張耀海,趙其陽(yáng),王成秋,焦必寧

1(西南大學(xué)/中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院柑桔研究所,重慶,400712)2(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部柑桔及苗木質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)測(cè)試中心,重慶,400712)3(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部柑橘類果品質(zhì)量安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,重慶,400712) 4(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部柑桔產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室,重慶,400712)5(國(guó)家柑桔工程技術(shù)研究中心,重慶,400712)

花椒,屬于蕓香科、花椒屬,是一種落葉小喬木。其果實(shí)是一種重要的食品添加劑和中草藥,尤其在川菜中具有獨(dú)特的麻木味道,具有溫中行氣、逐寒、止痛、殺蟲等功效[1-2]。近年來(lái),花椒產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展,種植面積已達(dá)50萬(wàn)hm2以上,產(chǎn)量已達(dá)10萬(wàn)t以上,是我國(guó)西南地區(qū)最主要的經(jīng)濟(jì)作物之一[3]。然而,花椒在種植過程中極易受到病蟲害的侵襲,會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)量和品質(zhì)嚴(yán)重下降[4]?；ń飞a(chǎn)上遇到的最大挑戰(zhàn)為病蟲害問題:主要病害如根腐病、銹病、潰瘍病、黑莖腐病、果實(shí)黑腐病等,主要害蟲如蚜蟲和鳳蝶等。

為了防治病蟲害,人們會(huì)在花椒生長(zhǎng)期間施用殺蟲劑和殺菌劑等多種農(nóng)藥,這會(huì)導(dǎo)致花椒中農(nóng)藥殘留的污染[2]。長(zhǎng)期或短期食用受農(nóng)藥污染的食品可能對(duì)人類健康造成潛在危害,導(dǎo)致各種癥狀,如頭痛、惡心、生殖功能下降、內(nèi)分泌系統(tǒng)紊亂等[3]。因此,食品中的污染物含量是否超過相關(guān)機(jī)構(gòu)設(shè)定的最大殘留限量(maximum residue limit,MRL),已引起公眾和科學(xué)界的關(guān)注。遺憾的是,國(guó)內(nèi)外明確的花椒農(nóng)藥殘留MRL標(biāo)準(zhǔn)甚少。在我國(guó),花椒上只登記了2種農(nóng)藥,分別是40%環(huán)丙唑懸浮劑和40%丙環(huán)唑水乳劑。目前,人們對(duì)殺蟲劑、殺菌劑等農(nóng)藥在花椒上殘留消解狀況及其膳食風(fēng)險(xiǎn)的報(bào)道甚少:ZHOU等[5]開展了花椒四地田間試驗(yàn),以QuEChERS結(jié)合超高效液色譜-二級(jí)質(zhì)譜分別測(cè)定干、鮮花椒中吡蟲啉及其5種代謝物殘留量,并進(jìn)行了膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估;唐光輝等[6]研究了樹干注藥后戊唑醇在花椒樹不同組織中的分布?xì)埩魟?dòng)態(tài);范金平等[7]開展了烯效唑在冷凍條件下花椒貯藏穩(wěn)定性研究;楊雙昱等[8]評(píng)價(jià)戊唑醇、肟菌酯和吡唑醚菌酯3種殺菌劑在青花椒中的殘留消解行為。

作為一種高效殺菌劑,60%百泰水分散粒劑是德國(guó)巴斯夫公司研制的新型復(fù)配殺菌劑,有效成分為5%吡唑醚菌酯和55%代森聯(lián),可有效防治真菌性病害,并且對(duì)非靶標(biāo)生物和環(huán)境安全,為果蔬、油料作物等農(nóng)作物的品質(zhì)和產(chǎn)量都起著積極的作用。國(guó)內(nèi)外陸續(xù)報(bào)道了百泰在葡萄[9]、蘋果[10]、柑桔[11]、荔枝[12]、花生[13]、棉花[14]等上的使用狀況,但未報(bào)道在花椒等香辛料中的使用現(xiàn)狀和殘留現(xiàn)狀。而在GB 2763—2021食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量中,僅制定了部分香辛料中的MRL(香辛料允許使用的滅菌劑如毒菌酚MRL為0.01 mg/kg、樂殺螨MRL為0.05 mg/kg、氯苯甲醚MRL為0.05 mg/kg和乙烯菌核利MRL為0.05 mg/kg,代森聯(lián)在胡椒、茴香和豆蔻中MRL均為0.1 mg/kg),但花椒中代森聯(lián)和香辛料中吡唑醚菌酯的MRL尚無(wú)明確標(biāo)準(zhǔn)。此外國(guó)外已評(píng)估了百泰的遺傳毒性,結(jié)果表明百泰能夠損傷DNA,并毒害細(xì)胞[15]。因此有必要通過田間試驗(yàn),探明百泰在花椒上的殘留消解規(guī)律,并探討其可能產(chǎn)生的膳食健康風(fēng)險(xiǎn),為制定其在花椒中的MRL提供數(shù)據(jù)支撐。

