李闖姚琪袁寶祺王慶峰譚化陳延偉王忠偉

(1.吉林省農業(yè)科學院/中國農業(yè)科技東北創(chuàng)新中心，吉林 長春 130033；2.吉林省仁佳農業(yè)科貿有限公司，吉林 長春 130000)

馬鈴薯瘡痂病(Streptomyces spp.)作為馬鈴薯最主要的土傳病害之一，隨著種植面積擴大而逐年遞增，可使塊莖表面形成木栓質、深棕色的凸起、凹陷或網狀瘡痂，在全球范圍內美國、加拿大、澳大利亞、荷蘭、秘魯等馬鈴薯產區(qū)都有一定程度的發(fā)生[1]。2015年我國在確立馬鈴薯主糧化戰(zhàn)略之后，全國種植馬鈴薯的面積逐年增加，由于馬鈴薯商品薯和種薯的快速流通，加快了馬鈴薯瘡痂病的傳播，危害性持續(xù)增加，目前在我國馬鈴薯生產各主要地區(qū)內蒙古、河北、云南、黑龍江、陜西、吉林等地均有發(fā)生[2]。一般地區(qū)發(fā)病率20%～30%，高發(fā)地區(qū)發(fā)病率可達到80%以上，嚴重影響馬鈴薯商品價值[3]。而在脫毒微型薯繁育過程中，蛭石、草炭土等基質的重復性利用，致使馬鈴薯瘡痂病的發(fā)病率達到30%～60%，發(fā)病率最高可達到80%以上，喪失留種的可能性，造成巨大經濟損失和致病隱患[4]。許多新型藥劑均在大田生產中對馬鈴薯瘡痂病有較好防效，播可潤C918[5]、益微[6]、大蒜油、3%噻霉酮、77%氫氧化銅、生防鏈霉菌可濕性粉劑[7]等在推薦使用劑量下均有較好防效[3]。但在微型薯生產方面抑制瘡痂病藥物的研究較少。本試驗旨在篩選出適宜在馬鈴薯微型薯生產過程中使用的抑制瘡痂病藥劑，為吉林省微型薯生產提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗地點

試驗地點在吉林省農業(yè)科學院(中國農業(yè)科技東北創(chuàng)新中心)經濟植物研究所內，地理位置N43°，E125°，海拔高度220m，獨立溫室進行。試驗采用蛭石作為基質，塑料周轉箱(55cm×36cm×15cm)作為栽培容器。

1.2 試驗材料

本試驗使用馬鈴薯組培苗扦插生產微型薯，供試品種為“吉薯1號”“吉科6號”，由本單位薯類研究課題組提供。

1.3 試驗設計

本試驗區(qū)組采用隨機設計，定植密度為25株/箱，每個處理10箱，進行3次重復試驗，試驗處理見表1。

表1 試驗藥劑及劑量

1.4 供試菌株

試驗選用由本單位農業(yè)生物技術研究所提供的馬鈴薯瘡痂病菌S.scabie的ACCC41289為接種菌株。經過山東農業(yè)大學殷修魯和本實驗室開展的鏈霉菌16Sr DNA基因鑒定，確定該病菌ACCC41289為吉林省馬鈴薯瘡痂病致病性較強主要病菌之一。

1.4.1 供試菌株的繁殖

試驗所用培養(yǎng)基：高氏一號培養(yǎng)基(不含瓊脂)，高氏一號培養(yǎng)基；儀器：精宏ZDP搖床，志誠ZSD-1160恒溫培養(yǎng)箱。

菌種活化后，取菌落至高氏一號培養(yǎng)基(不含瓊脂)中，搖床180～200rpm，28℃，培養(yǎng)3～5d至鏈霉菌肉眼可見，球狀，用剪過的1mL槍頭吸取帶球狀鏈霉菌的菌液100～200μL(根據天氣，天熱可以適量多吸，天冷100μL即可)，至高氏一號培養(yǎng)基，用滅菌過的磁珠進行涂抹至涂干，封口，培養(yǎng)箱28℃培養(yǎng)(最好黑暗環(huán)境)。培養(yǎng)2～3d，可見培養(yǎng)基上萌發(fā)白色小點，10d左右開始生長白色孢子，15d左右孢子由白色變?yōu)榛疑?，白色孢子菌液濃度僅107cfu·mL-1，培養(yǎng)20d菌液濃度能達到108cfu·mL-1。

