高 研 彭綠春 李世峰 解瑋佳 宋 杰 張 露熊俊芬 趙正雄，

（1云南農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院，云南 昆明 650201；2云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所/國(guó)家觀賞園藝工程技術(shù)研究中心/云南省花卉育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/云南花卉技術(shù)工程研究中心，云南 昆明 650205）

高山杜鵑（Rhododendronhybrids）是杜鵑花科杜鵑花屬中常綠闊葉種類及其雜交后代的總稱［1］。因其株型緊湊、花苞呈球形開(kāi)放、顏色豐富艷麗，在城市園林綠化及盆花栽培中具有較高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，已成為世界公認(rèn)的高檔盆花［2］。目前云南地區(qū)高山杜鵑數(shù)量占全國(guó)總量的80%以上［3］。粉精靈是云南省農(nóng)科院選育出的高山杜鵑新品種，具香味且易形成花芽，在花卉市場(chǎng)中具有巨大發(fā)展?jié)摿Α?/p>

施肥是花卉栽培管理重要過(guò)程之一，合理施肥不僅促進(jìn)植株增產(chǎn)，提高植株品質(zhì)，還能提高肥料利用率，減少環(huán)境污染［4］。氮素是植物體內(nèi)重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和信號(hào)物質(zhì)，且植物對(duì)氮素需求量高于其他元素［5-6］。銨態(tài)氮和硝態(tài)氮是植物吸收無(wú)機(jī)態(tài)氮的主要形式［7］，具有促進(jìn)植物營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)，提高光合能力，從而保證其正常生長(zhǎng)發(fā)育的功能［8］。氮素形態(tài)不同，對(duì)植物生長(zhǎng)及生理調(diào)節(jié)過(guò)程也存在差異。研究表明，植物對(duì)氮素吸收、運(yùn)輸和同化取決于硝銨比例。相比單一氮源，適當(dāng)比例的硝銨更有利于植物生長(zhǎng)發(fā)育［9］。硝銨比在3∶1 時(shí)會(huì)促進(jìn)辣椒根系發(fā)育，提高谷氨酰胺合成酶與谷氨酸合成酶活性，使編碼酶的基因上調(diào)，提高果實(shí)產(chǎn)量和品質(zhì)［10］。硝銨比例為1∶5 時(shí)，藍(lán)莓根系和地上部分長(zhǎng)勢(shì)最好，光合能力較強(qiáng)［11］。百香果屬于耐銨植物，而銨態(tài)氮濃度超過(guò)臨界值時(shí)會(huì)抑制氮素利用率［12］。非洲菊切花生產(chǎn)中，硝銨比為4∶1 時(shí)的生長(zhǎng)和品質(zhì)最佳［13］。

近年來(lái)，云南高山杜鵑盆栽產(chǎn)業(yè)處于快速發(fā)展階段［14］，株型是否飽滿是衡量其品相好壞的重要標(biāo)準(zhǔn)之一，而側(cè)枝質(zhì)量是影響株型結(jié)構(gòu)的重要因素，也是生殖階段花芽形成的重要基礎(chǔ)。由于缺乏相配套的科學(xué)、系統(tǒng)的施肥體系，使苗木和盆花的產(chǎn)品質(zhì)量存在很大的不穩(wěn)定性。目前，生產(chǎn)實(shí)踐中，高山杜鵑施肥配比及施肥量多憑借經(jīng)驗(yàn)和施肥習(xí)慣，造成資源浪費(fèi)和生長(zhǎng)緩慢現(xiàn)象；而前人研究仍主要圍繞施肥方式［15-17］、施用量展開(kāi)［18］，關(guān)于營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期氮素形態(tài)對(duì)側(cè)枝生長(zhǎng)及生理特性影響的研究鮮有報(bào)道。因此，在施肥前明確高山杜鵑營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期對(duì)不同氮素偏好程度十分必要。鑒于此，本試驗(yàn)通過(guò)探究不同氮素形態(tài)比例對(duì)粉精靈高山杜鵑側(cè)枝生長(zhǎng)、光合參數(shù)、酶活性及營(yíng)養(yǎng)元素積累的影響，旨在為生產(chǎn)栽培中合理有效選擇及施用氮肥、培育優(yōu)質(zhì)苗木提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

