魏僖僖

（福建省建甌市立醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建 建甌 353100）

乙型肝炎是全球關(guān)注的重要健康問(wèn)題，是導(dǎo)致肝硬化、肝細(xì)胞癌的主要原因[1]。其中乙型肝炎肝硬化是其重要的臨床結(jié)局，隨著疾病進(jìn)展，原發(fā)性肝癌是肝硬化最嚴(yán)重的并發(fā)癥。而加強(qiáng)乙型肝炎肝硬化的診治研究，對(duì)促進(jìn)患者靶向治療、改善其預(yù)后有重要意義?，F(xiàn)代免疫學(xué)認(rèn)為，免疫功能與多種肝臟疾病的發(fā)生、演變、進(jìn)展密切相關(guān)，免疫球蛋白是判定機(jī)體體液免疫功能的重要指標(biāo)，具有調(diào)控機(jī)體免疫功能狀態(tài)的作用[2-3]。自身抗體是指自身組織細(xì)胞成分的抗體，包括核酸、蛋白、功能細(xì)胞組件等，是反映自身免疫性疾病的重要指標(biāo)[4]。而也有研究發(fā)現(xiàn)[5]，自身抗體不僅在自身免疫性肝病中呈異常表達(dá)，在乙型肝炎、丙型肝炎等肝臟疾病中也可出現(xiàn)，因此自身抗體與肝臟損害及慢性疾病進(jìn)展有關(guān)?；诖?，本文分析免疫球蛋白和自身抗體在乙型肝炎肝硬化發(fā)病和進(jìn)展中的表達(dá)及與預(yù)后的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取福建省建甌市立醫(yī)院在2021年1月至2022年1月期間收治的乙型肝炎肝硬化患者、乙型肝炎患者和健康體檢者。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①乙型肝炎組、肝硬化組乙型肝炎患者均符合乙型肝炎[6]、乙型肝炎肝硬化[7]診斷標(biāo)準(zhǔn)。②近期未服用免疫抑制或凝血、抗炎等藥物。③入組對(duì)象精神狀態(tài)良好，認(rèn)知清晰。④對(duì)本試驗(yàn)知情，并簽訂同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①因病毒、藥物等導(dǎo)致的肝硬化。②酗酒、吸毒、藥物成癮史者。③有免疫缺陷、惡性腫瘤及傳染性疾病者。④合并心、腦、肺、腎等臟器疾病者。⑤近期有手術(shù)、外傷及感染史者。⑥處于妊娠或哺乳階段的女性。

1.2 方法 收取120例患者，40例乙型肝炎肝硬化患者為肝硬化組；40例乙型肝炎患者為乙型肝炎組；40名健康體檢者為對(duì)照組。收集三組患者性別、年齡、病程、肝功能Chlid-Pugh分級(jí)等一般資料。

三組對(duì)象均在清晨采集空腹靜脈血5 ml，先對(duì)血清樣本進(jìn)行離心處理，離心15 min，3 500 r/min，離心半徑為8 cm。留取上層清液，采用免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白（Ig）A、IgG、IGM水平，試劑盒由北京九強(qiáng)生物科技有限公司產(chǎn)。自身抗體檢測(cè)：采用免疫印跡法檢測(cè)，包括熒光核型：胞漿顆粒型、著絲點(diǎn)型、核顆粒型及核周型；德國(guó)歐蒙抗核抗體（ANA）：抗線粒體抗體M2亞型（AMA-M2）、抗Ro-52抗體、抗著絲點(diǎn)抗體（ACA），根據(jù)抗核抗體譜磨條顏色深淺盤(pán)點(diǎn)陽(yáng)性結(jié)果，當(dāng)見(jiàn)特異性熒光即為陽(yáng)性。

對(duì)肝硬化組患者予以12個(gè)月隨訪，將出現(xiàn)消化道出血、肝性腦病等并發(fā)癥者歸于預(yù)后不良組，其余為預(yù)后良好組，比較兩組患者各項(xiàng)指標(biāo)差異。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較三組對(duì)象IgA、IgG、IgM水平。②比較三組對(duì)象自身抗體陽(yáng)性檢出率，包括胞漿顆粒型、著絲點(diǎn)型、核顆粒型、核周型、AMA-M2、抗Ro-52抗體、ACA。③比較肝硬化組患者預(yù)后不良組與預(yù)后良好組，比較兩組患者IgA、IgG、IgM水平及自身抗體陽(yáng)性檢出率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件。計(jì)量資料經(jīng)±s表示，兩組、三組分別用t、F檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，應(yīng)用χ2檢驗(yàn)；免疫球蛋白、自身抗體與預(yù)后的相關(guān)性采用Spearman相關(guān)性分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組一般資料對(duì)比 肝硬化組40例，男23例，女17例；年齡范圍45～76歲，平均年齡（62.38±4.15）歲；病程1～8年，平均（3.82±0.42）年；肝功能Chlid-Pugh分級(jí)：A級(jí)10例，B級(jí)18例，C級(jí)12例；乙型肝炎組40例，男25例，女15例；年齡范圍45～75歲，平均（63.04±4.24）歲；病程1～8年，平均（4.01±0.48）年；肝功能Chlid-Pugh分級(jí)：A級(jí)8例，B級(jí)22例，C級(jí)10例；對(duì)照組40名，男22名，女18名；年齡45～76歲，平均（64.18±4.35）歲；三組基線資料比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），可比較。

