摘要：為掌握敵敵畏、吡蟲啉、高效氯氟氰菊酯和蟲螨腈4種殺蟲劑對(duì)豆天蛾幼蟲的毒力及對(duì)幼蟲體內(nèi)解毒酶活性的影響，通過浸漬法使用4種藥劑梯度濃度溶液處理豆天蛾3齡幼蟲，統(tǒng)計(jì)藥后12、24、36 h的幼蟲死亡率，計(jì)算不同藥劑不同藥后時(shí)間的半致死濃度（LC50）；并用4種藥劑亞致死濃度（LC25）處理幼蟲后，測(cè)定藥后0、12、24、36 h的3種解毒酶（谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶、羧酸酯酶、細(xì)胞色素P450）的活性。敵敵畏、吡蟲啉、高效氯氟氰菊酯和蟲螨腈處理幼蟲12 h后，LC50依次為15.83、39.49、2.64、58.64 mg/L；處理幼蟲24 h后，LC50依次為3.55、3.46、1.19、33.91 mg/L；處理幼蟲36 h后，LC50依次為1.91、1.33、1.25、24.40 mg/L。敵敵畏處理幼蟲后12 h的LC50是藥后24、36 h的4.46、8.29倍；同樣地，吡蟲啉、高效氯氟氰菊酯和蟲螨腈分別為（11.41、29.69）倍、（2.22、2.11）倍和（1.73、2.40）倍。4種藥劑處理幼蟲后12、24、36 h，幼蟲體內(nèi)解毒酶活性發(fā)生改變。經(jīng)敵敵畏處理后，GST活性先升高后降低再升高，CarE活性先大幅下降后緩慢上升再緩慢下降，CYP450活性先下降再升高；經(jīng)吡蟲啉處理后，幼蟲GST活性先升高后降低再趨平，CarE活性先降低后升高，CYP450活性逐漸上升；經(jīng)高效氯氟氰菊酯處理后，GST活性先升高后降低再升高，CarE活性先降低后升高，CYP450活性先升高后降低；經(jīng)蟲螨腈處理后，GST活性先升高后降低，CarE活性先升高后降低再穩(wěn)定，CYP450活性先降低后升高。

關(guān)鍵詞：豆天蛾；殺蟲劑；毒力；解毒酶活性

中圖分類號(hào)：S433.4；S482.3" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-1302（2024）04-0144-05

收稿日期：2023-06-28

基金項(xiàng)目：蘇北科技專項(xiàng)（編號(hào)：SZ-LYG202139）；連云港市財(cái)政局專項(xiàng)資金（編號(hào)：QNJJ2204、QNJJ2313）。

作者簡(jiǎn)介：李曉峰（1994—），男，山西臨汾人，碩士，研究實(shí)習(xí)員，主要從事豆天蛾生理生化研究。E-mail：xflilyg@163.com。共同第一作者：郭明明。

通信作者：樊繼偉，副研究員，主要從事豆天蛾人工養(yǎng)殖研究。E-mail：fantrta@163.com。

豆天蛾（Clanis bilineata Walker）屬鱗翅目（Lepidoptera）天蛾科（Sphingidae）豆天蛾屬（Clanis）［1］，1年發(fā)生1個(gè)（江蘇省、安徽省等地）或2個(gè)（湖北省、江西省等地）世代［2-3］。其主要寄主為葛藤、大豆等植物［4-5］。豆天蛾是威脅性較大的農(nóng)業(yè)害蟲，對(duì)田間大豆植株會(huì)造成嚴(yán)重危害。成蟲為黃褐色，雌蟲腹部寬大，尾部呈鈍角；而雄蟲腹部窄小，尾部呈銳角。初孵幼蟲體質(zhì)量約4×10-3 g，體表為淺綠色，至5齡末，體質(zhì)量可達(dá)10 g左右，體表轉(zhuǎn)為深綠色［6］。幼蟲白天潛伏于葉背，夜間于葉片邊緣取食，使葉片形成缺刻。每年7—8月溫濕條件適宜時(shí)，豆天蛾幼蟲數(shù)量暴發(fā)性增長(zhǎng)，對(duì)大豆農(nóng)業(yè)生產(chǎn)往往會(huì)帶來巨大損失［7］。

