繆小龍 鄭艷玲

【摘要】 目的 分析329例孕婦血小板抗體陽性結(jié)果，探討血小板抗體與妊娠次數(shù)和流產(chǎn)史的關(guān)系。方法 選取2017年1月—2021年12月廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院329例住院孕婦為研究對象，采用固相凝集法進(jìn)行血小板抗體篩查，分析孕婦血小板抗體陽性率與年齡、妊娠次數(shù)和流產(chǎn)史等因素之間的關(guān)系。結(jié)果 329例孕婦中，血小板抗體陽性50例，陽性率15.198%；經(jīng)產(chǎn)婦血小板抗體陽性率（19.431%）高于初產(chǎn)婦（7.627%），差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），妊娠次數(shù)不同陽性率不同（1次7.627%，2次17.582%，>2次20.833%），三者差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），組間趨勢χ2檢驗顯示妊娠次數(shù)和血小板抗體有線性趨勢（P<0.05）；有流產(chǎn)史的孕婦抗體陽性率（23.529%）大于無流產(chǎn)史（13.027%），二者差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；年齡對孕婦血小板抗體陽性率無影響（P>0.05）。結(jié)論 孕婦妊娠次數(shù)和流產(chǎn)史與血小板陽性率密切相關(guān)，妊娠孕婦應(yīng)該進(jìn)行血小板抗體篩查，特別是有妊娠史和流產(chǎn)史的孕婦更應(yīng)重視，這對于預(yù)防和減少孕期流產(chǎn)和胎兒/新生兒同種異體免疫血小板減少癥（fetal and neonatal alloimmune thrombocytopenia，F(xiàn)NAIT）具有重要的臨床意義。

【關(guān)鍵詞】 孕婦；血小板抗體；妊娠次數(shù)；流產(chǎn)史

Clinical value of platelet antibody screening in pregnant women under the three-child policy

Miao Xiaolong，Zheng YanLing*. First Affiliated Hospital of Ximen University，Xiamen，F(xiàn)ujian 361003

【Abstract】 Objective Positive results of platelet antibodies in 329 pregnant women were analyzed to explore the relationship between platelet antibodies and pregnancy number and history of miscarriage. Methods 329 pregnant women hospitalized from January 2017 to December 2021 were selected as the study subjects for platelet antibodies by solid phase agglutination method.The relationship between the rate of platelet antibody and age， pregnancy number and abortion history were analyzed. Results Among the 329 pregnant women， 50 patients were positive for platelet antibodies， with a positive rate of 15.198%. The positive rate of platelet antibody in pluriparas （19.431%） was higher than that of primiparas （7.627%）， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Different positive rates of different pregnancies （1 time：7.627%， 2 time：17.582%，>2 time：20.833%），the three differences were statistically significant（P<0.05）.Inter-group？test showed linear trends in the number of pregnancies and platelet antibodies（P<0.05）. The antibody positive rate of pregnant women with abortion （23.529%） was greater than that without abortion （13.027%）， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Age had no effect on the platelet antibody positive rate in pregnant women （P>0.05）. Conclusion The number of pregnant pregnancies and the history of miscarriage were closely correlated with the platelet positive rate. Pregnant women should be screened for platelet antibodies， especially those with a history of pregnancy andabortion. This is of great clinical significance for the prevention and reduction of pregnancy abortion and fetal/neonatal allograft-immune thrombocytopenia（FNAIT）.

【Key Words】 Pregnant women； Platelet antibody； Number of pregnancies； History of abortion

中圖分類號：R446.62? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A? ? ? ? 文章編號：1672-1721（2023）34-0098-03