本研究以花椒為對(duì)象,采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法和氣相色譜-火焰光度檢測(cè)器(gas chromatography coupled with flame photometric detector, GC-FPD)檢測(cè)技術(shù),分析了代森聯(lián)和吡唑醚菌酯在花椒中的消解與殘留分布,并對(duì)其可能產(chǎn)生的人群膳食風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估,以期為我國(guó)花椒安全生產(chǎn)、監(jiān)測(cè)和消費(fèi)引導(dǎo)提供重要的技術(shù)依據(jù)和參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

代森聯(lián)(純度≥75%),上海源葉生物科技有限公司;二硫化碳(純度≥99%)、甲酸(色譜純)和氯化亞錫二水合物(分析純),上海麥克林生化科技有限公司;吡唑醚菌酯(純度≥98%)和乙撐硫脲(ethylene thiourea, ETU)(純度≥99.5%),德國(guó)Dr.Ehrenstorfer GmbH公司;乙腈、甲醇和正己烷(色譜純),美國(guó)Sigma-Aldrich公司;抗壞血酸(分析純),上海國(guó)藥化學(xué)試劑有限公司;無(wú)水硫酸鎂和氯化鈉(均為分析純),江蘇強(qiáng)盛化工有限公司;鹽酸(分析純),重慶川東化工有限公司;氨水(分析純)、乙二胺基-N-丙基(40～63 μm,6 nm)和石墨化碳黑(120～400目),上海安譜科學(xué)儀器有限公司;60%代森聯(lián)·吡唑醚菌酯水分散粒劑,上海悅聯(lián)化工有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Agilent 7890B氣相色譜儀,配FPD 檢測(cè)器(含硫?yàn)V光片)、DB-1(30 m×0.25 mm×1.0 μm)氣相色譜柱、Agilent 1290-6495A液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀,美國(guó)Agilent公司;Acquity UPLC BEH C18超液相色譜柱(2.1 mm×10 cm,1.7 μm),美國(guó)Waters公司;CL31/CL31R冷凍離心機(jī),美國(guó)Thermo Fisher公司;CK2000高通量研磨儀,北京托摩根公司;Milli-Q 超純水器,美國(guó)Millipore公司;THZ-C恒溫振蕩器,蘇州培英實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;有機(jī)相針式濾器(0.22 μm),上海安譜科學(xué)儀器有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 田間試驗(yàn)和樣品采集

花椒于2020年4～5月在重慶市江津區(qū)(消解和終殘)、重慶市忠縣(消解和終殘)、山東省濟(jì)南市(終殘)、四川省資陽(yáng)市(終殘)四地采集。施藥方法:60%吡唑醚菌酯·代森聯(lián)水分散粒劑于花椒葉斑病發(fā)生初期噴霧施藥,推薦施藥劑量400～800 mg a.i./kg(稀釋倍數(shù)750～1 500倍),用水量1 500～2 250 L/hm2;施藥次數(shù):2～3次;施藥間隔7～10 d,安全間隔期:14 d。施藥器具:背負(fù)式電動(dòng)噴霧器。

