周 韻

廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)有限公司良圻原種豬場,廣西 南寧 530317

0 引言

對動物生產(chǎn)和運(yùn)輸設(shè)備以及動物飼養(yǎng)場所清潔和消毒是確保畜牧業(yè)生產(chǎn)中動物健康的重要步驟[1]。然而,受粗糙的表面、高有機(jī)物污染、低溫和其他一些相關(guān)因素的限制,動物房舍和動物運(yùn)輸設(shè)施的消毒很難實(shí)現(xiàn),只有同時進(jìn)行清潔和消毒才能充分減少相關(guān)表面上的細(xì)菌數(shù)量和活性[2]。目前,生豬販賣商沒有要求家畜運(yùn)輸車輛在重新使用之前清潔(去除有機(jī)物)和消毒(使用抗菌溶液),這就可能造成病菌的交叉污染[3]。對運(yùn)輸車輛進(jìn)行機(jī)械和清水洗滌并延長干燥時間24～48 h能有效減少微生物數(shù)量和種類[4]。本研究針對幾種不同泡沫清潔劑對畜禽運(yùn)輸設(shè)備的清潔殺菌效果進(jìn)行了對比分析,為泡沫清洗劑的選擇提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

A泡沫清洗劑、B泡沫清洗劑、C泡沫清洗劑、D泡沫清洗劑、E泡沫清洗劑、F泡沫清洗劑、G泡沫清洗劑、H泡沫清洗劑、I泡沫清洗劑、J泡沫清洗劑、K泡沫清洗劑、L泡沫清洗劑、M泡沫清洗劑、N泡沫清洗劑、O泡沫清洗劑、P泡沫清洗劑、Q泡沫清洗劑。

1.2 試驗(yàn)步驟

①在未清洗的家豬運(yùn)輸車輛車身前、中、后用棉簽進(jìn)行采樣接種培養(yǎng)細(xì)菌。具體步驟為:首先,采樣員需要穿戴好防護(hù)服,配戴一次性乳膠手套;然后用無菌棉簽蘸取中和劑后,擦拭5 cm×5 cm的表面(車身前、中、后3個點(diǎn))取樣,放入無菌樣品管中,密封帶回實(shí)驗(yàn)室用滴板計(jì)數(shù)法檢測細(xì)菌含量。注意不同實(shí)驗(yàn)組采樣點(diǎn)要相對固定。②將清潔劑發(fā)泡分別噴灑到12輛車(每種清洗劑分3組),20 min清洗后對車身的前、中、后用棉簽采樣接種培養(yǎng)細(xì)菌以及進(jìn)行ATP采樣讀數(shù)。③將清潔劑發(fā)泡噴灑到車身,觀察并計(jì)算泡沫掛壁時間,劃定一個固定區(qū)域,分別在反應(yīng)5 min、10 min、15 min、20 min時拍照,觀察并記錄泡沫的覆蓋面積(如果20min內(nèi)泡沫完全消失,則記錄好泡沫掛壁的確切時間,無須等到20 min)。④對每輛車清洗后的光潔度進(jìn)行評分(滿分10分)。

1.3 試驗(yàn)方法

細(xì)菌含量的檢測方法:將棉簽用5 mL無菌生理鹽水浸泡,渦旋振蕩,洗脫細(xì)菌作為原液,取100 μL于配制好的胰蛋白大豆?fàn)I養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上,涂布器進(jìn)行涂布均勻后放置在37 ℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);同時對原菌液進(jìn)行倍比稀釋(在高壓好的5 mL離心管中加入4.5 mL無菌生理鹽水,取500 μL原菌液進(jìn)行倍比稀釋),稀釋相應(yīng)梯度以后取20 μL進(jìn)行滴板計(jì)數(shù)。每個稀釋度做兩個平行,最后進(jìn)行菌量(CFU/mL)計(jì)算時取其平均值。