2.2 三組免疫球蛋白含量對(duì)比 與對(duì)照組相比，肝硬化、乙型肝炎組的免疫功能均發(fā)生改變，且肝硬化組IgA、IgG含量升高明顯（P＜0.05），但三組IgM水平比較無(wú)差異（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

2.3 三組自身抗體檢測(cè)結(jié)果對(duì)比 肝硬化組自身抗體檢測(cè)陽(yáng)性率明顯高于乙型肝炎組、對(duì)照組（P＜0.05），而乙型肝炎組與對(duì)照組的自身抗體檢測(cè)陽(yáng)性率比較無(wú)明顯差異（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表2 三組自身抗體陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果對(duì)比[例（%）]

表3-1 比較預(yù)后差異兩組免疫球蛋白水平（g/L）

表3-2 比較預(yù)后差異兩組自身抗體陽(yáng)性率檢測(cè)結(jié)果[例（%）]

2.4 比較不同預(yù)后兩組免疫球蛋白及自身抗體差異 隨訪12個(gè)月，肝硬化組患者出現(xiàn)預(yù)后不良12例，預(yù)后良好28例，預(yù)后不良組IgA、IgG水平及自身抗體檢出陽(yáng)性率均高于良好組（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

2.5 相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)性分析，IgA、IgG、胞漿顆粒型、著絲點(diǎn)型、核顆粒型、核周型、AMA-M2、抗Ro-52抗體、ACA與肝硬化患者的不良預(yù)后呈正相關(guān)性（r＝0.721，0.682，0.712，0.690，0.704，0.684，0.672，均P＜0.05）。

3 討論

當(dāng)前，慢性乙型肝炎無(wú)特異性根治方法，抗病毒藥物多是抑制病毒復(fù)制，但無(wú)法徹底清除病毒。而慢性乙型肝炎進(jìn)展至肝硬化的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制尚未明確，多認(rèn)為是乙型肝炎病毒（HBV）并不能直接殺傷肝細(xì)胞，多是在感染病毒后導(dǎo)致機(jī)體免疫功能障礙，以及人體為了清除病毒感染而誘發(fā)的免疫損傷，最終導(dǎo)致患者肝細(xì)胞破壞及肝臟炎癥反應(yīng)，最后發(fā)展至肝硬化形成[8]。因此免疫功能與乙型肝炎肝硬化的發(fā)生、演變及進(jìn)展關(guān)系緊密。根據(jù)免疫功能變化，可有效評(píng)估患者肝臟功能，對(duì)評(píng)價(jià)患者預(yù)后有重要意義。

體液免疫系統(tǒng)包括抗體及補(bǔ)體，其中免疫球蛋白是反映體內(nèi)免疫系統(tǒng)的重要指標(biāo)，主要由漿細(xì)胞合成及分泌，并與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合后形成的糖蛋白，在人體抗感染免疫系統(tǒng)中起到重要防御功能[9]。免疫球蛋白具有抗菌、加強(qiáng)細(xì)胞吞噬能力、抗病毒等作用，并能在補(bǔ)體的輔助作用下殺死病原體。IgA、IgG、IgM在機(jī)體內(nèi)含量最高，本研究發(fā)現(xiàn)，肝硬化、乙型肝炎組IgA、IgG含量均高于對(duì)照組，且肝硬化組IgA、IgG含量均高于乙型肝炎組（P＜0.05）。其中肝硬化患者隨訪12個(gè)月，預(yù)后不良組IgA、IgG含量高于良好組（P＜0.05）。說(shuō)明根據(jù)免疫球蛋白水平能夠評(píng)價(jià)慢性乙型肝炎患者病情，評(píng)估肝硬化患者預(yù)后結(jié)局。分析原因：IgA在血液內(nèi)的含量略微低于IgG，其代謝速度快、半衰期短，維持著人體重要的免疫防御作用[10]。IgG在血液內(nèi)含量最高，是免疫應(yīng)答的主要抗體，可活化補(bǔ)體，發(fā)揮調(diào)理素，促進(jìn)吞噬細(xì)胞對(duì)病原體的吞噬作用[11]。IgM在血液內(nèi)的含量較低，在早期感染中發(fā)揮著免疫防御作用。由于乙型肝炎肝硬化患者通常存在異常免疫應(yīng)答，受自身特異性抗原刺激，機(jī)體清除病毒感染，進(jìn)而會(huì)誘發(fā)免疫損傷，導(dǎo)致IgA、IgG含量急劇升高[12]。而三組IgM含量比較無(wú)明顯差異，可能是IgM是脾臟的最大生產(chǎn)器官，且在感染早期可能會(huì)出現(xiàn)異常表達(dá)，而在肝硬化及慢性疾病期的表達(dá)并不明顯，故需要進(jìn)一步論證。