最終殘留量試驗(yàn)設(shè)置4個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)。每個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)設(shè)1個(gè)處理小區(qū),小區(qū)面積50 m2(約6～8棵花椒樹),以800 mg a.i./kg(750倍稀釋液)的有效劑量,用水量為2.5 L/棵樹(即處理小區(qū)每次施藥稱取26.67 g 60%吡唑醚菌酯·代森聯(lián)水分散粒劑,用20 L水勾兌配制而成),于花椒成熟前28 d進(jìn)行第一次施藥,分別間隔7 d再進(jìn)行第2次、第3次施藥。每個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)在末次施藥后間隔14、21 d分別采集,每小區(qū)每次均采集2個(gè)獨(dú)立樣品。對(duì)照區(qū):另外設(shè)置,不施藥。采集處理小區(qū)時(shí),應(yīng)同時(shí)采集對(duì)照小區(qū)。

殘留消解試驗(yàn)設(shè)置2個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)。在最終殘留試驗(yàn)小區(qū)中開展,無(wú)需額外設(shè)置小區(qū)。每個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)在末次施藥后間隔2 h、7 d和28 d分別采集,每小區(qū)每次均采集2個(gè)獨(dú)立樣品。對(duì)照區(qū):另外設(shè)置,不施藥。第一次和最后一次采集時(shí),應(yīng)同時(shí)采集對(duì)照小區(qū)。

樣品采集:應(yīng)戴一次性手套,先采對(duì)照區(qū),再采集處理小區(qū)。按設(shè)計(jì)方案要求,采用隨機(jī)法在樹的不同方向及上、下、中、外、里、向陽(yáng)和背陰面等不同部位采集不少于2 kg無(wú)明顯病害、正常生長(zhǎng)、成熟的果實(shí)樣品,裝入容器中,包扎妥當(dāng),容器內(nèi)外各加上標(biāo)簽。處理小區(qū)需分2次采集2個(gè)獨(dú)立樣品。樣品運(yùn)輸:采集后在8 h內(nèi)進(jìn)行處理,并冷凍保存。樣品在冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸,并記錄運(yùn)輸過程中的溫度。

將田間采集的花椒的每個(gè)獨(dú)立樣品在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)均分別制備鮮花椒150 g樣品2份、干花椒150 g樣品2份,分別裝入封口袋中,貼好標(biāo)簽,-18 ℃低溫保存。干花椒制備,參照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)GH/T 1289—2020 干花椒流通規(guī)范和GB/T 30391—2013 花椒。

1.3.2 樣品前處理

1.3.2.1 代森聯(lián)的樣品前處理

代森聯(lián)樣品前處理采用衍生方法,在加熱的密閉頂空瓶中,樣品中代森聯(lián)遇氯化亞錫鹽酸溶液反應(yīng)生成的二硫化碳?xì)怏w被瓶中的正已烷吸收,形成二硫化碳的正已烷溶液,GC-FPD測(cè)定有機(jī)相中的二硫化碳的量,用二硫化碳定量代森聯(lián)的含量。

具體步驟參考相關(guān)文獻(xiàn)[16-17],并做了一定改進(jìn),如下:稱取樣品10.00 g(精確到0.01 g)于100 mL頂空瓶中,加入50 mg抗壞血酸、40 mL氯化亞錫鹽酸溶液、10.00 mL水、10.00 mL正已烷,迅速將瓶口密封,放入恒溫振蕩器中85 ℃下2 h,時(shí)間到后拿出冷卻至室溫,吸取上層有機(jī)相,0.22 μm有機(jī)相濾頭過濾,經(jīng)GC-FPD測(cè)定。

1.3.2.2 吡唑醚菌酯和ETU的樣品前處理

吡唑醚菌酯和ETU樣品前處理采用優(yōu)化的QuEChERS法提取凈化,液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測(cè)。

具體步驟如下:準(zhǔn)確稱取2 g(精確到0.01 g)樣品于50 mL離心管中,加入20.00 mL 1%(體積分?jǐn)?shù))氨水乙腈和2.00 mL去離子水,于高通量組織研磨儀上以1 000 r/min振蕩提取10 min;加入2.0 g無(wú)水硫酸鎂和0.5 g NaCl,振蕩2 min;10 000 r/min離心5 min,吸取1.00 mL上清液于含有50 mg乙二胺基-N-丙基、30 mg石墨化磷黑的離心管中,再加入1.00 mL乙腈稀釋,渦旋2 min;3 000 r/min離心5 min,取上清液過0.22 μm有機(jī)濾膜,待測(cè)。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制

