王雨陽(yáng)　楊焱　吳迪　李文　陳萬(wàn)超　張忠

摘要：通過(guò)體外抑制幽門螺旋桿菌和抗炎試驗(yàn)，考察了猴頭菌、茯苓、甘草、黃芪、葛根、蒲公英、陳皮幾種藥食兩用類物質(zhì)的提取物對(duì)幽門螺旋桿菌的抑制作用以及緩解炎癥的效果，結(jié)果表明：黃芪提取物、甘草提取物具有良好的體外抑制幽門螺旋桿菌的作用；葛根提取物、甘草提取物具有較好的緩解炎癥的效果。通過(guò)構(gòu)建人胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1損傷模型，明確了猴頭菌和茯苓的提取物對(duì)酒精損傷的人胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1增殖具有促進(jìn)作用。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，篩選出猴頭菌、茯苓、黃芪和甘草4種藥食兩用物質(zhì)的提取物，將其按照一定比例混合，制成3種組方，考察其對(duì)大鼠急性酒精性胃黏膜損傷的保護(hù)作用，結(jié)果表明：3種組方對(duì)胃黏膜損傷均具有一定的保護(hù)作用，組方2（猴頭菌43.0%、茯苓35.5%、黃芪15.9%、甘草5.6%）在0.375 g/kg時(shí)對(duì)大鼠急性酒精性胃黏膜損傷具有更好的保護(hù)作用。

關(guān)鍵詞：藥食兩用；胃黏膜損傷；幽門螺旋桿菌；抑菌；抗炎

中圖分類號(hào)R285文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A

文章編號(hào)0517-6611（2023）06-0157-06

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.06.038

Protective Effects of Several Dualpurpose Substances on Alcoholic Gastric Mucosal Injury and Inhibition of Helicobacter pylori

WANG Yuyang1，2，YANG Yan1，WU Di1 et al

（1.Key Laboratory of Edible Fungi Resources and Utilization （South）/Ministry of Agriculture，National Engineering Research Center of Edible Fungi/Institute of Edible Fungi，Shanghai Academy of Agricultural Sciences，Shanghai??? 201403;2.College of Food Sciences & Technology，Shanghai Ocean University，Shanghai? 201306）

AbstractIn vitro inhibition of Helicobacter pylori and antiinflammatory experiments were conducted to investigate the inhibitory effects and relief of Hericium erinaceus，Wolfiporia cocos，Glycyrrhiza uralensic，Astragalus membrahaceus，Pueraria lobata，Taraxacum mongolicum，tangerine peel and other medicinal and edible substances on Helicobacter pylori.The results show that Astragalus membranceus extract and Glycyrrhiza uralensic extract had a good effect of inhibiting Helicobacter pylori in vitro;Pueraria lobata extract and Glycyrhiza uralensis extract have a good effect of relieving inflammation.By constructing a GES1 injury model of human gastric mucosal epithelial cells，it is clear that the extracts of Hericium erinaceus and wolfiporia cocos can promote the proliferation of human gastric mucosal epithelial cells GES1 damaged by ethanol.According to the experimental results，four medicinal and edible extracts of Hericium erinaceus，Wolfiporia cocos，Astragalus membranaceus and Glycyrrhiza uralensic were screened out，and they were mixed according to a certain ratio to make 3 kinds of prescriptions to investigate their effects on the acute alcoholic gastric mucosa of rats.Tthe results show that the three prescriptions have a certain protective effect on gastric mucosal injury，and the prescription 2 （Hericium erinaceus 3.0%，Wolfiporia cocos 35.5%，Astragalus membranaceus 15.9%，Glycyrrhiza uralensic 5.6%） is 0.375 g/kg It has a better protective effect on acute alcoholic gastric mucosal injury in rats.