DOI：10.19435/j.1672-1721.2023.34.032

人類血小板抗體包括人類白細(xì)胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）抗體和人類血小板抗原（human platelet antigen，HPA）抗體，它可由輸血、妊娠和器官移植等免疫刺激產(chǎn)生。血小板同種抗體能夠引起發(fā)熱、非溶血性輸血反應(yīng)以及輸注血小板后導(dǎo)致血小板增量不足，并且能夠引起FNAIT[1]。研究表明，妊娠期血小板抗體除了引起FNAIT之外，嚴(yán)重者會導(dǎo)致早期流產(chǎn)或者新生兒重要器官水腫、出血，或因顱內(nèi)出血等情況導(dǎo)致死亡[2]。隨著我國三孩政策的實施，以及經(jīng)產(chǎn)婦和二胎、三胎寶寶的增多，研究認(rèn)為有必要對引起孕婦血小板抗體陽性影響因素進(jìn)行分析。因此，本研究對329例住院孕婦進(jìn)行了血小板抗體篩查，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月—2021年12月在廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院住院的329例妊娠期孕婦為研究對象，年齡18～44歲，所有孕婦均進(jìn)行血小板抗體篩查，篩查結(jié)果按年齡、既往妊娠情況、既往自然流產(chǎn)情況進(jìn)行分組。所有孕婦不規(guī)則抗體篩查均為陰性且無輸血史。

1.2 儀器和試劑 中型臺式離心機(jī)（湖南恒諾儀器有限公司）、電熱恒溫水浴箱（上海新苗醫(yī)療器械有限公司）、血小板抗體檢測試劑盒（荷蘭三昆試劑有限公司）、血小板抗體篩檢細(xì)胞和血小板抗體檢測用指示紅細(xì)胞（北京漢泰旭和生物科技有限公司）。所有試劑均在有效期內(nèi)使用并嚴(yán)格按照試劑盒使用說明進(jìn)行操作。

1.3 方法 采用分離膠-促凝管采集患者靜脈血，將凝結(jié)的血液標(biāo)本按1 500 r/min離心10 min獲得血清。若不能馬上檢測血清標(biāo)本，需將它保存在<-18 ℃的冰箱中。采用固相凝集法檢測血小板抗體，過程嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。結(jié)果判斷：陽性和弱陽性反應(yīng)表現(xiàn)為微孔底部形成一層紅細(xì)胞，表明血清中存在血小板抗體和（或）HLA抗體；陰性反應(yīng)表現(xiàn)為紅細(xì)胞在微孔板底部形成紐扣狀，表明血清中不存在血小板抗體和（或）HLA抗體。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 選擇SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計數(shù)資料用百分比表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 孕婦血小板抗體篩查結(jié)果 329例孕婦血小板抗體篩查陽性50例，陽性率為15.198%。

2.2 孕婦年齡與血小板抗體陽性的關(guān)系 各年齡段孕婦血小板抗體陽性例數(shù)和陽性率結(jié)果見表1，四者比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

2.3 妊娠次數(shù)與血小板抗體陽性率的關(guān)系 初產(chǎn)婦和經(jīng)產(chǎn)婦血小板抗體陽性例數(shù)和陽性率結(jié)果見表2，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。不同妊娠次數(shù)血小板抗體陽性例數(shù)和陽性率結(jié)果見表3，1次妊娠與2次及2次以上妊娠結(jié)果比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

注：1次妊娠與2次妊娠比較，χ2=4.835，P=0.028；1次妊娠與大于2次妊娠比較，χ2=7.305，P=0.007；3組的趨勢卡方檢驗，χ2=6.767，P=0.009。

2.4 流產(chǎn)史與血小板抗體陽性率關(guān)系 有流產(chǎn)史和無流產(chǎn)史的孕婦血小板抗體陽性例數(shù)和陽性率結(jié)果見表4，二者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

