韋如桂

（廣西南寧市興寧區(qū)五塘鎮(zhèn)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站 530215）

黏膜免疫是利用分布于消化道、呼吸道、生殖道、泌尿道、乳腺黏膜或其他部位黏膜的淋巴組織，通過抗原的局部刺激作用使之發(fā)生免疫反應(yīng)，產(chǎn)生分泌型免疫球蛋白，從而幫助抵御外界病原微生物感染的一種免疫方式[1]。在養(yǎng)豬領(lǐng)域已經(jīng)得到了較好地應(yīng)用。

1 黏膜免疫簡介

黏膜免疫顧名思義是以動物體的黏膜組織為基礎(chǔ)而發(fā)生的免疫，常見的黏膜組織包括消化道黏膜、呼吸道黏膜、泌尿生殖道黏膜等，這些黏膜的表層散布著與免疫相關(guān)的淋巴組織，通過抗原的刺激作用能產(chǎn)生分泌型抗體，從而起到抵抗病原微生物侵染的作用。黏膜免疫的發(fā)生需要黏膜免疫系統(tǒng)的支持，該系統(tǒng)不同于普通常規(guī)的由免疫器官、免疫細(xì)胞和免疫分子組成的內(nèi)環(huán)境免疫系統(tǒng)，而是一種受黏膜蛋白表面抗原物質(zhì)刺激而形成的局部免疫應(yīng)答。整體包括非特異性免疫和特異性免疫兩個(gè)方面，非特異性免疫功能是依靠黏膜的蠕動和纖毛的活動幫助減少病原菌對上皮細(xì)胞的作用，同時(shí)分泌黏液幫助抑制入侵的病原。而特異性免疫則是通過免疫細(xì)胞捕獲抗原物質(zhì)來產(chǎn)生局部免疫應(yīng)答，清除外來物，阻止致病原進(jìn)入機(jī)體。

實(shí)際養(yǎng)殖生產(chǎn)中，很多疾病的病原都是通過呼吸道、消化道、生殖道等侵染的，如果黏膜完整，功能完善，黏膜免疫力強(qiáng)，則病原體會在黏膜免疫作用下被殺滅，無法進(jìn)入到機(jī)體內(nèi)環(huán)境。在此過程中，黏膜扮演著天然“屏障”的角色，保護(hù)機(jī)體免受侵害。有些動物因疾病、化學(xué)物刺激、物理損傷等引發(fā)黏膜功能下降或受損時(shí)，病原很容易乘機(jī)而入，比如集約化豬場當(dāng)舍內(nèi)通風(fēng)不良造成氨氣、硫化氫等有害氣體超標(biāo)時(shí)，這些有害物會對呼吸道黏膜產(chǎn)生較為強(qiáng)烈的刺激，使得表面的黏膜液理化性質(zhì)改變，對病原微生物的屏障作用降低，最終導(dǎo)致群發(fā)性疾病發(fā)生。偽狂犬病毒、流感病毒、支原體、巴氏桿菌、副豬嗜血桿菌、傳染性胸膜肺炎放線桿菌等都是臨床常見的呼吸道類病原體，且多通過有害氣體刺激誘發(fā)。通過黏膜免疫的方法能使呼吸道表面產(chǎn)生分泌型抗體，病原進(jìn)入呼吸道后這些抗體能第一時(shí)間將其中和，并形成免疫復(fù)合體，最終以分泌物或排泄物的形式（鼻液、痰液、糞便等）排出體外，避免對機(jī)體造成威脅。

2 黏膜免疫的應(yīng)用

2.1 偽狂犬病的防控

仔豬出生后的1～3 d 通過滴鼻接種偽狂犬病毒疫苗的方法來預(yù)防偽狂犬病就是利用了黏膜免疫的原理。偽狂犬病毒疫苗屬于弱毒疫苗（目前市場以基因缺失型居多），具備很好的自身抗原性，同時(shí)其保留的毒力也不會對仔豬形成感染，滴鼻后一方面這些疫苗株通過“提前占位”原理先于“野毒”與鼻腔中的免疫細(xì)胞表面特異性蛋白結(jié)合，這樣即使有外界“野毒”侵入，其也會因?yàn)槿狈τ行У目晒┙Y(jié)合的蛋白靶位而無法定植和復(fù)制。另一方面，結(jié)合后的疫苗株能刺激鼻腔黏膜進(jìn)一步發(fā)生免疫反應(yīng)，最終產(chǎn)生分泌型抗體，該型抗體能較長時(shí)間存在于黏膜表面，是保護(hù)呼吸道的一道屏障。當(dāng)環(huán)境中的偽狂犬病毒經(jīng)呼吸道傳入時(shí)，這些抗體能及時(shí)將其中和，避免通過呼吸道途徑感染。