Key wordsMedicine and food;Gastric mucosal injury;Helicobacter pylori;Antibacterial;Antiinflammatory

近年來(lái)，隨著人們生活節(jié)奏的加快，過(guò)度飲酒、刺激性食物等外源性損傷因素引起的胃損傷逐漸增多，特別是飲酒引起的急性胃黏膜損傷病變臨床日益常見［1］。人們飲酒后，高濃度酒精在胃內(nèi)滯留，侵蝕胃黏膜組織，使胃黏膜屏障受損，直接引起胃黏膜急性炎癥，黏膜出現(xiàn)充血、水腫、出血、糜爛及潰瘍形成等癥狀［2］。隨著飲酒人數(shù)的增加，酒精性胃黏膜損傷相關(guān)疾病的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)［3］。幽門螺旋桿菌（Helicobacter pylori） 是一種革蘭氏陰性微需氧桿菌，也是胃黏膜損傷、慢性胃炎和胃十二指腸潰瘍發(fā)生的主要因素之一［4］?，F(xiàn)有臨床治療胃黏膜損傷的藥物還存在一些弊端，如副作用大、易復(fù)發(fā)和需長(zhǎng)期使用等［5］。因此，從營(yíng)養(yǎng)預(yù)防的角度出發(fā)，尋找安全、有效、能保護(hù)胃黏膜免受損傷的有效產(chǎn)品，具有重要的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

在胃黏膜保護(hù)方面，已有研究表明，猴頭菌、茯苓、黃芪和陳皮等藥食兩用類物質(zhì)對(duì)胃黏膜損傷具有一定的保護(hù)作用［6-11］。楊行堂等［12-14］研究發(fā)現(xiàn)，甘草、葛根和蒲公英具有預(yù)防幽門螺旋桿菌感染及降低胃癌發(fā)病危險(xiǎn)性的作用。Raish等［15］研究發(fā)現(xiàn)，苦瓜多糖可以通過(guò)抗炎作用機(jī)制對(duì)胃黏膜損傷起保護(hù)作用，這一機(jī)制與炎性細(xì)胞因子介導(dǎo)的抗氧化能力有關(guān)。關(guān)于利用猴頭菌和茯苓、黃芪、甘草等組方進(jìn)行胃黏膜損傷方面的研究鮮見報(bào)道，因此，筆者通過(guò)體外抗炎，抗幽門螺旋桿菌和酒精損傷的人胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1增殖模型，探討猴頭菌等幾種藥食兩用類物質(zhì)潛在的胃黏膜損傷修復(fù)活性，篩選出幾種藥食兩用類物質(zhì)制成組方，建立無(wú)水乙醇誘導(dǎo)的大鼠胃黏膜損傷模型，探討組方對(duì)大鼠胃黏膜損傷的保護(hù)作用，為胃黏膜損傷類疾病的防治提供理論和試驗(yàn)依據(jù)，也為猴頭菌、茯苓等藥食兩用類物質(zhì)應(yīng)用于胃黏膜保護(hù)類功能食品的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1試劑與儀器

細(xì)菌脂多糖（Lipopolysaccharides，LPS）、Alamar Blue? 美國(guó)Sigma公司；DMEM 培養(yǎng)基、RPMI1640培養(yǎng)基、胎牛血清，美國(guó)Gibco公司；青霉素、鏈霉素，美國(guó)Amersco公司；葡萄糖、氯化鈉、磷酸等，國(guó)藥集團(tuán)藥業(yè)股份有限公司； 腦心浸液粉、哥倫比亞瓊脂，上海信裕生物科技有限公司；脫纖維羊血，上海源葉生物科技有限公司。AL104 電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；水套式三氣培養(yǎng)箱，美國(guó)Thermo Fisher Scientific 公司；JJ-CJ-2FD 金凈潔凈操作臺(tái)，吳江市凈化設(shè)備總廠；Synergy HT96 孔板酶標(biāo)儀，美國(guó)Bio-Tek公司。

1.2供試細(xì)胞與菌株

RAW264.7細(xì)胞株（小鼠巨噬細(xì)胞株）購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞資源中心。用含體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清、100 U/mL青霉素及100 U/mL鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基，在37 ℃ 5% CO2條件下培養(yǎng)，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，用無(wú)色RPMI1640培養(yǎng)基將細(xì)胞稀釋到5×105個(gè)/mL。

