楊振國 陳秀芳 曹世林 汪斌 褚睿 鄭春美

抑郁癥是一種以情緒低落、思維遲緩、意志活動減退為主的心境障礙，而青少年抑郁癥是慢性的、消長變化的過程，持續(xù)到成年的風險是正常人的2～4倍[1]。青少年抑郁癥患者不僅可出現(xiàn)情緒障礙，也可發(fā)生認知障礙，以腦功能全面受損為主，是患者在緩解期仍不能恢復(fù)正常社會功能的主要原因[2]。及時評估患者認知障礙嚴重程度和治療效果，對患者治療方案的調(diào)整以及后期生活質(zhì)量的改善均有積極作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)，miRNA 在抑郁癥的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用[3]。miR-381-3p、miR-124 是miRNA 家族成員之一，其中miR-381-3p 沉默可保護神經(jīng)元，對減輕抑郁癥患者神經(jīng)元損傷具有積極作用，或可成為治療抑郁癥的潛在靶點[4]；而miR-124 表達可影響神經(jīng)元細胞DNA 轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致神經(jīng)元氧化應(yīng)激反應(yīng)增加，促進腦功能損傷，在抑郁癥患者中的表達明顯上調(diào)[5]。本研究就miR-381-3p、miR-124 檢測對青少年抑郁癥患者認知障礙嚴重程度評估和臨床療效的預(yù)測價值作一探討，以期為臨床診治提供參考，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2020 年1 月至2022 年4 月紹興市第七人民醫(yī)院收治的86 例青少年抑郁癥患者為研究對象，男49 例，女37 例；年齡12～18（15.49±1.36）歲；病程（6.39±2.13）個月；入院時簡易精神狀態(tài)檢查量表評分＜27 分[6]（認知障礙組）31 例，包括輕度14 例、中度12 例和重度5 例；≥27 分（無認知障礙組）55 例。認知障礙組與無認知障礙組患者性別、年齡、病程等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05），見表1。納入標準：（1）抑郁癥的診斷符合《精神病診斷與統(tǒng)計手冊（第5 版）》相關(guān)標準[7]，并結(jié)合臨床癥狀、病史等確診；（2）年齡12～18 歲；（3）入院時漢密爾頓焦慮量表（Hamilton anxiety scale，HAMA）評分≥14 分，漢密爾頓抑郁量表（Hamilton depression scale，HAMD）評分＞17 分[8]；（4）入院前未接受過相關(guān)治療，均為首次發(fā)病。排除標準：（1）臨床資料不完整；（2）患有其他嚴重的精神疾病或器質(zhì)性疾??；（3）因藥物、酒精等物質(zhì)濫用導(dǎo)致的精神障礙；（4）因外傷導(dǎo)致的精神障礙或認知障礙。本研究經(jīng)紹興市第七人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審查通過（批準文號：2019-003-01），所有患者或家屬知情同意。

表1 認知障礙組與無認知障礙組患者一般資料比較

1.2 治療方法 根據(jù)患者抑郁程度給予針對性的心理干預(yù)、認知療法、重復(fù)經(jīng)顱磁刺激療法等，其中心理干預(yù)包括鼓勵支持、興趣培養(yǎng)、精神放松、心理想象、冥想等，在此治療基礎(chǔ)上，均予草酸艾司西酞普蘭（規(guī)格：10 mg/片，國藥準字：H20213259，廣東東陽光藥業(yè)有限公司）口服治療，初始劑量10 mg/d，1周后改為20 mg/d；同時予奧氮平（規(guī)格：5 mg/片，國藥準字：H20213319，成都苑東生物制藥股份有限公司）口服治療，初始劑量2.5 mg/d，1 周后改為5 mg/d。治療3 個月為1 個療程。