偽狂犬病毒的滴鼻免疫法適用于本病流行的豬場。有的場上批次豬曾發(fā)生過該病，為了防止環(huán)境中殘留的病原對本批次豬造成威脅也可采取該方法。很多豬場為了確保本場的絕對安全，甚至將滴鼻免疫法納入程序性預(yù)防的范疇。另外，隨著疫苗研制的進(jìn)展和生產(chǎn)工藝水平的提升，其安全性提高的同時(shí)，抗原性得到了更好地保留，非常適合黏膜免疫接種。截至目前，偽狂犬病的滴鼻免疫已經(jīng)應(yīng)用于大多數(shù)的規(guī)?；i場，算是黏膜免疫的一種成功應(yīng)用。

2.2 仔豬腹瀉病的防控

仔豬腹瀉是哺乳期仔豬常見的一種消化道疾病，多流行于寒冷季節(jié)，常見病原包括傳染性胃腸炎病毒、流行性腹瀉病毒、大腸桿菌等，其中以前兩者感染后造成的損失最大，能導(dǎo)致90%以上的仔豬死亡，且傳染極快，一般表現(xiàn)整窩發(fā)病。大腸桿菌病臨床以仔豬黃白痢表現(xiàn)為主，由于病原屬于細(xì)菌性微生物，故臨床可通過使用抗生素進(jìn)行預(yù)防。生產(chǎn)中需要重點(diǎn)防控的是傳染性胃腸炎和流行性腹瀉，因這兩種病毒可寄生在腸道黏膜細(xì)胞中，通過快速復(fù)制的方式，在數(shù)量增加后導(dǎo)致腸黏膜大面積脫落，仔豬排出的糞便中不但有未消化完全的乳汁，還有大量的條索狀、絮狀的腸黏膜，大多數(shù)感染豬最終因營養(yǎng)不良和機(jī)體脫水而死亡。

目前預(yù)防流行性腹瀉病以接種疫苗為主，而臨床上的接種方法有兩種，一種是將疫苗口服使用，另一種則是肌肉注射免疫法。盡管兩種方法都能起到一定保護(hù)作用，但產(chǎn)生的免疫類型有著很大差別，口服免疫法是抗原在腸道中通過刺激黏膜組織而發(fā)生免疫，免疫方式以黏膜免疫為主，最終產(chǎn)生的抗體主要分布在黏膜表面，類型以分泌型的IgA 為主，是機(jī)體第一免疫屏障的組成部分，能阻止病原通過消化道感染[2]。肌肉注射法是通過抗原在機(jī)體內(nèi)環(huán)境中形成免疫刺激而發(fā)生體液免疫和細(xì)胞免疫，最終產(chǎn)生的抗體主要分布在體液中，且抗體類型以IgG 為主，更傾向于組成機(jī)體的第二免疫屏障。相比較而言，第一種口服免疫法具有使用簡便，免疫應(yīng)激小，毒副作用小的優(yōu)點(diǎn)。

2.3 微生態(tài)制劑保健

微生態(tài)制劑是一類含有益微生物的制劑產(chǎn)品，常見包括枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、凝結(jié)芽孢桿菌、丁酸梭菌、釀酒酵母菌以及乳酸菌類微生物等。目前在養(yǎng)殖領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，尤其是無抗養(yǎng)殖興起后，微生態(tài)制劑作為其有效的替代品而被廣泛推廣。關(guān)于微生態(tài)制劑的作用機(jī)理，業(yè)內(nèi)人士普遍認(rèn)為是其中的益生菌通過和有害菌進(jìn)行空間和營養(yǎng)的競爭而產(chǎn)生抗菌作用，還有些益生菌能分泌抗菌肽、溶菌酶等，可直接對環(huán)境中侵入的野毒或體內(nèi)條件致病菌進(jìn)行抑殺。但研究表明，益生菌進(jìn)入腸道后還能對黏膜表面的淋巴組織產(chǎn)生刺激，使得黏膜免疫功能增強(qiáng)，這也是微生態(tài)制劑能降低疾病發(fā)生率的重要原因之一[3]。隨著無抗養(yǎng)殖的興起，微生態(tài)制劑在養(yǎng)殖領(lǐng)域應(yīng)用越來越廣泛，多數(shù)豬場從仔豬出生開始就灌服益生菌，使有益菌先于有害菌定植在腸黏膜表面，待到保育期后更換抑菌型益生菌種類，幫助降低斷奶應(yīng)激和換料性腹瀉的發(fā)病率。當(dāng)豬進(jìn)入育肥期后，豬場可選擇添加產(chǎn)酶型益生菌來幫助提升飼料消化率，降低料肉比，有助于提前出欄。