幽門螺旋桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株Helicobacter pylori。ATCC43504和臨床標(biāo)準(zhǔn)菌株Helicobacter pylori SS1 購(gòu)自廣東省微生物菌種保藏中心。幽門螺旋桿菌培養(yǎng)基：腦心浸液粉9.6 g、哥倫比亞瓊脂23.4 g、蒸餾水780 mL，121 ℃高壓滅菌20 min后降至46 ℃后加入33～40 mL去纖維羊血。腦心浸液肉湯：蛋白胨10.0 g、腦心浸液粉17.5 g、氯化鈉5.0 g、葡萄糖2.0 g、磷酸氫二鈉2.5 g、蒸餾水1 000 mL，121 ℃高壓滅菌20 min，備用。

1.3樣品制備

稱取猴頭菌、茯苓、黃芪、蒲公英、陳皮、甘草、葛根，分別按照重量比加10倍的蒸餾水浸泡0.5 h后，用文火煎煮1.0 h，倒出藥液，藥渣再加等量蒸餾水煎煮1.0 h，2次藥液合并，8 000 r/min離心15 min，倒出上清液，蒸發(fā)濃縮后凍干。將凍干后的各類藥液破碎成粉即為提取物。

精確稱取猴頭菌、茯苓、黃芪、蒲公英、陳皮、甘草、葛根提取物各50 mg溶于5 mL蒸餾水中，沸水浴30 min，冷卻至室溫，13 000 r/min離心15 min，過(guò)0.22 μm濾膜備用。

1.4不同提取物抑制幽門螺旋桿菌的活性試驗(yàn)

1.4.1幽門螺旋桿菌菌懸液制備。

將保存的菌株活化后轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基上，37? ℃、10% CO2，5% O2孵育72 h。用腦心浸液肉湯洗下菌落，收集菌液。以腦心浸液肉湯校正菌懸液濃度，測(cè)量抑菌圈所用菌懸液濃度約2×108 CFU/mL，測(cè)定最小抑制濃度用1×108 CFU/mL菌懸液。

1.4.2抑菌圈的測(cè)定。

采用牛津杯法對(duì)抑菌圈進(jìn)行測(cè)定。取直徑9 cm，培養(yǎng)基厚度約4 mm的羊血培養(yǎng)基的平板，每塊平板加入約100? μL 幽門螺旋桿菌ATCC43504/SS1的菌懸液，立即用涂布棒涂布均勻。然后，每個(gè)培養(yǎng)皿放置4個(gè)牛津杯，呈均勻分布。往每個(gè)杯中加入100 μL不同的樣品溶液。37? ℃，10% CO2，5% O2培養(yǎng)5? d，觀察抑菌圈，測(cè)量其直徑，每個(gè)樣品重復(fù)3次。

1.4.3最小抑菌濃度的測(cè)定方法。

采用96孔板法測(cè)定最小抑菌濃度。配置樣品濃度梯度為10.000 000、5.000 000、2.500 000、1.250 000、0.625 000、0.312 500、0.156 250和0.078 125 mg/mL。依次加入96孔板中，每個(gè)樣品3組平行。趁熱加入羊血培養(yǎng)基，混合均勻。待培養(yǎng)基凝固后，每個(gè)孔中加入10? μL ATCC43504或者SS1的菌懸液。37 ℃，10% CO2，5% O2培養(yǎng)5 d。觀察細(xì)菌狀態(tài)，確定最小抑菌濃度［16］。

1.5不同提取物對(duì)LPS刺激巨噬細(xì)胞RAW264.7釋放NO的影響

1.5.1

Griess試劑的配制。在燒杯中加入6.25 mL H3PO4，加入蒸餾水250 mL，分別加入2.50 g sulfanilamide和0.25 g naphthylethyylenedia mine dihydrochloride，用磁力攪拌器攪拌至全部溶解，4? ℃避光保存。