1.4.2 供試菌株的接種體的制備

用滅菌水沖洗孢子，余下用棉棒輕輕刮下，混勻，吸出菌液至無菌管，吸10μL進行細胞計數后根據濃度進行稀釋使用。

1.5 接種試驗

通過人工接種方式，構建馬鈴薯瘡痂病病圃。試驗設計不接種(對照)處理、設置接種2種試驗方案。同時進行灌根接種，每個植株施入鏈霉菌的孢子懸浮液為50mL，濃度108cfu·mL-1。試驗過程中不使用任何化學農藥進行防控，保持水肥正常管理，從而保證馬鈴薯植株正常生長。

1.6 調查方法

1.6.1 瘡痂病調查方法

本試驗參照《馬鈴薯品種資源描述規(guī)范和數據標準》作為馬鈴薯瘡痂病抗性評價標準，分為5個等級，分級標準見表2。

表2 馬鈴薯瘡痂病分級標準

病情指數=Σ(各級病薯數×相對級數值)/(調查總薯數×最高級代表值)×100

發(fā)病率=發(fā)病薯塊數/調查薯塊總數×100%

防治效果=(空白對照病情指數-處理病情指數)/空白對照病情指數×100%

1.6.2 產量調查方法

合格薯率=(健康合格數/健康薯數)×100%(≥2g記為合格薯)

增產率=(處理區(qū)產量-對照區(qū)產量)/處理區(qū)產量×100%

1.7 數據分析

采用Microsoft Excel 2010對數據進行整理，采用DPS 7.05對數據進行分析。

2 結果與分析

2.1 不同處理對馬鈴薯植株的影響

觀察馬鈴薯組培苗在定植7d后和接種后第7天的植株生長情況，調查顯示，馬鈴薯的植株生長正常，其株高、莖粗以及葉片顏色等與對照相比沒有出現顯著的差異，證明本試驗所使用的藥劑和施用劑量并未對馬鈴薯植株產生不良影響，同時沒有對馬鈴薯產生藥害等情況的發(fā)生。

2.2 不同藥劑對馬鈴薯瘡痂病的防治效果

由表3可知，“吉薯1號”和“吉科6號”的微型薯在各藥劑處理下存在差異，與對照處理相比，各處理均對瘡痂病有顯著作用。

表3 不同藥劑處理對馬鈴薯瘡痂病的影響

“吉薯1號”品種，經過各藥劑處理后，馬鈴薯瘡痂病平均發(fā)病率存在顯著性差異，處理2平均發(fā)病率為7.0%，最低；其次是處理3，為7.1%；再次是處理4，為8.6%；在處理1的條件下馬鈴薯瘡痂病平均發(fā)病率最高，為9.8%。將處理2與處理3進行比較，結果顯示，二者之間存在差異不顯著；將處理2與處理1、處理4、CK之間進行比較，結果顯示，四者之間存在著差異性的顯著。在病情指數數據分析方面，處理2的馬鈴薯瘡痂病病情指數為3.5，最低；其次是處理3，病情指數為3.9；再次是處理4，病情指數為7.1；最后是處理1，病情指數為7.9；而對照CK病情指數最高，為17.6。結果顯示，處理2與處理3之間存在著馬鈴薯瘡痂病病情指數差異不顯著，但與其他處理相比存在顯著性差異。在防治效果方面進行分析，結果顯示，處理2防治馬鈴薯瘡痂病效果最好，為79.9；其次是處理3，為77.7；再次是處理4，為59.8；馬鈴薯瘡痂病防治效果最差的是處理1，為55.2。通過數據分析可以看出，處理2與處理3之間在防治效果上，存在著差異性不顯著，但處理2與其他處理相比，存在著顯著性差異。

