＊黃媛媛 高平 王秀橋 趙煜

（湛江市食品藥品檢驗(yàn)所 廣東 524022）

皮膚美白的定義是使用天然或合成產(chǎn)品來淡化膚色，或通過減少皮膚中的黑色素含量來提供均勻的皮膚膚色，從而幫助人們治療皮膚問題，如痤瘡疤痕、老年斑、雀斑和黃褐斑等。人的膚色主要起決定性作用的是黑色素，黑色素在黑素細(xì)胞中合成，黑素細(xì)胞能產(chǎn)生兩種黑色素即真黑素和褐黑素，這兩種色素以不同的比例混合能使皮膚呈現(xiàn)不同的顏色。

1.黑色素形成機(jī)理

黑色素的形成是一個(gè)復(fù)雜的途徑，它的產(chǎn)生是機(jī)體的一種自我保護(hù)機(jī)制，能保護(hù)皮膚免受紫外線損傷。目前，公認(rèn)的黑色素形成機(jī)理是在酪氨酸酶的作用下，酪氨酸逐步生成多巴醌，多巴醌又自動(dòng)氧化生成多巴和多巴色素，隨后多巴色素在多巴色素互變酶的作用下，生成5,6-二羥基吲哚羧酸和5,6-二羥基吲哚，最后經(jīng)過一系列氧化反應(yīng)生成真黑素。當(dāng)存在谷胱甘肽或半胱氨酸時(shí)，多巴醌會(huì)轉(zhuǎn)變成谷胱甘肽多巴和半胱氨酰多巴，最后轉(zhuǎn)化并聚合成褐黑素。

2.祛斑美白機(jī)制

對(duì)于皮膚美白，大多數(shù)研究集中在抑制黑素細(xì)胞成熟或干擾黑色素形成的信號(hào)通路。酪氨酸酶主要參與黑色素合成的最初限速反應(yīng)，是黑色素合成途徑中的關(guān)鍵酶[1]，因此，是抑制黑色素產(chǎn)生的主要靶點(diǎn)。市場(chǎng)上的美白類化妝品大部分是酪氨酸酶抑制劑。此外，使用有還原作用的成分將黑色素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o色前體物質(zhì)或使用化學(xué)剝離劑加速黑色素代謝，也能達(dá)到美白的效果。

3.幾種常見祛斑美白功效成分及其安全性

（1）熊果苷（ARB）及其衍生物。熊果苷（ARB）是一種天然的糖苷類物質(zhì)，它存在于小麥、小紅莓和藍(lán)莓等多種植物中，其功效成分為熊果苷，包括α-熊果苷、β-熊果苷兩種異構(gòu)體。熊果苷的兩種異構(gòu)體屬于酪氨酸酶抑制劑，它能與其重要的銅離子絡(luò)合，從而抑制酪氨酸酶活性，干擾黑色素生成，是治療色素沉著障礙的有效藥。

熊果苷（ARB）結(jié)構(gòu)與氫醌（HQ）類似，其療效低于氫醌（HQ），但它與氫醌（HQ）相比，對(duì)黑素細(xì)胞產(chǎn)生的毒性更少，因此是氫醌（HQ）的優(yōu)良替代品。研究表明，在紫外線照射以及低pH等情況下，熊果苷可能會(huì)通過人表皮微生物或葡萄糖苷酶轉(zhuǎn)變成為氫醌（HQ）[2]。因此，熊果苷的安全性一直備受關(guān)注。2023年2月，歐盟消費(fèi)者安全科學(xué)委員會(huì)（SCCS）發(fā)布關(guān)于α-熊果苷和β-熊果苷在化妝品中的安全性最終意見，意見結(jié)果顯示，α-熊果苷（面霜≤2%，身體乳液≤0.5%）和β-熊果苷（面霜≤7%）的總暴露量被認(rèn)為是安全的。

（2）曲酸及其衍生物。曲酸是一種有機(jī)酸，主要由青霉屬和曲霉屬等多種真菌發(fā)酵而來，是祛斑美白類化妝品中目前研究最多的酪氨酸酶抑制劑。酪氨酸酶的活性部位含有銅離子，當(dāng)紫外線照射時(shí)，銅離子能激活酪氨酸酶，由于曲酸能夠和金屬離子形成螯合物，所以它能捕獲銅離子，阻止銅離子的激活作用，進(jìn)而抑制酶的活性，防止黑色素產(chǎn)生[3]。

2017年，世界衛(wèi)生組織國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)將曲酸列為第3類致癌物質(zhì)。由此引起了對(duì)曲酸安全性的極大關(guān)注。歐盟SCCS于2022年3月17日發(fā)布的關(guān)于曲酸的評(píng)估報(bào)告中得到的結(jié)論為：考慮到曲酸可能存在的內(nèi)分泌干擾特性，此前允許使用的最大含量為1%的曲酸用于化妝品是不安全的，最高含量為0.7%時(shí)對(duì)消費(fèi)者是安全的。其評(píng)估顯示，當(dāng)曲酸的含量大于1%時(shí)，可能會(huì)致敏，引起接觸性皮炎等不良反應(yīng)，并且含量過高時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性。此外，曲酸性質(zhì)不穩(wěn)定，易被空氣氧化且對(duì)光和熱敏感，因此，化妝品中多使用合成的曲酸衍生物，與曲酸相比，其衍生物穩(wěn)定性更好，毒性也更低。