臨床實(shí)踐表明，每天按照01.%～0.5%的添加量在飼料中加入益生菌，使菌在飼料中的濃度不低于106cfu/g，便可使豬的腸道淋巴結(jié)發(fā)育更加成熟，免疫功能更完善。另外，微生態(tài)制劑對已經(jīng)受損的黏膜也有一定修復(fù)作用，豬因感染輪狀病毒、球蟲、大腸桿菌、沙門氏菌、流行性腹瀉或傳染性胃腸炎病毒導(dǎo)致腸黏膜受損脫落時(shí)，病灶區(qū)域會重新生成新的黏膜層。使用微生態(tài)制劑后，一方面通過調(diào)理使腸道保持局部微生態(tài)平衡，阻止有害微生物對黏膜產(chǎn)生進(jìn)一步危害，另一方面，部分種類的益生菌能產(chǎn)生黏膜修復(fù)性因子，使已經(jīng)受損的黏膜得到修復(fù)，病程得到縮短，對動物后期的生產(chǎn)性能影響也能降至最低。

3 黏膜免疫的安全性問題

黏膜免疫雖然有著諸多優(yōu)點(diǎn)，但如果操作不當(dāng)，或者選擇的疫苗種類不正確，最終也很容易出現(xiàn)安全性問題。有些養(yǎng)殖場在防控傳染性胃腸炎和流行性腹瀉兩種病方面，將病豬的腸道組織進(jìn)行體外滅活后直接飼喂而刺激腸道黏膜發(fā)生免疫反應(yīng)。大致過程為，將病料組織進(jìn)行清洗和分割后高溫下烘干，再進(jìn)行適當(dāng)粉碎，之后拌入料中飼喂。高溫的目的是為了對病料中的病原體進(jìn)行滅活，而粉碎后的病料具有較大的表面積，使病毒能充分接觸胃腸道黏膜免疫組織，從而起到刺激性作用而產(chǎn)生黏膜免疫抗體，這些抗體能幫助第一時(shí)間中和外界感染的野毒，對機(jī)體起到保護(hù)作用。但有些豬場在使用該法時(shí)，由于高溫處理不徹底，導(dǎo)致病毒無法徹底被殺滅，這樣飼喂后反而對健康豬進(jìn)行了“接種”，導(dǎo)致群發(fā)性感染。正是因?yàn)槿菀装l(fā)生安全性問題，臨床上我們不鼓勵(lì)使用含病毒的組織自行處理制備“自家苗”。

4 提升黏膜免疫的措施

黏膜免疫對于提升豬群的整體健康水平有顯著作用，尤其是能幫助降低傳染性疾病的發(fā)生率。為了能充分利用好機(jī)體的這一免疫功能，我們可以從以下幾個(gè)方面采取措施進(jìn)行提升。

4.1 科學(xué)、合理、規(guī)范免疫

以黏膜免疫為目的的疫苗接種時(shí)需要掌握一定的技巧。首先，黏膜中的相關(guān)免疫組織通常需要較高數(shù)量的疫苗毒株刺激才能成功完成免疫，故接種時(shí)要求抗原濃度要高，建議飲水免疫時(shí)抗原濃度不低于105cfu/mL，拌料免疫時(shí)不低于106cfu/g，滴鼻免疫時(shí)不低于109cfu/mL，具體可因免疫的抗原類型和毒株差異而定。其次，同樣使用劑量的情況下建議首選集中免疫方式接種，比如將疫苗進(jìn)行拌料使用時(shí)，可用少量料進(jìn)行稀釋，同時(shí)免疫前斷料4～6 h，使豬產(chǎn)生饑餓感，之后再集中喂料，這樣效果要比拌入全天料中稀釋更好。再次，免疫操作務(wù)必熟練，降低免疫過程的損耗，尤其是滴鼻免疫時(shí)，可以在仔豬吸氣時(shí)滴入，相比呼氣時(shí)滴入疫苗進(jìn)入鼻腔內(nèi)更深，同時(shí)也能減少浪費(fèi)。最后，口服免疫盡量空腹，空腹條件下黏膜組織能夠更充分暴露，有利于和疫苗毒株的直接接觸，接受刺激的作用也會更強(qiáng)，免疫效果會更好。

