黃偉玲 王芹芹 任學(xué)祥 芮昌輝 楊代斌 袁會珠 崔麗

關(guān)鍵詞：草地貪夜蛾；殺蟲劑；毒力測定；飼料表面涂藥法；不同地理種群；不同齡期

草地貪夜蛾Spodoptera frugiperda，又稱秋黏蟲，隸屬于鱗翅目Lepidoptera夜蛾科Noctuidae灰翅夜蛾屬Spodoptera，是原產(chǎn)于美洲地區(qū)的一種雜食性害蟲，為害谷物和雜草，以莖葉為食，可取食42科186種植物。草地貪夜蛾有兩種生物型：玉米型以玉米和高梁等大型草本植物為食，而水稻型則偏好小型草本植物，如水稻。入侵我國的草地貪夜蛾主要為玉米型，其首選寄主是玉米，可造成玉米產(chǎn)量損失平均達(dá)20%～40%，其為害嚴(yán)重時產(chǎn)量損失超過70%。據(jù)文獻(xiàn)報道，草地貪夜蛾在美國北卡羅來納州為害水稻，造成水稻產(chǎn)量損失20%。草地貪夜蛾擁有極強(qiáng)的適應(yīng)性和遷飛能力，截至2018年，已陸續(xù)入侵非洲、亞洲等地，2019年1月，我國云南省普洱市江城縣首次發(fā)現(xiàn)草地貪夜蛾。我國長江以南地帶，年平均氣溫在15℃以上，是草地貪夜蛾的全年適生區(qū)，加之國外蟲源的不斷遷入，草地貪夜蛾將成為我國的常發(fā)性害蟲，我國對草地貪夜蛾的防治將是一個長期持續(xù)的過程。

化學(xué)防治一直是防治草地貪夜蛾的重要技術(shù)措施，但殺蟲劑的頻繁使用，導(dǎo)致草地貪夜蛾對殺蟲劑產(chǎn)生了抗性。自1980年以來，草地貪夜蛾抗藥性的報道逐年增多，在美國，草地貪夜蛾已對6類29種殺蟲劑產(chǎn)生了抗性，其中，由于以鈉離子通道（擬除蟲菊酯類）和乙酰膽堿酯酶（氨基甲酸酯類和有機(jī)磷類）為靶標(biāo)的殺蟲劑種類多，價格便宜，使用頻率高，導(dǎo)致草地貪夜蛾對這些殺蟲劑普遍產(chǎn)生了抗性。1992年，Yu等報道指出，草地貪夜蛾對常用的有機(jī)磷類和擬除蟲菊酯類殺蟲劑產(chǎn)生了幾十至幾百倍的抗性。草地貪夜蛾對氨基甲酸酯類殺蟲劑甲萘威、滅多威和硫雙威也分別產(chǎn)生了高達(dá)562倍、231倍和124倍的抗性。此外，也有關(guān)于草地貪夜蛾對雙酰胺類、苯甲酰脲類和大環(huán)內(nèi)酯類殺蟲劑產(chǎn)生抗性的報道。2019年，據(jù)Gutierrez-Moreno等報道，草地貪夜蛾對氟苯蟲酰胺和氯蟲苯甲酰胺的抗性最高分別達(dá)500倍和160倍；同年，Bolzan等發(fā)現(xiàn)草地貪夜蛾對氯蟲苯甲酰胺的抗性存在與氟苯蟲酰胺和溴氰蟲酰胺產(chǎn)生交互抗性的風(fēng)險。此外，草地貪夜蛾對阿維菌素、乙基多殺菌素和殺鈴脲也已產(chǎn)生了低至中等水平抗性。

全球化增加了草地貪夜蛾入侵的可能性，氣候變化擴(kuò)大了其入侵范圍，這些入侵害蟲都具有一定的抗藥性背景。目前入侵我國的草地貪夜蛾的抗藥性水平主要受其來源地殺蟲劑使用種類和頻率的影響，但目前對其抗藥性背景并不是很清楚，因此，很有必要對我國草地貪夜蛾田間種群展開敏感性測定。本研究選取云南、廣東、廣西和海南4省區(qū)的5個草地貪夜蛾種群開展了室內(nèi)毒力測定，以期篩選出高效、經(jīng)濟(jì)實用殺蟲劑，為我國抗藥性監(jiān)測體系提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，同時為我國草地貪夜蛾有效防治提供用藥指導(dǎo)。

