朱德雯 熊靜霆

1 湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院檢驗科 （湖北 十堰 442000）

2 華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬梨園醫(yī)院檢驗科 （湖北 武漢 430000）

內(nèi)容提要： 目的：旨在探討國產(chǎn)邁瑞CL-6000i化學(xué)發(fā)光分析儀對甲狀腺功能檢測的臨床應(yīng)用可行性。方法：參考美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會EP15-A2和EP9-A2方案進行性能驗證和方法學(xué)比對，用邁瑞CL-6000i與索靈LIAISON XL兩種化學(xué)發(fā)光免疫分析儀分別檢測103份新鮮血清標(biāo)本的促甲狀腺激素（TSH）、游離甲狀腺素（FT4）和游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）水平，比較兩種儀器的相關(guān)性與一致性。結(jié)果：國產(chǎn)邁瑞CL-6000i化學(xué)發(fā)光免疫分析儀與進口索靈LIAISON XL化學(xué)發(fā)光免疫分析儀在FT3、FT4和TSH項目的相關(guān)性分析上，決定系數(shù)R2分別為0.9525、0.9500和0.9741；兩種檢測系統(tǒng)FT3、FT4和TSH在醫(yī)學(xué)決定水平處，預(yù)期偏倚分別為-0.30%～6.10%；7.20%～26.00%；-18.40%～-3.60%。結(jié)論：邁瑞與索靈化學(xué)發(fā)光免疫分析儀具有較好的相關(guān)性，在FT3項目檢測表現(xiàn)一致性較好，F(xiàn)T4和TSH項目檢測系統(tǒng)預(yù)期偏倚存在一定差異。

近30年來全球范圍內(nèi)甲狀腺疾病的發(fā)生率不斷升高，中國成年人甲狀腺疾病患病率超過50%[1]。甲狀腺激素幾乎作用于人體所有有核細(xì)胞并影響其生長發(fā)育與能量代謝[2]。甲狀腺功能檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和標(biāo)準(zhǔn)化至關(guān)重要，當(dāng)使用新的檢測系統(tǒng)或方法時均需要進行方法學(xué)比對，保證分析結(jié)果的質(zhì)量、一致性和可靠性。國際臨床化學(xué)聯(lián)合會針對游離三碘甲狀腺原氨酸（Free Triiodothyronine，F(xiàn)T3）、游離甲狀腺素（Free Thyroxine，F(xiàn)T4）和促甲狀腺激素（Thyroid-Stimulating Hormone，TSH）進行了方法學(xué)比對，提出大部分FT3和FT4的檢測方法可以通過建立對參考方法測量過程的溯源性，能夠在很大程度上糾正偏差，提高檢測方法的精確度、穩(wěn)定性和一致性[3,4]。但TSH沒有公認(rèn)的可溯源的參考方法，而可以通過一致化的校準(zhǔn)來完成[5]。意大利索靈LIAISON XL化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)有性能穩(wěn)定、重復(fù)性好、結(jié)果準(zhǔn)確性高的優(yōu)點，但檢測成本較高[6]。國產(chǎn)儀器邁瑞CL-6000i化學(xué)發(fā)光分析檢測系統(tǒng)在精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍和參考區(qū)間上也符合相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)[7]。本研究依據(jù)美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會EP15-A2和EP9-A2方案，通過對進口索靈LIAISON XL和新購進的國產(chǎn)邁瑞CL-6000i全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進行FT3、FT4和TSH比對試驗，比較不同檢測系統(tǒng)的一致性，并主要對實驗室中的新方法進行評價，為甲狀腺功能紊亂診斷試驗提供參考。

1.資料與方法

1.1 一般資料

精密度驗證標(biāo)本：采用邁瑞公司甲狀腺功能復(fù)合低值L、高值H定值質(zhì)控品（批號：2020100100）進行精密度驗證。

血清：收集華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬梨園醫(yī)院2021年2月～3月無溶血、黃疸、脂血的臨床檢測剩余標(biāo)本103例，每份標(biāo)本不少于0.5mL。用于國外儀器索靈LIAISON XL（DiaSorin，Italy）與國產(chǎn)儀器邁瑞CL-6000i的方法學(xué)比對與偏倚評估。

儀器與試劑：索靈LIAISON XL（DiaSorin，Italy）和邁瑞CL-6000i全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套試劑和邁瑞公司校準(zhǔn)品FT3、FT4和TSH（批號分別為：2020060100，2020080100，2020120100）。

1.2 方法

1.2.1 儀器操作

按照廠家要求對儀器進行維護保養(yǎng)、校準(zhǔn)和每日質(zhì)控，在保證定標(biāo)和質(zhì)控在控的情況下，對儀器進行性能驗證。

1.2.2 精密度

依據(jù)美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會EP15-A2的評價方法，使用邁瑞公司甲狀腺功能復(fù)合L、H定值質(zhì)控品，每天重復(fù)檢測3次，連續(xù)5d。計算L、H水平的實驗室總精密度。