ATP熒光檢測方法(微生物):握住球管從檢測管中取出沾濕了的拭子,涂抹約4 cm×4 cm檢測區(qū)域;將拭子插入檢測管中,握住吸閥,用另一只手捏住球管,從吸閥處折斷;輕擠球管2次,擠出球管內(nèi)試劑,輕搖2～3次,與檢測管內(nèi)涂抹后的拭子進(jìn)行充分混合;將整個檢測管放入熒光儀中,關(guān)閉艙蓋,進(jìn)行測量。

2 結(jié)果與分析

2.1 滅菌效果

通過滴板計(jì)數(shù)法對細(xì)菌含量進(jìn)行統(tǒng)計(jì),并對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和計(jì)算,得到其對數(shù)值;對泡沫清潔劑消毒前后數(shù)據(jù)進(jìn)行了滅菌率的計(jì)算,試驗(yàn)結(jié)果見表1。分析可知,17種泡沫清潔劑殺菌率在10%以上的有5種,分別是B、C、I、P、Q泡沫清潔劑,其中B泡沫清潔劑的殺菌效果最好,滅菌率高達(dá)21.04%,5種泡沫清潔劑滅菌率從高到低依次為B>Q>I>C>P;A、D、E、F、G、H、J、K、L、M、N、O 12種泡沫清潔劑滅菌效果較差,其中M泡沫清潔劑滅菌率最低,為1.60%。從車輛不同部位滅菌率分析,大部分清潔劑對車輛后部的滅菌效果好,其滅菌率高于車輛前部和中部,比如A、C、E、G、H、M、O、P、Q泡沫清潔劑。

表1 滴板計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)17種泡沫清潔劑對車輛不同部位的滅菌率 單位:%

為進(jìn)一步分析泡沫清潔劑殺滅微生物的效果,用熒光照度計(jì)ATP讀數(shù)的方法再次對其滅菌率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和計(jì)算,結(jié)果如表2所示。分析計(jì)算結(jié)果可知,平均微生物殺滅率在70%以上的泡沫清潔劑有6種,分別是A、B、C、I、P、O泡沫清潔劑,其中B泡沫清潔劑的微生物殺滅率最高為78.06%,6種泡沫清潔劑微生物殺滅率從高到低依次為B>Q>I>C>P>A;其余泡沫清潔劑的微生物殺滅率都在70%以下,微生物殺滅效果較差,尤其O泡沫清潔劑效果最差,微生物殺滅率只有59.12%,綜合2種方法計(jì)算結(jié)果可以確定B泡沫清潔劑的微生物殺滅效果最好。

2.2 清洗光潔度

光潔度是泡沫清洗劑一個基本的指標(biāo),只有光潔度達(dá)標(biāo)才是合格的清洗劑。本研究對17種泡沫清洗劑清洗家豬運(yùn)輸車輛后的光潔度進(jìn)行打分比較,計(jì)分統(tǒng)計(jì)如表3。觀察發(fā)現(xiàn)17種泡沫清潔劑評分均在7分以上,說明清洗光潔度均達(dá)標(biāo),B、C、I、Q 4種泡沫清潔劑的打分最高,為9分,清洗光潔度最好;A、H、J、G、K、P 6種泡沫清潔劑評分次之,為8分,清洗光潔度適中;N、O、D、L、M、E、F 7種泡沫清潔劑評分最低,為7分,清洗光潔度較差。

表3 光潔度打分評價(jià)

2.3 泡沫掛壁時間

泡沫掛壁時間越長,堿性泡沫清洗劑與污漬的反應(yīng)會越充分,清洗效果就越好,特別是家畜車輛運(yùn)輸設(shè)備的傾斜面、角落等容易遺漏的地方。本研究對17種泡沫清潔劑在車體上的掛壁時間進(jìn)行了記錄。如表4所示,17種泡沫清潔劑的掛壁時間分為:A、N、O 3種泡沫清潔劑掛壁時間能達(dá)到20 min;B、D、H、I、J 5種泡沫清潔劑掛壁時間能達(dá)到15 min;、G、K、L、M、P、Q 6種泡沫清潔劑掛壁時間能達(dá)到10 min;C、E、F 3種泡沫清潔劑掛壁時間只能達(dá)到5 min。 A、N、O泡沫清潔劑掛壁時間最長。