二硫化碳的標(biāo)準(zhǔn)母液:25 mL容量瓶中加入5 mL正已烷,向其中加入25.00 mg二硫化碳,用正已烷定容至刻度,即為1 000 mg/L的母液,于-50 ℃避光保存。

二硫化碳的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液:用正己烷將標(biāo)準(zhǔn)母液逐級(jí)稀釋配成30、20、10、5、2、1、0.5、0.2、0.1 mg/L系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,測(cè)試前現(xiàn)配。

吡唑醚菌酯和ETU的標(biāo)準(zhǔn)母液:分別稱取吡唑醚菌酯和ETU標(biāo)準(zhǔn)品10.00 mg于10 mL棕色容量瓶中,用乙腈定容,搖勻,配制成1 000 mg/L標(biāo)準(zhǔn)母液,轉(zhuǎn)移到帶蓋棕色試劑瓶中,置于-50 ℃超低溫冰箱中待用。

吡唑醚菌酯和ETU的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液:各取1 mL 1 000 mg/L吡唑醚菌酯和ETU標(biāo)準(zhǔn)母液,乙腈定容至10 mL,配制成100 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,用花椒基質(zhì)空白將混合標(biāo)準(zhǔn)溶液逐級(jí)稀釋配成1、0.5、0.1、0.05、0.01、0.005、0.002 mg/L系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,測(cè)試前現(xiàn)配。

1.3.4 儀器條件

1.3.4.1 氣相條件

色譜柱:DB-1(30 m×0.25 mm×1.0 μm);流速:0.8 mL/min;柱溫:50 ℃(1 min),以20 ℃/min升溫至120 ℃(1 min);進(jìn)樣口溫度:120 ℃;檢測(cè)器:200 ℃,載氣:氮?dú)?30 mL/min;空氣:60 mL/min;氫氣:50 mL/min;進(jìn)樣量:1 μL。

1.3.4.2 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜條件

色譜柱:Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×10 cm),1.7 μm;柱溫:40 ℃;進(jìn)樣量:1 μL;流動(dòng)相A:0.1%(體積分?jǐn)?shù))甲酸水溶液;流動(dòng)相B:乙腈;流速:0.25 mL/min。梯度洗脫條件見表1。

表1 流動(dòng)相梯度洗脫

離子源:AJS-ESI+;掃描方式:MRM模式;干燥氣溫度:250 ℃;干燥氣流速:14 L/min;氮?dú)鈮毫?30 psi;鞘氣溫度:375 ℃;鞘氣流速:12 L/min;毛細(xì)管電壓:4 000 V;噴嘴電壓:500 V。MRM質(zhì)譜條件見表2。

表2 MRM監(jiān)測(cè)條件參數(shù)

1.3.5 定性和定量方法

代森聯(lián)測(cè)定采用GC-FPD進(jìn)行定性定量,其中代森聯(lián)的衍生物二硫化碳定性采用其相對(duì)保留時(shí)間,定量采用代森聯(lián)的衍生物二硫化碳標(biāo)準(zhǔn)曲線法。用二硫化碳的含量[ω(二硫化碳)]定量代森聯(lián)的含量,單位以毫克每千克(mg/kg)表示,按公式(1)計(jì)算:

ω(代森聯(lián))=1.79×ω(二硫化碳)

(1)

式中:ω(代森聯(lián)),代森聯(lián)質(zhì)量濃度,mg/kg;ω(二氧化硫),二氧化硫質(zhì)量濃度,mg/kg。

吡唑醚菌酯和ETU采用液相色譜-三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行定性定量,如表2所示。根據(jù)《農(nóng)藥登記殘留試驗(yàn)待測(cè)殘留物和植物源性食品膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估殘留物目錄(2021版)》的要求,代森聯(lián)與ETU的殘留量之和計(jì)算如公式(2)所示:

總殘留量=ω(代森聯(lián))+7.5×ω(ETU)

(2)