1.2.3 方法學(xué)比對

參考美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會EP9-A2方案，本試驗至少需要40個患者的樣本，隨著樣本數(shù)的增多，本試驗統(tǒng)計評價的可信度也會提高。本次試驗分別用邁瑞和索靈系統(tǒng)檢測血清樣本的FT3、FT4和TSH水平，共使用103個標(biāo)本。其中，索靈LIAISON XL全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀連續(xù)多年參加國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗中心和湖北省臨檢中心的室間質(zhì)評且成績均為優(yōu)秀，溯源性好。結(jié)果根據(jù)絕對差值平均值的4倍與相對差值平均值的4倍進行離群值的判斷，且最多可有2.5%的數(shù)據(jù)被定義為方法間離群點。對FT3、FT4和TSH 3個項目分別繪制散點圖，顯示回歸方程Y=aX+b，并計算決定系數(shù)R2，95%可信區(qū)間，并計算預(yù)期偏倚。使用制造商提供的參考范圍，以最低值與最高值作為本次實驗的醫(yī)學(xué)決定水平，并分別計算在此醫(yī)學(xué)決定水平的預(yù)期偏倚。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

使用Excel、SPSS和GraphPad Prism 6.0軟件分析整理數(shù)據(jù)，計算得出相關(guān)系數(shù)和回歸方程。

2.結(jié)果

2.1 邁瑞CL-6000i儀器的FT3、FT4和TSH項目的精密度實驗結(jié)果

結(jié)果如表1所示，F(xiàn)T3、FT4和TSH項目的高、低值質(zhì)控品在邁瑞儀器上連續(xù)檢測5d，每天重復(fù)測定3次。FT3、FT4和TSH的低值和高值變異系數(shù)分別為3.80%，2.22%；3.87%，2.67%；2.25%，1.76%。變異系數(shù)均小于性能要求的8.3%，說明邁瑞CL-6000i儀器的FT3、FT4和TSH項目精密度良好。

表1.邁瑞CL-6000i精密度測定結(jié)果

2.2 邁瑞CL-6000i和索靈LIAISON XL臨床樣本的比對試驗結(jié)果

兩種檢測系統(tǒng)進行相關(guān)性回歸分析見圖1，F(xiàn)T3、FT4和TSH各方程的R2分別為0.9525、0.9500和0.9741，均≥0.95。Bland-Altman圖見圖2，顯示了兩種檢測系統(tǒng)間的絕對差異值，根據(jù)EP9-A2文件，認(rèn)為能滿足評價試驗的要求，兩臺儀器檢測FT3、FT4和TSH具有較好的相關(guān)性。

圖1.兩種檢測系統(tǒng)的相關(guān)性分析

圖2.樣本檢測結(jié)果的Bland-Altman圖

2.3 邁瑞CL-6000i儀器的偏差估計

結(jié)果如表2 所示，以索靈LIAISON XL 作為參比儀器，評價邁瑞CL-6000i 的檢測結(jié)果，F(xiàn)T3、FT4和TSH 檢測項目在醫(yī)學(xué)決定水平處預(yù)期偏倚分別為-0.30%～6.10%；7.20%～26.00%；-18.40%～-3.60%。

表2.邁瑞CL-6000i在醫(yī)學(xué)決定水平處的預(yù)期偏倚

3.討論

甲狀腺功能檢測對于甲狀腺疾病的診斷至關(guān)重要。部分甲狀腺疾病由于一些臨床癥狀容易與其他疾病混淆很難被診斷，但隨著醫(yī)療水平的提高，借助血液的甲狀腺功能檢測，影像學(xué)檢查與臨床癥狀，可以較準(zhǔn)確地確定是否是由甲狀腺的問題導(dǎo)致。目前，臨床常用的甲狀腺功能相關(guān)的血液檢測項目有血清中四碘甲狀腺原氨酸、TT3、FT4、FT3、TSH、甲狀腺球蛋白、甲狀腺過氧化物酶抗體、甲狀腺球蛋白抗體、促甲狀腺素受體抗體。其中最明確的方法就是檢測血液中甲狀腺相關(guān)激素含量，最主要的檢測項目有FT3、FT4和TSH。FT3和FT4是甲狀腺激素循環(huán)血中活性部分，發(fā)揮主要的生理功能；TSH由垂體分泌，在下丘腦-垂體-甲狀腺軸中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用[8]。通過FT3、FT4和TSH檢測項目可以簡便、直觀地了解甲狀腺功能狀態(tài)，是評價甲狀腺功能的基礎(chǔ)檢測方法。此外，當(dāng)臨床醫(yī)生治療甲狀腺疾病患者使用藥物左甲狀腺素鈉片時，需要依據(jù)甲狀腺功能檢測結(jié)果及臨床表現(xiàn)來確定患者的個體日劑量。因此檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性與疾病的診斷和治療直接相關(guān)，而實驗室質(zhì)量控制和質(zhì)量保證是保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的前提。