試驗(yàn)于2022 年6 月14 日—8 月12 日在云南省昆明市云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所大春河基地進(jìn)行。供試材料為三年生粉精靈（Rhododendron，F(xiàn)en Jingling）盆栽苗。栽培基質(zhì)為直徑0～30 mm 的草炭，理化性質(zhì)如下：pH值6.12，電導(dǎo)率（electrical conductivity，EC）0.84 ms·cm-1，銨態(tài)氮24.99 mg·kg-1，硝態(tài)氮16.07 mg·kg-1，有效磷31.83 mg·kg-1，速效鉀65.75 mg·kg-1。本試驗(yàn)所用分析純?cè)噭┚?gòu)自四川西隆科學(xué)有限公司（成都），EDTA-MIX 螯合全元素購(gòu)自歐貝斯農(nóng)業(yè)科技技術(shù)發(fā)展有限公司（連云港）。螯合全元素中養(yǎng)分含量如下：含鐵≥5.6%，含鋅≥4.7%，含錳≥4.7%，含硼≥1.8%，含銅≥1.7%，含鉬≥0.4%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用營(yíng)養(yǎng)液-基質(zhì)栽培法，栽培過(guò)程中每盆每次根灌營(yíng)養(yǎng)液500 mL，其總N 含量為66 mg，設(shè)置NH4+-N∶NO3--N不同比例共5個(gè)處理，分別為：T1：100∶0；T2：75∶25；T3：50∶50；T4：25∶75；T5：0∶100。每處理11 盆，每盆視為1 次重復(fù)，共55 盆，以單一銨態(tài)氮（NH4+-N）和單一硝態(tài)氮（NO3--N）處理為對(duì)照。其中（NH4）2SO4提供NH4+-N，Ca（NO3）2、KNO3提供NO3--N，具體每次單株實(shí)際施用量見(jiàn)表1。其余微量元素由EDTA-MIX螯合全元素提供，Ca2+用氯化鈣進(jìn)行平衡。

表1 營(yíng)養(yǎng)液中不同形態(tài)氮素比例處理下各營(yíng)養(yǎng)元素實(shí)際用量Table 1 Actual amount of each nutrient element under the treatment of different forms of nitrogen ratio in nutrient solution/（mg/株）

2022年6月初選擇打頂后生長(zhǎng)狀況基本一致的健壯苗木，將其定植于裝有2 L 基質(zhì)的上直徑22 cm、下直徑17 cm、高15 cm 容器中，每盆1 株。緩苗7 d 后按表1對(duì)粉精靈進(jìn)行施肥。每隔15 d澆1次處理液，共施3 次，間隔期進(jìn)行正常澆水管理，每次處理液配好后，利用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH 值至6.0±0.5 后再澆灌，除試驗(yàn)因素外，其他管理均保持一致。根據(jù)表2 中植株相關(guān)生長(zhǎng)信息進(jìn)行取樣。