1材料與方法

1.1供試蟲源

2019年至2020年，從云南、廣東、廣西、海南等地玉米田采集草地貪夜蛾幼蟲（試蟲采集詳細(xì)信息見表1），于中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所實驗室飼養(yǎng)。幼蟲用玉米粉、啤酒酵母制作的人工飼料飼養(yǎng)，待羽化后，將成蟲放人養(yǎng)蟲籠內(nèi)，用蜂蜜水飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件：溫度（27±1）℃，相對濕度80%～90%，光周期L∥D=14h∥10h。挑選大小一致的健康幼蟲進(jìn)行毒力測定。

1.2供試藥劑及試劑

20種供試藥劑均為原藥，詳細(xì)信息見表2。曲拉通（Ttriton X-100）購自Solarbio公司，丙酮購自北京化工廠。

1.3生物測定方法

參考Irecheta等的方法，采用飼料表面涂藥法，并略有改進(jìn)。將原藥用丙酮配成1%的母液，再用含有0.05%曲拉-IOO的水溶液稀釋成5個濃度梯度，同時以0.05%曲拉-100水溶液作為對照。制作人工飼料藥膜：將飼養(yǎng)草地貪夜蛾幼蟲的人工飼料按飼料：水=1.2：1的比例，加熱融化至可吸取的液態(tài)，吸取600u/L（0.6g左右）至24孔養(yǎng)蟲盒的每個孔中（直徑為16mm），自然晾干后，在凝固的光滑飼料表面加入100uL藥液，晾干形成均勻藥膜。將待測草地貪夜蛾3齡或5齡幼蟲接到藥膜上，封緊蓋子，防止試蟲逃逸，每個處理24頭，2次重復(fù)。將接蟲后的養(yǎng)蟲盒置于（25±1）℃，光周期L∥D=14∥10的光照培養(yǎng)箱內(nèi)。二芳甲酰基肼類、苯甲酰脲類及雙酰胺類殺蟲劑處理96h后檢查死亡率，其他種類殺蟲劑處理72h后檢查死亡率，以解剖針輕撥試蟲，無反應(yīng)或非正常扭曲者視為死亡，以對照組死亡率小于10%為有效測定，并用對照死亡率對結(jié)果進(jìn)行校正。

1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

對一種殺蟲劑最不敏感的草地貪夜蛾種群的相對毒力指數(shù)設(shè)為1，計算其他4個草地貪夜蛾種群的相對毒力指數(shù)，相對毒力指數(shù)一對應(yīng)藥劑對最不敏感草地貪夜蛾種群的LC50/藥劑對草地貪夜蛾種群的LC50。使用DPS生物統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計算LC50及其95%置信區(qū)間、卡方值等參數(shù)。

2結(jié)果與分析

2.1 5個種群草地貪夜蛾3齡幼蟲對20種殺蟲劑的敏感性

結(jié)果表明，苯甲酰脲類的虱螨脲、殺鈴脲和氟鈴脲對草地貪夜蛾5個種群3齡幼蟲的LC50分別為0.17～0.88、0.13～3.64、0.27～1.66ng/mm2，說明其對虱螨脲、殺鈴脲、氟鈴脲的敏感性有地區(qū)差異；其中，差異最大的是殺鈴脲，其對華寧種群（HNP）的LC50值最高，為3.64ng/mm2，對紅塔（HTP）、欽南（QNP）、花都（HDP）、秀英（XYP）種群的LC50值較低，分別為0.13、0.13、0.29、0.50ng/mm2，相對毒力指數(shù)分別為28.0、28.0、12.6、7.3倍；虱螨脲的相對毒力指數(shù)<5.2倍，氟鈴脲的相對毒力指數(shù)<6.1倍（表3）。

甲氧蟲酰肼對紅塔種群的LC50值最高，為13.82ng/mm2，是秀英種群LC50值的3.6倍（表3）。

間甲酰胺基苯甲酰胺類殺蟲劑中，溴蟲氟苯雙酰胺對5個種群草地貪夜蛾的相對毒力指數(shù)≤2.4，差異不大。3種雙酰胺類殺蟲劑中，氟苯蟲酰胺對不同種群的毒力差異最大，其對華寧種群LC50值最高，是秀英種群LC50值的333.4倍，是花都、欽南和紅塔種群LC50值的13.6、8.4倍和6.9倍；溴氰蟲酰胺對不同種群的毒力也有較大差異，其對華寧種群LC50值最高，是花都種群LC50值的52.3倍，紅塔、秀英、欽南種群相對毒力指數(shù)分別為11.0、6.7、4．0倍；各種群對氯蟲苯甲酰胺敏感性較高，種群間的差異不大（表4）。

