王艷，陶雙能，楊菲菲

武漢現(xiàn)代農(nóng)業(yè)教育中心/武漢市農(nóng)業(yè)學(xué)校，武漢 430043

禽流感在家禽、野禽和人均有發(fā)生，嚴(yán)重危害養(yǎng)禽業(yè)和人的生命健康安全。禽流感由A 型流感病毒引起，發(fā)病禽可表現(xiàn)出亞臨床癥狀、呼吸道癥狀、消化道癥狀、神經(jīng)癥狀、產(chǎn)蛋量下降、急性出血性癥狀及隱性感染。在家禽中對(duì)雞和火雞危害最為嚴(yán)重。禽流感病毒自從被發(fā)現(xiàn)起，H5 亞型與H7亞型的毒株一直在世界范圍內(nèi)的雞群中流行[1]。禽流感病毒可傳染給人，并造成死亡，據(jù)統(tǒng)計(jì)[2]，人感染高致病性禽流感H5N1 的死亡率接近50%；人感染H7N9約1 500例，死亡約600例；感染H5N6約80例，死亡約30 例。2022 年以來，禽流感又席卷了全球五大洲50余個(gè)國(guó)家，全球染疫或撲殺的禽類已超過2 億只，受疫情影響最嚴(yán)重的美國(guó)，撲殺了5 800多萬只禽類，損失約6.61 億美元。在柬埔寨發(fā)生了2例由H5N1引發(fā)的人類感染病例，其中1例死亡。

1 病原學(xué)

流感病毒屬于正黏病毒科，分為A、B、C 三型。A型流感病毒可感染人、禽和許多其他種屬的動(dòng)物，B 型和C 型主要感染人。根據(jù)流感病毒的血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）抗原性差異，將A 型流感病毒分為不同的亞型，目前HA 發(fā)現(xiàn)16 個(gè)亞型，NA發(fā)現(xiàn)9個(gè)亞型，不同的HA和NA之間無交叉反應(yīng)[3]。根據(jù)禽流感病毒毒力不同，分為強(qiáng)毒株（速發(fā)型）、中強(qiáng)毒株（中發(fā)型）和弱毒或無毒株（緩發(fā)型）[4]，引起高致病性禽流感的主要是H5 和H7 亞型。禽流感病毒重組和變異性強(qiáng)，且不同的H 抗原和N 抗原之間無交叉保護(hù)，給該病的防控增加了難度。大鼠、小鼠、兔、水貂、雪貂等都可感染，人也可感染[5]。禽流感病毒耐干燥、低溫，不耐熱，對(duì)紫外線耐受力差，對(duì)常用消毒藥敏感。在自然條件下，存在于病雞鼻腔分泌物和糞便中的禽流感病毒，由于受到有機(jī)物保護(hù)，抵抗力較強(qiáng)。

2 流行病學(xué)

禽流感呈世界性分布，家禽、野禽、鳥類都可感染。對(duì)禽流感病毒易感性最高的禽類是雞和火雞，其次是珠雞、野雞、孔雀，哺乳動(dòng)物和人也可感染。隱性帶毒或發(fā)病的動(dòng)物，野生水禽，遷徙的鳥類都可成為傳染源，病禽的分泌物、排泄物和尸體等污染飲水、飼料及用具，通過直接接觸和間接接觸感染。主要的感染途徑是消化道和呼吸道，也可通過損傷的皮膚和黏膜感染，吸血昆蟲和飼養(yǎng)人員也可傳播病毒；發(fā)病率和死亡率與毒株毒力強(qiáng)弱、禽類易感性、年齡、性別、飼養(yǎng)管理?xiàng)l件、環(huán)境等因素有關(guān)。禽流感在寒冷季節(jié)及天氣驟變時(shí)多發(fā)。

3 癥 狀

禽流感潛伏期從數(shù)小時(shí)到幾天不等，潛伏期長(zhǎng)短與病毒毒力強(qiáng)弱、感染強(qiáng)度、家禽種類、傳播途徑有關(guān)。該病癥狀與感染禽的種類、性別、年齡、毒株毒力強(qiáng)弱、混合感染或繼發(fā)感染情況及環(huán)境因素有關(guān)。高致病性禽流感毒株感染的病禽往往表現(xiàn)為最急性型和急性型，最急性型病例看不到明顯癥狀而突然死亡，死亡率接近100%；急性型病例體溫升高，顏面部水腫，角質(zhì)鱗片出血，咳嗽、噴嚏、呼吸困難、啰音、冠和肉髯發(fā)紺、腹瀉和神經(jīng)紊亂等，蛋雞停止產(chǎn)蛋，有的病例甚至失明，病程一般2～3 d，致死率可達(dá)100%[6]。低致病性禽流感病毒感染的病禽，出現(xiàn)典型的呼吸道癥狀，如咳嗽、噴嚏、流淚、流涕和鼻竇炎，蛋雞產(chǎn)蛋量和蛋的品質(zhì)下降，產(chǎn)軟殼蛋、砂殼蛋、畸形蛋，種蛋孵化率下降，大腸桿菌和博德特氏菌繼發(fā)感染時(shí)，臨床癥狀較嚴(yán)重[7]。部分蛋雞出現(xiàn)急性腎衰竭和內(nèi)臟痛風(fēng)，在沒有繼發(fā)細(xì)菌或病毒感染的情況下，發(fā)病率及死亡率會(huì)降低。