針對(duì)豆天蛾危害，化學(xué)農(nóng)藥防治仍是當(dāng)前最主要且有效的控制手段，具有見效快、防治效果好等特點(diǎn)［8-9］。但是，生產(chǎn)上對(duì)農(nóng)藥用量標(biāo)準(zhǔn)不一，施藥間期也不盡相同，不僅增加了防治成本，還增強(qiáng)了豆天蛾的抗藥性。為了高效、合理、經(jīng)濟(jì)地使用殺蟲劑防治豆天蛾幼蟲，保護(hù)大豆正常生長(zhǎng)，避免害蟲抗藥性產(chǎn)生，改善和提高現(xiàn)有殺蟲劑的使用效果，需要建立標(biāo)準(zhǔn)的豆天蛾室內(nèi)毒力測(cè)定技術(shù)，得到不同藥劑、不同濃度對(duì)豆天蛾的作用效果，從而為確定合理的田間用藥濃度提供指導(dǎo)。

當(dāng)昆蟲被殺蟲劑處理時(shí)，昆蟲會(huì)通過過量表達(dá)等方式調(diào)節(jié)體內(nèi)解毒酶活性來減小自身遭受的損害［10-11］。昆蟲解毒代謝方面的酶系主要包括谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶（GST）、羧酸酯酶（CarE）和細(xì)胞色素P450（CYP450）等［12］。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)藥劑在蟲體內(nèi)發(fā)揮作用后，昆蟲在基因水平和生理生化水平均能作出解毒反應(yīng)。基因水平上一般表現(xiàn)為3種解毒酶相關(guān)基因的擴(kuò)增、過量表達(dá)或者基因突變；基因水平的變化會(huì)直接導(dǎo)致蟲體內(nèi)相應(yīng)的生理生化水平的改變［13］。生理生化水平表現(xiàn)為3種解毒酶含量隨時(shí)間推移發(fā)生動(dòng)態(tài)變化。解毒酶含量的升高或降低直接決定了昆蟲對(duì)特定藥劑解毒活性的強(qiáng)弱。當(dāng)某種藥劑作用于昆蟲時(shí)，若昆蟲體內(nèi)特定解毒酶含量增加，活性增強(qiáng)，則說明昆蟲可能對(duì)該藥劑已經(jīng)產(chǎn)生了抗性［14］。因此，了解豆天蛾對(duì)不同藥劑的體內(nèi)解毒機(jī)制對(duì)于合理用藥防治豆天蛾具有重要意義。

基于此，本試驗(yàn)選取豆天蛾幼蟲常用殺蟲劑敵敵畏、吡蟲啉、高效氯氟氰菊酯和蟲螨腈，通過浸漬法［15］處理豆天蛾3齡幼蟲，測(cè)定4種藥劑在藥后不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)幼蟲的毒力，并用4種藥劑亞致死濃度處理幼蟲后，測(cè)定藥后不同時(shí)間點(diǎn)幼蟲體內(nèi)3種解毒酶活性，初步掌握豆天蛾解毒機(jī)制，本研究為合理使用化學(xué)農(nóng)藥、延緩豆天蛾抗藥性發(fā)展、延長(zhǎng)殺蟲劑的使用壽命等方面提供了一定的理論依據(jù)和技術(shù)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

試驗(yàn)于2023年3—6月開展，在江蘇省連云港市連云區(qū)農(nóng)場(chǎng)種植大豆，作為豆天蛾幼蟲食物來源，種植密度為行距×株距=35 cm×20 cm，種植面積20 m2。在大豆生長(zhǎng)至35 d即可分批次將待孵化豆天蛾卵接在大豆葉片背部，每株大豆接蟲卵30粒，以保證幼蟲孵化后食源充足。幼蟲在25～28 ℃、相對(duì)濕度（RH）80%環(huán)境條件下生長(zhǎng)，挑選同批次健康的3齡幼蟲作為供試蟲源。

1.2 供試材料

98.00%敵敵畏原藥（西安德生元生物科技有限公司）、98.00%高效氯氟氰菊酯原藥（山東綠德地生物科技有限公司）、96.00%蟲螨腈原藥（安徽華星化工有限公司）、95.46%吡蟲啉原藥（江蘇常隆農(nóng)化有限公司）、吐溫80（江蘇常隆農(nóng)化有限公司）。

谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶（GST）、羧酸酯酶（CarE）、昆蟲細(xì)胞色素P450（CYP450）酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自北京索萊寶科技有限公司。

1.3 試驗(yàn)儀器

全自動(dòng)酶標(biāo)儀（江蘇新春蘭科學(xué)儀器有限公司）、紫外可見分光光度計(jì)［日立高新技術(shù)（上海）國(guó)際貿(mào)易有限公司］、萬(wàn)分之一電子天平（江蘇新春蘭科學(xué)儀器有限公司）、恒溫培養(yǎng)箱（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司）、恒溫水浴鍋（江蘇新春蘭科學(xué)儀器有限公司）、高速冷凍離心機(jī)（江蘇新春蘭科學(xué)儀器有限公司）。

1.4 室內(nèi)毒力測(cè)定

1.4.1 藥劑配制

將敵敵畏、吡蟲啉、蟲螨腈和高效氯氟氰菊酯4種原藥以丙酮為溶劑制成較高濃度母液，而后用含有0.1%吐溫80的水溶液將其分別稀釋，最終4種原藥分別得到5組質(zhì)量分?jǐn)?shù)為等比梯度濃度的溶液，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.2 測(cè)定方法

通過浸漬法測(cè)定4種藥劑對(duì)豆天蛾3齡幼蟲毒力。試驗(yàn)分為4個(gè)藥劑因子，每個(gè)因子分為5個(gè)濃度水平，共20組處理。在直徑 20 cm、壁高2 cm的玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)分別緩緩倒入處理溶液，溶液高度為1 cm以保證能充分浸沒試蟲。培養(yǎng)中同時(shí)放入30頭試蟲，在溶液中浸沒10 s后轉(zhuǎn)入干燥的培養(yǎng)皿中，用濾紙吸去幼蟲體表多余水分。而后將培養(yǎng)皿中的30頭幼蟲放入長(zhǎng)×寬×高=30 cm×25 cm×15 cm的方形養(yǎng)蟲盒內(nèi)，盒內(nèi)放入20 g新鮮大豆葉片使幼蟲攀爬和取食。養(yǎng)蟲盒上端蓋子有直徑1 cm的圓形透氣孔并用網(wǎng)徑 1 mm 的防蟲網(wǎng)覆蓋，既能保證盒內(nèi)氣體交換，還可防止幼蟲逃逸。20組處理方法同上，并將含有0.1%吐溫80的溶液作為對(duì)照，每次處理30頭幼蟲，各處理和對(duì)照重復(fù)3次。用軟毛刷輕輕撥動(dòng)盒中豆天蛾3齡幼蟲，若幼蟲不能攀附在大豆葉片上則視為幼蟲死亡。統(tǒng)計(jì)各處理和對(duì)照幼蟲在處理后12、24、36 h的死亡數(shù)。

1.5 4種藥劑對(duì)豆天蛾幼蟲3種解毒酶活性的測(cè)定

測(cè)定豆天蛾3齡幼蟲經(jīng)敵敵畏、吡蟲啉、蟲螨腈和高效氯氟氰菊酯4種藥劑處理后不同時(shí)長(zhǎng)體內(nèi)3種解毒酶的活性。將4種藥劑的亞致死濃度（LC25）劑量通過浸漬法處理3齡幼蟲，方法同“1.4.2”節(jié)，以未進(jìn)行藥劑處理的3齡幼蟲（即藥劑處理后0 h）為對(duì)照。在4種藥劑處理后12、24、36 h后分別在養(yǎng)蟲盒中將活蟲取出，用液氮速凍，存放于-80 ℃冰箱。解毒酶活性測(cè)定按照試劑盒方法說明進(jìn)行操作，重復(fù)3次，每重復(fù)處理幼蟲6頭。