式中:ω(代森聯(lián)),代森聯(lián)質(zhì)量濃度,mg/kg;ω(ETU),ETU質(zhì)量濃度,mg/kg。

當(dāng)代森聯(lián)或ETU質(zhì)量濃度小于其定量限(limits of quantitation,LOQ)時(shí),以LOQ計(jì)算總殘留量。

1.3.6 降解動(dòng)態(tài)方程

按照一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程擬合代森聯(lián)和吡唑醚菌酯在花椒中的殘留降解動(dòng)態(tài),消解系數(shù)K通過公式(3)計(jì)算,半衰期通過公式(4)計(jì)算:

CT=C0e-KT

(3)

T1/2=ln(2/K)

(4)

式中:CT,T時(shí)間目標(biāo)農(nóng)藥的殘留濃度(mg/kg);C0,施藥后目標(biāo)農(nóng)藥的初始沉積量(mg/kg);K,消解系數(shù);T1/2,降解半衰期,d;T,施藥后時(shí)間,d。

1.3.7 加工因子

采用加工因子(processing factor,PF)表示鮮花椒加工成干花椒過程對(duì)農(nóng)藥殘留的影響,其計(jì)算如公式(5)所示:

加工因子=干花椒中的農(nóng)藥殘留量/鮮花椒中的農(nóng)藥殘留量

(5)

1.3.8 膳食評(píng)估

根據(jù)WHO規(guī)定的方法,花椒中農(nóng)藥殘留慢性膳食風(fēng)險(xiǎn)(chronic risk quotient,RQc)按公式(6)和公式(7)計(jì)算,急性膳食風(fēng)險(xiǎn)(acute risk quotient,RQa)按公式(8)和公式(9)計(jì)算,風(fēng)險(xiǎn)值<1時(shí),健康風(fēng)險(xiǎn)在可接受范圍內(nèi);而風(fēng)險(xiǎn)值>1時(shí),存在不可接受的健康風(fēng)險(xiǎn)。

NEDI=(STMR×F)/bw

(6)

RQc=NEDI/ADI

(7)

NESTI=(LP×HR)/bw

(8)

RQa=NESTI/ARfD

(9)

式中:NEDI,每日估計(jì)攝入量(the national estimated daily intake), mg/kg bw/d;STMR,農(nóng)藥殘留試驗(yàn)中值(the supervised trials median residue), mg/kg;F,花椒人均消費(fèi)量(the average fruit consumption), kg/d;bw,人群體重(the average body weight), kg;ADI,每日允許攝入量(the acceptable daily intake of pesticide), mg/(kg bw·d);NESTI,短期估計(jì)攝入量(the national estimated short term intake), mg/(kg bw·d);LP, 花椒消費(fèi)大份餐(the large portion), kg/d;HR,最終殘留試驗(yàn)得到的最高殘留濃度(the highest residue in available samples), mg/kg;ARfD,急性參考劑量(the acute reference dose of pesticide), mg/(kg bw·d)。代森聯(lián)的ADI為0.03 mg/(kg bw·d),吡唑醚菌酯的ADI和ARfD分別為0.03和0.05 mg/(kg bw·d)[18]。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法驗(yàn)證

二硫化碳的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖見圖1-A,ETU和吡唑醚菌酯的總離子色譜圖見圖1-B。

A-二硫化碳;B-ETU和吡唑醚菌酯

二硫化碳的峰面積Y對(duì)數(shù)與其質(zhì)量濃度X(0.1～30 mg/L)對(duì)數(shù)呈現(xiàn)正相關(guān),決定系數(shù)(R2)為0.997 2,標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:lgY=2.317 4×lgX+2.771 2,這與文獻(xiàn)吻合[22]。鮮花椒、干花椒均不存在較強(qiáng)的基質(zhì)效應(yīng),因此樣品檢測(cè)采用正己烷配標(biāo)定量。

吡唑醚菌酯和ETU的峰面積Y均與其質(zhì)量濃度X(0.002～1 mg/L)呈現(xiàn)正相關(guān),標(biāo)準(zhǔn)曲線方程分別為:吡唑醚菌酯:鮮花椒Y=1 583 872.991 3X-3 374.619 9,R2=0.999 9,干花椒Y=747 048.453 9X-3 102.174 2,R2=0.999 7;ETU:鮮花椒Y=295 622.614 4X+44.255 6,R2=0.999 9,干花椒Y=165 530.301 7X-1 578.354 8,R2=0.996 7?？梢钥闯?標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)性良好,決定系數(shù)均在0.996以上。