4 病理變化

病禽感染毒株毒力、病程長(zhǎng)短、禽的種類不同，病理變化也不同。死于高致病性禽流感的家禽，腦、皮膚及內(nèi)臟器官壞死，表現(xiàn)充血、出血、滲出和壞死變化，病雞顏面部水腫，冠和肉髯腫大，雞冠壞死和出血，心臟、肺、腦、脾出血，心臟、肝、腎、脾及肺有壞死。死于低致病性禽流感的家禽，主要表現(xiàn)為泌尿生殖系統(tǒng)受到侵害，輸卵管水腫，管腔內(nèi)有黏性分泌物，卵巢退化、出血和卵子變形、破裂及卵黃性腹膜炎，氣管黏膜水腫，有數(shù)量不等的漿液性或干酪樣滲出物，氣囊炎，腺胃乳頭和腸黏膜出血。

5 診 斷

根據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀和病理變化可做初步診斷，禽流感的確診主要根據(jù)病毒的分離和鑒定，在我國(guó)，高致病性禽流感必須由指定實(shí)驗(yàn)室開展分離和鑒定工作，診斷主要依據(jù)2020 年頒布實(shí)施的《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T 18936—2020）國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[2]。

5.1 臨床診斷

根據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀及病理剖檢結(jié)果可做初步診斷。

5.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

1）病毒分離、鑒定。禽流感病毒存在于病死禽的所有組織、分泌物和排泄物中。采集病料后，按照生物安全要求進(jìn)行包裝，防止病原泄露。將采集的病料進(jìn)行處理（混合，研磨、離心，取上清液，加入雙抗），將處理后的上清液接種于SPF 雞胚或流感病毒陰性雞胚，在37 ℃的條件下孵化3～7 d，收集48～96 h 的胚液，測(cè)定血凝活性。若檢測(cè)樣本血凝活性為陰性，用尿囊液盲傳2～5代，若血凝活性仍為陰性，則判定為禽流感病毒陰性；若血凝活性為陽性，則要用新城疫病毒抗血清進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)，排除新城疫病毒感染的可能性。如果新城疫病毒抗血清血凝抑制試驗(yàn)為陰性，下一步用血清學(xué)方法檢測(cè)特異性抗原，最后用血凝素抗血清和神經(jīng)氨酸酶抗血清進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)，來判定禽流感病毒H亞型和N亞型。

2）血清學(xué)檢測(cè)。血清學(xué)診斷方法較多，可用的有血凝試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)、瓊脂凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)、病毒中和試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、免疫膠體金試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和免疫組化試驗(yàn)等。

3）病毒核酸檢測(cè)。目前，常用的有RT–PCR（反轉(zhuǎn)錄–聚合酶鏈反應(yīng)）、熒光RT–PCR 技術(shù)[2]，結(jié)合電泳技術(shù)進(jìn)行診斷。該方法的特點(diǎn)是快速，靈敏度高，特異性強(qiáng)，準(zhǔn)確性高。

5.3 鑒別診斷

禽流感要與新城疫、傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎、傳染性鼻炎及慢性呼吸道疾病進(jìn)行鑒別診斷，特別是某些疾病的混合感染或繼發(fā)感染，常給診斷帶來困難，且容易發(fā)生誤診。

6 防 控

6.1 科學(xué)合理規(guī)劃養(yǎng)殖場(chǎng)

養(yǎng)殖場(chǎng)的選址、布局設(shè)計(jì)必須以科學(xué)合理飼養(yǎng)、降低疫病發(fā)病率為基礎(chǔ)。因此，在建造養(yǎng)殖場(chǎng)時(shí)，必須充分考慮當(dāng)?shù)氐慕煌ㄇ闆r、地形地勢(shì)、氣候、水源，與居民區(qū)、畜禽屠宰場(chǎng)的距離等，科學(xué)合理規(guī)劃，既能節(jié)約生產(chǎn)成本，提高生產(chǎn)效益，又能為禽營(yíng)造良好的生長(zhǎng)環(huán)境，提升疫情防控效果。