（1）粗酶液提取。取幼蟲6頭，取組織質(zhì)量（g） ∶提取液體積（mL）為1 ∶5的比例進(jìn)行冰浴勻漿，8 000 g、4 ℃離心10 min，而后將上清液置于冰上，用于測(cè)定GST活性；稱取約0.1 g幼蟲組織，加入 1 mL 提取液，進(jìn)行冰浴勻漿， 4 ℃、12 000 r/min離心 10 min，將上清液置于冰上，用于測(cè)定CarE活性；取幼蟲6頭，pH值控制在7.2～7.4，組織質(zhì)量（g）：濃度為0.01 moL/L的PBS體積（mL）為1 ∶10的比例，用于測(cè)定CYP450活性。

（2）按照試劑盒檢測(cè)方法說明對(duì)3種粗酶液進(jìn)行逐步處理。

（3）酶活性計(jì)算。GST活性：25 ℃條件下，1 g樣品1 min催化 1 μmol CDNB與GSH結(jié)合為1個(gè)酶活性單位。在GSH與CDNB（1-chlom-2，4-dinitrobenzene）的結(jié)合反應(yīng)中，GST為反應(yīng)催化劑。通過底物結(jié)合后其特異性波長(zhǎng)吸光度（340 nm）變化速率得出GST活性。

CarE活性：羧酸酯酶催化乙酸-1-萘酯生成萘酚，進(jìn)一步與固藍(lán)顯色劑反應(yīng)生成有色物質(zhì)，通過檢測(cè)該有色物質(zhì)在450 nm處的光吸收增加速率，進(jìn)而得出羧酸酯酶（CarE）活性大小。1 g組織1 min在反應(yīng)體系中使450 nm處吸光度增加1為1個(gè)酶活單位U。

CYP450活性：參考Kwon等的方法［16］，建立平面坐標(biāo)軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。其橫、縱坐標(biāo)分別表示標(biāo)準(zhǔn)物濃度、吸光度（D）。根據(jù)所檢測(cè)處理的D，參考標(biāo)準(zhǔn)曲線得到處理的濃度，所得濃度與之前稀釋倍數(shù)相乘得到處理的實(shí)際濃度。

1.6 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2007 和SPSS 17.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。根據(jù)死亡概率值和質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)值計(jì)算亞致死濃度、致死中濃度以及95%置信區(qū)間。對(duì)同種解毒酶在藥劑處理不同時(shí)長(zhǎng)活性數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，用鄧肯氏新復(fù)極差法分析差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力

4種藥劑對(duì)豆天蛾3齡幼蟲室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果如表1所示。在藥劑處理后12 h，毒力表現(xiàn)為高效氯氟氰菊酯＞敵敵畏＞吡蟲啉＞蟲螨腈，半致死濃度（LC50）分別是2.64、15.83、39.49、58.64 mg/L；在藥劑處理后24 h，毒力表現(xiàn)為高效氯氟氰菊酯＞吡蟲啉＞敵敵畏＞蟲螨腈，LC50分別為1.19、3.46、3.55、33.91 mg/L，吡蟲啉和敵敵畏對(duì)幼蟲毒力較為接近；在藥劑處理后36 h，毒力表現(xiàn)為高效氯氟氰菊酯＞吡蟲啉＞敵敵畏＞蟲螨腈，LC50分別為1.25、1.33、1.91、24.40 mg/L，前3種藥劑毒力接近，均明顯高于蟲螨腈。從單一藥劑毒力與時(shí)間關(guān)系來看，敵敵畏處理幼蟲后12 h的LC50是藥后24、36 h的4.46、8.29倍；同樣地，吡蟲啉、高效氯氟氰菊酯和蟲螨腈分別為（11.41、29.69）倍、（2.22、2.11）倍和（1.73、2.40）倍。吡蟲啉對(duì)幼蟲毒力受時(shí)間影響最大，其次為敵敵畏和蟲螨腈，而高效氯氟氰菊酯毒力受時(shí)間影響最小。

2.2 敵敵畏對(duì)豆天蛾幼蟲體內(nèi)GST、CarE、CYP450活性的影響

敵敵畏不同藥后時(shí)間對(duì)豆天蛾3齡幼蟲體內(nèi)