表2 植株取樣時(shí)間Table 2 Plant sampling times

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 植物生長(zhǎng)指標(biāo)的測(cè)定 分別對(duì)3 個(gè)時(shí)期苗高增量、側(cè)枝干物質(zhì)積累量、側(cè)枝長(zhǎng)度、根冠比進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并采集相應(yīng)樣品。用卷尺測(cè)量基質(zhì)表面至植株最高點(diǎn)的距離作為株高，每處理固定3個(gè)植株進(jìn)行株高測(cè)量。施肥處理前的株高為初始值，每次取樣時(shí)測(cè)量固定植株株高，測(cè)量值與初始值差值為苗高增長(zhǎng)量。選取每處理中長(zhǎng)勢(shì)一致3 株，采集每盆中所有新發(fā)側(cè)枝，放入保鮮盒中迅速帶回實(shí)驗(yàn)室，用去離子水洗凈并擦干，稱量側(cè)枝的鮮質(zhì)量，然后用游標(biāo)卡尺測(cè)量側(cè)枝長(zhǎng)度，最后將樣品置于恒溫干燥鼓風(fēng)箱中105 ℃殺青30 min，之后80 ℃烘干至恒重，稱重后用于養(yǎng)分含量測(cè)定。各處理中選取1 株，將其根、莖和葉片分開(kāi)洗凈后，吸干水分，稱取地上部分和地下部分鮮質(zhì)量，根冠比＝地下部分鮮質(zhì)量／地上部分鮮質(zhì)量。在側(cè)枝半木質(zhì)化期時(shí)，每處理選取長(zhǎng)勢(shì)一致3 株，統(tǒng)計(jì)葉面積、側(cè)枝數(shù)、側(cè)枝著生葉片數(shù)。選取成熟側(cè)枝中部的第3 片葉，使用游標(biāo)卡尺測(cè)量其葉長(zhǎng)和葉寬，葉面積=葉長(zhǎng)×葉寬×0.75。

1.3.2 光合特性與SPAD 值的測(cè)定 光合特性：在2022 年7 月19 日進(jìn)行最后一次施肥，待植株充分吸收肥料后，于2022 年8 月12 日上午9：00—11：00 對(duì)側(cè)枝半木質(zhì)化期光合指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定，每處理隨機(jī)選取3盆，測(cè)定部位為側(cè)枝中部第3 片成熟葉，用LI-6400 XT 光合測(cè)定儀（LI-COR 公司，美國(guó)）測(cè)定凈光合速率（net photosynthetic rate，Pn）、氣孔導(dǎo)度（stomatal conductance，Gs）、胞間CO2濃度（intercellular CO2concentration，Ci）、蒸騰速率（transpiration rate，Tr），并計(jì)算水分利用效率（water use efficiency，WUE），其中WUE=Pn/Tr。測(cè)定時(shí)使用紅藍(lán)光源葉室，設(shè)定人工光照強(qiáng)度為1 200 μmol·m-2·s-1，CO2濃度為400 μmol·mol-1［1］。葉綠素相對(duì)含量值（soil and plant analysis development，SPAD）：選取測(cè)定光合參數(shù)后的葉片，使用SPAD-502 葉綠素儀（美能達(dá)有限公司，日本）在葉片上、中、下不同位置測(cè)量3次取平均值。

1.3.3 硝酸還原酶活性的測(cè)定 分別于側(cè)芽萌發(fā)期、嫩側(cè)枝期、側(cè)枝半木質(zhì)化期在每處理隨機(jī)選擇3 株植株，取側(cè)枝頂芽從上往下第1～第2 片葉，保存于液氮，待取樣結(jié)束，采用試劑盒法測(cè)定硝酸還原酶活性，硝酸還原酶（nitrate reductase，NR）試劑盒購(gòu)于蘇州格銳思生物科技有限公司。

1.3.4 植物養(yǎng)分含量的測(cè)定 將測(cè)定側(cè)枝半木質(zhì)化期干物質(zhì)積累量的樣品粉碎后過(guò)60 目篩，用于葉片中營(yíng)養(yǎng)元素含量測(cè)定。稱取0.2 g樣品，經(jīng)濃硫酸—雙氧水聯(lián)合消煮后，參考《土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)分析方法》［19］采用凱氏定氮法測(cè)定葉片全氮含量，鉬銻抗比色法測(cè)定葉片全磷含量，火焰光度計(jì)法測(cè)定葉片全鉀含量，原子吸收法測(cè)定葉片鐵、鎂含量。每個(gè)指標(biāo)重復(fù)測(cè)定3次。

