻是河蟹池塘養(yǎng)殖的重要水生植物。由于河蟹養(yǎng)殖池塘水域面積小、養(yǎng)殖密度高、自凈能力低等特殊性，在成蟹養(yǎng)殖池塘中種植伊樂(lè)藻可營(yíng)造較好的生態(tài)環(huán)境，在河蟹棲息、隱蔽、蛻殼等方面發(fā)揮重要作用[26]。高密度養(yǎng)殖的池塘，伊樂(lè)藻覆蓋度較低，因?yàn)樵陴B(yǎng)殖后期，其更易受到河蟹的破壞，這可能是影響河蟹成活率的因素之一。因此，針對(duì)不同的養(yǎng)殖模式，還需進(jìn)一步優(yōu)化水生植物的種類和覆蓋率。本試驗(yàn)中，盡管高密度養(yǎng)殖組河蟹的平均體質(zhì)量和成活率較低，但隨著飼養(yǎng)密度的增加，雄蟹成體的單位面積產(chǎn)量明顯增加。因此，高密度養(yǎng)殖可有效提高河蟹產(chǎn)量。

4 結(jié)語(yǔ)

河蟹在室外純雄養(yǎng)殖條件下，表現(xiàn)出一定的密度依賴性。隨著養(yǎng)殖密度增加，河蟹的生長(zhǎng)性能和成活率明顯下降。但本試驗(yàn)中，不同養(yǎng)殖密度未對(duì)雄蟹的性腺發(fā)育產(chǎn)生顯著的影響。建議養(yǎng)殖戶綜合考慮最終平均規(guī)格及產(chǎn)量，合理選擇純雄養(yǎng)殖密度。