魏書(shū)洞,孫曉雪,孟 川,趙建軍,馬 衛(wèi),盧 銀
(1.華北作物改良與調(diào)控國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室·河北省蔬菜種質(zhì)創(chuàng)新與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室·河北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院河北保定 071000;2.河北省農(nóng)林科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所 石家莊 050057)
大白菜(Brassica rapaL.ssp.)原產(chǎn)于我國(guó),是蕓薹屬蕓薹種大白菜亞種的2 年生草本植物,是我國(guó)第二大蔬菜作物[1-2]。我國(guó)大白菜種質(zhì)資源十分豐富,截止到2000 年國(guó)家種質(zhì)庫(kù)保存的大白菜種質(zhì)達(dá)1680 份,且仍舊有新的種質(zhì)資源不斷被搜集、引進(jìn)和保存[3]。然而,我國(guó)大白菜種子市場(chǎng)上卻存在嚴(yán)重的同質(zhì)化問(wèn)題,不同公司的許多品種無(wú)論在商品性、產(chǎn)量、生育期還是在抗逆性等方面都存在相同或相似現(xiàn)象。面對(duì)當(dāng)前蔬菜市場(chǎng)上激烈的競(jìng)爭(zhēng)形勢(shì)和人們?nèi)找娑鄻踊南M(fèi)需求,大白菜種質(zhì)創(chuàng)新迫在眉睫。有效利用已保存的多樣化種質(zhì)資源既是種質(zhì)創(chuàng)新的重要途徑,也可為大白菜基礎(chǔ)生物學(xué)研究提供更多有價(jià)值的材料。
種質(zhì)資源又稱遺傳資源,是某一生物種內(nèi)遺傳多樣性的全部,主要包括農(nóng)家種、野生種以及育成品種等[4]。種質(zhì)資源在自然進(jìn)化和人工馴化的長(zhǎng)期選擇中形成,攜帶豐富多樣的表型變異,是育種和生物學(xué)基礎(chǔ)研究不可或缺的重要材料。實(shí)踐證明,育種的許多突破性進(jìn)展往往取決于特殊種質(zhì)資源關(guān)鍵基因或性狀的開(kāi)發(fā)利用[5]。隨著科技的迅猛發(fā)展,多學(xué)科、多領(lǐng)域的先進(jìn)知識(shí)和技術(shù)手段被廣泛應(yīng)用于作物育種和生物學(xué)研究中,表型性狀始終是作物育種和生物學(xué)研究的起點(diǎn)和最終落腳點(diǎn),開(kāi)展表型性狀調(diào)查并利用表型數(shù)據(jù)進(jìn)行遺傳多樣性分析是大白菜種質(zhì)資源高效利用的有效途徑,該方法在玉米、蘿卜、青花椒、甜瓜、茄子等多種作物上均有報(bào)道[6-10]。大白菜中也有相關(guān)研究,孟淑春等[11]、范偉強(qiáng)等[2]、韓睿等[12]分別對(duì)65、33 和47 份大白菜種質(zhì)進(jìn)行了表型性狀調(diào)查和多樣性分析。趙美華等[13]利用表型性狀結(jié)合分子標(biāo)記的方法分析了41份大白菜種質(zhì)的遺傳多樣性。李國(guó)強(qiáng)等[14]對(duì)國(guó)家蔬菜種質(zhì)資源庫(kù)中收集保存的1651 份大白菜種質(zhì)進(jìn)行表型數(shù)據(jù)分析,并篩選獲得了248 份核心種質(zhì)。這些研究報(bào)道為大白菜種質(zhì)資源的表型鑒定提供了參考,但表型性狀的調(diào)查方法多為傳統(tǒng)的觀察和測(cè)量,調(diào)查效率較低,部分重要性狀如面積相關(guān)性狀無(wú)法獲得。隨著科技的發(fā)展,表型數(shù)據(jù)分析軟件、圖像提取和處理軟件、拍照掃描儀器、無(wú)人機(jī)和機(jī)器人等智能化、自動(dòng)化的軟、硬件設(shè)施設(shè)備被逐步開(kāi)發(fā)并應(yīng)用于表型性狀調(diào)查中,大大提高了調(diào)查的效率和準(zhǔn)確性[15-16]。