1.4 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析

采用Microsoft Excel 2021 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，SPSS 25.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（one way ANOVA），Duncan 法進(jìn)行多重比較。Origin 2020 軟件進(jìn)行主成分分析（principal component analysis，PCA）。

公式參考文獻(xiàn)［20］，利用Microsoft Excel 2021 軟件計(jì)算各綜合指標(biāo)隸屬函數(shù)值及綜合評(píng)價(jià)值：

式（1）～（3）中，μ（Xi）代表第i個(gè)綜合指標(biāo)的隸屬函數(shù)值；Xi為第i個(gè)綜合指標(biāo)值；Xmax為第i個(gè)綜合指標(biāo)最大值；Xmin為第i個(gè)綜合指標(biāo)最小值；Wi代表第i個(gè)綜合指標(biāo)在所有綜合指標(biāo)中的重要程度及權(quán)重；Pi為各處理第i個(gè)綜合指標(biāo)的貢獻(xiàn)率；D 代表在各處理由綜合指標(biāo)計(jì)算所得綜合評(píng)價(jià)值。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對(duì)營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期粉精靈側(cè)枝生長(zhǎng)的影響

不同氮素形態(tài)對(duì)營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期（側(cè)芽萌發(fā)期、嫩側(cè)枝期、側(cè)枝半木質(zhì)化期）粉精靈側(cè)枝生長(zhǎng)均產(chǎn)生影響（圖1）。在側(cè)芽萌發(fā)期時(shí)，側(cè)枝干物質(zhì)積累量（圖1-A）、苗高增量（圖1-B）和側(cè)枝長(zhǎng)度（圖1-D）整體隨氮肥中硝態(tài)氮比例增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，側(cè)枝干物質(zhì)積累量在T3 處理時(shí)達(dá)到峰值，苗高增量和側(cè)枝長(zhǎng)度在T4 處理時(shí)最高。在嫩側(cè)枝期和半木質(zhì)化期時(shí)，苗高增量隨著氮肥中硝態(tài)氮比例增加呈波浪形趨勢(shì)，即先增高后降低再增高再下降，以T2 處理最高，側(cè)枝長(zhǎng)度呈現(xiàn)相同規(guī)律。與單一氮源相比，混合氮源均有利于提高各生長(zhǎng)期中側(cè)枝干物質(zhì)積累量、苗高增量和側(cè)枝長(zhǎng)度。綜上，側(cè)芽萌發(fā)期時(shí)，T3 處理更有利于側(cè)枝干物質(zhì)積累。嫩側(cè)枝期和側(cè)枝半木質(zhì)化期時(shí)，T2 和T4 處理更有利于促進(jìn)苗高增量和側(cè)枝長(zhǎng)度的提高，以T2 處理促進(jìn)效果最顯著。在不同生長(zhǎng)期時(shí)，不同處理對(duì)根冠比（圖1-B）有不同影響，在半木質(zhì)化期時(shí)，以T1 處理最低，表明過(guò)量的銨態(tài)氮會(huì)導(dǎo)致地上與地下部分生物量分配不平衡，從而不利于植物生長(zhǎng)。

圖1 不同處理對(duì)營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期粉精靈側(cè)枝生長(zhǎng)的影響Fig.1 Effect of different treatments on the growth of new shoots of Fen Jing-ling

由表3 可知，在側(cè)枝半木質(zhì)化期時(shí)，不同處理葉長(zhǎng)、側(cè)枝數(shù)和著生葉片數(shù)均無(wú)顯著差異，而葉寬和葉面積在部分處理間差異顯著。表明不同氮素形態(tài)并不會(huì)對(duì)葉長(zhǎng)、側(cè)枝數(shù)和著生葉片數(shù)產(chǎn)生明顯影響。

表3 不同處理對(duì)半木質(zhì)化期粉精靈側(cè)枝生長(zhǎng)的影響Table 3 Effect of different treatments on the growth of new shoots of Fen Jing-ling in semi-lignification stage

