梁海英
(山東省臨沂市莒南縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 山東臨沂 276600)
1907年由Josef Marek 首次報(bào)道馬立克氏?。?967年,英國(guó)和美國(guó)的兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室從接種病雞細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)物中分離出皰疹病毒,隨后用從羽毛囊中提取的病毒進(jìn)行感染試驗(yàn),證實(shí)馬立克氏病的病原體是病毒;1985年,有相關(guān)研究建立了馬立克氏病腫瘤誘導(dǎo)的淋巴母細(xì)胞系,測(cè)定了腫瘤細(xì)胞的T 細(xì)胞特性、細(xì)胞溶解期和疾病的免疫抑制期,闡明了暫時(shí)性麻痹與馬立克氏病病毒感染的關(guān)系,并分離出馬立克病毒。在未開發(fā)出有效疫苗之前,馬立克氏病造成的經(jīng)濟(jì)損失非常慘重,隨后幾年,對(duì)馬立克氏病的研究不斷有新發(fā)現(xiàn),制作出馬立克氏病弱毒疫苗和火雞皰疹病毒(HVT)疫苗,使得免疫接種疫苗成為防控雞馬立克氏病的有效手段。
雞馬立克氏病破壞法氏囊、胸腺、脾臟等免疫器官,可以引起雞只嚴(yán)重的免疫抑制,病雞更易繼發(fā)相關(guān)疾病,嚴(yán)重影響各種預(yù)防疫苗的有效性。20世紀(jì)70年代初,中國(guó)科學(xué)家對(duì)馬立克氏病的病因?qū)W、流行病學(xué)、病理學(xué)、診斷和控制進(jìn)行了系統(tǒng)研究,先后研制出凍干火雞皰疹病毒疫苗、1 型減毒疫苗等相關(guān)疫苗,并制定了雞馬立克氏病的診斷和監(jiān)測(cè)方法,提出了行之有效的綜合防控措施。這些成果的推廣應(yīng)用,大大減少了雞馬立克氏病帶來的經(jīng)濟(jì)損失。雖然新一代疫苗研究取得重大進(jìn)展,目前我國(guó)馬立克氏病防控工作取得積極成果,但病毒已經(jīng)在我國(guó)廣泛流行,已形成具有一定規(guī)模的流行趨勢(shì),因此在馬立克氏病流行的地區(qū)受疫情的風(fēng)險(xiǎn)仍然很高,且?guī)缀鯖]有減弱的跡象,因此需要建立合理規(guī)范的防治措施,及時(shí)做好雞馬立克氏病的免疫工作,制定雞場(chǎng)對(duì)雞馬立克氏病的應(yīng)對(duì)策略。
馬立克病毒是雞馬立克氏病的病原體,是一種細(xì)胞結(jié)合性皰疹病毒,其嗜淋巴細(xì)胞特性、分子結(jié)構(gòu)以及基因組結(jié)構(gòu)與皰疹病毒相似,同屬于皰疹病毒科中甲型皰疹病毒亞科的馬立克病毒屬。根據(jù)馬立克病毒的毒力,可將雞馬立克毒株分為幾種致病類型,主要包括弱馬立克病毒(mMDV)、強(qiáng)毒馬立克病毒(vMDV)、超強(qiáng)馬立克病毒(vvMDV) 和特超強(qiáng)馬立克病毒(vv+MDV)。馬立克病毒的病毒粒子的核衣殼呈六角形,具有包膜,呈圓柱形,典型的皰疹病毒顆粒,通常存在于受感染組織和培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞核膜以及核小泡中,有時(shí)也存在于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外液中。目前已鑒定出三種血清型:Ⅰ型致癌,Ⅱ型非致癌,Ⅲ型火雞皰疹病毒(簡(jiǎn)稱HVT)。火雞皰疹病毒與馬立克病毒具有明顯的不同,火雞皰疹病毒對(duì)雞不致病,但可作為預(yù)防雞馬立克氏病有效的疫苗。馬立克病毒可以感染細(xì)胞中的DNA 結(jié)構(gòu),并且可以在病毒復(fù)制的細(xì)胞核中看到線性病毒DNA,并且馬立克病毒基因組末端含有與宿主細(xì)胞端粒相似的序列,也進(jìn)一步證實(shí)了病毒DNA 優(yōu)先整合區(qū)域在潛伏感染細(xì)胞中靠近宿主細(xì)胞DNA 端粒處。