1.5.2樣品的配制。將樣品分別用PBS配制成5.0、2.0、0.5 mg/mL 待測(cè)樣品。

1.5.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。配成不同濃度的亞硝酸鈉溶液，濃度梯度為0、5、10、15、20、25、30、35、40 μmol/L共9個(gè)，取100 μL 于96孔板，加入50 μL Griess試劑，反應(yīng)10 min，測(cè)定543 nm吸光值，每個(gè)濃度3個(gè)平行，根據(jù)吸光值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.5.4對(duì)LPS刺激巨噬細(xì)胞RAW264.7釋放NO的影響。計(jì)算細(xì)胞個(gè)數(shù)，將RAW264.7用無(wú)色1640培養(yǎng)液稀釋成5×105個(gè)/mL 的細(xì)胞懸液，每組160 μL于96孔板中，37? ℃培養(yǎng)4～6 h至細(xì)胞完全貼壁后，樣品組加入20 μL LPS（作用濃度10 μg/mL）和20 μL待測(cè)液（作用濃度50、200、500 μg/mL）。LPS組每孔加入20 μL LPS和20 μL PBS，PBS組每孔加入40 μL PBS，37? ℃培養(yǎng)48 h后吸取上清液100 μL加入50 μL Griess試劑，反應(yīng)10 min，酶標(biāo)儀測(cè)定吸光值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算NO釋放量［17-19］。

1.6不同提取物對(duì)胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1的損傷修復(fù)研究

1.6.1細(xì)胞毒性試驗(yàn)。

將人胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1用無(wú)色1640培養(yǎng)液稀釋成1×105個(gè)/mL的細(xì)胞懸液，每組160 μL于96孔板中，37 ℃培養(yǎng)細(xì)胞12 h，分別加入上述配制的不同濃度待測(cè)樣品液20 μL，37 ℃培養(yǎng)24 h后，每孔加入20? μL Alamar Blue試劑繼續(xù)培養(yǎng)，以Alamar Blue法測(cè)定所選作用濃度范圍內(nèi)不同樣品對(duì)GES-1細(xì)胞活力的影響，每個(gè)樣品設(shè)置3個(gè)重復(fù)。

1.6.2乙醇處理及細(xì)胞損傷模型的構(gòu)建。

將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的GES-1細(xì)胞以1×105個(gè)/mL的密度培養(yǎng)12 h。加入不同濃度的樣品（作用濃度分別為50、200、500 μg/mL）預(yù)保護(hù)24 h，然后去除培養(yǎng)液，使用5%乙醇損傷GES-1細(xì)胞6 h。對(duì)照組細(xì)胞用相同的培養(yǎng)液處理，但不加乙醇。每孔加入20 μL Alamar Blue試劑繼續(xù)培養(yǎng)，以Alamar Blue法測(cè)定所選作用濃度范圍內(nèi)不同樣品對(duì)GES-1細(xì)胞活力的影響，每個(gè)樣品設(shè)置3個(gè)重復(fù)。將樣品組與對(duì)照組和模型組進(jìn)行比較。所有結(jié)果均以GES-1細(xì)胞增殖抑制率表示。

1.7不同提取物組方對(duì)乙醇損傷的大鼠胃潰瘍的抑制作用研究

1.7.1動(dòng)物模型建立及試驗(yàn)分組。

根據(jù)以上試驗(yàn)結(jié)果，將猴頭菌提取物、茯苓提取物、黃芪提取物和甘草提取物按照藥典和相關(guān)保健產(chǎn)品的要求，以一定比例均勻混合制成3種組方（表1）。

通過(guò)急性乙醇誘導(dǎo)胃黏膜損傷模型評(píng)價(jià)其預(yù)保護(hù)作用。將SD大鼠隨機(jī)分為11組（n=10）。胃潰瘍模型（模型組）和正常對(duì)照組（對(duì)照組）給予生理鹽水（0.9%），其余組分別給予組方1、組方2和組方3，各組方分為低劑量（0.188 g/kg）、中劑量（0.375 g/kg）和高劑量（0.75 g/kg），分別對(duì)應(yīng)于L組、M組和H組。生理鹽水和樣品均通過(guò)灌胃給藥，每天2? mL，持續(xù)14 d。用不同濃度的組方1、組方2和組方3灌胃預(yù)保護(hù)14 d后，除對(duì)照組大鼠外，其余大鼠在最后一次給藥前禁食并自由飲用自來(lái)水24 h，然后每只大鼠給予1.0 mL無(wú)水乙醇誘導(dǎo)胃潰瘍。1 h后，將大鼠頸椎脫臼處死，取出胃。每組大鼠的胃隨機(jī)分為2個(gè)亞組。一個(gè)亞組中的樣品立即用5 mL 10%磷酸鹽緩沖福爾馬林（pH 7.0）填充，并浸沒在相同的溶液中30 min，用于組織學(xué)研究［20-23］。