2.2 不同處理對(duì)粉精靈側(cè)枝生理生化的影響

2.2.1 不同處理對(duì)粉精靈側(cè)枝葉片光合特性的影響 由圖2 可知，不同氮素形態(tài)對(duì)粉精靈凈光合速率（Pn）、氣孔導(dǎo)度（Gs）、胞間CO2濃度（Ci）、蒸騰速率（Tr）及水分利用效率（WUE）有明顯影響。與單一氮源處理相比，除T3 處理外，混合氮源處理中的Pn、Gs顯著增加；與之相反，與單一氮源處理相比，T4 處理胞間CO2濃度（Ci）顯著降低。水分利用效率在不同處理間呈U 型變化趨勢(shì)，且不同處理間整體差異顯著，以T3 處理水分利用效率最低。T3 處理葉綠素相對(duì)含量最低，且與T2 和T4 處理間差異顯著。由此可見(jiàn)，在側(cè)枝半木質(zhì)化期以T2 和T4 處理光合特性較強(qiáng)，更有利于葉片生長(zhǎng)和有機(jī)物質(zhì)積累。

圖2 不同處理對(duì)粉精靈半木質(zhì)化期葉片光合特性的影響Fig.2 Effects of different treatments on photosynthetic characteristics of leaves of Fen Jing-ling at semi-lignification stage

2.2.2 不同處理對(duì)粉精靈側(cè)枝葉片酶活性的影響硝酸還原酶是影響氮代謝重要的關(guān)鍵酶和限速酶。由圖3 可知，在不同處理下，NR 活性隨生育期的推進(jìn)呈現(xiàn)先增加后降低趨勢(shì)，以嫩側(cè)枝期的NR 活性最高，且不同處理之間在同一生長(zhǎng)期存在差異。3 個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期的NR 活性均以T5 處理最高，T1 處理最低，而T2～T4處理在不同生長(zhǎng)期呈不同變化趨勢(shì)。表明硝態(tài)氮含量會(huì)影響NR 活性，且以粉精靈嫩側(cè)枝期時(shí)的酶活性最強(qiáng)。

圖3 不同處理對(duì)粉精靈側(cè)枝葉片硝酸還原酶活性的影響Fig.3 Effect of different treatments on nitrate reductase activity in lateral branch leaves of Fen Jing-ling

2.3 不同處理對(duì)半木質(zhì)化期粉精靈側(cè)枝營(yíng)養(yǎng)元素含量的影響

由表4 可知，進(jìn)入側(cè)枝半木質(zhì)化期后，側(cè)枝葉片氮含量隨硝態(tài)氮比例增加呈先增加后減小趨勢(shì)，以T3處理葉片氮含量最高，T5 處理最低，T1 與T2 處理間無(wú)顯著差異。葉片中磷含量隨硝態(tài)氮比例增加呈先增后減再增的趨勢(shì)，以T2 處理最高，T4 處理最低。T1～T4 處理側(cè)枝葉片鉀含量均高于T5 處理，以T4 處理葉片含鉀量最高，表明含銨態(tài)氮處理中側(cè)枝葉片鉀含量均高于不含銨態(tài)氮處理，銨態(tài)氮含量越低鉀含量反而越高。T1處理葉片含氮磷鉀量均高于T5處理，但單一氮源處理（T1 和T5）葉片氮磷鉀含量整體低于混合氮源處理（T2～T4），且不同處理之間存在差異，表明混合氮源處理對(duì)側(cè)枝葉片大量營(yíng)養(yǎng)元素積累促進(jìn)作用較強(qiáng)，全銨態(tài)氮處理次之，全硝態(tài)氮處理最低。

表4 不同處理對(duì)半木質(zhì)化期粉精靈側(cè)枝營(yíng)養(yǎng)元素含量的影響Table 4 Effect of different treatments on the nutrient element content of the side branches of Fen Jing-ling during the half lignification stage/（mg·g-1）

