亢學(xué)平 溫嘉偉 于婭 王鵬 張維東 楊大海 王娜 蔣思佳 張陽(yáng)

摘 要：對(duì)采自長(zhǎng)白山二道地區(qū)的兩株野生松杉靈芝（Ganoderma? tsugae? Murr.）進(jìn)行馴化栽培試驗(yàn)，結(jié)果表明：兩株松杉靈芝菌絲生長(zhǎng)速度快，長(zhǎng)勢(shì)好，菌絲顏色黃色，抗雜能力強(qiáng)；子實(shí)體形成較快，形態(tài)好，適合作為育種材料。

關(guān)鍵詞：松杉靈芝；組織分離；馴化栽培

松杉靈芝（Ganoderma? tsugae? Murr.）是一種名貴的藥材，具有增加免疫力、保肝解毒、改善心血管、抗衰老、美容等功效。隨著人們對(duì)松杉靈芝研究的深入，松杉靈芝的藥用價(jià)值被公眾廣泛認(rèn)知，市場(chǎng)供不應(yīng)求，野生松杉靈芝的產(chǎn)量已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足人們生產(chǎn)和生活需求。因此，開(kāi)展松杉靈芝的仿野生栽培有巨大的市場(chǎng)潛力和社會(huì)效益[1，2]。本研究在對(duì)東北地區(qū)野生食藥用菌資源調(diào)查中發(fā)現(xiàn)兩株松杉靈芝，通過(guò)菌種分離及馴化栽培，成功獲得子實(shí)體，為松杉靈芝育種研究提供基礎(chǔ)材料。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

野生松杉靈芝子實(shí)體于2020年8月，采集自吉林省長(zhǎng)白山二道白河山區(qū)（海拔630～680m），子實(shí)體呈扇形、半圓形，邊緣白色，蓋面中間紅褐色至紫紅色（圖1）。經(jīng)組織分離、提純獲得純菌種，編號(hào)分別為SL1、SL2。

1.2 培養(yǎng)基配方

母種培養(yǎng)基配方：馬鈴薯100g，硬雜木木屑30g分開(kāi)加水煮沸20min，紗布過(guò)濾，混合后的濾液加水定容至1000mL，加入葡萄糖20g，瓊脂粉15g，KH2PO43g，MgSO41.5g。

原種培養(yǎng)基配方：選用闊葉硬雜木木屑83%、麩皮15%、蔗糖1%、生石膏1%，含水量60%。

栽培種配方：選用闊葉硬雜木木屑83%，麩皮15%，石膏1%，蔗糖1%，含水量60%～65%[3]。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 組織分離：將野生松杉靈芝子實(shí)體組織塊放入母種斜面試管培養(yǎng)基上，置于26℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)3～5天后，檢查雜菌污染情況，挑出菌絲生長(zhǎng)致密、健壯的菌絲生長(zhǎng)尖端接種到試管培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得純菌種。

1.3.2 菌種制作：按照1.2的培養(yǎng)基配方，進(jìn)行高壓滅菌，冷卻后進(jìn)行接種，接種溫度22℃～26℃予以培養(yǎng)，接菌后5～7d檢查菌絲萌發(fā)及雜菌污染情況。

1.3.3 出芝管理：將菌包倒放，在其頂端5cm處開(kāi)長(zhǎng)5～8cm，寬1～1.5cm的口。覆蓋塑料薄膜和遮陽(yáng)網(wǎng)，保持棚內(nèi)的空氣濕度為70%～80%，溫度20℃左右均可，經(jīng)10～15d開(kāi)口處出現(xiàn)芝蕾，長(zhǎng)到2～3cm時(shí)，直接向芝蕾表面噴灑霧水，棚內(nèi)濕度可以保持在90%～95%，溫度要求25℃～30℃，散射光，CO2濃度調(diào)節(jié)到0.1%以下。

1.4 測(cè)試指標(biāo)

記錄母種萌發(fā)時(shí)間、菌絲生長(zhǎng)速度、長(zhǎng)勢(shì)、菌絲體顏色、菌種長(zhǎng)滿時(shí)間、菌袋顏色和污染率。

2 結(jié)果分析

2.1 菌絲生長(zhǎng)

將接種后的試管置于培養(yǎng)箱內(nèi)，25℃培養(yǎng)，每隔2天觀察1次，并記錄接種數(shù)量、記錄菌絲長(zhǎng)滿試管的時(shí)間，污染情況，成活率，結(jié)果見(jiàn)表3；觀察菌絲的粗度（粗、較粗、細(xì)）、生長(zhǎng)勢(shì)（強(qiáng)、較強(qiáng)、弱）、疏密程度（密、較密、疏）培養(yǎng)結(jié)果顯示，接種3天后菌種萌發(fā)，在試管中菌絲平均生長(zhǎng)速度為0.8cm/d，原種和栽培種滿瓶和滿袋時(shí)間分別為35天和60天。

2.2 出菇情況

在出菇期間，栽培袋開(kāi)口后3～5天，開(kāi)口處菌絲恢復(fù)，7天后長(zhǎng)出原基，隨著原基膨大，分化形成子實(shí)體。通過(guò)對(duì)子實(shí)體農(nóng)藝性狀觀測(cè)，菌蓋大小和芝體形態(tài)與野生者相似，為扇形；菌蓋表面邊緣顏色淺，向內(nèi)顏色變深；菌孔深褐色。子實(shí)體的形成照片見(jiàn)圖2。3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)采用東北地區(qū)的棚式代料地?cái)[栽培方法及層架式擺放，成功獲得了子實(shí)體。溫室大棚內(nèi)栽培出芝時(shí)發(fā)現(xiàn)，子實(shí)體的形成受溫度和濕度影響較大，溫度23℃～25℃，空氣相對(duì)濕度90%～95%時(shí)，子實(shí)體生長(zhǎng)較快。馴化的松杉靈芝菌株菌絲長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、生長(zhǎng)速度快，生育期短，菌蓋紅褐色，扇形，平均單袋干重高，分別為 35g/袋和33g/袋，為優(yōu)良菌種的選育提供依據(jù)，對(duì)長(zhǎng)白山珍貴種源保護(hù)及開(kāi)發(fā)利用具有重要意義。

參考文獻(xiàn)

[1] 梁秀鳳，龐啟亮，梁延海.松杉靈芝林下栽培技術(shù)[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2017，（7）：96.

[2] 孫巍巍，包海鷹.松杉靈芝提取物體外抗氧化活性的研究[J].中國(guó)食用菌，2010，29（6）：39-41，51.

[3] 胡志強(qiáng)，王鑫，王旭.松杉靈芝母種培養(yǎng)基篩選及菌株對(duì)比試驗(yàn)[J].中國(guó)林副特產(chǎn)，2019，12（6）：36-38.