雞是馬立克氏病最重要的天然宿主,而鵪鶉、火雞和野雞也易感染該疾病。幾乎所有雞,包括觀賞雞、本地品種雞和熱帶叢林雞,都易感并出現(xiàn)腫瘤特征。許多其他鳥類,包括鴨子、麻雀、鷓鴣、鴿子和孔雀,都對(duì)馬立克氏病有抵抗力,但接種馬立克氏病毒疫苗的鴨子會(huì)產(chǎn)生抗體。研究表明,口腔感染不是重要的傳播途徑。研究表明,被褥中的蜱蟲、蚊子等節(jié)肢動(dòng)物不能傳播馬立克氏病,馬立克氏病毒也不通過垂直傳播。馬立克氏病感染的病雞是主要傳染源,而禽類之間的直接或間接接觸可以導(dǎo)致病毒通過空氣而傳播。研究發(fā)現(xiàn),羽囊上皮細(xì)胞中復(fù)制的馬立克氏病的病毒具有高度傳染性,這使得完整的病毒顆??梢耘c羽毛以及皮屑一起釋放到環(huán)境中,保持病毒顆粒對(duì)外界較強(qiáng)的抵抗力,并幾個(gè)月后仍具有傳染性。因此雞馬立克病毒一旦感染了雞群,將會(huì)迅速傳播到整個(gè)雞群,而不管畜群的免疫狀況如何,從而引起雞只在接觸馬立克病毒后2 周開始排毒,并在4 周達(dá)到高峰[1]。大多數(shù)感染馬立克氏病的病雞一生都被帶毒,病毒可以不斷地從皮屑脫落的羽囊中釋放出具有傳染性的馬立克病毒,從而導(dǎo)致馬立克氏病傳播難以控制。
影響雞馬立克氏病發(fā)病率或死亡率的因素很多,可歸因于病原體因素、宿主因素、環(huán)境因素或其他因素。最重要的致病因素是毒株毒力、病毒劑量以及感染途徑。馬立克病毒的毒力可分為有輕型、強(qiáng)毒型、超強(qiáng)毒型和超超強(qiáng)毒型,毒力越強(qiáng),發(fā)病率越高。但對(duì)于特定的毒株,其毒力部分取決于宿主的基因構(gòu)成。馬立克氏病分為三種不同類型:神經(jīng)型、內(nèi)臟型以及眼型。
神經(jīng)型主要影響周圍神經(jīng),癥狀因感染神經(jīng)部位的不同而異。坐骨神經(jīng)最常侵害,臨床表現(xiàn)為病雞步態(tài)不穩(wěn),先是局部癱瘓,后是完全癱瘓,無(wú)法站立。當(dāng)肱神經(jīng)受到影響時(shí),受影響一側(cè)的羽翼導(dǎo)致下垂。如果支配頸部肌肉的神經(jīng)受到影響,病雞會(huì)出現(xiàn)低頭或頭部和頸部扭曲。迷走神經(jīng)的侵害會(huì)導(dǎo)致失音、甲狀腺腫大以及呼吸急促。腹瀉的癥狀通常伴隨著腹神經(jīng)的損傷,導(dǎo)致病雞經(jīng)歷進(jìn)食困難、饑餓、脫水、最后精疲力竭而死亡。
內(nèi)臟型的臨床特征為急性發(fā)作為主,發(fā)病突然,初期以雞群大量精神疲憊為主。幾天后,一些病雞出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào),隨后出現(xiàn)單側(cè)或雙側(cè)肢體麻痹,并出現(xiàn)一些病雞在沒有典型臨床癥狀的情況下死亡,另有許多病雞出現(xiàn)嚴(yán)重脫水、營(yíng)養(yǎng)不良并進(jìn)入昏迷狀態(tài)。
眼型表現(xiàn)為病雞的視力下降或消失,虹膜失去正常色素沉著,變成同心環(huán)或斑塊,逐漸褪色為彌漫性灰白色,出現(xiàn)不規(guī)則的瞳孔邊緣的癥狀,并出現(xiàn)體重減輕、食欲不振以及腹瀉。馬立克氏病廣泛存在于世界所有家禽養(yǎng)殖國(guó)家,根據(jù)病程可分為急性型和經(jīng)典型。馬立克氏病的急性形式的特征在于內(nèi)臟、肌肉和皮膚的多發(fā)性淋巴瘤的形成,而經(jīng)典形式的特征在于多發(fā)性神經(jīng)炎。