表4 泡沫掛壁時間統(tǒng)計(jì)

3 結(jié)論與討論

根據(jù)上述結(jié)果分析可知,A、N、O泡沫清潔劑掛壁時間最長,但滅菌率和光潔度均不理想。從滅菌效果分析,滅菌率從高到低依次為B>Q>I>C>P,但P、C泡沫清潔劑的掛壁時間一般。B、Q泡沫清潔劑的掛壁時間、滅菌率、光潔度等指標(biāo)均是最優(yōu)水平。其他產(chǎn)品的掛壁時間、滅菌率、光潔度都一般。

家畜交叉接觸的運(yùn)輸車輛是造成動物感染疾病的重要方式,對運(yùn)輸設(shè)備徹底清潔和消毒對防疫殺菌至關(guān)重要,即使是數(shù)量較少的病菌,都有可能造成豬群疾病的發(fā)生,對家豬健康生長造成較大威脅。比如豬的呼吸道僅接觸不到1萬個藍(lán)耳病病毒即造成疾病感染,其他特定的感染途徑的致病率更高;豬群在密閉的運(yùn)輸車輛上1 h就可能會感染沙門氏菌。本研究發(fā)現(xiàn)B、Q 2種泡沫清潔劑的殺菌率較高,在運(yùn)輸車輛清洗時可以重點(diǎn)推廣使用,進(jìn)而有效降低因運(yùn)輸而造成家畜患病的可能性。

表面光潔度又叫表面粗糙度,會影響車輛的性能及其維護(hù)成本,如影響車輛零件之間的摩擦、潤滑劑的保持性、關(guān)鍵部位的導(dǎo)電性和導(dǎo)熱性等。本研究對泡沫清潔劑清洗車輛后的表面光潔度進(jìn)行了評價(jià)分析,發(fā)現(xiàn)B、C、I、Q 4種泡沫清潔劑清洗之后的表面光潔度最佳,后期可以作為綜合考量選擇泡沫清潔劑的一個指標(biāo)進(jìn)行參考。

泡沫在物體表面的附著力增強(qiáng)能夠提高消毒水平。利用起泡技術(shù),清潔消毒劑對鐵質(zhì)車輛具有良好的黏附性,這種粘附性可以防止清潔成分被快速沖走,使得泡沫更適合消毒或用于垂直的車側(cè)表面,極大地延長了清潔劑的停留時間,保證了清潔與消毒時間,提升效率。同時,清潔劑可隨著泡沫延申到周圍無泡沫處,提高了清潔劑的滅菌效率,泡沫也可以滲透進(jìn)入車體縫隙深處,對深層次的細(xì)菌和病毒進(jìn)行清理和消殺。所以泡沫在車體表面附著時間的長短極為重要,泡沫在車體表面附著時間越長,消殺成分就越能夠與污染成分充分接觸反應(yīng),增強(qiáng)試劑的利用率。本研究將泡沫清潔劑的掛壁時間分為四檔,試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)A、N、O泡沫清潔劑掛壁時間最長,其清潔劑利用率最高。

總之,任何一種消毒方式的終極目標(biāo)都是為了提高藥物的殺菌效果,減少藥物用量,提高藥物的穩(wěn)定性,節(jié)約勞動時間,降低成本。泡沫清潔消毒有其獨(dú)到的優(yōu)勢和競爭力因而受到廣泛的關(guān)注,但在我國,泡沫清潔消毒作為一種新技術(shù)、新方法,在禽畜運(yùn)輸設(shè)備生物安全防疫中的應(yīng)用才剛剛起步,相關(guān)理論和使用研究還有待不斷深入,配套的防疫程序還有待進(jìn)一步完善,禽畜運(yùn)輸設(shè)備生物安全工作任重道遠(yuǎn)。