GST、CarE、CYP450活性的影響如圖1所示。藥后0、12、24、36 h幼蟲體內(nèi)GST活性分別為3.33、4.26、2.86、4.41 U/（g·min），整體表現(xiàn)為先升高后降低再升高；GST活性在藥后12 h和36 h差異不顯著（P＞0.05），均顯著高于藥后0 h和24 h；同時(shí)，藥后24 h的GST活性顯著低于藥后0 h。藥后0、12、24、36 h幼蟲體內(nèi)CarE活性分別為6.97、4.86、5.33、4.99 U/（g·min），表現(xiàn)為先大幅下降后緩慢上升再緩慢下降，藥后0 h幼蟲體內(nèi)CarE活性顯著高于12、24、36 h。藥后0、12、24、36 h幼蟲體內(nèi)CYP450活性分別為1.88、1.30、2.14、2.54 U/（g·min），表現(xiàn)為先降低后升高，藥后4個(gè)時(shí)間點(diǎn)的活性間均差異顯著。

2.3 吡蟲啉對(duì)豆天蛾幼蟲體內(nèi)GST、CarE、CYP450活性的影響

吡蟲啉不同藥后時(shí)間對(duì)豆天蛾3齡幼蟲體內(nèi)GST、CarE、CYP450活性的影響如圖2所示。藥后0、12、24、36 h幼蟲體內(nèi)GST活性分別為3.33、4.68、3.01、3.18 U/（g·min），表現(xiàn)為先升高后降低再趨平；藥后12 h幼蟲體內(nèi)GST活性顯著高于其他處理。藥后0、12、24、36 h幼蟲體內(nèi)CarE活性分別為6.97、3.38、4.98、5.41 U/（g·min），表現(xiàn)為先降低后升高；藥后4個(gè)時(shí)間點(diǎn)的活性均差異顯著。藥后0、12、24、 36 h幼蟲體內(nèi)CYP450活性分別為1.88、1.97、2.52、3.38 U/（g·min），表現(xiàn)為逐漸上升；藥后0、12 h幼蟲體內(nèi)CYP450活性差異不顯著，均顯著低于藥后24、36 h活性。

2.4 高效氯氟氰菊酯對(duì)豆天蛾幼蟲體內(nèi)GST、CarE、CYP 450活性的影響

高效氯氟氰菊酯不同藥后時(shí)間對(duì)豆天蛾3齡幼蟲體內(nèi)GST、CarE、CYP450活性的影響如圖3所示。藥后0、12、24、36 h幼蟲體內(nèi)GST活性分別為3.33、4.28、2.83、5.54 U/（g·min），表現(xiàn)為先升高后降低再升高，4個(gè)藥后時(shí)間點(diǎn)幼蟲體內(nèi)GST活性兩兩間均差異顯著。藥后0、12、24、36 h幼蟲體內(nèi)CarE活性分別為6.97、6.06、6.52、7.65 U/（g·min），表現(xiàn)為先降低后升高，4個(gè)藥后時(shí)間點(diǎn)幼蟲體內(nèi)CarE活性兩兩間均差異顯著。藥后0、12、24、36 h幼蟲體內(nèi)CYP450活性分別為1.88、3.68、2.20、1.48 U/（g·min），表現(xiàn)為先升高后降低，藥后0 h與藥后24、36 h幼蟲體內(nèi)CYP450活性差異不顯著，均顯著低于藥后12 h活性。

2.5 蟲螨腈對(duì)豆天蛾幼蟲體內(nèi)GST、CarE、CYP450活性的影響

蟲螨腈不同藥后時(shí)間對(duì)豆天蛾3齡幼蟲體內(nèi)GST、CarE、CYP450活性的影響如圖4所示。藥后0、12、24、 36 h幼蟲體內(nèi)GST活性分別為3.33、 6.58、5.19、2.99 U/（g·min），表現(xiàn)為先升高后降低，4個(gè)藥后時(shí)間點(diǎn)幼蟲體內(nèi)GST活性兩兩間均差異顯著。藥后0、12、24、36 h幼蟲體內(nèi)CarE活性分別為6.97、14.09、7.27、7.11 U/（g·min），表現(xiàn)為先升高后降低再趨于穩(wěn)定，藥后0、24、36 h幼蟲體內(nèi)CarE活性差異不顯著，均顯著低于藥后12 h活性。藥后0、12、24、36 h幼蟲體內(nèi)CYP450活性分別為1.88、1.17、1.70、2.59 U/（g·min），表現(xiàn)為先降低后升高，4個(gè)藥后時(shí)間點(diǎn)幼蟲體內(nèi)CYP450活性兩兩間均差異顯著。