馬立克氏病毒傳染性很強(qiáng),事實(shí)上,它在雞群中無(wú)處不在。很多人把檢測(cè)病毒或者特異性抗體作為馬立克氏病診斷的依據(jù),其實(shí)這是一個(gè)誤區(qū)。必須根據(jù)流行病學(xué)、癥狀、病理學(xué)和腫瘤特異性標(biāo)志物等疾病特異性標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷,而血清學(xué)方法和病毒學(xué)方法主要用于監(jiān)測(cè)雞的感染情況。神經(jīng)性馬立克氏病的鑒別診斷可根據(jù)病雞的特征性癱瘓癥狀和相應(yīng)周圍神經(jīng)的病理變化確定[2]。
利用病雞的腫瘤組織、抗凝血或含血液淋巴細(xì)胞的懸液作為接種材料,并接種在雞胚成纖維細(xì)胞中,待出現(xiàn)蝕斑后收獲蓋片并用冷丙酮固定,然后用單抗作免疫熒光染色進(jìn)行鑒定。檢測(cè)組織中的病毒抗原或核酸用于查明有病毒感染存在。聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)試驗(yàn)可用來擴(kuò)增馬立克病毒特異序列,可區(qū)分致弱株和野毒株。然而PCR 的敏感性有時(shí)不足以檢測(cè)出潛伏感染,因?yàn)殛?yáng)性細(xì)胞少,而每個(gè)細(xì)胞中病毒基因拷貝數(shù)較少。因此常用定量PCR 試驗(yàn)分析感染雞組織中病毒載量,也正成為馬立克病診斷和流行病學(xué)研究必不可少的手段[3]。另外抗體檢測(cè)雞血清特異抗體可用于監(jiān)測(cè)雞群馬立克病毒感染情況、研究病毒發(fā)病機(jī)理和監(jiān)控SPF 雞群。常用的有瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、熒光抗體試驗(yàn)、ELISA 和病毒中和試驗(yàn)等多種方法。
加強(qiáng)雞馬立克氏病的凈化,對(duì)雞進(jìn)行嚴(yán)格檢疫,及時(shí)淘汰帶毒雞者,對(duì)飼養(yǎng)環(huán)境及時(shí)消毒,建立健康雞群,培育健康后代。需要根據(jù)雞馬立克病毒抗體水平、生產(chǎn)類型和雞的飼養(yǎng)方式制定相應(yīng)的免疫程序,合理接種雞馬立克氏病相關(guān)疫苗,同時(shí)監(jiān)測(cè)雞體內(nèi)的抗體水平,才能獲得良好的免疫效果。通過適當(dāng)?shù)娘曫B(yǎng)管理,提高雞只的抗病能力。同時(shí)可添加益生菌、多種維生素、免疫增強(qiáng)劑、抗氧化補(bǔ)充劑,使雞群更能抵抗疾病。目前的研究發(fā)現(xiàn),幾乎所有的雞群都會(huì)發(fā)生馬立克病毒的強(qiáng)毒感染,而接種疫苗并不能阻止強(qiáng)毒感染,只能阻止強(qiáng)毒感染的致癌作用,因此即使與其他綜合防控措施配合,也未必能達(dá)到預(yù)期的防控效果。從接種雞馬立克氏病疫苗到得到可靠保護(hù)需要一周左右的時(shí)間,因此綜合防控應(yīng)防止孵化和飼養(yǎng)期間的早期感染為目標(biāo)。使孵化場(chǎng)應(yīng)遠(yuǎn)離禽舍,嚴(yán)格消毒,入雛前應(yīng)徹底清潔消毒,出雛前后用甲醛對(duì)輸卵管進(jìn)行熏蒸消毒,育雛雞舍應(yīng)遠(yuǎn)離其他日齡雞舍。
加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,預(yù)防其他疾病的繼發(fā)感染,提高機(jī)體的免疫力是雞馬立克氏病重要的防控措施。另外,可以將現(xiàn)代生物技術(shù)與傳統(tǒng)育種技術(shù)相結(jié)合,要改善飼養(yǎng)條件,加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,提高雞的身體機(jī)能,及時(shí)做好各種疾病的免疫工作,制定禽場(chǎng)馬立克氏病防治策略,做到科學(xué)飼養(yǎng),提高養(yǎng)雞業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。■