自身免疫是機(jī)體正常的生理功能，自身免疫過(guò)度則會(huì)誘發(fā)自身免疫性疾病。有研究指出[13]，病毒感染與自身免疫疾病密切相關(guān)，當(dāng)機(jī)體誘發(fā)病毒感染后，會(huì)誘發(fā)過(guò)度的自身免疫活性，導(dǎo)致自身免疫性疾病的出現(xiàn)。當(dāng)機(jī)體感染HBV病毒后，誘發(fā)自身免疫損傷及肝細(xì)胞損傷，引起肝臟疾病慢性進(jìn)展；同時(shí)可能會(huì)激發(fā)體內(nèi)自身抗體的產(chǎn)生，導(dǎo)致相應(yīng)的免疫應(yīng)答及免疫病理反應(yīng)，損傷肝細(xì)胞，導(dǎo)致疾病進(jìn)展[14]。本研究發(fā)現(xiàn)，肝硬化組自身抗體胞漿顆粒型、著絲點(diǎn)型、核顆粒型、核周型、AMA-M2、抗Ro-52抗體、ACA檢測(cè)陽(yáng)性率高于乙型肝炎組、對(duì)照組，且肝硬化預(yù)后不良組自身抗體檢出陽(yáng)性均高于良好組（P＜0.05）。據(jù)馮婧等[15]學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性膽汁性肝硬化患者自身抗體檢出陽(yáng)性率高于對(duì)照的健康組。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，乙型肝炎肝硬化患者均發(fā)生自身免疫損傷，且與肝細(xì)胞損傷密切相關(guān)，隨著疾病進(jìn)展，預(yù)后越差，自身抗體陽(yáng)性率越高?？赡苁荋BV病毒感染后會(huì)誘發(fā)自身抗原修飾，進(jìn)而激發(fā)自身免疫；同時(shí)會(huì)導(dǎo)致自身免疫系統(tǒng)紊亂，長(zhǎng)期自身免疫紊亂會(huì)致肝細(xì)胞硬變及癌變，加重肝臟損害，促進(jìn)疾病進(jìn)展，致患者預(yù)后差。

本研究發(fā)現(xiàn)，Spearman相關(guān)性分析，IgA、IgG、胞漿顆粒型、著絲點(diǎn)型、核顆粒型、核周型、AMA-M2、抗Ro-52抗體、ACA陽(yáng)性檢出率與肝硬化患者不良預(yù)后呈正相關(guān)性。通過(guò)對(duì)乙型肝炎肝硬化患者進(jìn)行免疫球蛋白及自身抗體的檢測(cè)，可發(fā)現(xiàn)患者免疫防御機(jī)制異常及自身免疫系統(tǒng)紊亂，而根據(jù)免疫功能評(píng)價(jià)可在一定程度上評(píng)價(jià)患者預(yù)后結(jié)局，對(duì)肝臟疾病患者病理狀態(tài)、損傷程度有重要意義。

綜上所述，當(dāng)乙型肝炎患者進(jìn)展至肝硬化后，IgA、IgG水平明顯升高，自身抗體陽(yáng)性檢出率增加，伴有明顯的免疫系統(tǒng)損傷及自身抗體異常，能夠預(yù)測(cè)患者預(yù)后結(jié)局。因此，監(jiān)測(cè)患者免疫功能改變可為評(píng)估疾病預(yù)后及臨床治療提供依據(jù)。但本研究尚有不足，樣本量少、研究時(shí)間短，使研究結(jié)果存在偏倚，故需要臨床進(jìn)一步論證。