（3）維生素C及其衍生物。維生素C又稱為抗壞血酸，是一種水溶性維生素，廣泛存在于各種新鮮蔬菜和水果中。維生素C是一種強(qiáng)還原劑，具有抗氧化作用。其美白原理在于一方面能直接抑制酪氨酸酶活性來減少黑色素合成，另一方面因其具有還原性，所以能將多巴醌還原為多巴并阻止多巴氧化為多巴醌。由于維生素C的水溶特性，它無法穿透完整的角質(zhì)層屏障發(fā)揮作用，并且維生素C不穩(wěn)定，易氧化，因此祛斑美白產(chǎn)品中主要使用各種衍生物，如抗壞血酸磷酸鎂和抗壞血酸棕櫚酸酯等，其穩(wěn)定性更高并且能更好地進(jìn)入皮膚發(fā)揮美白功效。盡管維生素C的安全性較好，但當(dāng)含量過高時(shí)也可能會(huì)產(chǎn)生一定的細(xì)胞毒性。

（4）煙酰胺。煙酰胺是一種水溶性煙酸酰胺，它是維生素B3的兩種主要形式之一，其結(jié)構(gòu)由帶有酰胺基團(tuán)的吡啶環(huán)組成。煙酰胺已被證實(shí)可以治療幾乎所有皮膚病，如衰老、色素沉著、痤瘡、牛皮癬、瘙癢、皮炎、真菌感染、表皮黃褐斑、非黑色素瘤皮膚癌等[4]。它可減輕紫外線誘導(dǎo)的表皮黑素細(xì)胞DNA損傷，并通過降低酪氨酸酶活性和黑素體從黑素細(xì)胞向角質(zhì)形成細(xì)胞的轉(zhuǎn)移來達(dá)到皮膚美白的效果。

有研究表明，參與黑色素生成的信號(hào)通路是煙酰胺核苷酸轉(zhuǎn)氫酶（NNT），控制的酪氨酸酶活性直接調(diào)節(jié)。其能通過細(xì)胞氧化還原變化誘導(dǎo)的酪氨酸酶降解來減少黑色素生成。Park等[5]就研究了煙酰胺、維生素C和聚脫氧核糖核苷酸（PDRN）的混合物能通過增加NNT表達(dá)來減少線粒體氧化應(yīng)激，并通過降解酪氨酸酶等來減少黑色素生成。除此之外，Shariff等[6]研究了4-己基間苯二酚（4-HR）和煙酰胺這一組合物，結(jié)果表明4-HR和煙酰胺的混合使用具有使皮膚變白和抗衰老的功效，這比單獨(dú)使用煙酰胺效果更好，這可能是4-HR的抗酪氨酸酶活性和煙酰胺對(duì)黑素體轉(zhuǎn)移的抑制作用，從而減少了色素沉著。盡管煙酰胺是一種非常安全的化妝品成分，但其原料中的雜質(zhì)煙酸可能會(huì)導(dǎo)致皮膚發(fā)紅過敏，從而出現(xiàn)煙酰胺不耐受問題，并且高含量的煙酰胺會(huì)引起皮膚干燥和灼燒感，同時(shí)不易被皮膚所吸收。

（5）果酸。果酸（AHAs）的化學(xué)結(jié)構(gòu)為α-羥基酸，包括蘋果酸、檸檬酸、乳酸、酒石酸、丙酮酸、葡萄糖酸、羥基乙酸等，因其存在于水果提取物中，故統(tǒng)稱果酸。果酸分子量較小，水溶性和滲透力較強(qiáng)。酸能夠加強(qiáng)皮膚的角質(zhì)代謝，促進(jìn)角質(zhì)層脫落，與此同時(shí)黑色素也隨角質(zhì)層脫落，因而具有美白淡斑的效果。但當(dāng)果酸濃度高時(shí)，會(huì)產(chǎn)生皮膚紅斑、鱗屑、瘙癢和刺痛等副作用，并且還會(huì)使我們的皮膚對(duì)紫外線更加敏感。根據(jù)美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）研究顯示，若持續(xù)使用果酸含量達(dá)10%，pH值為3.5的護(hù)膚品，4周之后，皮膚的抗紫外線能力減少18%。美國(guó)化妝品原料評(píng)價(jià)委員會(huì)（CIR）也對(duì)AHAs進(jìn)行了安全性評(píng)估，并建議果酸含量應(yīng)不超過10%限值，配方的最終pH值應(yīng)不低于3.5。

（6）甘草提取物。隨著人們對(duì)天然植物提取物的護(hù)膚功效成分的研究與天然純凈的護(hù)膚理念的盛行，甘草提取物等天然來源的化妝品原料逐漸成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)之一。