其中,通過(guò)表型圖像汲取性狀數(shù)據(jù)的應(yīng)用較為廣泛,馬曉丹等[17]利用高通量表型平臺(tái)獲取大豆冠層發(fā)育的3D 圖像,Merchuk 等[18]開(kāi)發(fā)的Coverage Tool 軟件可用于從已獲得的植物圖像中提取和分析表型數(shù)據(jù),但該技術(shù)在大白菜表型性狀研究中的應(yīng)用較少,作為重要的葉用蔬菜,大白菜葉片面積、葉片綠葉占比等重要農(nóng)藝性狀尚無(wú)研究報(bào)道。
在當(dāng)前國(guó)內(nèi)大白菜種業(yè)市場(chǎng)同質(zhì)化情況日趨嚴(yán)重的情況下,筆者引進(jìn)了138 份非主栽大白菜種質(zhì)資源,以傳統(tǒng)的調(diào)查測(cè)定結(jié)合創(chuàng)新的圖片分析技術(shù)汲取了32 個(gè)表型性狀數(shù)據(jù)并進(jìn)行分析,豐富了大白菜的表型調(diào)查方法和可調(diào)查性狀,為大白菜新品種選育、種質(zhì)改良與創(chuàng)新提供新的材料和表型數(shù)據(jù)參考,也為大白菜的基礎(chǔ)生物學(xué)研究奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
138 份材料為引自中國(guó)北京、河北和荷蘭三地的農(nóng)家種、原始種、野生種等非主栽種質(zhì)資源,經(jīng)多代自交純化后獲得的純合自交系,其中源自北京的種質(zhì)資源73 份,材料編號(hào)W1-W73;源自荷蘭的種質(zhì)資源11 份,材料編號(hào)W74-W84;源自河北的種質(zhì)資源54 份,材料編號(hào)W85-W138。
試驗(yàn)材料分別于2018 年種植于河北省保定市徐水區(qū)崔莊鎮(zhèn)農(nóng)家田,2021 年種植于石家莊辛集市的華北作物改良與調(diào)控國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室馬蘭試驗(yàn)基地,2022 年種植于河北省保定市的河北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)科教學(xué)實(shí)習(xí)基地,試驗(yàn)數(shù)據(jù)源自三地的調(diào)查結(jié)果。
試驗(yàn)材料播種于32 孔穴盤內(nèi)進(jìn)行育苗,長(zhǎng)至4~5 片真葉時(shí)定植于露地,每份材料定植30 株,每10 株一組,分為3 組,每組均采取完全隨機(jī)排列,株距60 cm、行距50 cm,隨機(jī)選取3 個(gè)長(zhǎng)勢(shì)一致的單株為生物學(xué)重復(fù),進(jìn)行表型性狀調(diào)查。共調(diào)查32個(gè)表型性狀,包括12 個(gè)間斷性性狀和20 個(gè)連續(xù)性性狀,以賦值的形式將間斷性性狀的調(diào)查結(jié)果轉(zhuǎn)化為數(shù)據(jù)。具體的調(diào)查時(shí)期、部位、方法及賦值標(biāo)準(zhǔn)參考國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和已有研究報(bào)道并進(jìn)行補(bǔ)充修改(表1)[19-21]。
表1 大白菜表型性狀調(diào)查部位、賦值標(biāo)準(zhǔn)及調(diào)查方法Table 1 Location,assignment standards,and investigation methods for phenotypic traits of Chinese cabbage