3 討論

血小板表面具有復(fù)雜的抗原系統(tǒng)，可分為血小板相關(guān)抗原和血小板特異性抗原。血小板相關(guān)抗原又包括紅細(xì)胞血型抗原和人類白細(xì)胞抗原（HLA），相應(yīng)的血小板抗體主要包括血小板相關(guān)抗體（主要是抗HLA-1類抗體）和血小板特異性抗體。妊娠期是一個母嬰抗原不斷交流的過程，特別是胎盤破裂時，胎兒血液進(jìn)入母體容易刺激母體產(chǎn)生血小板抗體。血小板抗體屬于IgG類抗體，分子量小，妊娠早期就能進(jìn)入胎兒血液循環(huán)系統(tǒng)破壞胎兒血小板，是導(dǎo)致早期流產(chǎn)和新生兒同種免疫性血小板減少性紫癜的主要原因[3]。臨床上導(dǎo)致新生兒同種免疫性血小板減少性紫癜的主要機(jī)制是，胎兒血小板在妊娠早期進(jìn)入母體血液循環(huán)，若胎兒遺傳的來自父親的血小板抗原基因不同于母親的血小板抗原基因，即可刺激母體產(chǎn)生針對胎兒血小板表面抗原的同種異體抗體，該抗體通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)與胎兒血小板表面抗原結(jié)合后被單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)清除，從而導(dǎo)致新生兒同種免疫性血小板減少性紫癜，嚴(yán)重者可誘發(fā)早期流產(chǎn)[2]。

本次調(diào)查研究采用了固相凝集法進(jìn)行篩查。固相凝聚法是目前國內(nèi)外檢測孕婦血小板抗體的主要方法，是國際上公認(rèn)的同種血小板抗體鑒定的金標(biāo)準(zhǔn)，靈敏度、特異度強，且方便應(yīng)用，易于標(biāo)準(zhǔn)化[4]。本次研究中，對329例孕婦進(jìn)行了血小板抗體篩查，篩查陽性的有50例，陽性率15.20%，這與王九菊等[5]的調(diào)查結(jié)果接近，稍高于國內(nèi)研究。這可能是因為不同地域人群之間存在差異，且本次研究對象完全來源于住院患者以及臨床高度懷疑存在血小板抗體者。研究結(jié)果，顯示孕婦血小板抗體陽性率在年齡方面的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），該結(jié)果與李賢見等人[6]的研究結(jié)果一致。本次研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)產(chǎn)婦血小板抗體陽性率顯著高于初產(chǎn)婦，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。趨勢卡方檢驗結(jié)果表明，隨著妊娠次數(shù)的增加，血小板抗體陽性率也越高，這與國內(nèi)報告的結(jié)果一致[7]。之所以經(jīng)產(chǎn)婦以及多次妊娠的孕婦血小板抗體陽性率更高，可能是多次妊娠的母體接受胎兒抗原刺激的機(jī)會增多所致。有研究表明，有早期流產(chǎn)史的孕婦血小板抗體陽性率顯著高于正常妊娠孕婦，且隨著流產(chǎn)次數(shù)的增加而增高；另一方面，血小板抗體陽性者發(fā)生早期流產(chǎn)的風(fēng)險也更高，血小板抗體是復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的主要原因[3，8]。本次研究結(jié)果顯示，有流產(chǎn)史的孕婦血小板抗體陽性率明顯增高，進(jìn)一步證實了血小板抗體與流產(chǎn)史的相關(guān)性。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報告，血小板抗體陽性率還與不孕密切相關(guān)，不孕患者血小板抗體陽性率顯著高于健康患者，繼發(fā)性不孕癥患者血小板抗體陽性率顯著高于原發(fā)性不孕癥，且患者血小板抗體陽性率隨不孕年齡逐漸增加[9]。另有研究表明，有輸血史的孕婦血小板抗體陽性率高于無輸血史的孕婦，輸血史可能是影響孕婦血小板抗體產(chǎn)生的又一影響因素[10]。總之，臨床上對于有妊娠史、流產(chǎn)史、輸血史或者生產(chǎn)過血小板減少癥患兒的孕婦，應(yīng)該及時檢測血小板抗體，以便及時發(fā)現(xiàn)抗體陽性孕婦，從而能夠及時采取有效措施，避免不良妊娠事件的發(fā)生。據(jù)國外文獻(xiàn)報道[11]，對于血小板抗體陽性孕婦，自妊娠中期開始可通過靜脈注射免疫球蛋白和皮質(zhì)類固醇，或者采用體外受精的方式預(yù)防FNAIT和流產(chǎn)的發(fā)生。研究表明，有FNAIT的兒童母親再次懷孕發(fā)生FNAIT的概率取決于胎兒父親攜帶的與母親血小板抗體靶向抗原相對應(yīng)的基因型。如果胎兒父親攜帶的抗原基因是純合子，則FNAIT的發(fā)生率接近100%；如果胎兒父親攜帶的抗原基因是雜合子，則為50%[12]。因此，有條件的醫(yī)院可以運用分子生物學(xué)技術(shù)對患兒及其父母進(jìn)行基因檢測，以便于臨床可以明確病因，及早采取預(yù)防和治療措施。