“吉科6號”品種，各處理間存在差異，在平均發(fā)病率方面，處理2的平均發(fā)病率最低，為7.0%；其次是處理3，為7.1%；再次是處理4，為9.2%；排在第4的是處理1，為9.7%；對照CK最高，發(fā)病率為21.9%。在病情指數數據分析方面，病情指數處理2(3.2)<處理3(3.4)<處理4(7.1)<處理1(7.8)<對照CK(16.3)，病情指數最低的為處理2。在防治效果數據分析方面，處理2(80.5%)>處理3(78.8%)>處理4(56.5%)>處理1(52%)，得出處理2的防治效果最好。

2.3 不同藥劑對產量的影響

由表4可知，“吉薯1號”和“吉科6號”的微型薯在各藥劑處理下產量存在差異，與對照處理相比，各處理均對產量提升有顯著作用。

表4 不同藥劑處理下產量

在試驗材料“吉薯1號”品種上分析可得出，4個處理之間存在顯著差異，而從平均粒數方面的數據來看，處理2與處理3之間差異不顯著，平均粒數為1353.7個和1341.7個，與其他處理相比，存在較為顯著差異。處理1、處理4與CK在平均粒數方面進行比較，存在顯著性差異，粒數分別為1225.7個、1239.3個、1260.0個。從產量結果的數據分析來看，“吉薯1號”產量最高的是處理2，為34823.7kg·hm-2，其次是處理3次，產量為33425.3kg·hm-2，與對照CK相比增產幅度分別為22.0%和18.7%，處理2、處理3產量差異不顯著，與處理1、處理4相比較差異性顯著；處理1、處理4之間差異不顯著，產量分別是28721.2kg·hm-2和28190.7kg·hm-2，與對照CK相比較分別增產為5.4%和3.6%。在合格薯率方面，處理2的合格薯率最高，為89.1%，其次是處理3，為84.7%，這2個處理間沒有顯著差異，但與其他處理存在顯著差異。處理1、處理4與CK在合格薯率方面差異不顯著，分別為73.4%、73.1%、70.0%。

“吉科6號”品種，各處理間存在差異，在平均粒數方面處理3獲得的微型薯粒數最多，為1299.0個，其次是處理2，為1298.7個，處理3與處理2之間未存在顯著性差異，但與其他處理相比，存在顯著性差異。在平均粒數上進行比較，處理1、處理4以及CK之間差異性不顯著，平均粒數分別是1194.7個、1185.3個、1136.3個。產量方面，處理2最高，產量為33507.7kg·hm-2，比CK增產24.8%，處理3次之，產量是32701.0kg·hm-2，與對照CK相比增產為22.9%，2個處理之間差異性不顯著。處理1與處理4之間存在著顯著性差異，產量分別是28515.8kg·hm-2、27473.2kg·hm-2，與對照CK相比較分別增產為11.6%和8.3%。在合格薯率方面，處理2的合格薯率最高，為89.4%，其次是處理3，為86%，之后分別是處理4、處理1和CK，合格薯率分別為80.4%、74.4%、70.0%。

3 討論與結論

本試驗結果表明，4種藥劑在馬鈴薯微型薯生產中均對瘡痂病ACCC41289菌株有較好的抑制作用，各藥劑所使用的劑量在安全范圍內，對馬鈴薯植株生長未造成不良影響。其中，解淀粉芽孢桿菌可濕性粉劑0.75g·m-2的配方，在2個品種上的防治效果均為最好，防治效果分別為79.9%和80.5%。嘧菌酯懸浮劑0.50mL·m-2的配方與解淀粉芽孢桿菌可濕性粉劑0.75g·m-2的配方在防治效果上沒有顯著性差異。且與對照相比，2種藥劑均能顯著提高微型薯產量和粒數，在“吉薯1號”上的增產率分別為22.0%和18.7%，在“吉科6號”上的增產率分別為24.8%和22.9%。