1.7.2胃潰瘍?cè)u(píng)價(jià)。大鼠胃沿大彎切開，用生理鹽水清洗，仔細(xì)觀察胃黏膜層潰瘍的發(fā)生情況。同時(shí)記錄出血斑數(shù)，用游標(biāo)卡尺測(cè)量潰瘍條紋的長(zhǎng)度和寬度。潰瘍程度宏觀評(píng)價(jià)得分按中國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)（CFDA出版物第107號(hào)，2012年修訂）計(jì)算：

潰瘍抑制率=（損傷組潰瘍面積-給藥組潰瘍面積）/損傷組潰瘍面積×100%

2結(jié)果與分析

2.1不同提取物抑制幽門螺旋桿菌的活性差異

2.1.1抑菌圈的測(cè)定。

以幽門螺旋桿菌ATCC43504和SS1為試驗(yàn)菌株，測(cè)定各提取物溶液抑菌圈直徑大小，結(jié)果見表2。由表2可知，黃芪提取物、甘草提取物的抑菌圈直徑均大于10.00 mm，對(duì)幽門螺旋桿菌ATCC43504和SS1抑菌作用強(qiáng)，說(shuō)明黃芪提取物和甘草提取物具有較強(qiáng)的抗幽門螺旋桿菌活性。對(duì)ATCC43504而言，蒲公英提取物、陳皮提取物、葛根提取物抑菌圈均為9.00 mm，抗菌活性弱；對(duì)SS1而言，陳皮提取物、葛根提取物的抑菌圈大于10.00 mm，表現(xiàn)出一定的抗菌活性。

2.1.2最小抑制濃度的測(cè)定。

由表3可知，甘草提取物對(duì)幽門螺旋桿菌的抑制濃度最小，為1.25～2.50 mg/mL，抑菌作用強(qiáng)；葛根提取物對(duì)幽門螺旋桿菌的抑制濃度較小，為2.50～5.00 mg/mL，抑菌作用較強(qiáng)。黃芪提取物、蒲公英提取物、陳皮提取物對(duì)ATCC43504和SS1最小抑制濃度均大于5.00 mg/mL，抑菌活性弱。

2.2不同提取物的體外抗炎活性分析

通過(guò)典型的Greiss法檢測(cè)不同濃度提取物對(duì)LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)模型中降低NO釋放量的效果，結(jié)果如圖1所示。從圖1可見，RAW264.7細(xì)胞經(jīng)過(guò)LPS刺激后，NO含量相對(duì)于對(duì)照組（PBS）明顯升高。黃芪提取物、蒲公英提取物、陳皮提取物、甘草提取物在低濃度時(shí)抗炎效果不明顯，濃度達(dá)到500 μg/mL 時(shí)甘草提取物、葛根提取物表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗炎活性，其中葛根提取物緩解炎癥的效果最好。

2.3不同提取物對(duì)胃黏膜上皮細(xì)胞的損傷修復(fù)分析分別考察了不同樣品的作用濃度（50、200、500 μg/mL）對(duì)GES-1細(xì)胞活力的影響，結(jié)果如圖2所示。從圖2可見，在設(shè)置濃度范圍內(nèi)，細(xì)胞的增

殖率均在50%附近，表現(xiàn)出明顯的促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。猴頭菌提取物對(duì)細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用具有濃度依賴性，隨濃度的增大效果越好；茯苓提取物在200 μg/mL時(shí)的增殖率低于50和500 μg/mL，其中500 μg/mL時(shí)增殖率最高。

