陳 萍 劉 芳 艾惠如 張 利

青島大學(xué)附屬泰安市中心醫(yī)院1. 消化內(nèi)科； 2. 門(mén)診部； 3. 急診科， 山東 泰安 271000

近幾年來(lái)，惡性腫瘤的發(fā)病率呈逐年升高趨勢(shì)，根據(jù)GLOBOCAN 2020 的估計(jì)，全球診斷出近2 億例新癌癥病例，而這些病例中近23.7%發(fā)生在中國(guó)［1］。我國(guó)是世界上最大的發(fā)展中國(guó)家，有著巨大的癌癥負(fù)擔(dān)。過(guò)去35年中，食管癌始終為我國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其具有隱匿性、進(jìn)展快、預(yù)后差及存在地區(qū)差異等特點(diǎn)，其發(fā)病率和死亡率一直居高不下［2-3］。因此，積極預(yù)防和治療食管癌對(duì)改善患者健康水平具有重要意義。近10來(lái)年，雖進(jìn)行了大量的研究和實(shí)踐，但食管癌患者的生存率仍未有明顯的改善。因此越來(lái)越多的學(xué)者開(kāi)始重視食管癌的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制的研究，并據(jù)此尋找更為有效的靶點(diǎn)藥物，以提高食管癌患者的生存率。食管癌患者通常免疫功能低下，加之手術(shù)創(chuàng)傷等，致使術(shù)后患者早期一般不能耐受毒副作用大的化療藥物，從而使得體內(nèi)的癌細(xì)胞迅速生長(zhǎng)、擴(kuò)散。由此可見(jiàn)，食管癌術(shù)后患者應(yīng)使用毒副作用輕且有強(qiáng)抗腫瘤作用的藥物。目前，大多數(shù)研究集中于從自然界中尋找新的化學(xué)藥物。植物化學(xué)物為植物中天然存在的、含量較少的一類具有抗突變、抗癌或其它生理活性的化學(xué)物質(zhì)。抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡是化療藥物的主要作用機(jī)理，腫瘤細(xì)胞的耐藥性也是導(dǎo)致化療失敗的最主要原因，因此尋找具有強(qiáng)抗腫瘤活性，且能提高腫瘤對(duì)化療藥物敏感性的植物化學(xué)物是近期研究的熱點(diǎn)。

棉酚是由棉籽提取的化合物。自20世紀(jì)60年代開(kāi)始研究者發(fā)現(xiàn)棉酚具有抗腫瘤作用。研究表明，棉酚可抑制肺癌、白血病、結(jié)腸癌、胰腺癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、頭頸部腫瘤、腎上腺皮質(zhì)腫瘤等腫瘤細(xì)胞系細(xì)胞的增殖及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，另外可增加耐藥腫瘤細(xì)胞對(duì)化療的敏感性［4］。有許多研究表明，棉酚具有較好的耐受性，對(duì)部分常規(guī)化療失敗的患者可提高療效，但其機(jī)制尚未明確。本團(tuán)隊(duì)既往研究已證實(shí)，單醛棉酚與醋酸棉酚均對(duì)食管癌細(xì)胞系SEG-1 具有抗增殖、阻止細(xì)胞周期的作用［5］。本研究旨在探討棉酚在體內(nèi)的抗癌作用，尋找食管癌防治的新思路和方法。