3 討論

本研究系統(tǒng)比較了敵敵畏、吡蟲啉、高效氯氟氰菊酯和蟲螨腈4種常用豆天蛾殺蟲劑在藥后12、24、36 h對(duì)豆天蛾3齡幼蟲的毒力，另得出了4種藥劑毒力與作用時(shí)間的關(guān)系；此外，將4種藥劑亞致死濃度處理幼蟲后，測(cè)定藥后不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)幼蟲體內(nèi)3種解毒酶（GST、CarE、CYP450）的活性，得出豆天蛾幼蟲對(duì)不同種類藥劑的解毒特點(diǎn)。

4種藥劑在藥后12、24、36 h時(shí)間節(jié)點(diǎn)高效氯氟氰菊酯對(duì)豆天蛾幼蟲毒力均最高，而蟲螨腈毒力均最低。表明豆天蛾幼蟲對(duì)高效氯氟氰菊酯敏感性較高，而對(duì)吡蟲啉敏感性較低。在藥后12 h，敵敵畏毒力高于吡蟲啉，而在藥后24、36 h，吡蟲啉毒力高于敵敵畏。這表明敵敵畏相較于吡蟲啉能更快使幼蟲產(chǎn)生中毒反應(yīng)，而隨著時(shí)間推移，吡蟲啉對(duì)幼蟲的作用效果更強(qiáng)。敵敵畏、吡蟲啉、高效氯氟氰菊酯和蟲螨腈在12 h的LC50分別是36 h的8.29、29.69、2.11、2.40倍，表明高效氯氟氰菊酯對(duì)豆天蛾幼蟲作用效果最快，其次分別為蟲螨腈、敵敵畏和吡蟲啉。高效氯氟氰菊酯可影響昆蟲神經(jīng)Na+通路，是擬除蟲菊酯類藥劑，昆蟲毒發(fā)后表現(xiàn)為被擊倒現(xiàn)象。但與此同時(shí)，高效氯氟氰菊酯不能在靶標(biāo)昆蟲體內(nèi)累積，對(duì)其進(jìn)一步的發(fā)育往往不會(huì)構(gòu)成威脅［17］。研究發(fā)現(xiàn)，高效氯氟氰菊酯對(duì)細(xì)足捷蟻防效優(yōu)于吡蟲啉，且作用時(shí)間更短［18］，與本研究結(jié)果相似。在豆天蛾田間大暴發(fā)時(shí)，通過使用高效氯氟氰菊酯，可在較短時(shí)間內(nèi)控制種群規(guī)模，減少農(nóng)業(yè)生產(chǎn)損失。此外，在農(nóng)業(yè)害蟲治理方面，對(duì)殺蟲劑進(jìn)行復(fù)配防治蟲害也成為了經(jīng)濟(jì)高效的方式［19］，復(fù)配之后的殺蟲劑毒力增強(qiáng)、遏制害蟲持效期延長(zhǎng)，靶標(biāo)昆蟲范圍增加。不僅如此，經(jīng)篩選后復(fù)配的殺蟲劑對(duì)環(huán)境表現(xiàn)為低毒、低殘留，減少了環(huán)境污染，同時(shí)也有效避免了靶標(biāo)昆蟲抗藥性的產(chǎn)生。根據(jù)孫守慧等的報(bào)道，氟啶脲與高效氯氟氰菊酯按一定比例復(fù)配后防治美國(guó)白蛾具有顯著的增效作用，提高了殺蟲效力［20］。因此，通過將高效氯氟氰菊酯與其他種類藥劑進(jìn)行復(fù)配防治豆天蛾幼蟲，實(shí)現(xiàn)復(fù)配藥劑中各成分充分發(fā)揮單劑優(yōu)勢(shì)，功能互補(bǔ)，增強(qiáng)對(duì)豆天蛾的毒殺效果和作用時(shí)長(zhǎng)是下一步防治豆天蛾幼蟲的重要手段。