在不同氮素處理中，側(cè)枝葉片中、微量元素與大量元素含量隨硝態(tài)氮比例增加呈現(xiàn)相反的變化趨勢(shì)，即葉片中鐵、鎂含量隨硝態(tài)氮比例增加整體呈先降低后升高趨勢(shì)。葉片鐵和鎂含量最高值均出現(xiàn)在單一氮源處理中，以T1 處理鐵含量最高，T5 處理鎂含量最高。最低值均為混合氮源T3 處理，T2 與T4 處理間無(wú)顯著差異。

2.4 主成分分析結(jié)果

對(duì)不同氮素形態(tài)粉精靈生長(zhǎng)、生理生化、營(yíng)養(yǎng)元素指標(biāo)進(jìn)行主成分分析，結(jié)果表明（圖4），第1 主成分和第2 主成分累計(jì)方差貢獻(xiàn)率為61.0%，可反映變量初始信息。根據(jù)樣本點(diǎn)之間的距離可以看出，T2和T4處理樣本距離較集中，有95%置信區(qū)間部分重疊，表明這兩種處理之間差異不顯著。T2 和T4 處理的樣本點(diǎn)與T1 和T3 樣本點(diǎn)距離較遠(yuǎn)，且有95%置信區(qū)間不重疊，表明T2和T4處理與T1、T3處理均有顯著差異。第1主成分分析方差貢獻(xiàn)率為37.3%，其中NR、LS、HG、Tr、Gs對(duì)PC1有較大貢獻(xiàn)，反映不同處理下生長(zhǎng)及生理生化指標(biāo)的變化情況。綜合分析發(fā)現(xiàn)，T5 處理與原點(diǎn)距離較近，表明T5 處理各指標(biāo)表現(xiàn)較差；T1 處理PCA點(diǎn)位于圖中第三象限，表明該處理對(duì)指標(biāo)有抑制作用；T2和T4處理對(duì)生長(zhǎng)及生理生化指標(biāo)的促進(jìn)效果較好，T4 處理次于T2 處理；T3 處理對(duì)營(yíng)養(yǎng)元素積累促進(jìn)效果較好。

圖4 主成分分析Fig.4 Principal component analysis

2.5 半木質(zhì)化期隸屬函數(shù)綜合分析結(jié)果

隸屬函數(shù)分析是常用的一種綜合分析方法，隸屬函數(shù)值能夠綜合分析不同氮素處理對(duì)粉精靈生長(zhǎng)的影響。由表5 可知，在半木質(zhì)化期，不同氮素形態(tài)處理隸屬函數(shù)綜合排名為T(mén)2＞T3＞T4＞T5＞T1，其中混合氮源處理對(duì)粉精靈營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)促進(jìn)作用較強(qiáng)，全硝態(tài)氮處理次之，全銨態(tài)氮處理最低。表明施加不同氮素形態(tài)對(duì)高山杜鵑營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)至關(guān)重要，在一定程度上混合態(tài)中銨態(tài)氮比重越高，越有利于粉精靈生長(zhǎng)。