當(dāng)前市面上有許多檢測系統(tǒng)用于測定甲狀腺功能，但由于其使用的檢測原理及試劑的不同，導(dǎo)致結(jié)果存在一定程度上的差異。近年來，由于檢驗醫(yī)學(xué)發(fā)展的需要，同一實驗室可能擁有多臺不同品牌的化學(xué)發(fā)光分析儀，且隨著國內(nèi)研發(fā)技術(shù)的不斷成熟，越來越多國產(chǎn)儀器被引入，承擔(dān)著相當(dāng)重要的日常檢測工作。對于新引進的檢測系統(tǒng)，通過儀器的性能驗證和臨床樣本比對，可以作為室內(nèi)質(zhì)量評價及結(jié)果可比性的有力補充。國產(chǎn)的邁瑞CL-6000i化學(xué)發(fā)光免疫分析儀具有檢測速度快、儀器性能穩(wěn)定、測定及時、使用樣本量較少等優(yōu)點，便于在急診檢驗中推廣。良好的精密度是儀器進行其他各項性能驗證的前提和基礎(chǔ)。本次研究選擇質(zhì)控品進行驗證，結(jié)果表明，國產(chǎn)邁瑞CL-6000i化學(xué)發(fā)光免疫分析儀FT3、FT4和TSH的精密度最小值是1.76%，精密度最大值是3.87%，表明該儀器檢測結(jié)果可重復(fù)性良好，可為臨床提供可靠依據(jù)。

同一項目在不同儀器之間的檢測結(jié)果需要具有可比性，以確保臨床能夠根據(jù)檢測結(jié)果對疾病類型進行正確判斷。本研究將實驗室中參加衛(wèi)生部室間質(zhì)評活動成績優(yōu)秀的索靈LIAISON XL作為參比儀器，國產(chǎn)邁瑞CL-6000i作為試驗儀器，按照要求進行比對分析，結(jié)果顯示，兩種儀器在FT3、FT4和TSH項目的相關(guān)性分析上，決定系數(shù)R2均≥0.95，說明兩個系統(tǒng)在檢測甲狀腺功能三項上有較好的相關(guān)性。由于目前還沒有公認(rèn)的甲狀腺參考范圍，故采用了制造商的參考范圍，最低值和最高值作為評價的醫(yī)學(xué)決定水平。FT3項目的檢測結(jié)果兩個系統(tǒng)接近，百分偏倚是-0.30%，6.10%；邁瑞系統(tǒng)FT4項目的檢測結(jié)果較索靈系統(tǒng)百分偏倚是7.20%，26.00%；邁瑞系統(tǒng)TSH項目的檢測結(jié)果較索靈系統(tǒng)的百分偏倚是-3.60%，-18.40%。兩種系統(tǒng)的FT3項目一致性評價較好，F(xiàn)T4與TSH的預(yù)期偏倚存在一定差異。兩種儀器在同一項目比對結(jié)果存在差異的原因，除了標(biāo)本本身局限可能導(dǎo)致的統(tǒng)計分析偏差外，試劑制備、方法學(xué)和系統(tǒng)性能差異等因素，均有可能導(dǎo)致同一標(biāo)本在不同儀器間檢測結(jié)果的差異。此外，由于免疫檢測項目標(biāo)準(zhǔn)不同，各廠家的參考范圍設(shè)置也不一致。

總之，自動化化學(xué)發(fā)光分析儀已廣泛應(yīng)用于臨床實驗室檢驗，且以國外廠商進口為主，隨著我國對科技產(chǎn)業(yè)的大力投入以及國民經(jīng)濟的飛速發(fā)展，國內(nèi)相關(guān)技術(shù)不斷發(fā)展，且市場占有率正逐步提升。當(dāng)前臨床上檢測甲狀腺功能的系統(tǒng)有許多，如進口雅培、貝克曼、西門子、羅氏、索靈等，國產(chǎn)邁瑞、邁克、新產(chǎn)業(yè)等[9]。在現(xiàn)有條件下，為避免給臨床診療帶來困擾，應(yīng)根據(jù)不同的檢測儀器制定相應(yīng)的診斷臨界值，對于不同檢測系統(tǒng)甲狀腺功能檢測結(jié)果間的互認(rèn)問題，還需要統(tǒng)一溯源等方案來解決[10,11]。未來甲狀腺功能檢測的標(biāo)準(zhǔn)化至關(guān)重要，不同儀器間結(jié)果的比對可以幫助臨床醫(yī)生了解患者的護理差異從而制定糾正這些差異的策略，同時也有利于實驗室檢驗人員選擇標(biāo)準(zhǔn)化高的實驗設(shè)備[12]。