國(guó)內(nèi)關(guān)于豆天蛾體內(nèi)解毒代謝機(jī)制的相關(guān)報(bào)道較少。本研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)敵敵畏和吡蟲啉LC25處理后，GST和CYP450可能參與了解毒代謝，而抑制了CarE表達(dá)，CarE與敵敵畏解毒代謝無關(guān)。而張睿等研究發(fā)現(xiàn)，異遲眼蕈蚊能夠?qū)λ巹┻料x啉抗藥性增強(qiáng)，其中重要的原因是其體內(nèi)通過提高CarE活性來抵抗吡蟲啉造成的侵害［21］，這說明不同昆蟲物種可能會(huì)對(duì)同一藥劑產(chǎn)生體內(nèi)解毒代謝方式的差異。豆天蛾幼蟲經(jīng)高效氯氟氰菊酯LC25處理后，GST活性分別表現(xiàn)為先升高后降低再升高，CarE活性分別表現(xiàn)為先降低后升高，CYP450活性分別表現(xiàn)為先升高后降低，表明3種解毒酶均參與了對(duì)高效氯氟氰菊酯的解毒代謝。與之相似的，全林發(fā)等研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)高效氯氟氰菊酯處理后，桃小食心蟲體內(nèi)3種解毒酶活性均表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)［22］。經(jīng)蟲螨腈處理后，GST活性先升高后降低，CarE活性先升高后降低再穩(wěn)定，CYP450活性先降低后升高，表明3種解毒酶均參與了對(duì)蟲螨腈的解毒代謝。經(jīng)敵敵畏處理后，CarE活性急劇下降，12、24、36 h的活性都顯著低于0 h，說明不但沒有參與解毒代謝，反而還被敵敵畏抑制；同理，在被吡蟲啉處理后，CarE活性急劇下降，12、24、36 h的活性都顯著低于0 h，可看出活性被抑制，未參與解毒代謝。綜上所述，豆天蛾幼蟲體內(nèi)GST和CYP450參與了對(duì)本試驗(yàn)4種藥劑的解毒代謝，而CarE只參與了對(duì)高效氯氟氰菊酯和蟲螨腈的解毒代謝。此結(jié)果初步闡明了豆天蛾幼蟲對(duì)不同藥劑的體內(nèi)解毒代謝機(jī)理，為農(nóng)藥合理使用，減小幼蟲抗性提供了一定的理論依據(jù)，下步工作應(yīng)從解毒酶基因角度入手，篩選、鑒定豆天蛾幼蟲解毒酶基因，探究不同藥劑處理后對(duì)解毒酶基因表達(dá)的影響，從而更全面揭示幼蟲抗藥機(jī)制。

通過性信息素防治農(nóng)業(yè)害蟲也是有效的手段之一［23-24］。據(jù)統(tǒng)計(jì)，危害大豆的害蟲有400余種，現(xiàn)有24種大豆田害蟲的性信息素被分離鑒定［25］。而豆天蛾性信息素相關(guān)研究未見報(bào)道。根據(jù)成熟的技術(shù)方法體系［26］，鑒定豆天蛾性信息素關(guān)鍵成分，通過昆蟲觸角電位測(cè)定、昆蟲行為選擇等手段探究性信息素對(duì)豆天蛾雄性成蟲生理和行為的影響，并采用大田誘捕進(jìn)行性信息素的功能驗(yàn)證，可實(shí)現(xiàn)性信息素誘捕田間豆天蛾雄成蟲。性信息素誘捕法可以改變田間自然雌雄比例，干擾自然交配，從而降低下一代蟲口基數(shù)。這既能避免產(chǎn)生抗性，還可有效控制豆天蛾危害。

參考文獻(xiàn)：

［1］席景會(huì)，陳玉江，張秀榮. 吉林省天蛾科昆蟲名錄［J］. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，22（2）：38-40.

［2］樊繼偉，孫中偉，李 強(qiáng)，等. 豆天蛾連云港種群生物學(xué)特性及應(yīng)用研究進(jìn)展［J］. 農(nóng)業(yè)開發(fā)與裝備，2019（2）：170-172.

［3］田 華，張義明. 資源昆蟲豆天蛾綜合利用研究進(jìn)展［J］. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37（6）：111-113.