連續(xù)性性狀中,13 個(gè)性狀以先拍照再通過(guò)圖像處理軟件分析照片的方式獲得數(shù)據(jù),拍照在設(shè)有標(biāo)尺的平整黑色背景下以支架固定微單相機(jī)(索尼ICLE-6000L)垂直向下拍攝(圖1),以ImageJ(1.46 r)軟件分析照片汲取相關(guān)性狀的表型數(shù)據(jù);其余7 個(gè)性狀采用直接測(cè)量和人工計(jì)數(shù)法測(cè)定,測(cè)定工具包括直尺、游標(biāo)卡尺和臺(tái)秤。
圖1 不同部位拍攝照片F(xiàn)ig.1 Photos of different parts
利用Microsoft Office Excel(2019)進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)并計(jì)算變幅、平均值、變異系數(shù)、多樣性指數(shù)和均勻度指數(shù);采用系統(tǒng)聚類法以O(shè)rigin(2022)進(jìn)行聚類和典型材料的提取分析;利用IBM SPSS Statistics(26.0)進(jìn)行主成分分析和差異顯著性分析。
由表2 和表3 可以看出,32 個(gè)表型性狀的變異系數(shù)、多樣性指數(shù)和均勻度指數(shù)分別為3.64%~52.82%、0.69~2.09、0.68~1.00,可見(jiàn)供試的138 份大白菜種質(zhì)資源具有豐富的表型變異。通過(guò)比較分析,發(fā)現(xiàn)連續(xù)性性狀較間斷性性狀變異系數(shù)低、多樣性指數(shù)高。
表2 20 個(gè)連續(xù)性性狀的多樣性分析Table 2 Diversity analysis of 20 continuous traits
表3 12 個(gè)間斷性性狀的多樣性分析Table 3 Diversity analysis of 12 intermittent traits
根據(jù)20 個(gè)連續(xù)性性狀多樣性分析結(jié)果(表2),可知變異系數(shù)、多樣性指數(shù)和均勻度指數(shù)分別為3.64%~46.98%、1.98~2.09 和0.86~0.91,均值分別為29.33%、2.05 和0.89,其中葉球截面面積的變異系數(shù)最高,外葉綠葉面積占比的變異系數(shù)最低;外葉主葉脈長(zhǎng)和株高的多樣性指數(shù)最高,外葉綠葉面積占比和葉球截面面積的多樣性指數(shù)最低;20 個(gè)性狀各表型均勻度指數(shù)變化幅度較小。
12 個(gè)間斷性性狀多樣性結(jié)果如表3 所示,變異系數(shù)、多樣性指數(shù)、均勻度指數(shù)分別為31.24%~52.82%、0.69~1.54、0.68~1.00,均值分別為41.07%、1.10、0.86,其中葉色變異系數(shù)最高,葉球頂部形狀的變異系數(shù)最低;葉球形狀的多樣性指數(shù)最高,葉面茸毛和葉面光澤的多樣性指數(shù)最低。138 份材料的7 個(gè)性狀均勻度指數(shù)大于0.85,均勻度較高,5 個(gè)性狀均勻度指數(shù)介于0.68~0.81 之間,具有一定偏好性。偏好性分析發(fā)現(xiàn)葉球形狀有6 種類型,僅有1 份種質(zhì)為炮彈形,編號(hào)W13;葉球內(nèi)葉顏色的4 種類型中,僅1 份種質(zhì)為橘黃色,編號(hào)W26;抱合方式的4 種類型,僅1 份種質(zhì)為擰抱,編號(hào)W34,占比僅為0.72%;葉球頂部形狀的3 種類型中,89 份種質(zhì)為圓頭形,占比高達(dá)64.49%;葉球顏色的4 種類型中87 份種質(zhì)為淺綠色,占比高達(dá)63.04%。