4.2 強(qiáng)化機(jī)體營養(yǎng)均衡

良好的營養(yǎng)是各營養(yǎng)素間的合理搭配，并非某一種成分過多添加，有些豬場盲目相信蛋白類飼料的功能，認(rèn)為飼料中蛋白含量高其營養(yǎng)價(jià)值就大，殊不知蛋白占比過高時(shí)，能量飼料的占比就會下降，機(jī)體獲能最終需要蛋白質(zhì)在肝臟中轉(zhuǎn)化，依靠氨基酸的脫氨基作用將無氮基團(tuán)轉(zhuǎn)變?yōu)槟芰浚鶊F(tuán)最終代謝為尿素經(jīng)腎臟外排，不僅造成蛋白飼料的浪費(fèi)，還會增加肝臟和腎臟負(fù)擔(dān)。另外，過多的蛋白還會提高飼料的成本，降低養(yǎng)殖報(bào)酬，因此，各營養(yǎng)元素間只有做到平衡才最重要。對于黏膜組織來講，與其功能和發(fā)育相關(guān)的營養(yǎng)包括蛋白、脂類、碳水化合物、維生素及礦物微量元素等，均衡的營養(yǎng)是黏膜功能維持的保證，是黏膜免疫的物質(zhì)基礎(chǔ)。

4.3 科學(xué)使用脂溶性維生素

維生素分為脂溶性維生素和水溶性維生素兩種，其中脂溶性包括維生素A、維生素D、維生素E 等，水溶性維生素主要包括B 族維生素和維生素C。相比較而言，脂溶性維生素對黏膜功能和完整性維持更為重要，例如維生素A 缺乏時(shí)，動物黏膜極易受損，完整性變差，角膜會發(fā)生軟化，皮膚也會變得粗糙。維生素E 缺乏時(shí)，黏膜細(xì)胞的抗氧化水平下降，容易受到過氧化氫、黃曲霉毒素等的損傷，從而不利于黏膜免疫反應(yīng)的進(jìn)行。建議規(guī)?；i場除了日糧中正常添加的脂溶性維生素外，建議每周再額外飼喂2～3d 的魚肝油。魚肝油可飲水，可拌料，但建議通過飲水方式集中使用，這樣藥物的生物利用度更高。黏膜的完整性是免疫發(fā)生的基礎(chǔ)條件，對黏膜免疫的發(fā)生和維持有促進(jìn)作用。

4.4 禁止濫用藥物

黏膜免疫是抗原與免疫組織持續(xù)發(fā)生反應(yīng)的過程，濫用藥物能阻止該免疫反應(yīng)的進(jìn)行。比如在飼料中拌入微生態(tài)制劑的同時(shí)又聯(lián)用了抗生素，殊不知抗生素對有害菌能起到抑殺作用，對某些有益菌也能產(chǎn)生抑制和殺滅，導(dǎo)致免疫效果下降。還有些豬場經(jīng)常使用糖皮質(zhì)激素類、非甾體類消炎藥，致使機(jī)體免疫力下降，白細(xì)胞對疫苗株抗原的識別、呈遞和免疫反應(yīng)出現(xiàn)遲鈍，最終導(dǎo)致免疫效果差。如果采用口服免疫法，則要注意飲水中不要使用酸化劑、消毒劑等物質(zhì)，以防對抗原蛋白造成傷害。有些豬場長期在飼料中添加違禁藥物，不但對黏膜直接造成傷害，影響其完整性，還不利于機(jī)體自身免疫的建立，最終導(dǎo)致豬群長期不穩(wěn)定。濫用藥物現(xiàn)象生產(chǎn)中務(wù)必要禁止。

5 討論

黏膜免疫的本質(zhì)是局部免疫，是整個(gè)免疫系統(tǒng)的重要組成部分，同時(shí)又是具有獨(dú)特功能的一個(gè)獨(dú)立體系，在豬的生長發(fā)育過程中承擔(dān)著向宿主提供黏膜防御的功能。由于黏膜屏障對機(jī)體能起到非常重要的保護(hù)作用，故黏膜免疫強(qiáng)的豬受外界病原感染的幾率相對更低，豬群也相對更加平穩(wěn)。黏膜免疫能幫助機(jī)體建立更為完整的免疫屏障，豬場獸醫(yī)人員可結(jié)合本場實(shí)際情況科學(xué)利用這一免疫方式，將疾病發(fā)生率降至最低。