［4］閆茂華. 豆天蛾的人工飼養(yǎng)［J］. 生物學(xué)雜志，2001，18（2）：33，25.

［5］呂 飛，劉玉升，王振鵬，等. 豆天蛾生產(chǎn)與綜合利用的研究進(jìn)展［J］. 華東昆蟲學(xué)報(bào)，2006，15（3）：192-195.

［6］田 華. 大豆害蟲豆天蛾的危害與綜合防治［J］. 南陽(yáng)師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，8（6）：58-60.

［7］劉志紅，李桂亭，吳福中，等. 豆天蛾的研究進(jìn)展［J］. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005，33（6）：1101-1102.

［8］陳景輝. 桔小實(shí)蠅綜合防治技術(shù)的初步研究［J］. 華東昆蟲學(xué)報(bào)，2004，13（1）：107-110.

［9］陳 亮，浦冠勤. 化學(xué)防治與生物防治在害蟲綜合防治中的作用［J］. 中國(guó)蠶業(yè)，2008，29（4）：84-86，90.

［10］Wan H，Zhan S，Xia X D，et al. Identification and functional characterization of an epsilon glutathione S-transferase from the beet armyworm （Spodoptera exigua）［J］. Pesticide Biochemistry and Physiology，2016，132：81-88.

［11］Perry T，Batterham P，Daborn P J. The biology of insecticidal activity and resistance［J］. Insect Biochemistry and Molecular Biology，2011，41（7）：411-422.

［12］王芙蓉，吳 薇. 昆蟲對(duì)殺蟲劑的抗性機(jī)制概述［J］. 陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，55（2）：109-111.

［13］Li X C，Schuler M A，Berenbaum M R. Molecular mechanisms of metabolic resistance to synthetic and natural xenobiotics［J］. Annual Review of Entomology，2007，52：231-253.

［14］Ffrench-Constant R H. Which came first：insecticides or resistance？［J］. Trends in Genetics，2007，23（1）：1-4.

［15］賈海民，黨志紅，高占林，等. 韭菜遲眼蕈蚊室內(nèi)毒力測(cè)定方法［J］. 植物保護(hù)，2000，26（5）：35.

［16］Kwon D H，Seong G M，Kang T J，et al. Multiple resistance mechanisms to abamectin in the two-spotted spider mite［J］. Journal of Asia-Pacific Entomology，2010，13（3）：229-232.

［17］Hemingway J. The molecular basis of two contrasting metabolic mechanisms of insecticide resistance［J］. Insect Biochemistry and Molecular Biology，2000，30（11）：1009-1015.

［18］魏也茗. 3種殺蟲劑對(duì)細(xì)足捷蟻的室內(nèi)毒力測(cè)定［J］. 農(nóng)業(yè)科技與信息，2021（19）：61-62，65.

［19］韓麗娟. 研究農(nóng)藥復(fù)配劑的意義及其要求［J］. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，1989，17（7）：25-26.

［20］孫守慧，高道雄，閆秀英，等. 2種殺蟲劑對(duì)美國(guó)白蛾的聯(lián)合毒力作用研究［J］. 沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2022，53（6）：717-722.

［21］張 睿，何 超，李 河，等. 吡蟲啉對(duì)異遲眼蕈蚊抗性篩選及其對(duì)解毒酶活性的影響［J］. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2021，50（7）：110-116.

［22］全林發(fā)，仇貴生，孫麗娜，等. 高效氯氰菊酯亞致死濃度對(duì)桃小食心蟲生物學(xué)特性的影響［J］. 昆蟲學(xué)報(bào)，2017，60（7）：799-808.

［23］Boo K S，Park K C. Insect semiochemical research in Korea：overview and prospects［J］. Applied Entomology and Zoology，2005，40（1）：13-29.

［24］Gao Y，Shi S S，Xu M L，et al. Current research on soybean pest management in China［J］. Oil Crop Science，2018，3（4）：215-227.

［25］高 宇，朱詩(shī)禹，田 徑，等. 大豆主要害蟲防控技術(shù)研究進(jìn)展［J］. 大豆科技，2022（3）：18-25.

［26］閆 祺，楊婷婷，董雙林. 蛾類昆蟲混合型性信息素研究進(jìn)展［J］. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào)，2023，60（2）：323-334.