對(duì)中國(guó)北京、河北和荷蘭三地大白菜種質(zhì)資源的表型多樣性進(jìn)行比較,由圖2 可知,三地種質(zhì)的32 個(gè)性狀變異系數(shù)各有不同,除外葉綠葉占比外,其他性狀的變異系數(shù)均高于11.27%,說(shuō)明三地種質(zhì)各性狀均表現(xiàn)為一定的表型多樣性。其中荷蘭種質(zhì)葉緣波狀、外葉綠葉占比、葉球顏色和葉球頂部形狀4 個(gè)性狀的變異系數(shù)高于其他兩地種質(zhì);葉片數(shù)、葉緣鋸齒、外葉主葉脈厚度、株型及凈菜率5 個(gè)性狀介于其他兩地種質(zhì)之間;其余23 個(gè)性狀均低于其他兩地種質(zhì)。三地種質(zhì)各性狀多樣性指數(shù)均較高,其中荷蘭種質(zhì)球葉寬、葉緣波狀和葉球顏色3個(gè)性狀多樣性指數(shù)高于其他兩地種質(zhì);葉緣鋸齒、株型、葉球內(nèi)葉顏色3 個(gè)性狀介于其他兩地種質(zhì)之間;外葉主葉脈面積、株高和球葉面積3 個(gè)性狀與河北種質(zhì)相同但低于北京種質(zhì);葉面茸毛多樣性指數(shù)與其他兩地種質(zhì)相同;其余22 個(gè)性狀均表現(xiàn)為多樣性指數(shù)低于其他兩地(圖3)。
圖3 不同來(lái)源種質(zhì)性狀的多樣性指數(shù)比較Fig.3 Comparison of diversity index of germplasm traits of different sources
連續(xù)性性狀的均值和變幅比較結(jié)果如圖4 所示,3 地種質(zhì)僅葉片數(shù)和凈菜率2 個(gè)性狀無(wú)顯著差異,其余18 個(gè)性狀均存在不同程度的差異。其中荷蘭種質(zhì)的外葉長(zhǎng)、外葉主葉脈長(zhǎng)、外葉主葉脈面積、株高、株展、毛質(zhì)量、球質(zhì)量、球葉長(zhǎng)、球葉寬、球葉面積10 個(gè)性狀顯著大于河北和北京兩地種質(zhì);外葉主葉脈厚度、葉球高度、葉球?qū)挾?、球截面面積4 個(gè)性狀顯著大于河北種質(zhì);外葉寬、外葉面積和外葉主葉脈寬3 個(gè)性狀顯著大于北京種質(zhì);僅外葉綠葉占比1 個(gè)性狀表現(xiàn)為顯著小于北京種質(zhì),與河北種質(zhì)無(wú)顯著差異。荷蘭種質(zhì)雖多數(shù)性狀的均值較大但變幅普遍較小,20 個(gè)性狀變幅均小于北京種質(zhì);與河北種質(zhì)相比,17 個(gè)性狀的變幅較小,僅外葉綠葉占比、毛質(zhì)量和球質(zhì)量3 個(gè)性狀變幅偏大。間斷性性狀分級(jí)頻次比較結(jié)果表明(圖5),中國(guó)北京和河北兩地種質(zhì)不具有明顯的偏好性,而荷蘭種質(zhì)以葉色淺綠,葉球筒形合抱為主。各表型中,3 個(gè)具有特殊表型的種質(zhì)(葉球炮彈形、橘黃色球內(nèi)葉和葉球擰抱)均源自中國(guó)北京。
圖5 不同來(lái)源種質(zhì)間斷性性狀分布頻次比較Fig.5 Comparison of distribution frequency of discontinaous traits of different sources
主成分分析結(jié)果表明(表4),32 個(gè)性狀可歸為10 個(gè)主成分,累計(jì)方差貢獻(xiàn)率為72.70%,可代表這些性狀的絕大部分信息。其中,第1 主成分貢獻(xiàn)率最高,為20.68%,包括葉球的6 個(gè)連續(xù)性性狀;第2主成分貢獻(xiàn)率為12.71%,包括結(jié)球期最大外葉的6個(gè)連續(xù)性性狀;第3 主成分包括株高、株型、抱合方式、葉球形狀、葉球頂部形狀6 個(gè)與株型和球形相關(guān)的性狀;毛質(zhì)量、球質(zhì)量等產(chǎn)量相關(guān)性狀居于第4主成分,其余11 個(gè)性狀分別居于第5 至第10 主成分。
表4 主成分貢獻(xiàn)率Table 4 Contribution rate of principal component
聚類分析結(jié)果見(jiàn)圖6-A,138 份材料分為5 類,分別包括27、37、23、16 和35 份材料,未發(fā)現(xiàn)分類與種質(zhì)來(lái)源地相關(guān)。經(jīng)軟件分析分別提取了5 個(gè)分類的典型種質(zhì),I~V類典型種質(zhì)的編號(hào)分別為W67、W49、W113、W105 和W21,表型特征差異明顯(圖6-B)。