唑蟲酰胺對5個種群草地貪夜蛾的相對毒力指數(shù)也沒有明顯差異（表4）。

結(jié)果表明，有機(jī)磷類的毒死蜱對5個種群草地貪夜蛾3齡幼蟲的相對毒力指數(shù)≤1.4倍，差異不大；乙酰甲胺磷的相對毒力指數(shù)≤1.6倍，差異不大（表5）。

兩種擬除蟲菊酯類殺蟲劑中，高效氯氟氰菊酯對5個種群草地貪夜蛾3齡幼蟲的相對毒力指數(shù)≤2.9倍，差異不大；聯(lián)苯菊酯對不同種群的毒力差異大，其對秀英種群LC50值最高，為37.54ng/mm2，是欽南、花都種群LC50值的8.0、6.7倍，是紅塔、華寧種群LC50值的4.9、1.0倍（表5）。

啶蟲脒和噻蟲嗪對5個種群草地貪夜蛾3齡幼蟲的相對毒力指數(shù)分別≤4.3倍、≤4.7倍，差異不大（表5）。

茚蟲威對5個種群草地貪夜蛾3齡幼蟲的相對毒力指數(shù)≤3.4倍；甲萘威對不同種群的毒力差異大，對紅塔、欽南種群3齡幼蟲LC50值最高，大于2500.00ng/mm2，是華寧種群LC50值的9.2倍以上（表5）。

甲維鹽、蟲螨腈、多殺霉素對5個種群草地貪夜蛾3齡幼蟲的LC50分別為0.015～0.060、1.99～4.28、0.58～2.36ng/mm2，甲維鹽、蟲螨腈、多殺霉素的相對毒力指數(shù)分別≤4.0倍、≤2.2倍、≤4.1倍（表6）。

分析殺蟲劑單劑對5個種群草地貪夜蛾3齡幼蟲的毒力，結(jié)果表明，甲維鹽和溴蟲氟苯雙酰胺對3齡幼蟲的殺蟲活性最好，毒死蜱、乙酰甲胺磷的殺蟲活性較差，噻蟲嗪、啶蟲脒、甲萘威的殺蟲活性最差。20種殺蟲劑對5個種群草地貪夜蛾3齡幼蟲的毒力大小由高到低依次為：甲維鹽、溴蟲氟苯雙酰胺>虱螨脲、殺鈴脲、氟鈴脲、氯蟲苯甲酰胺>高效氯氟氰菊酯、蟲螨腈、多殺霉素>溴氰蟲酰胺、茚蟲威、唑蟲酰胺>氟苯蟲酰胺、聯(lián)苯菊酯、甲氧蟲酰肼>毒死蜱、乙酰甲胺磷>噻蟲嗪>啶蟲脒、甲萘威。

2.2紅塔種群、華寧種群草地貪夜蛾5齡幼蟲對9種殺蟲劑的敏感性

從上述幾種類型殺蟲劑中，選出毒力高、使用較多的殺蟲劑單劑：甲維鹽、溴蟲氟苯雙酰胺、氯蟲苯甲酰胺、氟苯蟲酰胺、虱螨脲、殺鈴脲、蟲螨腈、高效氯氟氰菊酯、茚蟲威，測定草地貪夜蛾5齡幼蟲對9種殺蟲劑的敏感性。因紅塔種群對殺蟲劑敏感性高，故選擇紅塔種群作為相對敏感種群；因華寧種群對虱螨脲、殺鈴脲、氟苯蟲酰胺、溴氰蟲酰胺、氯蟲苯甲酰胺、茚蟲威的敏感性均是最低，所以選擇華寧種群作為相對抗性種群；測定相對敏感和相對抗性種群5齡幼蟲對9種殺蟲劑的敏感性，以期得到對草地貪夜蛾高齡幼蟲也具有較高活性的殺蟲劑。

由表7可知，9種殺蟲劑對相對敏感種群紅塔種群5齡幼蟲的毒力大小依次為：甲維鹽、溴蟲氟苯雙酰胺（LC50<0.13ng/mm2）>氯蟲苯甲酰胺（LC50為0.48ng/mm2）>虱螨脲、殺鈴脲、蟲螨腈（LC50為1.29～2.31ng/mm2）>高效氯氟氰菊酯、茚蟲威（LC50為9.85～11.15ng/mm2，LC90為58.38～75.16ng/mm2）>氟苯蟲酰胺（LC50為10.25ng/mm2， LC90為183.11ng/mm2）.