分別在空白鮮花椒、干花椒中添加4檔質(zhì)量濃度的代森聯(lián)標(biāo)準(zhǔn)溶液,3檔質(zhì)量濃度的吡唑醚菌酯和ETU混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,每檔加標(biāo)質(zhì)量濃度水平均重復(fù)5次,結(jié)果見表3。代森聯(lián)回收率為85.5%～106.7%,RSD為1.0%～4.2%;ETU回收率為81.2%～93.1%,RSD為1.6%～9.5%;吡唑醚菌酯回收率為83.4%～91.3%,RSD為2.3%～4.6%。

表3 代森聯(lián)、ETU和吡唑醚菌酯添加回收率結(jié)果

代森聯(lián)、ETU和吡唑醚菌酯在鮮花椒、干花椒中的定量限均為0.05 mg/kg。

由上可見,采用的方法具有良好的準(zhǔn)確度和精密度,根據(jù)農(nóng)作物中農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則(NY/T 788—2018),可滿足所選農(nóng)藥殘留檢測(cè)分析要求。

2.2 降解動(dòng)態(tài)曲線

施藥2 h后,吡唑醚菌酯在2個(gè)產(chǎn)地鮮花椒上的初始沉積量為3.96～5.80 mg/kg,在干花椒上的初始沉積量為8.97～9.20 mg/kg(圖2)。施藥28 d時(shí),吡唑醚菌酯在鮮花椒中的消解率可達(dá)94.1%～96.9%,在干花椒中的消解率可達(dá)97.3%～97.5%。消解規(guī)律均符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程,消解曲線決定系數(shù)(R2)為0.840 7～0.992 2,指數(shù)關(guān)系良好。吡唑醚菌酯在鮮花椒中的半衰期為5.59～6.93 d,在干花椒中的半衰期為5.87～6.13 d。

圖2 吡唑醚菌酯在花椒中的殘留消解變化

施藥2 h后,代森聯(lián)、ETU在2個(gè)產(chǎn)地鮮花椒上的初始沉積量分別為15.44～32.68 mg/kg和2.87～8.03 mg/kg,在干花椒上的初始沉積量分別為6.88～18.16、2.26～4.77 mg/kg(圖3)。施藥28 d時(shí),代森聯(lián)在鮮花椒中的消解率分別可達(dá)95.3%～97.7%,在干花椒中的消解率分別可達(dá)92.4%～96.2%。代森聯(lián)消解規(guī)律均符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程,消解曲線決定系數(shù)(R2)為0.916 0～0.993 8,指數(shù)關(guān)系良好。代森聯(lián)在鮮花椒中的半衰期為5.10～6.86 d,在干花椒中的半衰期為5.63～7.37 d。可見,代森聯(lián)和吡唑醚菌酯在花椒上的消解速度都比較快。

A-鮮花椒重慶市江津區(qū);B-干花椒重慶市江津區(qū);C-鮮花椒重慶市忠縣;D-干花椒重慶市忠縣

2.3 最終殘留

表4顯示,14 d鮮花椒中代森聯(lián)、吡唑醚菌酯殘留量分別為4.31～11.33 mg/kg、0.25～0.94 mg/kg,干花椒中代森聯(lián)、吡唑醚菌酯殘留量分別為2.17～9.09 mg/kg、0.30～2.86 mg/kg;21 d鮮花椒中代森聯(lián)、吡唑醚菌酯殘留量分別為2.29～4.41 mg/kg、0.11～0.59 mg/kg,干花椒中代森聯(lián)、吡唑醚菌酯殘留量分別為1.87～3.63 mg/kg、0.21～2.02 mg/kg。