1.3 miR-381-3p、miR-124 相對表達量檢測 采用RT-PCR法。治療前抽取患者空腹靜脈血3 mL，使用低速離心機進行離心，獲得血清后待檢。取300 μL血清標本，使用Trizol 總RNA 試劑盒（美國Thermo Scientific 公司）提取樣本總RNA，并將總RNA 反轉(zhuǎn)錄為cDNA。然后使用RT-PCR 儀（山東博科科學(xué)儀器有限公司）進行反應(yīng)，以甘油醛-3-磷酸脫氫酶為內(nèi)參基因，采用2-ΔΔCt法計算miR-381-3p、miR-124相對表達量。

1.4 療效評估 治療3 個月后評估療效，HAMA 評分≥7 分或HAMD 評分≥8 分認定為療效不佳，HAMA 評分＜7分或HAMD評分＜8分認定為療效良好[9]。HAMA共包含14 個項目，評分越高提示焦慮程度越嚴重；HAMD共包含17個條目，評分越高提示抑郁程度越嚴重。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 20.0 統(tǒng)計軟件。計量資料以表示，兩組間比較采用兩獨立樣本t檢驗；多組間比較采用單因素方差分析，進一步兩兩比較采用SNK-q檢驗。miR-381-3p、miR-124 單獨或聯(lián)合檢測對臨床療效的預(yù)測效能采用ROC 曲線分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 認知障礙組與無認知障礙組患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較 認知障礙組患者miR-381-3p 相對表達量明顯低于無認知障礙組，miR-124相對表達量則明顯高于無認知障礙組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 認知障礙組與無認知障礙組患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較

2.2 不同程度認知障礙患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較 不同程度認知障礙患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），其中miR-381-3p 相對表達量為輕度＞中度＞重度（均P＜0.05），miR-124 相對表達量為重度＞中度＞輕度（均P＜0.05），見表3。

表3 不同程度認知障礙患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較

2.3 不同療效患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較 治療3 個月后評估療效，結(jié)果顯示療效良好66例，療效不佳20 例。療效不佳組miR-381-3p 相對表達量明顯低于療效良好組，miR-124 相對表達量則明顯高于療效良好組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表4。

表4 不同療效患者miR-381-3p、miR-124 相對表達量比較

2.4 miR-381-3p、miR-124 單獨或聯(lián)合檢測對臨床療效的預(yù)測效能 miR-381-3p、miR-124 單獨預(yù)測患者臨床療效的AUC 分別為0.719、0.695，兩者聯(lián)合預(yù)測的AUC 為0.782，兩者聯(lián)合檢測的效能明顯高于單獨檢測（均P＜0.05），見表5 和圖1。

圖1 miR-381-3p、miR-124 單獨或聯(lián)合預(yù)測臨床療效的ROC曲線

表5 miR-381-3p、miR-124 單獨或聯(lián)合檢測對臨床療效的預(yù)測效能

3 討論

臨床上認為抑郁癥的發(fā)生與生物、環(huán)境等因素有關(guān)，抑郁癥早期患者可表現(xiàn)出思維遲緩、心境低落等癥狀，但隨著疾病的進展，患者自傷和自殺發(fā)生率明顯升高[10]。吳祖勤等[11]研究發(fā)現(xiàn)，青少年的認知功能仍處于發(fā)育階段，當發(fā)生抑郁癥時可對患者認知功能產(chǎn)生不良影響，若合并認知障礙有可能影響患者后期恢復(fù)。因此，尋找一種評估患者認知障礙嚴重程度及預(yù)測臨床療效的有效指標，對于臨床早期干預(yù)與指導(dǎo)治療具有重要意義。