2.4不同提取物對(duì)酒精損傷大鼠胃潰瘍的抑制作用為觀察各組方的胃保護(hù)作用，對(duì)胃黏膜病變進(jìn)行了顯微觀察。如圖3所示，對(duì)照組未見病變條帶，模型組大鼠胃黏膜有明顯的充血或壞死。與模型組相比，各組方處理組胃黏膜損傷明顯減輕。

潰瘍抑制率如圖4所示，結(jié)果表明，組方1在低濃度和高濃度時(shí)對(duì)胃黏膜上皮細(xì)胞的保護(hù)作用不明顯。組方2和組方3在低濃度和高濃度時(shí)也具有較好的保護(hù)作用，各組方均在中濃度時(shí)（0.375 g/kg）時(shí)抑制效果最好，均能明顯保護(hù)胃黏膜上皮細(xì)胞，抑制胃潰瘍的形成，其中，組方2對(duì)大鼠胃潰瘍抑制率最為明顯。

為檢測(cè)胃組織的病理狀態(tài)，采用HE染色和組織學(xué)評(píng)分法觀察胃組織的組織學(xué)變化。胃黏膜組織HE染色結(jié)果顯示（圖5），對(duì)照組胃黏膜組織結(jié)構(gòu)完整，無(wú)上皮細(xì)胞脫落壞死，未見明顯炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。模型組胃黏膜組織腺體結(jié)構(gòu)紊亂，上皮細(xì)胞脫落嚴(yán)重，可見多處壞死灶，

伴有廣泛的血細(xì)胞浸潤(rùn)，且炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)明顯。組方1～3預(yù)處理后，上述癥狀均有不同程度的緩解。病理切片結(jié)果表明，組方1～3具有保護(hù)胃黏

膜上皮免受酒精損傷和預(yù)防潰瘍的作用。值得注意的是組方2中0.375 g/kg組胃黏膜基本光滑，未見明顯的腺結(jié)構(gòu)紊亂，黏膜充血、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。組織病理評(píng)分結(jié)果如圖 6所示，組方3對(duì)胃黏膜具有顯著的劑量依賴性保護(hù)作用，高濃度時(shí)，病理評(píng)分較低，說(shuō)明組方3可能通過(guò)降低炎癥反應(yīng)起到胃黏膜保護(hù)作用。

3討論

胃黏膜類疾病，包括消化性潰瘍、急慢性胃炎等，是臨床常見及多發(fā)疾病。隨著現(xiàn)代社會(huì)生活節(jié)奏的加快，該病的發(fā)與工作壓力過(guò)大、創(chuàng)傷、幽門螺旋桿菌感染、大量飲酒、胃酸分泌過(guò)多等多種因素引起的胃黏膜防御與攻擊因素平衡的破壞密切相關(guān)［24-25］。急性胃黏膜損傷病變的機(jī)制比較復(fù)雜，包括乙醇、細(xì)菌等侵襲因素對(duì)胃黏膜的直接損傷、促進(jìn)炎癥介質(zhì)的釋放、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等，目前認(rèn)為炎癥是胃黏膜抵御內(nèi)源性和外源性損傷因子的重要病理過(guò)程，炎癥損害可以導(dǎo)致胃黏膜的損傷和修復(fù)過(guò)程的受損［26-28］。

該研究首先通過(guò)幽門螺旋桿菌抑菌試驗(yàn)考察了幾種藥食兩用類物質(zhì)的提取物對(duì)幽門螺旋桿菌的抑制作用，結(jié)果表明，黃芪、甘草提取物具有良好的抑菌作用，如果作為胃黏膜損傷修復(fù)類產(chǎn)品，能抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，防止細(xì)胞滋生，從而在胃黏膜恢復(fù)的過(guò)程中減少細(xì)菌損害；通過(guò)體外抗炎試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)葛根、甘草提取物具有較好的緩解炎癥的效果。通過(guò)構(gòu)建乙醇處理的胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1的損傷修復(fù)模型，明確了猴頭菌、茯苓提取物對(duì)損傷的胃上皮細(xì)胞增殖具有促進(jìn)作用［29-30］。篩選出猴頭菌、茯苓、黃芪和甘草提取物按照一定比例混合，制成3種組方，利用體內(nèi)動(dòng)物試驗(yàn)考察其對(duì)急性胃黏膜損傷的修復(fù)作用，結(jié)果表明組方2（猴頭菇43.0%、茯苓35.5%、黃芪15.9%、甘草5.6%）在0.375 g/kg時(shí)對(duì)胃急性胃黏膜損傷的修復(fù)效果最好。