甘草是豆科植物烏拉爾甘草、光果甘草和脹果甘草的干燥根和根莖。甘草提取物中含有光甘草定、甘草黃酮以及甘草酸等成分，各種成分的功效倚重有所不同。其中光甘草定與酪氨酸酶結(jié)合力最強(qiáng)，能夠通過競(jìng)爭(zhēng)性抑制酪氨酸酶的活性而起到美白作用。光果甘草美白效果好，溫和不刺激，無需建立耐受。但光果甘草來源少，萃取量小，因此含有光果甘草的產(chǎn)品價(jià)格都會(huì)較高，所以光果甘草提取物也被稱為“美白黃金”。

4.幾種常見祛斑美白功效成分檢測(cè)

（1）熊果苷?，F(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于熊果苷的檢測(cè)方法主要有：SN/T 1475—2004《化妝品中熊果苷的檢測(cè)方法液相色譜法》[7]、QB/T 4953—2016《化妝品用原料熊果苷（β-熊果苷）》[8]和GB/T 35954—2018《化妝品中10種美白祛斑劑的測(cè)定高效液相色譜法》[9]，均采用液相色譜法測(cè)定。李烏云塔娜等[10]就研究了采用膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜法對(duì)化妝品中熊果苷等四種美白成分進(jìn)行測(cè)定，其線性范圍為12.5～2000μg/g，加標(biāo)回收率為96%～112%。簡(jiǎn)龍海等[11]采用親水作用液相色譜法同時(shí)測(cè)定化妝品中α-熊果苷和β-熊果苷的含量，線性范圍為2～2000ng/mL（r＞0.999），平均回收率為91.5%～96.5%。

（2）曲酸及其衍生物。對(duì)于曲酸及其衍生物的測(cè)定，常采用液相色譜法，如現(xiàn)有檢測(cè)方法GB/T 29662—2013《化妝品中曲酸、曲酸二棕櫚酸酯的測(cè)定 高效液相色譜法》[12]。余詩(shī)雨等[13]對(duì)不同類型的色譜柱進(jìn)行分離優(yōu)化，建立了反相高效液相色譜高效分離曲酸的方法。線性范圍0.1～10.0mg·L-1，加標(biāo)回收率為93.89%～119.11%。錢疆等[14]建立了高效液相色譜-電化學(xué)安培檢測(cè)食品或化妝品中曲酸的新方法，其線形范圍為0.2ng～2μg，回收率為86%～91%。Cala?a等[15]建立了同時(shí)測(cè)定美白化妝品中曲酸和氫醌的電化學(xué)分析方法，曲酸的線性范圍為3.5×10-5～2.5×10-4mol·L-1（R=0.9996），方法回收率在96%～103%之間，線性關(guān)系良好、靈敏度高。

（3）其他。煙酰胺，維生素C及其衍生物以及甘草酸相關(guān)提取物等也是祛斑美白類化妝品中常檢測(cè)的功效成分，近些年的研究主要在于多種功效組分的同時(shí)分析測(cè)定。鄒孝等[16]建立UPLC-MS/MS（液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜）快速檢測(cè)化妝品中煙酰胺、曲酸、抗壞血酸磷酸酯鎂以及熊果苷等七種祛斑美白功效成分含量的方法。結(jié)果表明，7種功效成分在3min內(nèi)實(shí)現(xiàn)分離，線性關(guān)系良好（R＞0.999），檢出限為0.10～0.75mg/L，加標(biāo)回收率為78.84%～104.85%。陳思敏等[17]采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定了化妝品中維生素C磷酸酯鎂、β-熊果苷以及氫醌等19種祛斑美白功效成分的含量。目標(biāo)物的線性范圍為1.0～10mg/L，回收率為91.7%～107.0%。高俊飛等[18]建立了快速測(cè)定11種植物祛斑美白功效成分的超高效液相檢測(cè)方法，在濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，具有較高的重現(xiàn)性和耐用性。

5.總結(jié)與展望

市面上祛斑美白產(chǎn)品所用的功效成分大多為酪氨酸酶抑制劑，雖然效果較好，但也都有其特定的缺點(diǎn)，故研究開發(fā)會(huì)傾向于相關(guān)的衍生物來獲得更好的穩(wěn)定性或皮膚滲透性；另外，鑒于單一美白成分很難達(dá)到理想效果，開發(fā)兩種及以上的功效成分復(fù)配更是逐漸成為了研究趨勢(shì)。與此同時(shí)，有著天然純凈護(hù)膚理念的植物類祛斑美白產(chǎn)品也逐漸成為當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。目前，祛斑美白成分的常用檢測(cè)方法包括高效液相色譜法、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法、高效液相色譜法定量結(jié)合液質(zhì)聯(lián)用法定性的檢測(cè)方法等?；陟畎呙腊桩a(chǎn)品市場(chǎng)的快速發(fā)展，建立快速、高效的祛斑美白多組分同時(shí)檢測(cè)分析方法，對(duì)祛斑美白類化妝品的市場(chǎng)監(jiān)管乃至化妝品產(chǎn)品品質(zhì)安全均具有重要的意義。