表5 半木質(zhì)化期隸屬函數(shù)綜合分析Table 5 Comprehensive analysis of membership function

3 討論

生物量積累與植株形態(tài)指標(biāo)的變化是響應(yīng)植物生長(zhǎng)好壞最直接的體現(xiàn)，本研究發(fā)現(xiàn)，在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)三個(gè)時(shí)期中，與單一氮源相比，混合氮源均能促進(jìn)粉精靈側(cè)枝長(zhǎng)度、苗高增量和側(cè)枝干物質(zhì)積累量的提高。其中T3處理對(duì)粉精靈側(cè)芽萌發(fā)有促進(jìn)作用，而T2處理均促進(jìn)植株在嫩側(cè)枝期和側(cè)枝半木質(zhì)化期時(shí)的生長(zhǎng)。已有研究表明，杜鵑科為喜銨植物，但銨在植物體內(nèi)不能直接被利用，需要與有機(jī)酸結(jié)合形成酰胺或氨基酸后才能被植物所吸收［21］。本試驗(yàn)結(jié)果表明，與單一全銨態(tài)氮相比，加入適量硝態(tài)氮可促進(jìn)植株生長(zhǎng)，這可能是由于轉(zhuǎn)化過(guò)程會(huì)造成細(xì)胞內(nèi)酸化，從而導(dǎo)致過(guò)高濃度的銨態(tài)氮易對(duì)植株產(chǎn)生銨毒作用［7］。而過(guò)多硝態(tài)氮能大量積累在液泡中，對(duì)植物無(wú)傷害作用，加入適量的硝態(tài)氮可以緩解銨態(tài)氮的毒害作用。植物對(duì)銨態(tài)氮和硝態(tài)氮的吸收還受生長(zhǎng)期、土壤類型、土壤酸堿性等影響［22］。本研究發(fā)現(xiàn)，粉精靈生長(zhǎng)期不同，對(duì)銨態(tài)氮和硝態(tài)氮吸收偏好程度也不盡相同；在基質(zhì)栽培條件下，在微生物的作用下通過(guò)硝酸反應(yīng)將銨態(tài)氮轉(zhuǎn)化為硝態(tài)氮，產(chǎn)生H+，而酸性環(huán)境并不適宜硝化細(xì)菌生存，導(dǎo)致硝化過(guò)程中產(chǎn)生的硝態(tài)氮會(huì)通過(guò)淋溶或反硝化流失，為保持植物體內(nèi)化學(xué)平衡，硝態(tài)氮與銨態(tài)氮兩者之間轉(zhuǎn)換處于動(dòng)態(tài)變化狀態(tài)。因此，在前期栽培條件一致前提下，不同處理導(dǎo)致基質(zhì)中酸堿度不同，從而對(duì)銨態(tài)氮與硝態(tài)氮吸收產(chǎn)生不同影響。

氮素形態(tài)可影響葉綠體構(gòu)建、光合反應(yīng)過(guò)程以及光合速率相關(guān)變量，從而影響植物總體生物量變化［23］。光合速率有關(guān)氣體交換參數(shù)反映植物光合能力，其中氣孔導(dǎo)度主要反映氣孔開(kāi)放程度；葉肉細(xì)胞中CO2濃度越高，胞間CO2濃度越低，光合速率越大；水分利用效率是植物凈光合和蒸騰特征的綜合反映［24］。本研究結(jié)果表明，光合特性值與生物量之間存在正相關(guān)關(guān)系，可能是由于光合作用決定植物生長(zhǎng)狀態(tài)，進(jìn)而決定生物量積累。與單一氮源相比，混合氮源能夠促進(jìn)植物光合作用，在西瓜研究中也得到類似的結(jié)果［25］。其原因?yàn)閱我坏纯赡軙?huì)破環(huán)植物生物膜，減少氧化磷酸化反應(yīng)，減少光合磷酸化和非光合磷酸的偶聯(lián)，導(dǎo)致ATP 生成減少，從而抑制CO2固碳作用，降低氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率［26］?；旌系刺幚碇?，T2處理對(duì)植物光合作用的促進(jìn)效果最明顯，這與前人在雷竹林中的研究結(jié)果一致［27］。而T3 處理對(duì)植物光合作用的促進(jìn)作用不顯著，與前人對(duì)油茶［28］、番茄［29］、藍(lán)莓［11］的研究結(jié)果相反，這可能與植物種類、生育期和對(duì)氮素偏好程度不同有關(guān)。