綜上所述，隨著三孩政策的實施，為了確保優(yōu)生優(yōu)育，有必要對孕婦進(jìn)行血小板抗體篩查，特別是有流產(chǎn)史和妊娠史的孕婦，以便早期評估流產(chǎn)和FNAIT的風(fēng)險。鑒于此，建議在常規(guī)產(chǎn)檢中加入血小板抗體檢測，以便更好地篩查出這種危險因素，做到早發(fā)現(xiàn)、早介入、早治療。同時，有條件的地區(qū)要摸清本地區(qū)HLA、HPA基因型分布情況，掌握本地區(qū)高?？乖到y(tǒng)，建立全區(qū)血小板捐獻(xiàn)者HLA、HPA基因型數(shù)據(jù)庫，實現(xiàn)血小板輸注治療HLA血型、HPA血型相匹配，減少血小板輸注無效的發(fā)生，使孕產(chǎn)婦和血小板減少患者及時有效接受血小板制劑輸注。

參考文獻(xiàn)

[1] KIEFEL V.Platelet antibodies in immune thrombocytopenia and related conditions[J].J Lab Med，2020，44（5）：209-217.

[2] 陳麗，周浩，郭博，等.孕婦孕期血小板抗體檢測的影響因素分析[J].中國輸血雜志，2019，32（6）：575-577.

[3] 謝一唯，王瑩，李育，等.血小板抗體對早期流產(chǎn)和新生兒同種免疫性血小板減少性紫癜的預(yù)測價值[J].浙江醫(yī)學(xué)，2019，41（6）：533-536.

[4] 王彩蓮，張軍.孕期血小板抗原抗體檢測的研究進(jìn)展[J].中華全科醫(yī)學(xué)，2018，16（8）：1355-1359.

[5] 王九菊，張麗潔，趙舒祺，等.血小板抗體與不良妊娠及妊娠次數(shù)的關(guān)聯(lián)性分析[J].中國輸血雜志，2021，34（1）：32- 34.

[6] 李賢見，黃裕林，黎妮，等.渝東北地區(qū)不同孕周的孕婦血小板抗體篩查分析[J].現(xiàn)代儀器與醫(yī)療，2019，25（6）：46- 48，91.

[7] 張軍，王彩蓮，陳麗，等.皖北地區(qū)1 025例孕婦抗-HPA抗體的初步研究[J].中國免疫學(xué)雜志，2020，36（5）：611-617.

[8] 劉波，原霞.不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者血小板抗體的檢測及陽性分布特征[J].新疆醫(yī)學(xué)，2019，49（7）：679-681.

[9] ZOU Y L，CHEN X T，WU C L，et al.Platelet antibodies in infertility patients[J].Clin lab，2021，67（3）：764-766.

[10] 張文麗，宗朋，周鴻晨，等.孕婦孕期血小板抗體篩查的影響因素分析[J].中國輸血雜志，2021，34（1）：34-36.

[11] TILLER H，HUSEBEKK A，AHLEN M T，et al.Current perspectives on fetal and neonatal alloimmune thrombocytopenia-increasing clinical concerns and new treatment opportunities[J].Int J Womens Health，2017，19（9）：223-234.

[12] 羅梓瑜，董偉群.云南地區(qū)育齡人群血小板抗原基因多態(tài)性初步研究[J].臨床輸血與檢驗，2021，23（6）：737-741.

（收稿日期：2023-09-28）