圖6 聚類分析(A)與典型特征材料(B)Fig.6 Cluster analysis(A)and typical characteristic materials(B)
各類材料表型數(shù)據(jù)的差異顯著性分析結(jié)果見(jiàn)表5,類別I的葉片數(shù)、株高、毛質(zhì)量、球質(zhì)量、葉球高度、葉球?qū)挾?、葉球截面面積、球葉長(zhǎng)、球葉寬和球葉面積10 個(gè)植株大小相關(guān)性狀除株高與類別Ⅱ差異不顯著外,其他性狀均表現(xiàn)為顯著變小,可歸納為小株型;類別Ⅱ的外葉長(zhǎng)、外葉寬、外葉面積、外葉主葉脈長(zhǎng)、外葉主葉脈寬、外葉主葉脈面積、株高和株展8 個(gè)外葉相關(guān)性狀,除外葉寬與類別Ⅳ、株高與類別I差異不顯著外,其他性狀均表現(xiàn)為顯著變小,可歸納為小外葉型;類別Ⅲ外葉寬、外葉面積、外葉主葉脈寬、毛質(zhì)量、球質(zhì)量和凈菜率6 個(gè)性狀均表現(xiàn)為最大,可歸納為高產(chǎn)型;類別Ⅳ葉片數(shù)、株展、球葉寬、球葉面積較大但外葉寬和凈菜率卻表現(xiàn)為最小,可歸納為葉球松散型;類別V的外葉長(zhǎng)、外葉面積、外葉主葉脈長(zhǎng)、外葉主葉脈寬、外葉主葉脈面積、外葉主葉脈厚度、株高、株展、葉球高、葉球?qū)挕⑷~球截面面積、球葉長(zhǎng)和球葉寬13 個(gè)性狀均表現(xiàn)為較大,可歸納為大株型。數(shù)據(jù)分析結(jié)果與典型特征材料表型一致。
表5 各類材料表型數(shù)據(jù)的差異顯著性分析Table 5 Difference significance analysis of phenotypic data of various materials
變異系數(shù)體現(xiàn)性狀的變異幅度,多樣性指數(shù)則體現(xiàn)性狀類型的豐富程度,二者均是評(píng)價(jià)作物表型多樣性的重要指標(biāo)。研究表明變異系數(shù)大于10.00%、多樣性指數(shù)大于1.00,可說(shuō)明不同樣本的多樣性豐富[22]。在筆者的研究中變異系數(shù)除外葉綠葉面積占比較小外(3.64%),其他性狀均大于10.00%;多樣性指數(shù)除葉面茸毛、葉光澤和葉球頂部形狀這3 個(gè)間斷性性狀外,其他性狀多樣性指數(shù)均大于1.00,可見(jiàn)引進(jìn)的138 份大白菜種質(zhì)資源具有較豐富的表型多樣性。在筆者的研究中,連續(xù)性性狀和間斷性性狀相比,連續(xù)性性狀的變異系數(shù)低而多樣性指較高,與何偉鋒等[23]、趙玉靖等[24]、羅雙霞等[25]研究結(jié)果一致。分析發(fā)現(xiàn)這與性狀本身的數(shù)值類型有關(guān),連續(xù)性性狀為實(shí)際測(cè)定值,不同材料的測(cè)定數(shù)值各異且數(shù)值間差異小,而間斷性性狀僅有通過(guò)賦值獲得的幾個(gè)有限且跨度較大的數(shù)值,類型少,不同種質(zhì)可能具有相同的數(shù)值,從而表現(xiàn)為連續(xù)性性狀多樣性指數(shù)高,間斷性性狀變異系數(shù)高,因此兩類性狀表型數(shù)據(jù)需要分開(kāi)比較分析,相互之間比較意義不大。均勻度指數(shù)可解析性狀各類型的分布是否均一,在筆者研究的32 個(gè)性狀中,27 個(gè)性狀分布均一,僅5 個(gè)間斷性性狀表現(xiàn)為一定的偏好性,即葉球顏色、葉球內(nèi)葉顏色、抱合方式、葉球形狀和葉球頂部形狀,其中葉球炮彈形、球內(nèi)葉橘黃色和擰抱3 種表型的種質(zhì)僅各有1 份,葉球淺綠色和圓頭2 個(gè)性狀均占比60%以上,這可能與大白菜的自然進(jìn)化和人工選育有關(guān)。