miRNA 在人體內(nèi)具有基因調(diào)控的作用，在腦組織中表達豐富，可維持神經(jīng)元功能，同時調(diào)節(jié)神經(jīng)的可塑性，促進神經(jīng)再生。臨床研究發(fā)現(xiàn)，miRNA 與神經(jīng)元細胞生長發(fā)育、中樞神經(jīng)炎癥反應(yīng)、突觸可塑性等一系列病理及生理過程密切相關(guān)。張振華等[12]研究表明，miRNA 與認知障礙的發(fā)生密切相關(guān)。許鑫等[13]通過建立術(shù)后認知障礙小鼠模型，以分析小鼠海馬miRNA 表達變化及生物信息，結(jié)果顯示小鼠海馬22 個miRNA 存在差異表達，這些miRNA 可能與術(shù)后認知障礙的發(fā)病機制有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，認知障礙組miR-381-3p 相對表達量明顯低于無認知障礙組，而miR-124 相對表達量則高于無認知障礙組，且miR-381-3p 相對表達量隨著認知障礙嚴重程度的增加而降低，而miR-124 相對表達量隨著認知障礙嚴重程度的增加而升高?？梢?，miR-381-3p、miR-124 相對表達量異常與患者認知障礙密切相關(guān)，或可成為評估患者認知功能損傷的參考指標[14-15]。李世利等[16]研究發(fā)現(xiàn)，認知障礙的發(fā)生與神經(jīng)膠質(zhì)細胞激活、海馬區(qū)促炎細胞表達有關(guān)，而miR-381-3p 可靶向調(diào)控腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子，過表達miR-381-3p 可促進腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子相對表達，從而保護神經(jīng)元，減輕皮質(zhì)酮對神經(jīng)元的損傷。miR-124 的表達上調(diào)后可激活NF-KB 信號通路，參與神經(jīng)元細胞代謝微環(huán)境的損害過程，影響其修復(fù)能力。

有研究指出，miRNA 可調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)合成、細胞分化，并重塑神經(jīng)元結(jié)構(gòu)，從而參與抑郁癥的發(fā)生、發(fā)展過程中[17]。miR-124 在腦組織中表達豐富，可通過降低糖皮質(zhì)激素受體活性，抑制腦圓形生長因子生長，同時可重塑海馬神經(jīng)結(jié)構(gòu)，影響機體5-羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）釋放，繼而引發(fā)抑郁癥[18]。臨床發(fā)現(xiàn)首發(fā)抑郁癥患者miR-124 相對表達量明顯增加，且與治療效果關(guān)系密切，對患者診療具有重要參考價值[19]。miR-381-3p 可保護神經(jīng)元，對減輕抑郁癥患者神經(jīng)元損傷具有積極作用[20]。黃文武等[21]研究顯示，特異性沉默miR-381-3p 可能通過調(diào)節(jié)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子/磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶信號通路和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B 信號通路的蛋白而調(diào)控神經(jīng)細胞凋亡、增殖、遷移、侵襲，進而改善抑郁癥大鼠海馬神經(jīng)細胞生物學(xué)的異常行為。張茹等[22]評估烏靈膠囊干預(yù)抑郁癥效果的研究顯示，抑郁癥患者使用烏靈膠囊治療有效者miR-381-3p 表達高于無效者，提示miR-381-3p 高表達在保護海馬神經(jīng)元、減輕抑郁癥認知損傷中發(fā)揮關(guān)鍵作用。本研究結(jié)果顯示，療效不佳組miR-381-3p 相對表達量低于療效良好組，miR-124相對表達量則高于療效良好組；分析原因可能與miR-381-3p 降低、miR-124 升高促進5-HT 轉(zhuǎn)運體產(chǎn)生，從而抑制5-HT產(chǎn)生，進而加重患者焦慮、抑郁情況，影響抗抑郁效果，導(dǎo)致臨床療效差有關(guān)[23]。本研究進一步繪制ROC曲線發(fā)現(xiàn)，miR-381-3p、miR-124檢測對患者臨床療效均有一定的預(yù)測價值，提示在臨床治療中對于miR-381-3p 相對表達量降低、miR-124 相對表達量升高的患者需考慮改變治療方式。相對于單獨預(yù)測，miR-381-3p、miR-124聯(lián)合檢測的預(yù)測效能更高。

綜上所述，miR-381-3p 與miR-124 聯(lián)合檢測有助于青少年抑郁癥患者認知障礙嚴重程度的評估和療效預(yù)測。