1 材料與方法

1.1 材料

人食管癌細(xì)胞系SEG-1，由鄭州大學(xué)消化疾病研究所提供。健康SPF 級(jí)BALb/c 雌性裸鼠30 只，濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司提供，體質(zhì)量13 ～18 g。醋酸棉酚、單醛棉酚均由上海譜振生物科技有限公司提供。RPMI1640 培養(yǎng)基，美國(guó)Invitrogen公司。胎牛血清，天津懿陽(yáng)生物制品有限公司。L-谷氨酰胺，北京天根生化科技有限公司。青霉素、鏈霉素，美國(guó)Amresco 公司。臺(tái)盼藍(lán)，美國(guó)Sigma 公司。二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide， DMSO），北京博大泰克公司。75%酒精，山東瑞泰奇洗滌消毒科技有限公司。NaCl， KCl，分析純，南京化學(xué)試劑一廠。磷酸氫二鉀（K2HPO4），磷酸二氫鈉（NaH2PO4），成都曼思特生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 主要溶液制備 PBS 緩沖液：取KCl 0.2 g、NaCl 8.0 g、Na2PO43.49 g、K2HPO40.24 g，加入去離子水，攪拌至完全溶解，調(diào)節(jié)pH值 = 7.4后，定容至1 L，高壓滅菌，4 ℃保存?zhèn)溆?；棉酚：在超凈工作臺(tái)上以無(wú)菌級(jí)DMSO 配成50 μmol/L 儲(chǔ)存液，-20 ℃冷凍保存，每周配制1 次。配好后在含血清的固體培養(yǎng)基中進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)72 h，無(wú)菌生長(zhǎng)方可使用；RPMIl640培養(yǎng)基配制：稱取10.4 g RPMIl640粉末，加入3.7 g NaHCO3， 2 mmol/L L-谷氨酰胺，100 U/mL 青霉素，100 U/mL 鏈霉素，調(diào)整pH 到7.2，加蒸餾水定容至l L，0.22 μm 過(guò)濾除菌，加入經(jīng)滅活處理（56 ℃，30 min）的10%的胎牛血清，4 ℃保存；棉酚配制：每次動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前新鮮配制所有濃度的棉酚，以DMSO溶解后再溶于PBS中，DMSO終濃度為10%。

1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng) 將食管癌細(xì)胞系SEG-1 放在含2 mmol/L L-谷氨酰胺、100 U/mL 青霉素、100 U/mL鏈霉素、10%胎牛血清（fetal bovine serum， FBS）的RPMI l640 培養(yǎng)基中，放在5%CO2、37 ℃、飽和濕度下培養(yǎng)。0.25%的胰蛋白酶消化細(xì)胞傳代，每2 ～ 3天傳代1次，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2.3 食管癌細(xì)胞系SEG-1 細(xì)胞動(dòng)物模型建立取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25%胰蛋白酶消化，收集消化液離心后除去上清液，加入培養(yǎng)液制成細(xì)胞濃度約為1 × 107/mL 懸液待種，用75%酒精消毒裸鼠局部皮膚后，用注射器抽取0.2 mL細(xì)胞懸液注射到每只裸鼠的左前肢腋窩皮下。裸鼠左前肢腋窩長(zhǎng)出腫塊后，將腫塊解剖制成細(xì)胞懸液后進(jìn)行Wright-Giemsa染色觀察腫瘤細(xì)胞的形態(tài)學(xué)。

1.2.4 裸鼠分組方法、給藥方法及觀察指標(biāo) 裸鼠接種癌細(xì)胞72 h后，在小鼠腹腔內(nèi)注射200 μL的醋酸棉酚或單醛棉酚溶液。將30只裸鼠分6組，分別為醋酸棉酚40 mg/kg組、醋酸棉酚60 mg/kg組、單醛棉酚40 mg/kg組、單醛棉酚60 mg/kg組、空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組，各組5 只；醋酸棉酚40 mg/kg 組在接種后第4 天和第6 天注射醋酸棉酚溶液，每天注射劑量為20 mg/kg；醋酸棉酚60 mg/kg 組在接種后4、5、6 天注射醋酸棉酚溶液，每天注射劑量為20 mg/kg；單醛棉酚40 mg/kg組在接種后第4天和第6 天注射單醛棉酚溶液，每天注射劑量為20 mg/kg；單醛棉酚60 mg/kg組在接種后第4、5、6天注射單醛棉酚溶液，每天注射劑量為20 mg/kg?？瞻讓?duì)照組不接種腫瘤及不給藥、陰性對(duì)照組接種SEG-1細(xì)胞，腹腔注射含10%DMSO的PBS。每日觀察裸鼠的活動(dòng)、皮膚變化，記錄給藥前及給藥后每天體質(zhì)量、腫瘤大小，裸鼠死后則記錄其生存時(shí)間，死后12 h 內(nèi)取肝、脾測(cè)肝、脾質(zhì)量。