不同氮素形態(tài)是影響硝酸還原酶活性的因素之一。前人研究發(fā)現(xiàn)，NR 活性與硝態(tài)氮含量呈正比［30］，且在野牛草［31］、雷竹林［27］中研究發(fā)現(xiàn)，相比單一氮源，兩種氮共存時(shí)的氮素代謝能力較強(qiáng)，酶活性也隨之加強(qiáng)。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著生育期的推進(jìn)，NR 活性呈先增加后減小趨勢(shì)，以嫩側(cè)枝期活性最高，可能是由于該時(shí)期植株側(cè)枝正處于快速生長(zhǎng)階段，氮代謝和細(xì)胞活性較強(qiáng)。而在同一生長(zhǎng)期不同處理下，NR活性隨硝態(tài)氮含量增加而增加，且在一定比例銨態(tài)氮處理下對(duì)硝酸還原酶活性的促進(jìn)效果優(yōu)于全銨態(tài)氮處理。表明全銨態(tài)氮處理抑制了NR 活性，減弱植物體內(nèi)硝態(tài)氮的同化作用，適宜銨態(tài)氮比例能促進(jìn)NR 活性，但全硝態(tài)氮處理對(duì)提高酶活性作用更顯著。在全硝態(tài)氮處理中，各生長(zhǎng)期NR 活性均較高，可能是由于大部分植株從根系吸收硝態(tài)氮，并通過(guò)木質(zhì)部運(yùn)輸?shù)饺~片進(jìn)行同化，隨著硝態(tài)氮含量的增加，葉片中的硝酸還原酶活性也增加。

植物中營(yíng)養(yǎng)元素含量與土壤養(yǎng)分具有直接關(guān)系，其營(yíng)養(yǎng)元素含量受植物自身轉(zhuǎn)運(yùn)和分配影響。本研究發(fā)現(xiàn)，植物葉片營(yíng)養(yǎng)元素含量在不同氮素形態(tài)處理下存在差異?；旌系刺幚硐聜?cè)枝葉片中氮磷鉀含量較高；全硝態(tài)氮處理下氮磷鉀含量較低，但鎂含量最高，鐵含量較低，與前人在西瓜中的研究結(jié)果一致［25］。其原因?yàn)椴煌匦螒B(tài)比例會(huì)影響栽培基質(zhì)中的礦化和硝化作用，導(dǎo)致植物自身與微生物之間存在對(duì)氮元素的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，從而影響對(duì)養(yǎng)分的吸收和利用，混合氮源處理會(huì)促進(jìn)植物對(duì)氮磷鉀養(yǎng)分的吸收，全硝態(tài)氮處理會(huì)提高植物質(zhì)外體pH 值，阻止Fe（Ⅲ）還原，抑制鐵鹽進(jìn)入共質(zhì)體，造成植物鐵含量短缺，而加入一定的銨態(tài)氮能降低植物根際和質(zhì)外體pH值，根際酸化增加了鐵的有效性，使植物體中鐵含量增加。因此混合氮源能夠相互彌補(bǔ)其對(duì)植物造成的傷害，保證其正常生長(zhǎng)。由于離子間存在拮抗作用，為維護(hù)植物體內(nèi)電荷平衡，銨態(tài)氮含量增加會(huì)抑制植物對(duì)其他陽(yáng)離子如K+、Ca2+和Mg2+的吸收，從而導(dǎo)致植物體內(nèi)鎂離子含量降低。

4 結(jié)論

高山杜鵑盆花生產(chǎn)中不僅要考慮側(cè)枝株型結(jié)構(gòu)，還要考慮側(cè)枝光合和養(yǎng)分積累能力，為后續(xù)花芽生理分化奠定營(yíng)養(yǎng)基礎(chǔ)。在相同氮素施加量下，不同氮素形態(tài)比例對(duì)植株生長(zhǎng)狀況、養(yǎng)分吸收、光合作用以及代謝酶活性影響也存在差異。以半木質(zhì)化時(shí)期各指標(biāo)進(jìn)行綜合分析發(fā)現(xiàn)，在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期施用銨硝比為75∶25更有利于側(cè)枝生長(zhǎng)。