6.2 外防輸入

嚴(yán)防高致病性禽流感病毒從外傳入，引進(jìn)來自無禽流感養(yǎng)禽場(chǎng)的禽類及其產(chǎn)品。對(duì)進(jìn)口或者從外地引進(jìn)的禽類及其產(chǎn)品加強(qiáng)檢疫，運(yùn)輸途中防止禽類接觸到禽流感病毒，到達(dá)目的地后進(jìn)行隔離，待隔離期滿后，才可進(jìn)入圈舍飼養(yǎng)。

6.3 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

對(duì)未有該病發(fā)生的養(yǎng)禽場(chǎng)和地區(qū)，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。減少應(yīng)激，注意飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的配比，提高家禽自身的抵抗力。注意養(yǎng)禽場(chǎng)內(nèi)工作人員和飼養(yǎng)用具的流動(dòng)，做好消毒，防止禽流感病毒交叉?zhèn)鞑?。做好禽舍的通風(fēng)，定期清掃、消毒，控制好禽舍的溫度、濕度、光照，為禽提供良好的生活環(huán)境。

6.4 建立健全疫情防控制度

基層獸醫(yī)主管部門對(duì)轄區(qū)內(nèi)的養(yǎng)禽場(chǎng)加強(qiáng)監(jiān)管，嚴(yán)格消毒制度和免疫接種程序，養(yǎng)殖畜禽做好登記，定期監(jiān)測(cè)抗體。養(yǎng)禽場(chǎng)內(nèi)防止野禽進(jìn)入，尤其在野禽遷徙季節(jié)，加強(qiáng)對(duì)場(chǎng)內(nèi)禽的抗體監(jiān)測(cè)，防止禽流感暴發(fā)。一旦發(fā)現(xiàn)禽流感疫情，應(yīng)立即上報(bào)上級(jí)獸醫(yī)主管部門，劃定疫點(diǎn)、疫區(qū)，采取隔離封鎖、撲殺銷毀、環(huán)境消毒、強(qiáng)制免疫、限制人員和車輛流動(dòng)等措施，防止病原擴(kuò)散。

6.5 免疫接種

疫苗免疫接種是目前防控禽流感最有效的方法。核酸疫苗主要是DNA 疫苗，優(yōu)點(diǎn)是注射劑量低，免疫保護(hù)力持久，且制備簡(jiǎn)單，易批量生產(chǎn)、成本低、儲(chǔ)運(yùn)方便，免疫效果不受機(jī)體免疫機(jī)能和母源抗體的影響，缺點(diǎn)是免疫效率和表達(dá)效率低，而且核酸疫苗可能會(huì)攜帶抗生素基因，存在生物安全隱患[8]；重組活載體疫苗，可使用痘病毒、新城疫病毒、火雞皰疹病毒、禽腺病毒作為載體制備疫苗，此類疫苗具有滅活疫苗的優(yōu)勢(shì)，使用方便，又可以做到“一針多防”，但是載體的免疫與目的抗原的免疫會(huì)發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)[9]；亞單位疫苗，生物安全性高，其制備過程中使用的佐劑雖然能顯著增強(qiáng)疫苗的免疫原性，但是此類疫苗不能刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫應(yīng)答反應(yīng)，誘導(dǎo)免疫保護(hù)期短，且制作成本高，應(yīng)用不廣泛；基因工程重組滅活苗，2006 年以后在我國(guó)使用較為廣泛，相比于傳統(tǒng)滅活苗，此類疫苗在安全性、生產(chǎn)難易程度、免疫效果上都有明顯提升；減毒活疫苗，穩(wěn)定性好，免疫原性高，接種方法簡(jiǎn)單，一次免疫即可刺激機(jī)體產(chǎn)生良好的免疫保護(hù)力，但是要警惕其“毒力返祖”現(xiàn)象，使用不當(dāng)，可能引起禽發(fā)??；滅活疫苗在安全性、穩(wěn)定性、儲(chǔ)存運(yùn)輸、生產(chǎn)周期，以及針對(duì)流行毒株的保護(hù)效率等方面都具有優(yōu)勢(shì)，但是需要接種2次以上才能產(chǎn)生高水平抗體，免疫保護(hù)期短，并且不能中和變異產(chǎn)生的新病毒；病毒顆粒樣疫苗，是納米疫苗的一種[10]，又被稱為“假病毒”，已研制出利用昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)抗毒基因的禽流感疫苗，此類疫苗不含核酸，安全性高，穩(wěn)定性好，可有效避免其他病毒的感染，同時(shí)還能較好地刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體，適合大批量生產(chǎn)；表位疫苗可以誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫反應(yīng)和體液免疫反應(yīng)，提高不同亞型禽流感病毒之間的交叉保護(hù)力。