筆者所選試材并非各地主栽品種而是源自野生種、農(nóng)家種等,推測(cè)3 個(gè)較少出現(xiàn)的性狀類型非自然演化而來(lái),而是經(jīng)人工選育獲得,在原始種質(zhì)中這些類型較少,如橘黃色球心大白菜是當(dāng)前市場(chǎng)上的熱銷類型,多個(gè)育種單位進(jìn)行了有目的的選育;而大白菜球葉因包裹在外葉中見(jiàn)光少多為淺綠色,抱合緊實(shí)的葉球多呈現(xiàn)圓頭形,較散葉、舒心等類型更耐低溫,進(jìn)而更容易度過(guò)冬天進(jìn)入生殖生長(zhǎng)階段從而繁衍后代,這2 個(gè)性狀是大白菜自然進(jìn)化繁衍的結(jié)果,因此占比較大。在主成分分析中,第1 主成分為葉球相關(guān)的連續(xù)性性狀,可見(jiàn)葉球在大白菜生產(chǎn)和生長(zhǎng)發(fā)育中均為最重要的特征性狀之一;第2 主成分為最大外葉相關(guān)連續(xù)性性狀,外葉為大白菜營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)發(fā)育階段進(jìn)行光合作用的主要功能葉片,與大白菜葉球發(fā)育和產(chǎn)量息息相關(guān),聚類分析結(jié)果也可證實(shí)這一論點(diǎn),類別Ⅱ的小外葉型材料即表現(xiàn)為株高、株展、毛質(zhì)量、球質(zhì)量偏小,而類別Ⅲ的高產(chǎn)型則表現(xiàn)為外葉寬、外葉面積、外葉綠葉占比大。
筆者引入了圖片數(shù)據(jù)提取技術(shù),在葉片及葉球部分的13 個(gè)數(shù)量性狀的測(cè)定中摒棄了傳統(tǒng)測(cè)量方法,大大提高了測(cè)定的精準(zhǔn)性和高效性,增加了外葉面積、外葉主葉脈面積、球葉面積、葉球截面面積和綠葉占比5 個(gè)傳統(tǒng)調(diào)查方法無(wú)法測(cè)定的重要性狀。此外,筆者拍照所選標(biāo)尺為具有幾個(gè)標(biāo)準(zhǔn)色號(hào)的色卡,并以此為基礎(chǔ),利用MATLAB 軟件分析圖片,成功提取了葉色、葉球顏色和球內(nèi)葉顏色3 個(gè)性狀的RGB、HSV、LAB 值,已有研究將葉片RGB參數(shù)用于預(yù)測(cè)葉綠素含量,但是如何將這些成組的數(shù)據(jù)應(yīng)用于評(píng)價(jià)大白菜葉色性狀中,仍有待深入研究[26]。隨著后基因組時(shí)代的快速發(fā)展,“表型組”成為生物學(xué)研究的下一個(gè)戰(zhàn)略高點(diǎn),“表型組+基因組”、“表型組+大數(shù)據(jù)”、“表型組+人工智能”成為未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì),更多能解決表型調(diào)查中實(shí)際問(wèn)題的硬件設(shè)備和軟件技術(shù)將不斷得到研發(fā)和應(yīng)用。
綜上所述,筆者引進(jìn)的138 份國(guó)內(nèi)外的大白菜種質(zhì)具有豐富的表型多樣性,對(duì)不同來(lái)源地的種質(zhì)表型進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)荷蘭引進(jìn)種質(zhì)特色鮮明,以葉色淺綠、葉球筒形合抱為主,北京和河北兩地種質(zhì)表型呈現(xiàn)多樣化,引進(jìn)種質(zhì)和本試驗(yàn)表型數(shù)據(jù)可進(jìn)一步應(yīng)用于大白菜種質(zhì)創(chuàng)新和基礎(chǔ)生物學(xué)研究中。在大白菜的32 個(gè)表型性狀中,葉球相關(guān)性狀是可用于評(píng)價(jià)、區(qū)分描述不同類型大白菜的關(guān)鍵農(nóng)藝性狀,而外葉(非產(chǎn)品葉片)相關(guān)性狀可影響大白菜的葉球發(fā)育和產(chǎn)量,是大白菜育種中的重要性狀因子。