腫瘤生長(zhǎng)變化：記錄給藥當(dāng)天即0天，每隔1天用游標(biāo)卡尺測(cè)量裸鼠腫瘤最大的長(zhǎng)徑、寬徑、厚徑1次，三徑相互垂直，記錄體積變化。瘤體積計(jì)算方法：腫瘤體積（mm3） = 長(zhǎng)徑 × 寬徑 × 厚徑 × π/6。腫瘤生長(zhǎng)抑制率：［1-（陰性對(duì)照組腫瘤的平均體積在1 g左右時(shí)給藥各組的腫瘤平均質(zhì)量/陰性對(duì)照組腫瘤的平均質(zhì)量）］ × 100%。腫瘤生長(zhǎng)延遲：給藥各組腫瘤重量達(dá)到0.7 g時(shí)的天數(shù)和陰性對(duì)照組達(dá)到相同質(zhì)量的天數(shù)之差。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

選用SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，符合正態(tài)分布數(shù)據(jù)用計(jì)量資料（xˉ ±s）描述，經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)后，多組間比較用LSD 檢驗(yàn)，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α= 0.05。

2 結(jié) 果

2.1 食管癌SEG-1細(xì)胞裸鼠模型的建立

裸鼠在接種前生活狀態(tài)始終正常、食欲旺盛、行動(dòng)自如。皮下接種1 × 107個(gè)SEG-1細(xì)胞后第1天即出現(xiàn)精神萎靡、飲食不振、體毛聳立等癥狀，繼而行動(dòng)遲緩直至死亡。裸鼠在接種細(xì)胞第4天時(shí)皮下出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的明顯腫塊，腫塊逐漸增大，裸鼠存活時(shí)間為（13.0 ± 1.0）d。死亡后解剖發(fā)現(xiàn)腫瘤灶與周圍組織粘連，部分裸鼠腹腔有腹水，肝脾腫大。腫塊解剖后制作成細(xì)胞懸液，染色后于顯微鏡下觀察腫瘤細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與SEG-1細(xì)胞一致。

2.2 病理學(xué)檢查

本研究選取醋酸棉酚40 mg/kg 組代表給藥組腫瘤與陰性對(duì)照組裸鼠的腫瘤標(biāo)本進(jìn)行病理對(duì)照。給藥組腫瘤大小及浸潤(rùn)范圍均小于陰性對(duì)照組，腫瘤分化稍好于陰性對(duì)照組，腫瘤血管形成較陰性對(duì)照組差。

給藥組：與陰性對(duì)照組的腫瘤組織比較，腫瘤細(xì)胞分化較好，腫瘤間質(zhì)組織較豐富，細(xì)胞形態(tài)較一致，細(xì)胞較大，胞漿豐富，病理性核分裂少。腫瘤血管形成差，可見(jiàn)部分細(xì)胞缺血性壞死。腫瘤浸潤(rùn)范圍較小，尚未超過(guò)基底層（圖1）。

圖1 給藥組裸鼠皮下腫瘤的病理表現(xiàn)（HE染色， × 400）

2.3 棉酚在裸鼠體內(nèi)的抗腫瘤活性

各給藥組裸鼠皮下腫塊均出現(xiàn)不同程度的縮小、腫塊生長(zhǎng)速度減慢（圖2A）。腫瘤生長(zhǎng)抑制率：醋酸棉酚40 mg/kg組、醋酸棉酚60 mg/kg組、單醛棉酚40 mg/kg組、單醛棉酚60 mg/kg組分別為14.3%、31.2%、33.7%、32.9%，醋酸棉酚40 mg/kg 組的生長(zhǎng)抑制率明顯低于醋酸棉酚60 mg/kg 組、單醛棉酚40 mg/kg組、單醛棉酚60 mg/kg組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05），醋酸棉酚40 mg/kg 組腫瘤生長(zhǎng)延遲天數(shù)比醋酸棉酚60 mg/kg組、單醛棉酚40 mg/kg組、單醛棉酚60 mg/kg 組少1d，見(jiàn)表1。各組裸鼠接種后腫瘤質(zhì)量、體積變化趨勢(shì)見(jiàn)圖2A和2B。