綜上所述，筆者利用體外抗幽門螺旋桿菌和抗炎活性試驗(yàn)及體外胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1的損傷修復(fù)試驗(yàn)，以及大鼠體內(nèi)胃黏膜損傷試驗(yàn)評(píng)估了不同藥食兩用類物質(zhì)提取物組成的組方的胃黏膜損傷保護(hù)作用，該研究結(jié)果可為開發(fā)具有胃黏膜損傷保護(hù)作用的功能食品、保健食品及藥品提供科學(xué)的理論依據(jù)和參考價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

［1］阮研碩，趙江燕，李艷梅，等.巖藻多糖對(duì)急性酒精性胃黏膜損傷的保護(hù)作用［J］.中國(guó)食品學(xué)報(bào)，2015，15（1）：19-24.

［2］孫曉艷，常冰，王炳元，等.急性酒精性胃黏膜損傷大鼠胃黏膜組織中TNFα和血漿PGE2、血清NO的改變［J］.現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2007，23（8）：1108-1110.

［3］SIDAHMED H M A，HASHIM N M，ABDULLA M A，et al.Antisecretory，gastroprotective，antioxidant and antiHelicobcter pylori activity of Zerumbone from Zingiber zerumbet （L.） Smith［J］.PLoS One，2015，10（3）：1-21.

［4］SILVA O，VIEGAS S，DE MELLOSAMPAYO C，et al.AntiHelicobacter pylori activity of Terminalia macroptera root［J］.Fitoterapia，2012，83（5）：872-876.

［5］劉睿，珠娜，郝云濤，等.核桃低聚肽對(duì)大鼠胃黏膜損傷的保護(hù)作用［J］.食品科學(xué)，2021，42（7）：191-197.

［6］周春暉，廖兵武，段迪，等.三種猴頭菇口服液對(duì)大鼠胃黏膜損傷的保護(hù)作用研究［J］.食品工業(yè)科技，2020，41（14）：270-275.

［7］馮小東.赤土茯苓苷對(duì)運(yùn)動(dòng)后小鼠應(yīng)激性胃潰瘍的保護(hù)作用［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2018，39（3）：70-74.

［8］蔡甜甜，潘華峰，張成哲，等.黃芪甲苷保護(hù)胃癌前病變大鼠胃黏膜損傷研究［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2018，33（9）：4066-4070.

［9］虎喜成，田文榮，劉敬霞，等.加味陳皮膏治療慢性萎縮性胃炎臨床觀察［J］.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2014，22（9）：517-520.

［10］QIN S M，HUANG K E，F(xiàn)ANG Z G，et al.The effect of Astragaloside IV on ethanolinduced gastric mucosal injury in rats： Involvement of inflammation［J］.International immunopharmacology，2017，52：211-217.

［11］潘世杰，丁麗婷，胡婕倫，等.茯苓多糖對(duì)乙醇致小鼠急性胃黏膜損傷的輔助保護(hù)作用［J］.食品研究與開發(fā)，2021，42（17）：1-6.

［12］楊行堂，林永輝，張俊杰，等.甘草活性成分抗幽門螺桿菌實(shí)驗(yàn)研究［J］.同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2013，34（6）：26-30.

［13］劉海昀.幽門螺旋菌患者應(yīng)用葛根芩連湯治療的臨床觀察［J］.健康導(dǎo)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2014，19（9）：250.

［14］趙家彪，廖軍.蒲公英聯(lián)合奧美拉唑治療幽門螺桿菌陽(yáng)性糜爛性胃炎66例療效觀察［J］.中華現(xiàn)代內(nèi)科學(xué)雜志，2007（7）：634-635.