表4 代森聯(lián)和吡唑醚菌酯在花椒上的最終殘留量

2.4 加工因子

由表5可知,干花椒中代森聯(lián)的殘留量均低于鮮花椒中的殘留量,加工因子均小于1(0.47～0.83),而干花椒中吡唑醚菌酯的殘留量均高于鮮花椒中的殘留量,加工因子均大于等于1(1.00～3.86)。加工后能顯著降低代森聯(lián)在干花椒中的殘留,而吡唑醚菌酯在干花椒中發(fā)生了顯著的富集效應(yīng)。

表5 代森聯(lián)、吡唑醚菌酯在花椒中的加工因子

2.5 膳食評(píng)估

膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全評(píng)估的重要組成部分,也是衡量產(chǎn)品安全性的手段之一。由表6可知,慢性和急性暴露風(fēng)險(xiǎn)值隨安全間隔期延長(zhǎng)而降低,均低于安全界限1。慢性暴露風(fēng)險(xiǎn)表現(xiàn)為代森聯(lián)>吡唑醚菌酯,吡唑醚菌酯的分布范圍為0.000 26～0.000 67,代森聯(lián)的分布范圍為0.001 8～0.003 8;急性暴露風(fēng)險(xiǎn),吡唑醚菌酯的分布范圍為0.000 37～0.001 8。由于代森聯(lián)缺乏ARfD值,故暫不考慮其急性暴露風(fēng)險(xiǎn)。與加工因子相似,對(duì)代森聯(lián)而言,鮮花椒的慢性暴露風(fēng)險(xiǎn)>干花椒的慢性暴露風(fēng)險(xiǎn);對(duì)吡唑醚菌酯而言,干花椒的慢性暴露風(fēng)險(xiǎn)>鮮花椒的慢性暴露風(fēng)險(xiǎn),干花椒的急性暴露風(fēng)險(xiǎn)>鮮花椒的急性暴露風(fēng)險(xiǎn)。因此,按照良好農(nóng)業(yè)規(guī)范在花椒上施用代森聯(lián)·吡唑醚菌酯農(nóng)藥后,間隔14、21 d,花椒中代森聯(lián)和吡唑醚菌酯的急性和慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)均在可接受范圍內(nèi)。

表6 代森聯(lián)和吡唑醚菌酯殘留對(duì)我國(guó)消費(fèi)者的慢性和急性膳食風(fēng)險(xiǎn)

利用GB 2763—2021中代森聯(lián)和吡唑醚菌酯在不同食物中的MRL,結(jié)合19種食物的人均膳食量,通過公式(6)和公式(7),評(píng)估了代森聯(lián)和吡唑醚菌酯在19種食物中的慢性暴露風(fēng)險(xiǎn),如表7所示。代森聯(lián)和吡唑醚菌酯在不同食物中的慢性暴露風(fēng)險(xiǎn)貢獻(xiàn)率差異較大,累計(jì)慢性暴露風(fēng)險(xiǎn)均超過了100%,代森聯(lián)和吡唑醚菌酯在醬油類食物的慢性暴露風(fēng)險(xiǎn)貢獻(xiàn)率占總比僅分別為0.83%和0.47%。再結(jié)合表6中農(nóng)藥最高殘留值,估算出代森聯(lián)在鮮花椒和干花椒的風(fēng)險(xiǎn)閾值分別為15、10 mg/kg,吡唑醚菌酯在鮮花椒和干花椒的風(fēng)險(xiǎn)閾值分別為1、3 mg/kg。

表7 代森聯(lián)和吡唑醚菌酯殘留在不同食物中的慢性膳食風(fēng)險(xiǎn)

3 結(jié)論

花椒樣品分別經(jīng)QuEChERS方法處理和衍生化,再分別采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法和氣相色譜-火焰光度檢測(cè)器檢測(cè)代森聯(lián)和吡唑醚菌酯。結(jié)果表明該方法操作簡(jiǎn)單,具有良好的準(zhǔn)確度和精密度,可滿足試驗(yàn)農(nóng)藥殘留檢測(cè)分析要求。在花椒生長(zhǎng)發(fā)育過程中,代森聯(lián)和吡唑醚菌酯均快速消解。按照良好農(nóng)業(yè)規(guī)范在花椒上施用代森聯(lián)和吡唑醚菌酯后,花椒中代森聯(lián)和吡唑醚菌酯的急性或慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)均在可接受范圍內(nèi)。