9種殺蟲劑對相對抗性種群華寧種群5齡幼蟲的毒力大小為：甲維鹽、溴蟲氟苯雙酰胺（ LC50≤0.17ng/mm2）>虱螨脲（LC50為0.69ng/mm2）>氯蟲苯甲酰胺（LC50為1.59ng/mm2，LC90為32.10ng/mm2）>殺鈴脲（LC50為1.97ng/mm2，LC90為62.53ng/mm2）>蟲螨腈（LC50為10.32ng/mm2）>高效氯氟氰菊酯、茚蟲威（LC50為20.92～27.27ng/mm2，LC90為168.28～193.94ng/mm2）>氟苯蟲酰胺（LC50為31.97ng/mm2， LC90為695.45ng/mm2）。

結(jié)合2.1中對3齡幼蟲的LC50可知，甲維鹽、溴蟲氟苯雙酰胺、氯蟲苯甲酞胺、虱螨脲4種殺蟲劑對草地貪夜蛾3齡和5齡幼蟲均具有很高的毒力；在使用殺鈴脲、蟲螨腈、高效氯氟氰菊酯、茚蟲威、氟苯蟲酰胺5種殺蟲劑防治草地貪夜蛾時，應(yīng)注意草地貪夜蛾不同齡期對殺蟲劑的敏感性。

3結(jié)論與討論

草地貪夜蛾已在我國定殖，國外仍有蟲源不斷遷入，入侵我國的草地貪夜蛾來源不同，擁有不同的抗藥性背景。本試驗采用飼料表面涂藥法，測定了20種殺蟲劑對5個地理種群草地貪夜蛾3齡幼蟲的毒力，同時測定了9種常用殺蟲劑對相對敏感種群、相對抗性種群5齡幼蟲的毒力，評價了不同類型殺蟲劑對不同地理種群草地貪夜蛾不同齡期的毒力效果。

一般而言，鱗翅目害蟲3齡以后的幼蟲對農(nóng)藥的抵抗力增強(qiáng)，本試驗中，甲維鹽、溴蟲氟苯雙酰胺、虱螨脲、氯蟲苯甲酰胺4種殺蟲劑對5個種群草地貪夜蛾3齡和5齡幼蟲均有較好的殺蟲活性，這4種殺蟲劑是防治草地貪夜蛾的首選藥劑。同時，齊浩亮等報道溴蟲氟苯雙酰胺對小菜蛾的LC50為0.021ug/mL，溴蟲氟苯雙酰胺作為一種全新的雙酰胺類殺蟲劑，對小菜蛾等鱗翅目昆蟲具有很高的毒力。另外，也有研究表明，通過浸葉法測得甲維鹽、虱螨脲、氯蟲苯甲酰胺對草地貪夜蛾3齡幼蟲高活性，是防治草地貪夜蛾的優(yōu)選藥劑，且甲維鹽、氯蟲苯甲酰胺對草地貪夜蛾卵有較高的孵化抑制率和致死率。氟鈴脲、多殺霉素對5個種群草地貪夜蛾3齡幼蟲也有較好的殺蟲活性，且氟鈴脲、多殺霉素對卵有一定的孵化抑制作用和致死作用。