表1 各給藥組腫瘤生長(zhǎng)抑制率和腫瘤生長(zhǎng)延遲情況比較

圖2 不同劑量醋酸棉酚和單醛棉酚對(duì)接種SEG-1細(xì)胞的裸鼠腫瘤的影響

2.4 棉酚對(duì)接種腫瘤裸鼠肝、脾臟的影響

2.4.1 棉酚對(duì)接種腫瘤裸鼠肝的影響 在接種腫瘤后第10天、死亡時(shí)解剖裸鼠發(fā)現(xiàn)，未接受棉酚干預(yù)的陰性對(duì)照組裸鼠肝臟較正常裸鼠肝臟明顯增重，說(shuō)明SEG-1腫瘤細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生肝轉(zhuǎn)移；給予40 mg/kg醋酸棉酚干預(yù)的接種裸鼠肝臟質(zhì)量明顯低于陰性對(duì)照組；給予60 mg/kg 醋酸棉酚干預(yù)的裸鼠由于存活時(shí)間較短，肝臟質(zhì)量未列入統(tǒng)計(jì)。給予40 mg/kg 或60 mg/kg單醛棉酚干預(yù)的裸鼠肝臟較對(duì)照組并沒(méi)有減輕，說(shuō)明醋酸棉酚除了對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用外，還對(duì)肝臟正常細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用，而單醛棉酚不同劑量對(duì)裸鼠的肝臟并無(wú)明顯影響，見(jiàn)表2和圖3。

表2 不同濃度棉酚對(duì)接種裸鼠肝臟重量的影響

圖3 不同濃度兩種棉酚對(duì)接種腫瘤裸鼠生存期的影響（與對(duì)照組相比，*P ＜ 0.05）

2.4.2 棉酚對(duì)接種腫瘤裸鼠脾的影響 在接種腫瘤后第10 天、死亡時(shí)解剖裸鼠發(fā)現(xiàn)，未接受棉酚干預(yù)的陰性對(duì)照組裸鼠脾臟較正常裸鼠脾臟明顯增重，說(shuō)明SEG-1 腫瘤細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生脾轉(zhuǎn)移。給予40 mg/kg醋酸棉酚干預(yù)的接種裸鼠脾臟質(zhì)量明顯低于陰性對(duì)照組；給予60 mg/kg 醋酸棉酚干預(yù)的裸鼠由于存活時(shí)間較短，脾臟質(zhì)量未列入統(tǒng)計(jì)。而給予40 mg/kg或60 mg/kg單醛棉酚干預(yù)的裸鼠脾臟腫瘤較陰性對(duì)照組雖有降低，但降低程度較小，說(shuō)明醋酸棉酚除了對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用外，還對(duì)脾臟正常細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用，而單醛棉酚不同劑量對(duì)裸鼠的脾臟影響較小，見(jiàn)表3。

表3 不同濃度棉酚對(duì)接種裸鼠脾臟質(zhì)量的影響

2.4.3 棉酚對(duì)接種腫瘤裸鼠生存期的影響 醋酸棉酚40 mg/kg 組裸鼠生存時(shí)間為8 ～ 13 d，平均（8.9 ±1.0）d；醋酸棉酚60 mg/kg組裸鼠生存時(shí)間為6 ～ 11 d，平均（8.2 ± 0.9）d；單醛棉酚40 mg/kg 組裸鼠生存時(shí)間為10 ～ 16 d，平均（12.9 ± 0.6）d；單醛棉酚60 mg/kg組裸鼠生存時(shí)間為10 ～ 15 d，平均（12.3 ± 0.8）d；陰性對(duì)照組裸鼠生存時(shí)間為10 ～ 18 d，平均（13.1 ±1.1）d。醋酸棉酚40 mg/kg組、醋酸棉酚60 mg/kg組裸鼠生存時(shí)間明顯短于陰性對(duì)照組；單醛棉酚40 mg/kg 組、單醛棉酚60 mg/kg 組裸鼠生存時(shí)間與陰性對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)圖4。