［15］RAISH? M，AHMAD? A，ANSARI M A，et al.Momordica charantia polysaccharides ameliorate oxidative stress，inflammation，and apoptosis in ethanolinduced gastritis in mucosa through NFkB signaling pathway inhibition［J］.International journal of biological macromolecules，2018，111：193-199.

［16］謝勇，謝正興，周南進(jìn)，等.殼聚糖及其衍生物體外抗幽門螺桿菌作用及影響因素［J］.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2005，21（11）：1343-1347.

［17］楊陽(yáng)，張緒陽(yáng)，常利華，等.5種鳶尾屬藥用植物甲醇提取物體外抗炎活性研究［J］.中南藥學(xué)，2019，17（2）：199-203.

［18］丁麗婷，潘世杰，胡婕倫，等.燕麥多糖對(duì)小鼠急性胃黏膜損傷的保護(hù)作用［J］.食品科學(xué)，2022，43（9）：150-157.

［19］張曉鳳，薛延團(tuán)，張育浩，等.沙棘甾醇對(duì)酒精性胃黏膜損傷的保護(hù)作用［J］.華西藥學(xué)雜志，2020，35（1）：37-42.

［20］CHEN W C，WU D，JIN Y L，et al.Preprotective effect of polysaccharides purified from Hericium erinaceus against ethanolinduced gastric mucosal injury in rats［J］.International journal of biological macromolecules，2020，159：948-956.

［21］WANG X Y，YIN J Y，ZHAO M M，et al.Gastroprotective activity of polysaccharide from Hericium erinaceus against ethanolinduced gastric mucosal lesion and pylorus ligationinduced gastric ulcer，and its antioxidant activities［J］.Carbohydrate plymers，2018，186：100-109.

［22］ZENG Q，KO C H，SIU W S，et al.Polysaccharides of Dendrobium officinale Kimura & Migo protect gastric mucosal cell against oxidative damageinduced apoptosis in vitro and in vivo［J］.Journal of ethnopharmacology，2017，208：214-224.

［23］LIAO B W，HUANG H H.Structural characterization of a novel polysaccharide from Hericium erinaceus and its protective effects against H2O2induced injury in human gastric epithelium cells［J］.Journal of functional foods，2019，56：265-275.

［24］徐仙赟，李洪亮，孫立波，等.2味中藥復(fù)方對(duì)大鼠胃黏膜損傷保護(hù)作用及血液指標(biāo)的影響［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（5）：2636-2637，2719.

［25］沈玖君，鄧?yán)幔瑤浱祛?，?魔芋粉對(duì)小鼠急性酒精性胃黏膜損傷和慢性酒精性腸損傷的影響［J］.食品科學(xué)，2018，39（9）：163-169.

［26］張書，時(shí)昭紅.微米大黃炭對(duì)乙醇誘導(dǎo)大鼠急性胃黏膜損傷的保護(hù)作用及炎癥因子的影響［J］.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2017，37（10）：926-928.

［27］王浩.除幽湯聯(lián)合四聯(lián)療法對(duì)HP相關(guān)性胃潰瘍患者胃黏膜愈合及炎癥反應(yīng)的影響［J］.臨床研究，2021，29（3）：127-129.

［28］袁奕清，胡小軍.芍藥甘草湯加減對(duì)急性胃潰瘍患者血清炎癥因子、胃黏膜表皮生長(zhǎng)因子及受體表達(dá)的影響［J］.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2021，16（1）：92-95，99.

［29］潘猛，徐德昌，孫永敢，等.藥食同源食品對(duì)大鼠酒精性胃黏膜損傷的影響［J］.中國(guó)食品學(xué)報(bào)，2021，21（7）：115-122.

［30］李麗華，章圣朋，秦加旭，等.香椿子提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性小鼠胃黏膜損傷保護(hù)作用［J］.中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2021，26（5）：546-551.

作者簡(jiǎn)介王雨陽(yáng)（1998—），男，江蘇連云港人，碩士研究生，研究方向：食藥用菌的功能營(yíng)養(yǎng)。*通信作者，副研究員，碩士，從事食藥用菌的研究與開發(fā)。

收稿日期2022-02-20