草地貪夜蛾對高效氯氟氰菊酯、殺鈴脲、蟲螨腈、茚蟲威、氟苯蟲酰胺5種殺蟲劑的敏感性有齡期差異、地理種群差異，這5種殺蟲劑對5個種群草地貪夜蛾3齡幼蟲致死率較高，但對5齡幼蟲的LC50值較3齡幼蟲顯著提高，高效氯氟氰菊酯、殺鈴脲、蟲螨腈、茚蟲威、氟苯蟲酰胺對相對抗性種群（華寧種群）的LC50分別為：20. 92、1.97、10. 32、27.27、31.97ng/mm2。我們得出的結(jié)論與魯艷輝等的研究結(jié)果一致，高效氯氟氰菊酯對3齡幼蟲防治效果較好，但對5齡幼蟲室內(nèi)毒力與3齡幼蟲相差較大，選藥防治時，應(yīng)特別注意高效氯氟氰菊酯在草地貪夜蛾低齡幼蟲期用藥。殺鈴脲對草地貪夜蛾3齡幼蟲防治效果好，但對5齡幼蟲防治效果較差，且文獻(xiàn)報道殺鈴脲防治草地貪夜蛾時，均為復(fù)配藥劑，如甲維鹽·殺鈴脲，藥后14d對草地貪夜蛾防效達(dá)84.67%以上。蟲螨腈對草地貪夜蛾3齡幼蟲防治效果好，對5齡幼蟲防治效果較差，且蟲螨腈對卵的孵化抑制率較低，100、10mg/L蟲螨腈處理，卵孵化抑制率分別為46.05%、34.14%，所以建議蟲螨腈復(fù)配使用。茚蟲威對草地貪夜蛾3齡幼蟲防治效果好，對5齡幼蟲防治效果較差，田間試驗表明，甲維鹽·茚蟲威、阿維·茚蟲威復(fù)配藥劑對草地貪夜蛾防治效果較好，且茚蟲威有較好的持效性，藥后10、30d仍具有良好的藥效。氟苯蟲酰胺對5個種群草地貪夜蛾3齡幼蟲的防治效果好，但對5齡幼蟲防治效果差，魯艷輝等報道，10%氟苯蟲酰胺懸浮劑稀釋2000倍，初孵、3齡、5齡幼蟲的死亡率分別為80%、63.33%、56.67%，且國外已經(jīng)報道，草地貪夜蛾對氟苯蟲酰胺的抗性倍數(shù)高達(dá)500倍，防治時應(yīng)注意氟苯蟲酰胺的抗藥性問題。

甲氧蟲酰肼、溴氰蟲酰胺、唑蟲酰胺、聯(lián)苯菊酯4種殺蟲劑對5個種群3齡幼蟲最高相對毒力指數(shù)分別為3.5、52.3、1.8、8.0倍，其中溴氰蟲酰胺相對毒力指數(shù)最大，達(dá)52.3倍，說明不同地理種群對溴氰蟲酰胺的敏感性差異較大，但溴氰蟲酰胺對3齡幼蟲的LC50最大值為17. 78ng/mm2，仍有較好的殺蟲活性；甲氧蟲酰肼、唑蟲酰胺相對毒力指數(shù)<5倍，說明種群之間敏感性差異不大，但對3齡幼蟲的LC50值已經(jīng)較高，最大值分別為27.63、76.95ng/mm2，且文獻(xiàn)報道指出，甲氧蟲酰肼殺卵效果較差，對3齡幼蟲防治效果也較差，但甲氧蟲酰肼作用機(jī)理獨(dú)特，不易和其他常規(guī)殺蟲劑產(chǎn)生抗藥性，因此，甲氧蟲酰肼可以復(fù)配使用；聯(lián)苯菊酯相對毒力指數(shù)為8.0倍，雖小于10倍，但LC50最大值達(dá)37.54ng/mm2。毒死蜱、乙酰甲胺磷、甲萘威、啶蟲脒、噻蟲嗪5種殺蟲劑對不同種群草地貪夜蛾的LC50值較大，且相對毒力指數(shù)差異小，說明這5種殺蟲劑對草地貪夜蛾的活性普遍很差，這與文獻(xiàn)報道草地貪夜蛾對有機(jī)磷類（毒死蜱等）、甲萘威等產(chǎn)生的抗藥性高達(dá)11～517倍、560.7倍一致，所以，不推薦單獨(dú)使用這5種殺蟲劑單劑，應(yīng)考慮進(jìn)行殺蟲劑復(fù)配防治草地貪夜蛾。

研究結(jié)果表明：甲維鹽、溴蟲氟苯雙酰胺、虱螨脲、氯蟲苯甲酰胺對不同種群草地貪夜蛾3齡和5齡幼蟲均具有很高的毒力，是防治草地貪夜蛾的理想藥劑；高效氯氟氰菊酯、殺鈴脲、蟲螨腈、茚蟲威、氟苯蟲酰胺、溴氰蟲酰胺、唑蟲酰胺7種殺蟲劑對不同地理種群、不同齡期的草地貪夜蛾毒力差異較大，因此應(yīng)該因地制宜地選擇幾種殺蟲劑，對于抗性較高的地區(qū)需要通過殺蟲劑復(fù)配來實現(xiàn)對草地貪夜蛾的高效防控；毒死蜱、乙酰甲胺磷、甲萘威3種殺蟲劑單劑不推薦單獨(dú)使用來防治草地貪夜蛾。