圖4 各組的裸鼠接種腫瘤后體重隨時(shí)間的變化

2.4.4 棉酚對(duì)接種裸鼠體質(zhì)量的影響 陰性對(duì)照組裸鼠接種SEG-1細(xì)胞后13 d后體質(zhì)量顯著超過(guò)未接種SEG-1 細(xì)胞的裸鼠。醋酸棉酚40 mg/kg 組、醋酸棉酚60 mg/kg組裸鼠經(jīng)腹腔注射醋酸棉酚后第1天開(kāi)始出現(xiàn)活動(dòng)減少，逐漸消瘦；醋酸棉酚60 mg/kg組裸鼠體質(zhì)量在用藥第5天開(kāi)始顯著低于陰性對(duì)照組，醋酸棉酚40 mg/kg 組裸鼠體質(zhì)量在用藥第6 天開(kāi)始顯著低于陰性對(duì)照組。單醛棉酚40 mg/kg 組、單醛棉酚60 mg/kg 組裸鼠經(jīng)腹腔注射醋酸棉酚后體質(zhì)量變化與陰性對(duì)照組基本一致（見(jiàn)圖4）。

3 討 論

食管癌是全世界最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，我國(guó)發(fā)病和死亡人數(shù)分別占全球的53.7%和55.3%［6］。據(jù)2019 年中國(guó)腫瘤登記年報(bào)結(jié)果顯示，我國(guó)2015食管癌發(fā)病24.6 萬(wàn)，居惡性腫瘤第6 位；死亡18.8萬(wàn)，居惡性腫瘤死亡第4位［7-8］。食管癌好發(fā)于男性人群，其在我國(guó)男性患者死亡率僅次于第1 位的胃癌，而在女性患者中僅次于宮頸癌居第3位，因此該病已成為威脅人們生命健康的重要疾病。手術(shù)治療、放射治療、化學(xué)藥物治療、內(nèi)鏡治療和中醫(yī)藥治療等方法是食管癌目前常用的治療方法。然而，即便近年來(lái)已不斷改善，這些方法的療效仍不完全令人滿意，食管癌仍為預(yù)后較差的惡性腫瘤之一，我國(guó)食管癌患者總體5年生存率僅為29.7%［9］。因此選擇新的抗食管癌藥物，探索新的靶向治療，是目前食管癌治療的熱點(diǎn)問(wèn)題。

化療是腫瘤治療領(lǐng)域中重要的治療手段，然而，傳統(tǒng)的化療藥物往往毒副作用較大，治療期間，腫瘤患者的正常器官組織也會(huì)受到不同程度的損害，故尋找無(wú)毒副作用或較輕毒副作用的藥物已成為腫瘤治療的新熱點(diǎn)。并且我國(guó)食管癌早期發(fā)現(xiàn)率低，確診時(shí)I期患者僅占17%［2］，化療在食管癌的治療中起著重要的作用。近年來(lái)，食管癌的化學(xué)防治多集中于丁酸甘油脂、維生素類、姜黃素、棉酚等藥物，其中棉酚具有抑制多種惡性腫瘤生長(zhǎng)的作用，其部分衍生物由于毒副作用輕微而引起廣大學(xué)者的重視。

目前，有關(guān)棉酚的抗腫瘤作用主要通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)得以證實(shí)，而本實(shí)驗(yàn)則將其作為新藥物進(jìn)行體內(nèi)研究加以證實(shí)該藥的抗腫瘤特性。研究發(fā)現(xiàn)，很多體外實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)的Bcl-2小分子抑制劑具有良好的抗腫瘤特性，但應(yīng)用于臨床試驗(yàn)時(shí)卻不能達(dá)到預(yù)期的療效，其原因是這些藥物在體外實(shí)驗(yàn)所具有的抗腫瘤作用或細(xì)胞毒性作用在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)時(shí)無(wú)法發(fā)揮。為此，本實(shí)驗(yàn)在SEG-1 裸鼠模型中應(yīng)用棉酚干預(yù)，以了解棉酚是否能在裸鼠體內(nèi)發(fā)揮抗腫瘤的特性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，棉酚的2 種衍生物醋酸棉酚和單醛棉酚在食管癌細(xì)胞系SEG-1細(xì)胞裸鼠模型體內(nèi)產(chǎn)生一定的抗腫瘤作用。不同濃度的醋酸棉酚、單醛棉酚均可減小腫塊，其中40 mg/kg 醋酸棉酚的腫瘤抑制率最低，為14.3%，腫瘤生長(zhǎng)延遲2 天，而60 mg/kg 醋酸棉酚為31.2%，40 mg/kg、60 mg/kg 單醛棉酚的腫瘤抑制率分別為33.7%、32.9%，腫瘤生長(zhǎng)延遲均為3 d。另外，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，陰性對(duì)照組的肝脾均較正常增大，提示腫瘤已發(fā)生了肝脾轉(zhuǎn)移；給予醋酸棉酚治療后，裸鼠的肝脾均出現(xiàn)縮小，提示醋酸棉酚可有效地縮小腫大的肝脾，對(duì)轉(zhuǎn)移性腫瘤具有抑制作用。然而醋酸棉酚同時(shí)縮短了裸鼠的生存時(shí)間，表明它雖具有抗腫瘤的特性，但同樣對(duì)正常組織細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用。單醛棉酚則不同，其對(duì)腫瘤組織具有抗增殖作用，同時(shí)對(duì)肝脾正常細(xì)胞毒性作用較小，從而延長(zhǎng)了裸鼠的生存時(shí)間。

傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)證實(shí)，棉酚的治療范圍較窄。它在臨床應(yīng)用中易出現(xiàn)以下毒副作用：①生殖毒性，棉酚具有殺精作用，早期作為男性避孕藥而應(yīng)用于臨床，然而作為抗腫瘤藥物時(shí)，這種殺精作用則成為不良反應(yīng)。②肝臟毒性，應(yīng)用棉酚處理的小鼠肝臟病理可見(jiàn)充血性壞死，其機(jī)制可能與電子傳遞、氧化應(yīng)激、自由基密切相關(guān)［10］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果也證實(shí)了醋酸棉酚對(duì)肝臟具有一定的毒性作用。③心臟毒性，棉酚可引起實(shí)驗(yàn)小鼠呼吸困難、頸靜脈怒張、心律失常等表現(xiàn)，棉酚具有阻止氧化血紅蛋白釋放氧的作用。④低鉀血癥，在棉酚的早期應(yīng)用研究中，研究者們發(fā)現(xiàn)，低鉀血癥是棉酚的一個(gè)較嚴(yán)重的副作用，但近期研究表明，低鉀血癥并非完全是棉酚引起，而與地區(qū)差異、飲食習(xí)慣、營(yíng)養(yǎng)不良等相關(guān)。

棉酚分子結(jié)構(gòu)中存在2 個(gè)活性醛基，這是產(chǎn)生毒性的主要活性結(jié)構(gòu)，通過(guò)阻斷醛基的作用是降低棉酚的毒性有效方法［11］。藥理研究表明，若同時(shí)阻斷棉酚分子結(jié)構(gòu)中的2 個(gè)活性醛基，棉酚就會(huì)失去抗腫瘤活性，若保留1 個(gè)醛基則可使棉酚具有抗腫瘤作用的同時(shí)，毒性也明顯降低［12］。鑒于此，本實(shí)驗(yàn)采用無(wú)活性醛基的醋酸棉酚和有1個(gè)活性醛基的的單醛棉酚做對(duì)照。本動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，醋酸棉酚具有較大的毒性，而同劑量的單醛棉酚則無(wú)明顯毒副作用，故推測(cè)，單醛棉酚較醋酸棉酚更適用于臨床。本實(shí)驗(yàn)觀察到裸鼠的生存期并未得到有效延長(zhǎng)，腫瘤在短期抑制后即會(huì)迅速增長(zhǎng)，提示棉酚在體內(nèi)的作用尚待進(jìn)一步提高。研究表明，血清中的蛋白與棉酚結(jié)合，從而降低棉酚的活性，使其抗腫瘤作用降低［13］。因此，尋找阻斷棉酚與體內(nèi)血清蛋白結(jié)合的方法也是當(dāng)前有關(guān)棉酚研究的一個(gè)熱點(diǎn)。潘奇等［13］研究表明，棉酚聯(lián)合其他化療藥物治療可增強(qiáng)化療的效果，如聯(lián)合CHOP 和棉酚治療淋巴瘤能獲得比單一CHOP 治療更好的效果，因此化療藥物聯(lián)合棉酚對(duì)食管癌的治療也是下一步研究的方向。

綜上所述，棉酚可抑制食管癌裸鼠模型的腫瘤生長(zhǎng)，醋酸棉酚具有明顯的毒性作用，而單醛棉酚有較高的安全性，這為未來(lái)將棉酚應(yīng)用于食管癌的臨床治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。